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基于纳米金星的层析试纸条用于检测HIV-DNA（英文） 被引量：1
1
作者 吕思嘉 操婷伟 +2 位作者 文为 张修华 王升富 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期517-524,共8页
构建了基于纳米金星(AuNSs)的快速、简单且可视化的横向流层析试纸条(LFTS),并用于检测人类免疫缺陷病毒的DNA。采用一步法合成AuNSs,并对其进行生物功能化,目标物与DNA修饰的AuNSs结合。该复合物通过碱基互补配对原则被捕获在测试线上... 构建了基于纳米金星(AuNSs)的快速、简单且可视化的横向流层析试纸条(LFTS),并用于检测人类免疫缺陷病毒的DNA。采用一步法合成AuNSs,并对其进行生物功能化,目标物与DNA修饰的AuNSs结合。该复合物通过碱基互补配对原则被捕获在测试线上,依据测试线上纳米金星颜色的变化进行定性和半定量分析,使用便携式读条器在最佳实验条件下进行定量分析。该方法的线性范围为0.2～50 nmol/L,检出限为0.14 nmol/L。相同条件下,该方法比传统纳米金试纸条的灵敏度约高5倍。该方法可用于人血清中HIV DNA的检测,结果良好。 展开更多
关键词 纳米金星 层析试纸条 人类免疫缺陷病毒的DNA (hiv-dna ) 可视化检测
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一种基于微芯片电泳平台的级联化学发光信号放大策略用于HIV-DNA的高灵敏检测 被引量：1
2
作者 钟洁 赵书林 《分析测试学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期928-933,共6页
该文基于微芯片电泳-化学发光检测(MCE-CL)平台,以辣根过氧化酶标记的DNA(HRP-DNA)作为信号探针,利用HRP催化鲁米诺和双氧水化学发光反应及目标分子与DNA的杂交反应,结合T7Exo酶辅助信号放大,建立了一种MCE分离辅助双循环化学发光信号... 该文基于微芯片电泳-化学发光检测(MCE-CL)平台,以辣根过氧化酶标记的DNA(HRP-DNA)作为信号探针,利用HRP催化鲁米诺和双氧水化学发光反应及目标分子与DNA的杂交反应,结合T7Exo酶辅助信号放大,建立了一种MCE分离辅助双循环化学发光信号放大的新方法。结果显示:优化实验条件下,在1.0×10^(-14)~5.0×10^(-9) mol/L范围内,HIV-DNA的浓度对数值与HIV-DNA的化学发光强度呈良好的线性关系,检出限(S/N=3)为1.6×10^(-15) mol/L,在0.10、0.25、1.0、10(×10^(-12) mol/L)4个加标水平下的回收率为93.0%~103%,相对标准偏差(RSD)为0.50%~3.7%,方法具有较好的准确度,可应用于人血清中HIV-DNA的高灵敏检测。 展开更多
关键词 微芯片电泳 化学发光 信号放大 hiv-dna
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总HIV-DNA作为病毒储存库动力学标志物的研究进展 被引量：3
3
作者 宋霆 粟斌 +3 位作者 刘志英 姜太一 张彤 吴昊 《北京医学》 CAS 2019年第6期494-497,共4页
即使联合抗逆转录病毒治疗(cART),HIV-1DNA仍然存在于受感染的细胞中,形成病毒库。总HIV DNA水平影响感染过程,因此具有临床相关性,可以预测艾滋病死亡和进展。细胞相关总HIV-DNA储存库检测作为一个生物学标志物,可以定义为包含所有形式... 即使联合抗逆转录病毒治疗(cART),HIV-1DNA仍然存在于受感染的细胞中,形成病毒库。总HIV DNA水平影响感染过程,因此具有临床相关性,可以预测艾滋病死亡和进展。细胞相关总HIV-DNA储存库检测作为一个生物学标志物,可以定义为包含所有形式HIV的感染细胞和组织。本文对作为可以量化病毒储存库动力学变化的标志物细胞总HIV-DNA,致病机制,靶向HIV储存库治疗的方法及其临床意义作一综述。 展开更多
关键词 病毒库:hiv-dna 生物学标志物
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基于金纳米粒子的DNA探针和ExoⅢ辅助信号放大平台用于HIV-DNA的检测
4
作者 田建袅 李晴 +3 位作者 梁雪花 谭莉 陆江南 王鑫 《河南师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2021年第2期54-62,F0002,共10页
