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长链非编码RNA HOXA-AS3通过靶向调控miR-509-3p/MMD2轴调节胃癌生物学行为
1
作者 刘远翔 王华斌 +1 位作者 向正凯 董小川 《微循环学杂志》 2025年第2期1-7,共7页
目的:探究长链非编码RNA(lncR)HOXA-AS3通过靶向调控微小RNA-509-3p(miR-509-3p)/单核巨噬细胞分化相关蛋白2(MMD2)轴,对胃癌(GC)细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响。方法:运用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测MGC-803、AG... 目的:探究长链非编码RNA(lncR)HOXA-AS3通过靶向调控微小RNA-509-3p(miR-509-3p)/单核巨噬细胞分化相关蛋白2(MMD2)轴,对胃癌(GC)细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响。方法:运用实时荧光定量-聚合酶链反应(qRT-PCR)检测MGC-803、AGS、SGC-7901、BGC-823、HGC-27五种胃癌细胞及GES-1正常胃上皮细胞中lncR HOXA-AS3、miR-509-3p、MMD2 mRNA水平。将siRNA(si-lncR HOXA-AS3)、miRNA模拟物(miR-509-3p)和miRNA抑制剂(miR-509-3p in)及其相应对照物转染至SGC 7901细胞。通过克隆形成试验评估细胞增殖能力,Transwell试验评估细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测E-cadherin、N-cadherin蛋白表达水平,双荧光素酶报告基因检测lncR HOXA-AS3与miR-509-3p、miR-509-3p与MMD2之间靶向关系,肿瘤异种移植实验检测lncR HOXA-AS3在体内的肿瘤形成能力。结果:与GES-1正常胃上皮细胞相比,五种胃癌细胞中lncR HOXA-AS3、MMD2 mRNA水平显著升高,miR-509-3p mRNA水平显著降低(P<0.01)。数据库预测结合荧光素酶实验证实,lncR HOXA-AS3与miR-509-3p存在靶向作用,且二者水平呈负相关(P<0.01)。下调lncR HOXA-AS3后,SGC-7901细胞E-cadherin表达显著升高(P<0.05),N-cadherin表达、细胞迁移、增殖及侵袭能力均受到显著抑制(P<0.01);抑制miR-509-3p后,上述抑制作用被逆转(P<0.05)。同时,荧光素酶实验表明MMD2与miR-509-3p存在结合位点,二者水平呈负相关(P<0.01),转染miR-509-3p和miR-509-3p抑制剂可显著改变MMD2蛋白水平(P<0.01)。肿瘤异种移植实验中,si-lncR HOXA-AS3组大鼠肿瘤的重量和体积以及MMD2蛋白水平均显著降低(P<0.01)。结论:lncRHOXA-AS3通过抑制miR-509-3p表达,促进MMD2表达,进而推动GC细胞的增殖、迁移和侵袭,为GC治疗提供了新的潜在靶点和理论依据。 展开更多
关键词 lncR hoxa-as3 miR-509-3p/MMD-2轴 胃癌 生物学行为
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前列腺癌患者血清外泌体lncRNA-HOXA-AS3、miR-29a表达变化及其与患者临床特征和预后的关系 被引量：1
2
作者 朱研峰 刘志飞 +4 位作者 邢力永 孟建利 谢华 石鹏 雷竹卿 《山东医药》 CAS 2024年第24期19-23,共5页
