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HIV-2 RNA片段病毒样颗粒的构建与表达
1
作者 张兴群 李晓璐 +1 位作者 李振勇 曹张军 《昭通学院学报》 2025年第5期75-79,共5页
目的:构建并表达含有HIV-2 RNA片断的病毒样颗粒。方法:通过PCR扩增获得HIV-2基因gag片段,并将其插入载体pTrc99a-MS2上,经培养、诱导表达、纯化后,采用荧光定量PCR进行分析、评价,了解其抗核酸酶能力。结果:获得了病毒样颗粒,在37℃条... 目的:构建并表达含有HIV-2 RNA片断的病毒样颗粒。方法:通过PCR扩增获得HIV-2基因gag片段,并将其插入载体pTrc99a-MS2上,经培养、诱导表达、纯化后,采用荧光定量PCR进行分析、评价,了解其抗核酸酶能力。结果:获得了病毒样颗粒,在37℃条件下能够稳定储存30天,具有抵抗核酸酶降解能力。结论:该病毒样颗粒表达产量高,稳定好,可作为HIV-2核酸检测、定量分析的有效阳性参考品。 展开更多
关键词 hiv-2 RT-PCR 病毒样颗粒
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人免疫缺陷病毒Ⅱ型(HIV-2)gag蛋白基因在毕赤酵母中的克隆表达 被引量：1
2
作者 李子健 金宁一 +3 位作者 江文正 张应玖 张立树 孙兆增 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期75-78,共4页
目的:实现HIV-2ROD gag重组蛋白的分泌表达,为研究HIV-2ROD gag蛋白结构与功能及亚单位蛋白疫苗研究打下基础。方法:将HIV-2ROD gag蛋白基因片段,与分泌型毕赤酵母表达载体pPIC9重组,构建了相应的重组表达质粒pPIC9-gag,转化GS115酵母菌... 目的:实现HIV-2ROD gag重组蛋白的分泌表达,为研究HIV-2ROD gag蛋白结构与功能及亚单位蛋白疫苗研究打下基础。方法:将HIV-2ROD gag蛋白基因片段,与分泌型毕赤酵母表达载体pPIC9重组,构建了相应的重组表达质粒pPIC9-gag,转化GS115酵母菌,经MD/MM表型筛选、PCR扩增筛选阳性克隆,以甲醇诱导表达后进行SDS-PAGE分析及Western blot证实。结果:获得了HIV-2ROD gag重组蛋白在巴斯德毕赤酵母系统中的分泌表达,表达产物可被HIV-2抗血清识别,分子量约为57kD。结论:pPIC9-gag重组质粒在甲醇营养型酵母菌中可经甲醇诱导产生HIV-2ROD gag蛋白,该蛋白具有强免疫学活性。 展开更多
关键词 艾滋病 人免疫缺陷病毒Ⅱ型 hiv-2 hiv-2HCOgag蛋白 毕赤酵母 基因重组 基因表达
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四川省首例HIV-2感染者的诊断分析
3
作者 万小莉 邱甜 +10 位作者 王晓敏 郭静 周玚 王楠 李玲 袁丹 梁姝 邹潇白 贺健梅 曾亚莉 叶黎 《中国艾滋病性病》 北大核心 2025年第9期960-966,共7页
目的对四川省首次发现的1例HIV-2型感染病例进行诊断与流行病学个案调查。方法2025年1月对四川省眉山市发现的1例疑似HIV-2型感染病例采集血样开展HIV抗体确证检测、核酸检测、基因测序及流行病学个案调查。结果该病例HIV1+2抗体确证试... 目的对四川省首次发现的1例HIV-2型感染病例进行诊断与流行病学个案调查。方法2025年1月对四川省眉山市发现的1例疑似HIV-2型感染病例采集血样开展HIV抗体确证检测、核酸检测、基因测序及流行病学个案调查。结果该病例HIV1+2抗体确证试验结论为“HIV-2抗体阳性”,HIV-1核酸定量检测为未检出,HIV1+2型核酸定性检测为阳性,HIV-2核酸检测结果为108.8 copies/mL。流行病学调查显示该病例与湖南省已确诊的1例HIV-2型感染者(HN001)有过密切性接触。