设计了一种金纳米粒子(AuNP)和核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)辅助靶标循环信号放大的新型纳米探针用于HIV-DNA的检测.该纳米探针由AuNP和捕获探针p1和信号探针p2构成.在靶标HIV-DNA不存在的情况下,此时纳米探针抗ExoⅢ水解,信号探针p2与AuNP之间... 设计了一种金纳米粒子(AuNP)和核酸外切酶Ⅲ(ExoⅢ)辅助靶标循环信号放大的新型纳米探针用于HIV-DNA的检测.该纳米探针由AuNP和捕获探针p1和信号探针p2构成.在靶标HIV-DNA不存在的情况下,此时纳米探针抗ExoⅢ水解,信号探针p2与AuNP之间的距离较近产生荧光共振能量转移,体系的荧光基本被猝灭.但是,在靶标存在的情况下,靶标与信号探针p2杂交,将p1置换下来,此时与靶标杂交的信号探针p2双链体能在ExoⅢ的作用下发生水解,使荧光团释放,体系荧光增强.同时,靶标也被释放并与AuNP上的探针p2作用,以驱动下一个反应,达到靶标循环目的,因此这种方式检测时间较短且稳定性高.该方法的线性范围为100 pmol/L~50 nmol/L,检测限为38.68 pmol/L(信噪比S/N=3).该方法具有良好的抗干扰性,可用于复杂生物样品检测,回收率在98.72%~106.72%之间. 展开更多
关键词 HIV DNA 金纳米粒子 核酸外切酶Ⅲ 信号放大
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不同中医证型艾滋病患者PD-1/PD-L1轴与HIV-1病毒库表达差异初探
5
作者 李静茹 马秀兰 +1 位作者 曾琳 舒占钧 《中国民族民间医药》 2026年第2期115-118,共4页
目的:基于PD-1/PD-L1轴角度探讨艾滋病患者两种常见中医证型气阴两虚型和气虚湿阻型免疫应答水平差异。方法:通过流式检测、酶联免疫检测和qT-PCR方法对艾滋病患者上述证型检测PD-1、PD-L1、CD4、CD8^(+)、HIV-DNA、HIV-RNA的表达水平... 目的:基于PD-1/PD-L1轴角度探讨艾滋病患者两种常见中医证型气阴两虚型和气虚湿阻型免疫应答水平差异。方法:通过流式检测、酶联免疫检测和qT-PCR方法对艾滋病患者上述证型检测PD-1、PD-L1、CD4、CD8^(+)、HIV-DNA、HIV-RNA的表达水平。结果:气阴两虚型艾滋病患者PD-1、PD-L1的表达水平及CD4^(+)/CD8^(+)比值低于气虚湿阻型,气阴两虚型艾滋病患HIV-1-DNA和CD8^(+)的表达水平高于气虚湿阻型,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:不同中医证型艾滋病患者免疫应答水平存在差异,其中气阴两虚型免疫障碍较气虚湿阻型更为明显。 展开更多
关键词 艾滋病 中医证型 PD-1/PD-L1 hiv-dna
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长期抗反转录病毒治疗中CD8细胞计数与HIV-1DNA相关性
6
作者 刘燕芬 欧汝志 +1 位作者 吴念宁 黄金萍 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第8期1597-1600,1604,共5页
目的分析长期接受抗逆转录病毒治疗(ART)病毒抑制的慢性艾滋病病毒(HIV)感染者的CD8+T淋巴细胞(简称CD8细胞)计数与HIV-1DNA水平的相关性。方法以2020年9月至2021年9月就诊于广西南宁市第四人民医院接受ART治疗7年且HIV-1 RNA低于50拷贝... 目的分析长期接受抗逆转录病毒治疗(ART)病毒抑制的慢性艾滋病病毒(HIV)感染者的CD8+T淋巴细胞(简称CD8细胞)计数与HIV-1DNA水平的相关性。方法以2020年9月至2021年9月就诊于广西南宁市第四人民医院接受ART治疗7年且HIV-1 RNA低于50拷贝/mL的60例18~65岁HIV-1感染者为研究对象,根据研究对象检查的HIV DNA定量结果进行分组,HIV-1DNA≥100 copies/10^(6)外周血单个核细胞(PBMCs)的高HIV-1DNA水平组38例;HIV-1DNA<100 copies/10^(6) PBMCs的低HIV-1DNA水平组22例。比较两组一般资料及ART的基线信息;比较两组7年内各个随访点CD8细胞计数及CD4/CD8比值的差异性;采用单因素logistic回归分析各随访点CD8细胞计数、CD4/CD8比值与ART7年后HIV-1DNA水平是否大于100 copies/10^(6) PBMCs的相关性;并利用广义估计方程(GEE)对各随访点的CD8细胞计数、CD4/CD8比值与7年后HIV-1DNA水平进行多元回归分析。结果两组基线CD4/CD8比值、基线HIV-1RNA水平差异有统计学意义(P<0.05)。低HIV-1DNA水平组表现出较低的CD8细胞计数和较高的CD4/CD8比值。两组CD8细胞计数在第4、12、24、48、144、192、240、288、336周差异有统计学意义(P<0.05)。两组CD4/CD8水平在第0、4、12、24、48、72、96、192、240周差异有统计学意义(P<0.05)。