目的 观察前列腺癌(PCa)患者血清外泌体长链非编码RNA HOXA-AS3(lncRNA-HOXA-AS3)、微小RNA 29a(miR-29a)表达变化,并分析其与患者临床特征、预后的关系。方法 PCa患者115例(观察组),同期健康体检者115例(对照组),采用qRT-PCR法检测两... 目的 观察前列腺癌(PCa)患者血清外泌体长链非编码RNA HOXA-AS3(lncRNA-HOXA-AS3)、微小RNA 29a(miR-29a)表达变化,并分析其与患者临床特征、预后的关系。方法 PCa患者115例(观察组),同期健康体检者115例(对照组),采用qRT-PCR法检测两组血清外泌体lncRNA-HOXA-AS3、miR-29a,Pearson相关分析法分析两指标间及其与患者临床特征的关系;观察组按照lncRNA-HOXA-AS3相对表达量的均数为临界值分为lncRNAHOXA-AS3高表达者(56例)和lncRNA-HOXA-AS3低表达者(59例),按照miR-29a相对表达量的均数为临界值分为miR-29a高表达者(58例)和miR-29a低表达者(57例),采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,应用Log-rank检验比较高表达者和低表达者的生存率;采用Cox回归分析法分析PCa患者不良预后的危险因素。结果 与对照组比较,观察组血清外泌体lncRNA-HOXA-AS3相对表达量升高,miR-29a相对表达量降低(P均<0.05)。观察组血清外泌体lncRNA-HOXA-AS3表达与miR-29a表达呈负相关(r=-0.689,P<0.05)。血清外泌体lncRNA-HOXA-AS3、miR-29a表达均与PCa患者Gleason评分、T分期、淋巴结转移有关(P均<0.05)。与lncRNA-HOXA-AS3低表达者比较,lncRNA-HOXA-AS3高表达者患者生存率低(P<0.05);与miR-29a高表达者比较,miR-29a低表达者患者生存率低(P<0.05)。单因素及多因素分析显示,lncRNA-HOXA-AS3、miR-29a是PCa患者不良预后的影响因素和独立危险因素(P均<0.05)。结论 PCa患者血清外泌体lncRNA-HOXA-AS3表达升高、miR-29a表达下调,两者表达呈负相关,两指标均与患者Gleason评分、T分期、淋巴结转移有关,lncRNA-HOXA-AS3高表达者及miR-29a低表达者生存率低,lncRNA-HOXA-AS3、miR-29a是PCa患者不良预后的独立危险因素。 展开更多
关键词 前列腺癌 血清外泌体 长链非编码RNA hoxa-as3 微小RNA 29a
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lncR-HOXA-AS3靶向miR-29a对前列腺癌细胞凋亡和自噬的影响 被引量：1
3
作者 李强 刘晶 +3 位作者 张国民 王亮 刘志飞 朱研峰 《山东医药》 CAS 2024年第10期16-20,共5页
目的 探讨长链非编码RNA(lncR)HOXA-AS3和微小RNA-29a(miR-29a)对前列腺癌(PCa)细胞凋亡、自噬的影响。方法 体外培养人PCa细胞(DU-145、LNCaP、C4-2B)和人正常前列腺细胞RWPE-1,采用RT-qPCR法检测细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达。... 目的 探讨长链非编码RNA(lncR)HOXA-AS3和微小RNA-29a(miR-29a)对前列腺癌(PCa)细胞凋亡、自噬的影响。方法 体外培养人PCa细胞(DU-145、LNCaP、C4-2B)和人正常前列腺细胞RWPE-1,采用RT-qPCR法检测细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达。应用双荧光素酶报告基因实验验证lncR-HOXA-AS3和miR-29a之间的靶向调控关系。取对数生长期LNCaP细胞,分为si-NC组、si-HOXA-AS3组、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC组和si-HOXA-AS3+anti-miR-29a组,利用脂质体转染法分别将si-NC、si-HOXA-AS3、si-HOXA-AS3+anti-miR-NC、si-HOXA-AS3+anti-miR-29a转染至各组LNCaP细胞,应用RT-qPCR法检测各组细胞中lncR-HOXA-AS3和miR-29a表达,应用流式细胞术检测各组细胞凋亡情况,应用Western blotting法检测各组细胞中凋亡相关蛋白Caspase-3及自噬相关蛋白LC3II、LC3I、Beclin 1表达。