对该病例HIV-2 pol区进行扩增测序,成功扩增RT区并构建基因进化树,显示病例与HIV-2参考毒株聚集在一簇,但仅依靠一个RT区基因片段建立的系统进化树难以判定病例感染毒株为HIV-2。病例与HN001毒株之间的pol基因距离为0.0167,基因进化树及分子网络构建发现两者聚集在同一分子簇上,推断病例与HN001具有可能的传播关系。结论本研究采用HIV抗体确证检测、HIV核酸检测、测序及序列比对等HIV检测项目,最终通过HIV抗体确证检测“HIV-2抗体阳性”结果诊断四川省首例HIV-2感染病例。但在诊断过程中也发现,现行HIV检测策略及流程、核酸检测试剂及相关检测技术等在HIV-2诊断方面存在不足,急需加强重视与优化,才能及时诊断和发现HIV-2感染者,减少HIV-2传播。 展开更多
关键词 艾滋病病毒2型 诊断 流行病学 个案调查
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68份免疫印迹试验出现HIV-2特异性条带的样本分析
4
作者 朱丹 张燕琳 +1 位作者 李姗珊 杜玲 《公共卫生与预防医学》 2025年第6期152-156,共5页
目的分析免疫印迹试验(Western Blot,WB)出现HIV-2特异性条带的原因,了解成都市既往HIV-2感染状况。方法用两种确证试剂对68份WB出现HIV-2特异性条带的样本进行分析,并结合流行病学资料和核酸检测、基因测序对检测结果进行分析。结果用M... 目的分析免疫印迹试验(Western Blot,WB)出现HIV-2特异性条带的原因,了解成都市既往HIV-2感染状况。方法用两种确证试剂对68份WB出现HIV-2特异性条带的样本进行分析,并结合流行病学资料和核酸检测、基因测序对检测结果进行分析。结果用MP试剂检测,有66份(97.06%)为HIV-2抗体阳性,另外两份分别为HIV-2抗体阴性和不确定;用MIKROGEN试剂检测,有67份(98.53%)为HIV-1抗体阳性,1份为HIV-1抗体阴性。进一步用HIV-1核酸检测,68份均检测到HIV-1 RNA,结果均>5000 copies/mL。进行BLAST比对后发现,68份样本与HIV-1参考株序列同源性比较相似度>90%,但与HIV-2参考株序列同源性比较无相似度。结论本次68份的血清学检测、核酸检测以及基因测序结果均表明为HIV-1型感染,结合流行病学资料可以看出,此次68份样本WB后出现HIV-1和HIV-2抗体的双重反应,很可能是非特异性的交叉反应,而非HIV-2感染,此次研究表明成都既往暂未发现HIV-2感染病例。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒2型 免疫印迹试验(WB) 条带免疫法(LIA) 核酸检测 基因测序
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HIV-1与HIV-2交叉反应毒株的基因亚型分析 被引量：5
5
作者 于国龙 刁丽梅 +4 位作者 李杰 林鹏 鄢心革 林萍 张玉润 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2008年第4期198-200,共3页
目的分析HIV-1+2蛋白印迹试验中HIV-1确证阳性同时出现HIV-2带型样本的基因亚型。方法将HIV-1+2确证试验中同时出现HIV-2带型的样本,通过基因诊断确认是否为HIV-2共感染;同时扩增HIV-1 gag,env基因段,通过测序和系统进化树的构建,分析具... 目的分析HIV-1+2蛋白印迹试验中HIV-1确证阳性同时出现HIV-2带型样本的基因亚型。方法将HIV-1+2确证试验中同时出现HIV-2带型的样本,通过基因诊断确认是否为HIV-2共感染;同时扩增HIV-1 gag,env基因段,通过测序和系统进化树的构建,分析具有HIV-2带型的HIV-1毒株的基因亚型。结果在34份出现HIV-2带型的标本中,基因诊断发现均为交叉反应,并非HIV-1和HIV-2共感染。出现交叉反应的毒株中以AE亚型为主,占73.5%(25/34),BC重组和B亚型分别占17.7%(6/34)和8.8%(3/34)。结论HIV-1+2蛋白确证试验中HIV-1确证阳性,同时出现HIV-2带型的阳性样本,并非HIV-1和HIV-2共感染,而是交叉反应。出现交叉反应的HIV-1毒株以AE亚型为主。 展开更多