第4、12、24、48、96、144、192、240、288、336周的CD8水平与ART7年后HIV-1DNA水平是否大于100 copies/10^(6) PBMCs相关;第0、4、12、24、48、96、192与240周的CD4/CD8水平与ART7年后HIV-1DNA水平是否大于100 copies/10^(6) PBMCs相关,差异有统计学意义(P<0.05)。经GEE分析只有CD8细胞计数与HIV-1 DNA定量值是否≥100 copies/10^(6) PBMCs差异有统计学意义(P=0.042,OR=1.002),CD8细胞计数越高,发生HIV-1DNA定量值≥100 copies/10^(6) PBMCs的概率越大。结论在接受ART治疗7年且长期病毒学抑制HIV-1感染者中CD8细胞水平越高,发生HIV-1DNA定量值≥100 copies/10^(6) PBMCs的概率越大。 展开更多
关键词 HIV-1DNA CD8+T淋巴细胞 CD4/CD8比值 抗逆转录病毒治疗
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HIV-1 DNA检测及其应用的专家指导意见
7
作者 中国性病艾滋病防治协会艾滋病检测与促进社会应用专业委员会 蒋岩 +4 位作者 李太生 王通 韩孟杰 姚均 韩扬 《中国艾滋病性病》 北大核心 2025年第10期1149-1157,共9页
HIV-1 RNA检测是HIV-1感染诊断、cART疗效评估的常用方法,但HIV-1 RNA检测在诊断和治疗管理中有其局限性,如窗口期检测、婴儿早期诊断和功能性治愈评估等。由于HIV-1 DNA检测能反映病毒储存库含量及长期潜伏状态,逐渐成为关键补充指标,... HIV-1 RNA检测是HIV-1感染诊断、cART疗效评估的常用方法,但HIV-1 RNA检测在诊断和治疗管理中有其局限性,如窗口期检测、婴儿早期诊断和功能性治愈评估等。由于HIV-1 DNA检测能反映病毒储存库含量及长期潜伏状态,逐渐成为关键补充指标,可作为HIV-1感染的极早期诊断标志物,对cART疗效评估、HIV-1感染预后预测和功能性治愈研究与评估等也具有重要价值。中国性病艾滋病防治协会艾滋病检测与促进社会应用专业委员会(简称检测专委会)组织全国艾滋病预防控制、检验检测和传染病学领域专家,基于国内外最新研究与实践证据,结合多学科共识,系统综述了HIV-1 DNA与致病机制、检测的样本类型、检测技术及其在诊断和治疗监测中的应用进展,并基于此,提出了HIV-1 DNA检测在HIV-1感染预防控制和临床诊疗中应用的科学指导意见。 展开更多
关键词 1型艾滋病病毒 脱氧核糖核酸 艾滋病 诊断 疗效评估 临床价值
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HIV感染者病毒库与外周血HIV抗体的相关性分析
8
作者 刘小芳 鲁雁秋 +2 位作者 孙凤 王静 陈耀凯 《中国热带医学》 北大核心 2025年第12期1568-1571,共4页
目的分析人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者血浆中HIV抗体水平与病毒储存库水平的关系,探索新的HIV储存库的评估标志物。方法纳入2021年7月—2024年5月在重庆市公共卫生医疗救治中心确诊并随访≥3年的HIV感染... 目的分析人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染者血浆中HIV抗体水平与病毒储存库水平的关系,探索新的HIV储存库的评估标志物。方法纳入2021年7月—2024年5月在重庆市公共卫生医疗救治中心确诊并随访≥3年的HIV感染者96例为研究对象,通过荧光定量PCR检测外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中HIV DNA和细胞相关RNA(cell-associated RNA,CA-HIV RNA),并通过免疫吸附试验对外周血HIV抗体水平进行定量检测,结合患者临床感染参数,通过Spearman相关系数进行相关性分析。结果共纳入研究对象96例,年龄为51(36,59)岁。经长期抗逆转录病毒疗法(antiretroviral therapy,ART),所有HIV感染者病毒载量均维持在检测水平以下。经检测,HIV DNA和CA-HIV RNA水平M(P_(25),P_(75))分别为2.81(2.29,3.10)log10 copies/10^(6) PBMCs和2.68(2.28,2.98)log10 copies/10^(6) PBMCs,分析发现HIV DNA和CA-HIV RNA水平呈正相关(r=0.6069,P<0.01);HIV DNA与基线HIV RNA 4.91(4.40,5.39)log10 copies/mL呈正相关(r=0.3292,P<0.01);HIV DNA和CA-HIV RNA分别与基线CD4^(+)T细胞计数177(72,287)cells/μL呈负相关(r=-0.5133,P<0.01;r=-0.3228,P<0.01),而与HIV p24抗体水平2.61(1.96,3.08)light unit呈正相关关系(r=0.37,P<0.01;r=0.3711,P<0.01)。结论慢性HIV感染者ART前感染参数及ART后特异性抗体水平与HIV储存库大小密切相关,对于HIV感染者应关注以上指标从而更好地监测病毒库。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 HIV感染者 HIV DNA 细胞相关RNA 病毒库 p24抗体
