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维生素D受体在1,25(OH)_2D_3调节人骨肉瘤细胞系HOS-8603增殖中的作用 被引量:4
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作者 陈玉霞 刘宇健 宋亮年 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第10期979-982,T001,共5页
目的 :研究维生素D3受体 (VDR)在 1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物调节人骨肉瘤细胞系HOS - 860 3增殖中的作用。方法 :用RT -PCR和免疫组织化学技术分别在mRNA和蛋白水平上明确HOS - 860 3细胞中是否有VDR表达 ;瞬时转染VDR报告基因技术观察... 目的 :研究维生素D3受体 (VDR)在 1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物调节人骨肉瘤细胞系HOS - 860 3增殖中的作用。方法 :用RT -PCR和免疫组织化学技术分别在mRNA和蛋白水平上明确HOS - 860 3细胞中是否有VDR表达 ;瞬时转染VDR报告基因技术观察HOS - 860 3细胞中VDR的功能活性 ;并进一步利用稳定表达VDR反义mRNA的细胞株VDRas3细胞研究VDR被阻断后细胞增殖以及基因转录的变化。结果 :HOS - 860 3细胞有VDR表达 ,此内源性VDR具有激素依赖性的转录激活活性。在内源性VDR被阻断后 ,1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物对细胞增殖的抑制作用以及对VDR的靶基因p2 1mRNA表达的诱导作用均明显减弱。结论 :1,2 5 (OH) 2 D3及其类似物对HOS -860 3细胞增殖抑制作用是由VDR介导的。 展开更多
关键词 基因表达 骨化三醇 骨肉瘤 细胞培养 hos-8603 细胞增殖 维生素D受体 1 25(OH)2D3
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TRAIL诱导骨肉瘤HOS-8603细胞凋亡与线粒体跨膜电位关系的研究 被引量:3
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作者 喻爱喜 周志刚 +1 位作者 张仲宁 祝少博 《现代肿瘤医学》 CAS 2005年第5期586-588,共3页
目的研究TRAIL诱导HOS-8603细胞凋亡与线粒体跨膜电位(ΔΨm)关系。方法MTT法测定TRAIL对HOS-8603细胞的抑制率;将HOS-8603细胞分别用TRAIL、TRAIL+1.0μg/ml环孢菌素A(CsA)处理,然后用透射电镜观察HOS-8603细胞形态学变化;用流式细胞... 目的研究TRAIL诱导HOS-8603细胞凋亡与线粒体跨膜电位(ΔΨm)关系。方法MTT法测定TRAIL对HOS-8603细胞的抑制率;将HOS-8603细胞分别用TRAIL、TRAIL+1.0μg/ml环孢菌素A(CsA)处理,然后用透射电镜观察HOS-8603细胞形态学变化;用流式细胞术分别测定亚G1期细胞百分率及PI和Rh123双染色后细胞的ΔΨm。结果MTT还原试验表明:作用24小时后,2.5μg/mlTRAIL的抑制率为29%;5μg/mlTRAIL的抑制率为83%。HOS-8603细胞经TRAIL作用后,透射电镜下观察到典型的凋亡形态特征;随着TRAIL作用时间增加,HOS-8603细胞凋亡数增加和ΔΨm降低(F=33.831P<0.01),两者呈直线相关。CsA不仅能抑制TRAIL诱导HOS-8603细胞ΔΨm降低,而且能减少凋亡细胞数的增加(t=7.103,P<0.01)。结论TRAIL诱导HOS-8603细胞凋亡的线粒体依赖途径是通过使线粒体膜通透性转运孔开放,ΔΨm降低来实现;CsA能部分抑制这些效应。 展开更多
关键词 TRAIL 细胞凋亡 hos-8603细胞系 环孢菌素 线粒体跨膜电位
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顺铂诱导骨肉瘤HOS-8603细胞凋亡并降低其线粒体跨膜电位 被引量:2
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作者 周志刚 喻爱喜 +2 位作者 祝少博 张仲宁 张建华 《现代肿瘤医学》 CAS 2005年第3期301-303,共3页
目的研究顺铂诱导HOS-8603细胞凋亡与线粒体跨膜电位(ΔΨm)关系。方法MTT法测定顺铂对HOS-8603细胞的抑制率;将HOS-8603细胞分别用顺铂、顺铂+1.0ug/ml环孢菌素A(CsA)处理,用透射电镜观察HOS-8603细胞形态学变化;用流式细胞术分别测定... 目的研究顺铂诱导HOS-8603细胞凋亡与线粒体跨膜电位(ΔΨm)关系。方法MTT法测定顺铂对HOS-8603细胞的抑制率;将HOS-8603细胞分别用顺铂、顺铂+1.0ug/ml环孢菌素A(CsA)处理,用透射电镜观察HOS-8603细胞形态学变化;用流式细胞术分别测定亚G1期细胞百分率及PI和Rh123双染色后细胞的ΔΨm。结果MTT还原试验表明,作用24小时后,1ug/ml和50ug/ml顺铂的抑制率分别为58.56%,90.69%;HOS-8603细胞经顺铂作用后,透射电镜下观察到典型的凋亡形态特征;随着顺铂作用时间增加,HOS-8603细胞凋亡数增加和ΔΨm降低(P<0.01),两者呈直线相关,CsA能部分抑制这些效应。结论顺铂诱导HOS-8603细胞凋亡的另一途径是通过使线粒体膜通透性转运孔开放,ΔΨm降低来实现的。 展开更多