关键词 交叉反应 hiv-1 hiv-2 基因亚型 聚合酶链反应
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用细菌/杆状病毒系统在昆虫细胞中表达HIV-2外膜糖蛋白gp105和跨膜糖蛋白gp36 被引量：5
6
作者 张应玖 金宁一 +2 位作者 金善荣 王宏伟 沈家骢 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期13-16,共4页
目的用细菌 /杆状病毒 (Bac to Bac)表达系统在昆虫细胞 Sf9中表达 HIV- 2外膜糖蛋白 gp10 5和跨膜糖蛋白 gp36 ,为研制艾滋病疫苗和诊断试剂奠定基础。方法分别将 HIV- 2外膜蛋白 gp10 5和跨膜蛋白 gp36全基因序列克隆到杆状病毒转座载... 目的用细菌 /杆状病毒 (Bac to Bac)表达系统在昆虫细胞 Sf9中表达 HIV- 2外膜糖蛋白 gp10 5和跨膜糖蛋白 gp36 ,为研制艾滋病疫苗和诊断试剂奠定基础。方法分别将 HIV- 2外膜蛋白 gp10 5和跨膜蛋白 gp36全基因序列克隆到杆状病毒转座载体 p Fast Bac HTa和 p Fast Bac HTb中多角体启动子下游 ,构建成重组转座载体 p Fast Bac HTa- gp10 5和 p FastBac HTb- gp36 ,利用细菌 /杆状病毒 (Bac to Bac)表达系统筛选重组杆状病毒 ,并在昆虫细胞 Sf9中表达 HIV- 2的 gp10 5和gp36。结果 SDS- PAGE分析结果表明 ,gp10 5基因表达产物为一 6 6 0 0 0 u糖蛋白 ,gp36基因则表达一 410 0 0 u糖蛋白 ,与天然产物一致。 Western blot结果显示 :两者均具有抗原特异性。结论 gp10 5和 gp36在昆虫细胞中得到了高效表达 ,并均被糖基化 ;gp10 5接近天然产物 。 展开更多
关键词 hiv-2 gp105 gp36 杆状病毒 昆虫细胞
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小鼠对HIV-2gp105核酸疫苗免疫应答的研究 被引量：5
7
作者 李子健 金宁一 +1 位作者 江文正 张立树 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期86-89,共4页
　目的: 探讨HIV- 2gp105基因核酸疫苗在小鼠体内的免疫应答, 为开发HIV- 2核酸疫苗提供实验依据。方法:将HIV- 2外膜蛋白 (gp105 )基因插入真核表达质粒载体pVAX1中, 构建pVAX1 gp105重组表达质粒。将其肌注免疫BALB/c小鼠, 用ELISA法... 　目的: 探讨HIV- 2gp105基因核酸疫苗在小鼠体内的免疫应答, 为开发HIV- 2核酸疫苗提供实验依据。方法:将HIV- 2外膜蛋白 (gp105 )基因插入真核表达质粒载体pVAX1中, 构建pVAX1 gp105重组表达质粒。将其肌注免疫BALB/c小鼠, 用ELISA法检测小鼠血清抗HIV -2抗体, 用流式细胞仪测定CD4+、CD8+ T细胞亚群数, 以乳酸脱氢霉释放法检测脾特异性CTL的杀伤活性。结果: 重组质粒pVAX1 -gp105免疫组小鼠的血清抗体滴度、脾T细胞亚群的数量及特异性CTL的杀伤活性, 均明显高于对照组, 分别为P<0. 01, P<0. 05和P<0. 01。结论: HIV -2gp105核酸疫苗能诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫。 展开更多
关键词 hiv-2 gp105 DNA疫苗 免疫应答