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合并人类免疫缺陷病毒感染患者的白内障和年龄相关性白内障中染色体外环状DNA的总体特征及差异
9
作者 刘馨齐 张婉琪 +3 位作者 王芳 袁超 闫素 江先明 《眼科学报》 2025年第11期910-919,共10页
目的:分析染色体外环状DNA(extrachromosomal circular DNA,eccDNA)的分子特征及潜在功能,初步探索eccDNA在合并人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染患者的白内障发病过程中的作用机制。方法:收集4例合并HIV感染的... 目的:分析染色体外环状DNA(extrachromosomal circular DNA,eccDNA)的分子特征及潜在功能,初步探索eccDNA在合并人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)感染患者的白内障发病过程中的作用机制。方法:收集4例合并HIV感染的并发性白内障(complicated cataract,CC)患者及性别、年龄与之匹配的4例年龄相关性白内障(age-related cataract,ARC)患者晶状体囊膜,通过提取、滚环扩增及circle-seq对eccDNA进行全长测序,分析比较合并HIV感染的CC患者及ARC患者之间晶状体囊膜eccDNA的数量、长度分布、基因组元件分布及eccDNA相关差异基因功能富集情况。结果:合并HIV感染的CC患者晶状体囊膜中eccDNA数量较ARC患者增多,鸟嘌呤(guanine,G)和胞嘧啶(cytosine,C)碱基所占的比例(GC含量)较ARC患者减少。在CC患者及ARC患者中,eccDNA的长度在1200~1800 bp均分布最多,CC患者在2000~2200 bp之间呈现另一部分高峰,ARC组则在此区间eccDNA丰度极低。CC患者eccDNA来源基因组元件在CpG岛占比低于ARC组。CC患者组eccDNA差异基因富集的通路多与钙信号通路、Apelin信号通路及cGMP-PKG信号通路相关。结论:合并HIV感染的CC患者与ARC患者晶状体囊膜eccDNA的分子特征存在差异,提示eccDNA可能通过基因表达调控晶状体前囊膜代谢功能影响CC的发生、发展。 展开更多
关键词 并发性白内障 染色体外环状DNA 人类免疫缺陷病毒 艾滋病 晶状体囊膜
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基于生物信息学筛选HIV感染诊断和治疗潜在标志物及验证
10
作者 刘洁 谌茂刚 袁丹 《解剖科学进展》 2025年第4期480-484,共5页
目的利用生物信息学方法分析HIV感染筛查诊断和治疗潜在标志物。方法整合GSE199911、GSE143942和GSE140650数据集,利用GEO2R在线分析工具分析HIV感染患者外周血单核细胞中差异表达基因、差异甲基化基因和差异表达miRNA,并采用韦恩分析... 目的利用生物信息学方法分析HIV感染筛查诊断和治疗潜在标志物。方法整合GSE199911、GSE143942和GSE140650数据集,利用GEO2R在线分析工具分析HIV感染患者外周血单核细胞中差异表达基因、差异甲基化基因和差异表达miRNA,并采用韦恩分析进行筛选;运用Metascape软件分别对进行GO功能和KEGG通路富集分析;采用RT-qPCR和甲基化特异性PCR进行验证。结果HIV感染患者外周血单核细胞中低表达高甲基化的基因包括EFHC2、PAK3、VSIG1、DGKK和TSPAN6。HIV感染患者外周血单核细胞中高表达低甲基化的基因包括USP18、KIF4A、CENPI、LY6E、SLC38A5、SH2D1A和PARP9;共筛选出12个HIV感染患者外周血单核细胞中高表达且靶向低表达高甲基化基因的miRNA以及6个HIV感染患者外周血单核细胞中低表达且靶向高表达低甲基化基因的miRNA。结论HIV感染后差异表达和甲基化的基因以及靶向它们的miRNA可作为HIV感染筛查诊断和治疗潜在标志物。 展开更多
关键词 GEO数据库 HIV感染 DNA甲基化 微小RNA 生物信息学
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艾滋病母婴阻断的临床观察 被引量：7
11
作者 刘琴 《中国医学创新》 CAS 2012年第7期161-162,共2页