结果 与正常前列腺细胞相比,人PCa细胞中lncR-HOXA-AS3表达均明显升高(P均<0.05),而miR-29a表达均降低(P均<0.05)。双荧光素酶报告基因显示lncR-HOXA-AS3能靶向miR-29a抑制荧光素酶活性(P<0.05)。与si-NC组比较,si-HOXA-AS3组LNCaP细胞lncR-HOXA-AS3表达降低(P<0.05),miR-29a表达升高(P<0.05),细胞凋亡率升高(P均<0.05),Caspase-3、LC3Ⅱ/LC3I及Beclin 1蛋白表达升高(P均<0.05)。与si-HOXA-AS3+anti-miR-NC组比较,si-HOXA-AS3+anti-miR-29a组LNCaP细胞miR-29a表达下降(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Caspase-3、LC3Ⅱ/LC3I及Beclin1蛋白表达下降(P均<0.05)。结论 抑制lncR-HOXA-AS3表达能靶向调控miR-29a基因促进PCa细胞凋亡和自噬。 展开更多
关键词 前列腺癌 长链非编码RNA-hoxa-as3 微小RNA-29a 细胞凋亡 细胞自噬
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HOXA-AS3通过调控HOXA6/7基因对人肺腺癌细胞增殖凋亡作用机制 被引量：1
4
作者 张超 曲晓翰 韩立波 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2020年第17期2371-2375,共5页
目的研究HOXA-AS3通过调控HOXA6/7基因对人肺腺癌细胞增殖凋亡的作用机制。方法人肺腺癌细胞株经培养后随机分为LA组(单纯人肺腺癌细胞株)和EX组(HOXA-AS3转染的人肺腺癌细胞株)。使用TUNEL法、CCK-8法、划痕实验、Western blot法及RT-... 目的研究HOXA-AS3通过调控HOXA6/7基因对人肺腺癌细胞增殖凋亡的作用机制。方法人肺腺癌细胞株经培养后随机分为LA组(单纯人肺腺癌细胞株)和EX组(HOXA-AS3转染的人肺腺癌细胞株)。使用TUNEL法、CCK-8法、划痕实验、Western blot法及RT-PCR法分析两组细胞凋亡、增殖、迁移能力、HOXA6/7蛋白表达及HOXA6/7 mRNA表达的差异。结果TUNEL法结果表明LA组细胞凋亡较EX组多且分布明显稀疏(P<0.05);CCK-8检测结果表明EX组细胞的增殖数量明显高于LA组(P<0.05);划痕实验显示,与EX组相比,LA组无细胞区域宽度较大,表明其细胞迁移能力较低;Western blot法对两组细胞内HOXA6/7蛋白的免疫印迹分析显示,EX组的HOXA6/7蛋白表达明显上升(P<0.05);RT-PCR结果显示,EX组的HOXA6/7 mRNA表达明显升高(P<0.05)。结论HOXA-AS3激活HOXA6/7基因的表达,加快人肺腺癌细胞的增殖、迁移,促进疾病发展。深入研究HOXB6/7基因对肺腺癌的作用机制可为控制肺腺癌的发展与转移提供临床帮助。 展开更多
关键词 肺腺癌 hoxa-as3 HOXA6/7 细胞增殖 凋亡
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抑制lncR-HOXA-AS3表达的人前列腺癌细胞增殖、迁移、侵袭能力及EMT相关蛋白表达变化 被引量：4
5
作者 朱研峰 刘志飞 +4 位作者 邢力永 孟建利 谢华 邓刚 雷竹卿 《山东医药》 CAS 2023年第6期6-10,共5页