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我国首次发现的HIV-1和HIV-2双重感染样品中病毒部分基因的序列特征分析 被引量：4
8
作者 邢辉 潘品良 +5 位作者 冯毅 林旭东 于健石 龚新昌 戴玉琳 邵一鸣 《病毒学报》 CSCD 北大核心 2000年第2期111-115,共5页
上海市卫生检疫局送检了一例HIV - 1和HIV - 2抗体检测均呈阳性的双重感染样品 ,对其感染的HIV前病毒的 gag和env基因区进行了序列分析 ,首次阐明我国发现的HIV双重感染样品的HIV部分基因特征。从HIV感染者淋巴细胞 (peripheralbloodmon... 上海市卫生检疫局送检了一例HIV - 1和HIV - 2抗体检测均呈阳性的双重感染样品 ,对其感染的HIV前病毒的 gag和env基因区进行了序列分析 ,首次阐明我国发现的HIV双重感染样品的HIV部分基因特征。从HIV感染者淋巴细胞 (peripheralbloodmononuclearcells,PBMC)中提取前病毒DNA ,分别使用HIV 1和HIV 2特异性引物用套式PCR扩增HIV 1和HIV 2的部分基因区。PCR产物不经克隆直接测序 ,经GenBank检索并使用GCG软件包进行序列分析。结果表明 ,其中感染的HIV 2毒株中gag基因区与德国株HI2PEI2KR相似 ,基因离散率仅为8 1% ,env基因C2 -V3区与来自几内亚比绍的HIV 2U0 5 35 8株最近 ,离散率为 13 0 4% ,在其 gp36区发现与HIV 2U0 5 35 8基因离散率为 10 6 3% ,两个毒株均属HIV 2中的A亚型。而其HIV 1型毒株在 gag和env区都与从尼日利亚分离的H92NG0 83株相似 ,属HIV 1的G亚型。本文首次对我国发现的HIV 2型毒株进行了主要基因区的序列分析 ,表明在非洲较常见的HIV 2A亚型和HIV 1G亚型毒株 ,已随援外劳工传入我国。 展开更多
关键词 双重感染 序列分析 系统树分析 hiv-1 hiv-2
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福建发现首例HIV-2感染者 被引量：7
9
作者 严延生 郑兆双 +4 位作者 陈舸 郑健 颜苹苹 陈亮 戴立芳 《海峡预防医学杂志》 CAS 1999年第1期6-7,共2页
目的：我国目前尚未发现ＨＩＶ－２病毒感染者，首例ＨＩＶ－２病毒感染者的检出对于ＨＩＶ－２病原学的研究、血清学确认实践、及艾滋病的预防控制具有重要意义。方法：被检血清标本用ＦＡＧＴ（ＧＢＣ，ＨＩＶ－１＋２）、ＥＩＡ（Ｖ... 目的：我国目前尚未发现ＨＩＶ－２病毒感染者，首例ＨＩＶ－２病毒感染者的检出对于ＨＩＶ－２病原学的研究、血清学确认实践、及艾滋病的预防控制具有重要意义。方法：被检血清标本用ＦＡＧＴ（ＧＢＣ，ＨＩＶ－１＋２）、ＥＩＡ（Ｖｉｒｏｎｏｓｔｉｃａ，ＨＩＶ－１＋２）和ＰＡ（Ｓｅｒｏｄｉａ，ＨＩＶ－１）３种不同原理的检测方法进行ＨＩＶ抗体初筛检测，可疑阳性血清经免疫印迹试验（ＷＢ）确认，通过分析蛋白反应条带确定ＨＩＶ抗体的性质。进行艾滋病流行病学调查，分析被检人员感染ＨＩＶ的地点、途径及可能扩散传播的范围。结果：ＦＡＧＴ和ＥＬＩＳＡＨＩＶ抗体初筛检测试验发现１个回国人员ＨＩＶ抗体阳性，用ＨＩＶ－１＋２和ＨＩＶ－２特异性的抗体ＷＢ试验证实为ＨＩＶ－２病毒感染。这是福建也是我国首例确认报告的ＨＩＶ－２抗体阳性者。 展开更多
关键词 HIV 抗体检测 免疫印迹 hiv-2病毒 福建
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湖南省既往HIV-2抗体阳性血清RNA核酸检测结果分析 被引量：1
10
作者 贺健梅 彭瑾瑜 +4 位作者 郑军 邹潇白 江洋 粟晓玲 陈曦 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期756-759,共4页