目的探讨艾滋病母婴阻断的临床特点及效果。方法选择本院2007年4月-2011年3月住院分娩的HIV阳性孕妇47例,自孕14周开始服用抗病毒药物,新生儿出生后服用抗病毒药物、人工喂养进行母婴阻断,分析临床疗效。结果 47例孕妇均坚持服用抗病毒... 目的探讨艾滋病母婴阻断的临床特点及效果。方法选择本院2007年4月-2011年3月住院分娩的HIV阳性孕妇47例,自孕14周开始服用抗病毒药物,新生儿出生后服用抗病毒药物、人工喂养进行母婴阻断,分析临床疗效。结果 47例孕妇均坚持服用抗病毒药物,38例出现轻微胃肠道反应,6例出现贫血,2例出现肝肾功能损伤,1例出现药物过敏。新生儿采取顺产及剖宫产方式,全部顺利出生,均未早产,无身体畸形。出生后2个月进行HIV-DNA的PCR检测,1例为阳性,其余全部为阴性,阳性新生儿3个月再进行HIV-DNA的PCR检测时为阳性,阻断失败,阻断成功率为97.87%。结论对HIV阳性孕妇产前、产时、产后进行母婴阻断,能有效控制艾滋病病毒传播,临床疗效较好。 展开更多
关键词 艾滋病 母婴阻断 hiv-dna
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贵阳市131例HIV-1感染者DNA与RNA在基因型耐药检测中的对比研究
12
作者 郭磊 彭俊 +3 位作者 徐磊 谢小馨 符燕华 龙海 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第5期865-869,共5页
目的探索HIV-1 DNA与HIV-1 RNA基因型耐药检测结果的差异,进一步评估HIV-1DNA基因型耐药检测的临床意义。方法将2021年11月至2023年5月共131名在贵阳市公共卫生救治中心初治和经治患者纳入研究对象,血浆用于检测HIV-1 RNA定量及基因型... 目的探索HIV-1 DNA与HIV-1 RNA基因型耐药检测结果的差异,进一步评估HIV-1DNA基因型耐药检测的临床意义。方法将2021年11月至2023年5月共131名在贵阳市公共卫生救治中心初治和经治患者纳入研究对象,血浆用于检测HIV-1 RNA定量及基因型耐药检测,全血用于检测HIV-1 DNA定量及基因型耐药检测。分析HIV-1耐药突变的发生比例及突变位点情况。对比HIV-1RNA和HIV-1 DNA基因型耐药的共同点及两者之间的差异,进一步评价HIV-1 DNA基因型耐药检测的临床价值。结果131例研究对象中,HIV-1 RNA和HIV-1 DNA基因型耐药检测扩增成功率分别为76.34%(100/131)和97.71%(128/131)。HIV-1 RNA及HIV-1 DNA耐药检测结果一致率为96.00%(96/100)。31例HIV-1 RNA扩增不成功的标本中,其定量结果均小于1000 IU/mL,此31例标本中HIV-1DNA扩增成功率为90.32%(28/31),在28例仅HIV-1 DNA扩增成功的标本中有9例标本存在耐药突变,对其中两例标本依据HIV-1 DNA耐药检测结果进行方案调整后,随访其HIV-1 RNA载量下降至小于30 IU/mL。结论HIV-1 RNA和HIV-1 DNA耐药检测结果具有高度的一致性(96.00%)。并且HIV-1DNA比HIV-1 RNA耐药扩增的灵敏度更高。在HIV-1 RNA载量很低时,用HIV-1 DNA检测耐药可以更早发现可能出现的耐药突变情况,进而优化抗病毒治疗方案减少病毒学治疗失败率。 展开更多
关键词 HIV-1 RNA HIV-1 DNA 基因型耐药
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人类免疫缺陷病毒-1感染者滤泡细胞毒性T细胞/滤泡辅助性T细胞比值的免疫学特点与临床意义
13
作者 张和倩 刘圆圆 +1 位作者 石明芳 张大伟 《传染病信息》 2025年第1期6-10,共5页
目的探究人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)感染者滤泡细胞毒性T细胞(follicular cytotoxic T cell,TFC)/滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cells,TFH)比值和HIV-1活跃复制及疾病进展关系,以期探讨TFC/TFH... 目的探究人类免疫缺陷病毒-1(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)感染者滤泡细胞毒性T细胞(follicular cytotoxic T cell,TFC)/滤泡辅助性T细胞(follicular helper T cells,TFH)比值和HIV-1活跃复制及疾病进展关系,以期探讨TFC/TFH比值在艾滋病进展过程的预后评估作用及临床意义。方法入组66例HIV-1感染者和17例健康对照者(healthy control,HC),其中未接受抗逆转录病毒治疗(antiretroviral therapy,ART)的典型进展患者(typical progressor,TP)48例为TP组,接受ART的HIV-1感染者18例患者为ART组。