目的观察抑制长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncR)HOXA-AS3表达的人前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞系LNCaP增殖、迁移、侵袭能力及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达变化。方法本研究受试细... 目的观察抑制长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncR)HOXA-AS3表达的人前列腺癌(prostate cancer,PCa)细胞系LNCaP增殖、迁移、侵袭能力及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达变化。方法本研究受试细胞为人PCa细胞系LNCaP。将对数生长期LNCaP细胞分为2组,分别转染lncRHOXA-AS3沉默质粒si-HOXA-AS3(观察组)和阴性对照质粒si-NC(对照组),转染48 h时采用qRT-PCR法检测lncR-HOXA-AS3,分别于转染24、48、72 h时采用CCK8实验测算细胞增殖活性(光密度OD值),转染48 h时采用细胞划痕实验观察细胞迁移能力,转染48 h时采用Transwell实验观察细胞侵袭能力,转染48 h时采用WESTERN Blotting法检测两组EMT相关蛋白E-钙黏蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤维连接蛋白(Fibronectin)。结果与RWPE-1相比,DU-145、LNCaP、C4-2B中lncR-HOXA-AS3相对表达量均升高(P均<0.05)。与对照组相比,转染48 h时观察组细胞lncR-HOXA-AS3相对表达量降低(P<0.05)。与对照组比较,转染24、48、72 h时观察组细胞OD值降低(P均<0.05)。与对照组比较,转染48 h时观察组划痕愈合率小、侵袭穿膜细胞数目少(P均<0.05)。与对照组比较,转染48 h时观察组LNCaP细胞E-cadherin蛋白相对表达量升高,Vimentin、Fibronectin蛋白相对表达量表达降低(P均<0.05)。结论沉默lncR-HOXA-AS3表达能抑制LNCaP细胞的增殖、迁移及侵袭,其机制可能为lncRHOXA-AS3促进LNCaP细胞E-cadherin蛋白表达、抑制Vimentin及Fibronectin蛋白表达。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 长链非编码RNA hoxa-as3 前列腺癌 细胞增殖 细胞迁移 细胞侵袭 上皮间质转化相关蛋白
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干扰lncRNA HOXA-AS3负调控miR-340-5p对小细胞肺癌细胞DMS114/DDP顺铂耐药性的影响 被引量：7
6
作者 张昆 孙洋 +1 位作者 翟所锴 杨光 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第11期96-101,共6页
目的探讨长链非编码RNA HOXA-AS3(lncRNA HOXA-AS3)对小细胞肺癌耐药性细胞DMS114/DDP的影响及其对微小RNA-340-5p(miR-340-5p)的调控作用。方法采用qRT-PCR法检测肺癌组织及癌旁组织中HOXA-AS3、miR-340-5p的表达量;体外培养小细胞肺... 目的探讨长链非编码RNA HOXA-AS3(lncRNA HOXA-AS3)对小细胞肺癌耐药性细胞DMS114/DDP的影响及其对微小RNA-340-5p(miR-340-5p)的调控作用。方法采用qRT-PCR法检测肺癌组织及癌旁组织中HOXA-AS3、miR-340-5p的表达量;体外培养小细胞肺癌细胞DMS114,采用顺铂浓度递增法建立耐药细胞DMS114/DDP,分别将si-NC、si-HOXA-AS3、si-HOXA-AS3与anti-miR-NC、si-HOXA-AS3与anti-miR-340-5p转染至DMS114/DDP细胞;采用qRT-PCR法检测细胞中HOXA-AS3、miR-340-5p的表达量;采用CCK-8法检测细胞存活率及计算顺铂IC_(50)值;流式细胞术检测细胞凋亡率;双荧光素酶报告实验检测HOXA-AS3、miR-340-5p的靶向关系。