目的对湖南省既往人类免疫缺陷病毒-2(human immunodeficiency virus 2,HIV-2)抗体阳性者血清进行RNA核酸检测,以确定HIV-2感染。方法对2005—2019年湖南省HIV确证实验室保存的HIV-2抗体阳性血清样本进行核酸测序,采用自行设计的引物通... 目的对湖南省既往人类免疫缺陷病毒-2(human immunodeficiency virus 2,HIV-2)抗体阳性者血清进行RNA核酸检测,以确定HIV-2感染。方法对2005—2019年湖南省HIV确证实验室保存的HIV-2抗体阳性血清样本进行核酸测序,采用自行设计的引物通过巢式PCR扩增HIV-2病毒核酸保守区gag基因片段(453 bp,HXB2620-1072),扩增产物测序并与HIV-2 gag基因参考序列比对判定。结果15份HIV-2抗体阳性血清样本中,13份(86.67%)HIV-2型核酸检测结果为阳性,2份未检出。13份HIV-2型核酸阳性样本中,gp36和gp105条带阳性率均为100.00%(13/13),gp41条带阳性率为92.30%(12/13),p51条带阳性率为69.23%(9/13),p31条带阳性率为84.62%(11/13)。结论通过核酸测序进一步验证湖南省已经存在HIV-2感染。 展开更多
关键词 艾滋病 hiv-2 抗体阳性 巢式PCR 基因测序 gag基因片段
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HIV-2 env基因在大肠杆菌和重组痘苗病毒中的表达 被引量：1
11
作者 王秀清 金宁一 +5 位作者 田梅 郭志儒 方厚华 顾万钧 李萍 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期216-220,共5页
将编码人Ⅱ型免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－２）ｅｎｖｇｐ１２０（Ｅ１）和ｇｐ３６（Ｅ２）分别克隆到原核高效表达载体ｐＥＴ１７ｂ、ｐＢＶ２２０和真核表达载体ｐ１０、ｐ１６中，构建成８个重组质粒。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒ... 将编码人Ⅱ型免疫缺陷病毒（ＨＩＶ－２）ｅｎｖｇｐ１２０（Ｅ１）和ｇｐ３６（Ｅ２）分别克隆到原核高效表达载体ｐＥＴ１７ｂ、ｐＢＶ２２０和真核表达载体ｐ１０、ｐ１６中，构建成８个重组质粒。经ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ分析证明，在原核表达系统成功地表达了ＨＩＶ－２ｅｎｖ融合蛋白，表达的蛋白分子量分别为３５０００、７００００和５００００，而原核表达质粒ｐＥＴＥ１在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶的３５０００处可见明显的额外蛋白带。经薄层扫描测定，原核系统表达的Ｅｎｖ蛋白（ｇｐ１２０）相对含量为５．８％。在真核细胞中表达的Ｅｎｖ蛋白经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测分析，分子量分别为６００００、５７０００和４２０００。上述表达的Ｅｎｖ蛋白均能与ＨＩＶ－２阳性血清发生特异性反应。 展开更多
关键词 hiv-2 Env蛋白 表达 大肠杆菌 痘苗病毒
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HIV-2gag基因在重组痘苗病毒中的表达 被引量：1
12
作者 王秀清 金宁一 +5 位作者 田梅 毛春生 李体远 王宏伟 苏忠兰 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第6期570-574,共5页