检测TFC/TFH比值,分析其与CD4^(+)T细胞计数、CD4/CD8比值相关性,以及与血浆HIV-1核糖核酸(ribonucleic acid,RNA)、细胞内HIV-1核糖核酸(cell associated HIV-1 RNA,CA HIV-1 RNA)及CA HIV-1 RNA/CA HIV-1脱氧核糖核酸(CA HIV-1 deoxyribonucleic acid,CA HIV-1 DNA)相关性。结果相较于HC组,TP组和ART组TFC/TFH比值均显著升高。在TP组中,TFC/TFH比值与CD4^(+)T细胞计数(r=0.334,P=0.021)、CD4/CD8比值(r=0.376,P=0.008)呈正相关,与血浆HIV-1 RNA呈负相关(r=-0.324,P=0.009)。对其中11例进行CA HIV-1 RNA及HIV-1 DNA检测,TP组TFC/TFH比值与CA HIV-1 RNA(r=-0.672,P=0.024)、CA HIV-1 RNA/HIV-1 DNA(r=-0.573,P=0.037)均呈负相关。相较于HC组,TP组淋巴组织内TFC/TFH比值显著升高(平均值0.49 vs 1.07,P=0.018),且与血浆HIV-1 RNA呈负相关(r=-0.904,P=0.004)。结论HIV-1感染者体内TFC/TFH比值与HIV-1活跃复制及疾病进展密切相关。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒-1 滤泡辅助性T细胞 滤泡细胞毒性T细胞 TFC/TFH比值 HIV-1载量 细胞内HIV RNA 细胞内HIV DNA
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应用RD-PCR技术制备HIV基因芯片探针 被引量：13
14
作者 李凌 马文丽 +5 位作者 祝骥 朱利娜 宋艳斌 吴清华 郭秋野 郑文岭 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期105-109,共5页
利用限制性显示 (RD PCR)技术快速分离HIV 1基因片段制备DNA芯片探针 .以Sau3AⅠ酶切HIV基因 ,得到许多大小适合芯片的限制性酶切片段 .然后在片段两端接上接头 ,根据酶切位点、接头的序列设计通用引物 .在该通用引物的 3′端分别延伸... 利用限制性显示 (RD PCR)技术快速分离HIV 1基因片段制备DNA芯片探针 .以Sau3AⅠ酶切HIV基因 ,得到许多大小适合芯片的限制性酶切片段 .然后在片段两端接上接头 ,根据酶切位点、接头的序列设计通用引物 .在该通用引物的 3′端分别延伸一个碱基后 ,通过引物间的两两组合 ,将PCR反应分成 10个亚组 .纯化各组PCR产物 ,克隆到T载体上 .阳性克隆经鉴定、扩大培养后提取质粒 .以质粒为模板扩增靶片段并进行序列分析 .每个亚型得到了十几个 10 0～ 10 0 0bp的HIV基因片段 .研究表明 ,RD 展开更多
关键词 RD-PCR HIV DNA芯片 基因芯片探针 制备
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中国HIV-1流行毒株的DNA疫苗的初步研究 被引量：5
15
作者 管永军 朱跃科 +2 位作者 刘海鹰 周玲 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期322-326,共5页
为研制针对我国HIV 1流行毒株的艾滋病毒疫苗 ,构建了具有代表性的 gag和 gp12 0核酸疫苗 ,进行了初步的小鼠免疫实验。结果初步显示 :(1)免疫Balb/C小鼠可以产生HIV 1特异性的体液和细胞免疫 ;(2 ) gag和gp12 0基因联合免疫可以同时诱... 为研制针对我国HIV 1流行毒株的艾滋病毒疫苗 ,构建了具有代表性的 gag和 gp12 0核酸疫苗 ,进行了初步的小鼠免疫实验。结果初步显示 :(1)免疫Balb/C小鼠可以产生HIV 1特异性的体液和细胞免疫 ;(2 ) gag和gp12 0基因联合免疫可以同时诱发针对 gag和 gp12 0的细胞和体液免疫反应 ,而且效果比各自单独免疫要好 ;(3)B亚型 gp12 0基因免疫可以诱发识别C亚型 gp12 0抗原的CTL反应。本文核酸疫苗研究的初步结果值得进一步系统地进行试验。 展开更多
关键词 艾滋病毒 核酸疫苗 GAG基因 gp120基因
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PBMC HIV-1 DNA的动态监测在HIV-1感染者抗病毒治疗过程中的临床意义 被引量：6
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作者 吴育龙 江建宁 +7 位作者 曹汴川 苏明华 梁浩 王荣明 零小樟 臧伟伟 滕春玲 张萍 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期925-927,940,共4页