结果肺癌组织中HOXA-AS3的表达水平升高(P<0.05),miR-340-5p的表达水平降低(P<0.05);不同浓度的顺铂处理后DMS114细胞、DMS114/DDP细胞存活率逐渐降低(P<0.05),且DMS114/DDP细胞IC_(50)值高于DMS114细胞(P<0.05);与DMS114细胞比较,DMS114/DDP细胞中HOXA-AS3的表达水平升高(P<0.05);转染si-HOXA-AS3可明显降低细胞活力(P<0.05),提高凋亡率(P<0.05);双荧光素酶报告实验证实HOXA-AS3可靶向结合miR-340-5p;共转染si-HOXA-AS3与anti-miR-340-5p可明显提高细胞活力(P<0.05),降低凋亡率(P<0.05)。结论干扰HOXA-AS3表达可抑制细胞增殖及促进细胞凋亡进而增强DMS114/DDP细胞顺铂敏感性,其作用机制可能与上调miR-340-5p的表达有关。 展开更多
关键词 lncRNA hoxa-as3 miR-340-5p 小细胞肺癌 顺铂 增殖 凋亡
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下调长链非编码RNAHOXA-AS3靶向促进微小RNA-29b对结肠癌细胞LOVO凋亡和奥沙利铂敏感性的影响 被引量：4
7
作者 游进 张佳 +1 位作者 徐飞 王志伟 《实用临床医药杂志》 CAS 2022年第2期69-75,共7页
目的探讨下调长链非编码RNA(lncRNA)HOXA-AS3靶向促进微小RNA-29b(miR-29b)对结肠癌细胞LOVO凋亡和奥沙利铂敏感性的影响。方法实时聚合酶链反应测定结肠癌细胞LOVO、SW1116、HCT116、SW620和正常结肠上皮细胞NCM460中HOXA-AS3表达变化... 目的探讨下调长链非编码RNA(lncRNA)HOXA-AS3靶向促进微小RNA-29b(miR-29b)对结肠癌细胞LOVO凋亡和奥沙利铂敏感性的影响。方法实时聚合酶链反应测定结肠癌细胞LOVO、SW1116、HCT116、SW620和正常结肠上皮细胞NCM460中HOXA-AS3表达变化。结肠癌细胞LOVO分成control组、si-NC组、si-HOXA-AS3组、L-OHP+si-NC组、L-OHP+si-HOXA-AS3组、si-HOXA-AS3+Anti-miR-NC组、si-HOXA-AS3+Anti-miR-29b组、L-OHP+si-HOXA-AS3+Anti-miR-NC组和L-OHP+si-HOXA-AS3+Anti-miR-29b组。采用MTT实验、流式细胞术和Western blot分别分析细胞增殖、凋亡以及细胞中Bax、Bcl-2蛋白表达情况。生物学信息学软件预测HOXA-AS3的靶miRNA,荧光素酶活性测定试剂盒验证HOXA-AS3和miR-29b的靶向关系。结果与正常结肠上皮细胞NCM460相比,结肠癌细胞LOVO、SW1116、HCT116、SW620中HOXA-AS3表达水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结肠癌细胞LOVO中HOXA-AS3表达水平均高于结肠癌细胞SW1116、HCT116、SW620,差异有统计学意义(P<0.05)。与control组、si-NC组比较,si-HOXA-AS3组结肠癌细胞LOVO增殖活性降低,凋亡率升高,细胞中Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与si-HOXA-AS3组、L-OHP+si-NC组比较,L-OHP+si-HOXA-AS3组结肠癌细胞LOVO增殖活性降低,凋亡率升高,细胞中Bax蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达减少,差异有统计学意义(P<0.05)。与si-HOXA-AS3+Anti-miR-NC组比较,si-HOXA-AS3+Anti-miR-29b组结肠癌细胞LOVO增殖活性升高,细胞凋亡率降低,细胞中Bax蛋白表达减少,Bcl-2蛋白表达增多,差异有统计学意义(P<0.05)。与L-OHP+si-HOXA-AS3+Anti-miR-NC组比较,L-OHP+si-HOXA-AS3+Anti-miR-29b组结肠癌细胞LOVO增殖活性升高,细胞凋亡率降低,细胞中Bax蛋白表达减少,Bcl-2蛋白表达增多,差异有统计学意义(P<0.05)。下调HOXA-AS3靶向促进miR-29b表达。结论下调HOXA-AS3可通过靶向促进miR-29b诱导结肠癌细胞LOVO凋亡并提高奥沙利铂敏感性。 展开更多