以痘苗病毒ＨＡ基因为侧翼，将ＨＩＶ－２ｇａｇ基因部分序列（简称Ｇ１）和全部序列（简称Ｇ２）分别插入牛痘病毒Ａ型包涵体（ＡＴＩ）和串联１０个（与ＨＡ基因反向）或１６个（与ＨＡ基因同向）痘苗病毒Ｐ７．５组成的复合型启动子... 以痘苗病毒ＨＡ基因为侧翼，将ＨＩＶ－２ｇａｇ基因部分序列（简称Ｇ１）和全部序列（简称Ｇ２）分别插入牛痘病毒Ａ型包涵体（ＡＴＩ）和串联１０个（与ＨＡ基因反向）或１６个（与ＨＡ基因同向）痘苗病毒Ｐ７．５组成的复合型启动子下游，构建了４个重组痘苗病毒表达载体质粒。经脂质体转染、鸡红细胞吸附试验筛选和免疫荧光鉴定，获得４株能稳定表达目的蛋白的重组痘苗病毒。实验结果表明，以ＨＡ基因为侧翼构建重组病毒的重组率约为０．１％，阳性重组率为２５％～１００％。实验中还发现，以ＨＡ基因为侧翼的重组痘苗病毒能够引起细胞融合，其可作为筛选重组痘苗病毒的另一种标志。Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ结果表明，表达的Ｇａｇ蛋白能被ＨＩＶ－２血清中的特异性抗体所识别，并能诱导小鼠产生抗ＨＩＶ－２Ｇａｇ抗体。 展开更多
关键词 hiv-2 GAG基因 痘苗病毒 表达
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广州市发现首例HIV-1/HIV-2混合感染 被引量：6
13
作者 高凯 李燕 +5 位作者 梁彩云 徐慧芳 顾菁 李泽荣 赵宇腾 张周斌 《华南预防医学》 2006年第1期17-19,共3页
目的探讨首例HIV-1/HIV-2混合感染发现的经过以及对本地艾滋病预防控制的意义。方法对广州市某医院一名门诊患者血样2份(包括初筛试验前后各1份)进行HIV抗体检测。初筛试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和明胶颗粒凝集试验(PA),确认试验... 目的探讨首例HIV-1/HIV-2混合感染发现的经过以及对本地艾滋病预防控制的意义。方法对广州市某医院一名门诊患者血样2份(包括初筛试验前后各1份)进行HIV抗体检测。初筛试验采用酶联免疫吸附试验(ELISA)和明胶颗粒凝集试验(PA),确认试验采用蛋白印迹法(WB)。结果患者为男性,非洲马里人,血清经初筛试验为HIV阳性。初筛阳性的血清,以HIV-1/HIV-2 HIVBLOT2.2试剂做蛋白印迹试验(WB),确认为HIV-1阳性,同时HIV-2的特异条带gp36阳性;样本再用HIV-2型的BLOT1.2膜条确认为HIV-2阳性。结论被检者为HIV-1/HIV-2混合感染,这是广州市、广东省首次发现HIV-1/HIV-2混合感染,提示HIV-2可能会以对外交流等方式传入广东。 展开更多
关键词 hiv-1 hiv-2 抗体 病毒
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我国首例HIV-2感染者的确认 被引量：20
14
作者 严延生 郑兆双 +3 位作者 陈舸 郑健 颜苹苹 邵一鸣 《中国性病艾滋病防治》 2000年第1期16-18,共3页
目的 HIV-2抗体的确认。方法 用多种血清学检测方法测定一份可疑HIV-2抗体,并用HIV-2特异性免疫印迹试剂盒确认。结果 从一个科特迪瓦回国人员采集的血液标本经FAGT(GBC,HIV-1+2)和ELISA(Vironostica,HIV-1+2)检测为HIV抗体阳性,使用HIV... 目的 HIV-2抗体的确认。方法 用多种血清学检测方法测定一份可疑HIV-2抗体,并用HIV-2特异性免疫印迹试剂盒确认。结果 从一个科特迪瓦回国人员采集的血液标本经FAGT(GBC,HIV-1+2)和ELISA(Vironostica,HIV-1+2)检测为HIV抗体阳性,使用HIV-1+2免疫印迹试验(WB)证实该血清含有HIV-2特异性抗体,其中LiaTekⅢWB出现HIV-1 p24和HIV-2的gp105、gp35 3条反应条带,HIV Blot 2.2WB出现HIV-1 p24和HIV-2 gp36 2条反应带,继续用HIV-2特异性的HIV-2 Blot 1.2试剂盒检测,出现gp125、gp80、P68、p56、gp36、p26和p16条带,而HIV-1感染者血清仅出现p26反应带,因此,确认检出HIV-2抗体阳性者。结论 发现我国首例HIV-2病毒感染者。 展开更多