目的探讨1型艾滋病病毒(HIV-1)感染者接受抗病毒治疗(ART)过程中,当获得核糖核酸(RNA)病毒学完全抑制后,患者外周血单个核细胞(PBMC)中HIV-1脱氧核糖核酸(DNA)的动态变化及其临床意义。方法分别在HIV-1感染者血浆HIV-1 RNA首次<20拷... 目的探讨1型艾滋病病毒(HIV-1)感染者接受抗病毒治疗(ART)过程中,当获得核糖核酸(RNA)病毒学完全抑制后,患者外周血单个核细胞(PBMC)中HIV-1脱氧核糖核酸(DNA)的动态变化及其临床意义。方法分别在HIV-1感染者血浆HIV-1 RNA首次<20拷贝/mL时(定义为转阴)、RNA转阴1年时、RNA转阴2年时检测患者PBMC中HIV-1 DNA的含量,比较三个时间点患者PBMC中HIV-1 DNA含量的动态变化,不同ART方案以及获得RNA病毒学完全抑制所需的时间对HIV-1感染者PBMC中HIV-1 DNA的影响。结果治疗组34例HIV-1感染者接受ART过程中,在血浆HIV-1 RNA首次转阴时、RNA转阴1年时、RNA转阴2年时三个时间点患者PBMC中HIV-1 DNA含量分别为(2.88±0.50)、(2.58±0.47)、(2.57±0.43)Log10拷贝/106个细胞,差异有统计学意义;而未接受ART的对照组15例HIV-1感染者PBMC中HIV-1 DNA含量为(3.26±0.56)Log10拷贝/106个细胞,与ART治疗组比较,差异有统计学意义;含依非韦伦的一线方案和含洛匹那韦/利托那韦的二线方案对患者PBMC中HIV-1 DNA含量的影响无明显统计学差异;HIV-1感染者获得RNA病毒学完全抑制的时间越早,其PBMC中HIV-1 DNA的水平越低。结论在ART获得RNA病毒学完全抑制的HIV-1感染者仍可检出PBMC HIV-1 DNA;随着ART延长,PBMC HIV-1 DNA逐渐消减;PBMC HIV-1 DNA检测有助于判断ART疗效。 展开更多
关键词 1型艾滋病病毒 抗病毒治疗 脱氧核糖核酸 外周血单个核细胞
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表达SIV Gag/Env基因的DNA疫苗、重组腺病毒和重组痘苗病毒三载体疫苗联合免疫小鼠的细胞免疫研究 被引量：3
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作者 何小周 陈丹瑛 +3 位作者 王琬玓 徐柯 曾毅 冯霞 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期170-178,共9页
获得性免疫缺陷综合征即艾滋病是人类面临的严重公共卫生威胁,目前常用的药物疗法仍存在一定的缺陷,尚不能彻底治愈AIDS并阻断HIV的传播。将治疗型疫苗用于HIV感染的治疗具有一定的发展潜力,但缺乏适宜的HIV感染动物模型阻碍了治疗型HI... 获得性免疫缺陷综合征即艾滋病是人类面临的严重公共卫生威胁,目前常用的药物疗法仍存在一定的缺陷,尚不能彻底治愈AIDS并阻断HIV的传播。将治疗型疫苗用于HIV感染的治疗具有一定的发展潜力,但缺乏适宜的HIV感染动物模型阻碍了治疗型HIV疫苗的研制。SIV能够感染非人灵长动物并引起类似AIDS的猴免疫缺陷病,因而常被用作研究HIV及其疫苗的替代动物模型。为了对SIV疫苗在猴感染模型中治疗SIV感染的效果进行评价,我们分别构建了表达SIV gag和env基因的DNA疫苗、重组腺病毒和重组痘苗病毒疫苗,并联合使用这三种疫苗免疫小鼠,对包括不同抗原组合、不同免疫次序及间隔的免疫策略进行探索和优化。IFN-γ酶联免疫斑点和小鼠体内杀伤试验的结果显示,通过三载体疫苗联合免疫,能够在小鼠体内诱导出强度较高、持续时间较长的SIV Gag/Env特异性细胞免疫反应。并且,重复免疫后仍可以诱导较高水平的免疫反应。该结果为在SIV感染猴模型中评价多载体疫苗序贯和重复免疫治疗SIV感染的研究奠定了基础,也为治疗型HIV疫苗的研究提供了参考。 展开更多
关键词 SIV HIV DNA疫苗 重组腺病毒 重组痘苗病毒 联合免疫
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不同病程状态HIV/AIDS病人的HIV总DNA比较研究 被引量：4
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作者 刘佳 闫江舟 +5 位作者 薛秀娟 刘春华 孙国清 田随安 孙定勇 王哲 《中国艾滋病性病》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期227-230,共4页