关键词 结肠癌 凋亡 奥沙利铂 长链非编码RNA hoxa-as3 微小RNA-29b
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LncRNA HOXA-AS3通过miR-218-5p调控USP3对前列腺癌细胞增殖、凋亡的影响 被引量：3
8
作者 刘志飞 邢力永 +4 位作者 朱研峰 石鹏 孟建利 谢华 邓刚 《国际泌尿系统杂志》 2024年第3期440-446,共7页
目的:探讨长非编码RNA HOXA簇反义RNA 3(LncRNA HOXA-AS3)通过miR-218-5p调控泛素特异性肽酶3(USP3)对前列腺癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:体外培养人前列腺上皮细胞和人前列腺癌细胞系DU-145、PC-3、22RV1,将DU-145细胞分为对照组、Ln... 目的:探讨长非编码RNA HOXA簇反义RNA 3(LncRNA HOXA-AS3)通过miR-218-5p调控泛素特异性肽酶3(USP3)对前列腺癌细胞增殖、凋亡的影响。方法:体外培养人前列腺上皮细胞和人前列腺癌细胞系DU-145、PC-3、22RV1,将DU-145细胞分为对照组、LncRNA HOXA-AS3过表达组、LncRNA HOXA-AS3敲低组、共转染阴性对照组、LncRNA HOXA-AS3敲低+miR-218-5p inhibitor组。采用实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)和免疫印迹法检测LncRNA HOXA-AS3、miR-218-5p与USP3的表达;采用免疫荧光染色检测凋亡相关蛋白Bax和Bcl-2表达比值(Bax/Bcl-2);采用免疫印迹法检测增殖(PCNA、Cyclin D1)与凋亡相关蛋白(Bax、Bcl-2)的表达;采用双荧光素酶报告基因实验检测前列腺癌细胞中LncRNA HOXA-AS3对miR-218-5p的靶向调节。结果:与人前列腺上皮细胞相比,DU-145、PC-3、22RV1细胞的LncRNA HOXA-AS3、USP3的mRNA与蛋白表达升高,miR-218-5p表达降低(均P<0.05)。与对照组比较,LncRNA HOXA-AS3过表达组LncRNA HOXA-AS3、USP3的mRNA与蛋白表达、细胞活力、集落生成率、PCNA与Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达升高,miR-218-5p表达、凋亡细胞比例、细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、Bax蛋白表达降低(均P<0.05);LncRNA HOXA-AS3敲低组的细胞LncRNA HOXA-AS3、USP3的mRNA与蛋白表达、细胞活力、集落生成率、PCNA与Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达降低,miR-218-5p表达、凋亡细胞比例、凋亡率、Bax/Bcl-2、Bax蛋白表达升高(均P<0.05)。与LncRNA HOXA-AS3敲低组比较,LncRNA HOXA-AS3敲低+miR-218-5p inhibitor组的USP3的mRNA与蛋白表达、细胞活力、集落生成率、PCNA与Cyclin D1、Bcl-2蛋白表达升高,miR-218-5p表达、凋亡细胞比例、细胞凋亡率、Bax/Bcl-2、Bax蛋白表达降低(均P<0.05)。共转染miR-218-5p mimics和野生型LncRNA HOXA-AS3报告质粒的相对荧光素酶活性降低(0.34±0.06 vs.1.01±0.22,P<0.05)。结论:敲低LncRNA HOXA-AS3可通过上调miR-218-5p而降低USP3表达,从而抑制前列腺癌细胞增殖,并促使其凋亡。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 LncRNA hoxa-as3 USP3
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