关键词 顺铂 细胞凋亡 细胞系 hos-8603 环孢菌素 线粒体跨膜电位
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p21^(wafl)在1,25(OH)_2D_3调节人骨肉瘤细胞系HOS-8603增殖分化中的作用 被引量:2
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作者 陈玉霞 刘宇健 +1 位作者 宋亮年 卢建 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期297-300,T002,共5页
目的 :探讨p2 1wafl在 1,2 5 (OH) 2 D3调节人骨肉瘤细胞系HOS - 860 3增殖中的作用。方法 :用定量RT-PCR法检测 1,2 5 (OH) 2 D3对p2 1waflmRNA表达的诱导作用 ,并构建稳定表达p2 1wafl真核表达载体的细胞系HOS -p2 1wafl进一步观察该... 目的 :探讨p2 1wafl在 1,2 5 (OH) 2 D3调节人骨肉瘤细胞系HOS - 860 3增殖中的作用。方法 :用定量RT-PCR法检测 1,2 5 (OH) 2 D3对p2 1waflmRNA表达的诱导作用 ,并构建稳定表达p2 1wafl真核表达载体的细胞系HOS -p2 1wafl进一步观察该细胞的生长及分化情况。结果 :1,2 5 (OH) 2 D3作用 2h即可诱导HOS - 860 3细胞内源性p2 1wafl的表达 ,4h达高峰 ,2 4h仍未回降。细胞过度表达p2 1wafl后生长速度明显减慢 ,培养 6d时细胞数为未转染细胞的5 0 % ;并且组织化学染色结果表明细胞的分化标志性抗原碱性磷酸酶 (AKP)的表达明显增强。结论 :表明 1,2 5(OH) 2 D3对p2 展开更多
关键词 P21^WAFL 1 25(OH)2D3 人骨肉瘤细胞 hos-8603
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肿瘤坏死因子α诱导人成骨细胞和人成骨细胞系HOS-8603凋亡的作用 被引量:13
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作者 王文良 吴岳嵩 +3 位作者 杨柳 许建中 娄永华 焦炳华 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2005年第26期162-164,i0008,共4页
目的:观察不同浓度重组肿瘤坏死因子α对于培养的人原代成骨细胞和人成骨细胞系HOS-8603的凋亡作用,并分析浓度效应。方法:实验于1998-04/2000-04在第二军医大学卫生毒理学教研室完成。在人成骨细胞和人成骨细胞系HOS-8603中,实验组加... 目的:观察不同浓度重组肿瘤坏死因子α对于培养的人原代成骨细胞和人成骨细胞系HOS-8603的凋亡作用,并分析浓度效应。方法:实验于1998-04/2000-04在第二军医大学卫生毒理学教研室完成。在人成骨细胞和人成骨细胞系HOS-8603中,实验组加浓度为1,10,100,1000ng/L的肿瘤坏死因子α,对照组加等量的无肿瘤坏死因子培养基,培养后检测细胞活力应用噻唑兰法,检测细胞凋亡情况应用DNA梯形条带和透射电镜等方法。结果:①肿瘤坏死因子α对培养成骨细胞和HOS-8603细胞的作用(噻唑兰法):肿瘤坏死因子α浓度为100和1000ng/L实验组均高于对照组犤成骨细胞:(0.14±0.006),(0.10±0.010),(0.27±0.013)ng/L;HOS-8603细胞:(0.15±0.012),(0.09±0.015),(0.27±0.013)ng/L,P<0.05犦。②DNA梯形条带结果:凋亡细胞使DNA在核小体外降解,形成180~200bp或与之成倍的DNA片段。在琼脂糖凝胶电泳时呈现梯形结果。在肿瘤坏死因子α浓度为1000ng/L时,成骨细胞可检测到典型DNA梯形条带。③成骨细胞的凋亡情况:应用透射电镜检查,浓度为1000ng/L实验组较浓度为100ng/L实验组凋亡细胞多。肿瘤坏死因子α同样可以诱导HOS-8603的凋亡,未加肿瘤坏死因子α时,凋亡很少,加入100ng/L及1000ng/L肿瘤坏死因子α时,凋亡细胞数量明显增加。结论:肿瘤坏死因子α质量浓度达到100g/L时,可以引起体外培养的成骨细胞和成骨细胞系HOS-8603细胞凋亡,并随浓度加大出现凋亡细胞增多的剂量-效应关系,结果验证了肿瘤坏死因子能刺激成骨细胞凋亡的假说。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子 成骨细胞 细胞凋亡 hos-8603 肿瘤坏死因子Α 人成骨细胞 凋亡作用 细胞系 成骨细胞凋亡 DNA片段
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