目的了解不同病程状态的艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)病人(简称HIV/AIDS病人)的HIV总脱氧核糖核酸(DNA)情况及特点。方法分四组纳入HIV/AIDS病人进行横断面研究,四组分别为长期不进展组(组1),低CD4^+T淋巴细胞(简称CD4细胞)未治... 目的了解不同病程状态的艾滋病病毒(HIV)感染者/艾滋病(AIDS)病人(简称HIV/AIDS病人)的HIV总脱氧核糖核酸(DNA)情况及特点。方法分四组纳入HIV/AIDS病人进行横断面研究,四组分别为长期不进展组(组1),低CD4^+T淋巴细胞(简称CD4细胞)未治疗组(组2),高CD4细胞未治疗组(组3)和成功治疗组(组4)。使用荧光实时定量聚合酶链反应的方法进行总DNA的定量检测。结果四组共纳入161例病例,其总DNA中值(四分位数)为229.0(83.0~492.0)拷贝/10^6细胞。四组的总DNA中值之间的差异有统计学意义(H=12.647,P=0.005),组3为111.1(45.4~393.4)拷贝/10^6细胞,组2为339.6(166.1~637.4)拷贝/10^6细胞。组2与另外三组的总DNA中值之间的差异均有统计学意义,分别为组2与组1(Z=-2.601,P=0.009)、组2与组3(Z=-2.225,P=0.026)、组2与组4(Z=-2.138,P=0.033),其他各组的差异均无统计学意义。病毒载量与总DNA之间存在正相关性(r=0.506,P=0.000),但个别病例的病毒载量(VL)为0拷贝/mL而总DNA却很高,也有病例的总DNA低但VL值很高。结论不同病程状态HIV/AIDS病人的总DNA差异显著,总DNA能够为监测患者的机体状况提供重要信息。 展开更多
关键词 艾滋病 总脱氧核糖核酸 比较研究
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HIV多表位核酸疫苗构建及其免疫原性 被引量：3
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作者 李臻 金宁一 +5 位作者 金洪涛 沈国顺 付延军 辛苏文 韩贞珍 刘玉生 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2007年第3期178-180,共3页
目的设计新型HIV复合多表位疫苗,并检测其在小鼠体内的免疫效果。方法检索抗原表位数据库,进行新型HIV多表位核酸疫苗的设计,利用化学合成的方法合成多表位基因,并构建重组质粒pVAX1-MEGNp24,转染BHK-21细胞,间接免疫荧光法检测多表位... 目的设计新型HIV复合多表位疫苗,并检测其在小鼠体内的免疫效果。方法检索抗原表位数据库,进行新型HIV多表位核酸疫苗的设计,利用化学合成的方法合成多表位基因,并构建重组质粒pVAX1-MEGNp24,转染BHK-21细胞,间接免疫荧光法检测多表位基因的表达。重组质粒免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测抗体动态变化,流式细胞仪检测脾T淋巴细胞亚类。结果重组质粒pVAX1-MEGNp24经酶切及测序分析,证明构建正确。间接免疫荧光显示能在BHK-21细胞中表达多表位基因。免疫小鼠可诱导小鼠特异性体液免疫和细胞免疫。结论已成功构建了重组质粒pVAX1-MEGNp24,小鼠免疫试验显示其具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 人免疫缺陷病毒 核酸疫苗 多表位抗原
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治疗性HIV-1重组DNA疫苗的构建与免疫效果评价 被引量：2
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作者 宋英今 金宁一 +3 位作者 张立树 李子建 金洪涛 郎守民 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2005年第2期126-128,共3页
目的　构建编码HIV- 1多表位抗原基因 (MEG)与p2 4基因嵌合的核酸疫苗 ,并评价其免疫效果。方法　将编码HIV -1多表位抗原基因 (MEG)与p2 4基因插入到真核表达载体pVAXI中 ,构建HIV- 1治疗性重组核酸疫苗质粒。通过ELISA试剂盒检测免疫... 目的　构建编码HIV- 1多表位抗原基因 (MEG)与p2 4基因嵌合的核酸疫苗 ,并评价其免疫效果。方法　将编码HIV -1多表位抗原基因 (MEG)与p2 4基因插入到真核表达载体pVAXI中 ,构建HIV- 1治疗性重组核酸疫苗质粒。通过ELISA试剂盒检测免疫恒河猴血清中HIV -1特异性抗体 ,并通过淋巴细胞转化实验检测HIV -1特异性T淋巴细胞增殖反应。结果　构建的重组核酸疫苗质粒pVAXI -MEGp2 4免疫恒河猴后 ,能有效地刺激产生T淋巴细胞特异性增殖反应 ,并诱导产生抗HIV -1特异性抗体。结论　所构建的重组核酸疫苗质粒能诱导机体产生免疫反应。 展开更多
关键词 HIV-1 核酸疫苗质粒 治疗性 特异性抗体 MEG 恒河猴 多表位抗原 原基 免疫效果 ELISA试剂盒
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