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小分子干扰RNA对绒毛膜癌细胞人类白细胞抗原G基因表达的影响 被引量：10
1
作者 陈春玲 廖秦平 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期549-552,共4页
目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)对绒毛膜癌(绒癌)细胞中人类白细胞抗原G(HLA-G)基因表达的影响,了解HLA-G基因在绒癌发生、发展中的作用。方法设计并合成HLA-GsiRNA,分为两组。实验组以不同浓度(分别为1.0、2.5、5.0μg/L,下同)的HLA-Gsi... 目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)对绒毛膜癌(绒癌)细胞中人类白细胞抗原G(HLA-G)基因表达的影响,了解HLA-G基因在绒癌发生、发展中的作用。方法设计并合成HLA-GsiRNA,分为两组。实验组以不同浓度(分别为1.0、2.5、5.0μg/L,下同)的HLA-GsiRNA转染HLA-G基因高表达的绒癌细胞系JEG-3细胞,对照组以等量阴性对照siRNA转染JEG-3细胞。实时荧光定量RT-PCR技术检测转染后JEG-3细胞中HLA-GmRNA的表达,HLA-GmRNA的表达以PCR循环数阈值(Ct值)表示;蛋白印迹法测定JEG-3细胞中HLA-G蛋白的表达;显微镜观察并计数转染后存活的JEG-3细胞数。结果HLA-GsiRNA转染JEG-3细胞后,明显下调JEG-3细胞中HLA-GmRNA及蛋白的表达水平。实验组不同浓度的HLA-GsiRNA转染后,JEG-3细胞的Ct值[分别为(20.67±0.02)、(21.37±0.03)、(21.43±0.02)个循环数],分别与对照组[分别为(20.33±0.01)、(20.37±0.02)、(20.40±0.03)个循环数]比较,差异有统计学意义(P<0.05)。上述浓度转染后,实验组JEG-3细胞的HLA-G蛋白表达水平[分别为0.42±0.03、0.37±0.02、0.12±0.04],分别与对照组[分别为1.69±0.23、1.62±0.31、1.36±0.22]比较,差异有统计学意义(P<0.01)。实验组JEG-3细胞生长较对照组明显受到抑制(P<0.05)。结论HLA-GsiRNA可以下调HLA-GmRNA及蛋白的表达水平,抑制细胞生长,表明HLA-G基因在绒癌的发生、发展中具有重要作用。 展开更多
关键词 RNA 小分子干扰 HLA抗原 组织相容性抗原Ⅰ类 绒毛膜癌 人类白细胞抗原G RNA转染 绒癌细胞系 基因表达 小分子 hla-gmrna
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