关键词 HIV抗体 免疫印迹检验 hiv-2 艾滋病
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ELISA法和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测分析 被引量：7
15
作者 金晶 《中国医药指南》 2018年第4期49-49,共1页
目的探讨分析ELISA法(酶联免疫吸附法)和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测。方法本次研究对象为2016年2月至2016年8月我院收集的400份新生儿脐血标本,采用ELISA法和化学发光法对所收集的新生儿脐血标... 目的探讨分析ELISA法(酶联免疫吸附法)和化学发光法对血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体的检测。方法本次研究对象为2016年2月至2016年8月我院收集的400份新生儿脐血标本,采用ELISA法和化学发光法对所收集的新生儿脐血标本进行检测,检测内容包括HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体和丙型肝炎抗体。结果采用ELISA法(酶联免疫吸附法)检测400份新生儿脐血标本,血清中HIV-1/HIV-2抗体阳性2例,阳性率为0.50%,梅毒抗体阳性3例,阳性率为0.75%,丙型肝炎抗体阳性4例,阳性率为1%;采用化学发光法检测400份新生儿脐血标本,血清中HIV-1/HIV-2抗体阳性3例,阳性率为0.75%,梅毒抗体阳性4例,阳性率为1%,丙型肝炎抗体阳性5例,阳性率为1.25%。结论采用化学发光法检测血清中HIV-1/HIV-2抗体、梅毒抗体、丙型肝炎抗体的敏感性高于酶联免疫法检测,可作为首选检测方案,具有良好的临床应用价值。 展开更多
关键词 ELISA法 化学发光法 hiv-1/hiv-2抗 梅毒抗体 丙型肝炎抗体 检测
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HIV-2gp105重组疫苗联合免疫引起小鼠更强的免疫应答
16
作者 李子健 金宁一 +3 位作者 张立树 江文正 张洪勇 李昌 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期1-3,共3页
目的:探讨应用prime—boost免疫策略进行HIV-2外膜蛋白重组鸡痘病毒与重组DNA疫苗联合免疫引起小鼠的免疫应答。方法:将HIV-2 gp105重组DNA疫苗与重组鸡痘病毒以prime-boost免疫策略,免疫 BALB／c小鼠,检测免疫小鼠脾CD4+、CD8+T细胞亚... 目的:探讨应用prime—boost免疫策略进行HIV-2外膜蛋白重组鸡痘病毒与重组DNA疫苗联合免疫引起小鼠的免疫应答。方法:将HIV-2 gp105重组DNA疫苗与重组鸡痘病毒以prime-boost免疫策略,免疫 BALB／c小鼠,检测免疫小鼠脾CD4+、CD8+T细胞亚群的数量、脾特异性CTL杀伤活性和血清抗体滴度。结果:重组DNA疫苗和重组鸡痘病毒prime-boost免疫策略和两种疫苗单独免疫均刺激小鼠产生针对HIV-2靶细胞的特异性CTL杀伤活性及特异性抗体,联合免疫组特异性CTL杀伤活性及特异性抗体水平高于单独免疫组(P<0．05)。结论:以HIV-2 gp105重组DNA疫苗进行基础免疫、以HIV-2 gp105重组鸡痘病毒进行加强免疫的prime-boost免疫策略能诱导小鼠产生更强的特异性细胞和体液免疫应答。 展开更多
关键词 hiv-2I gp105 疫苗 DNA 重组鸡痘病毒 免疫策略
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HIV-2DNA疫苗免疫小鼠的免疫反应观察
17
作者 张应玖 金宁一 +3 位作者 郭焱 江文正 李子健 沈家骢 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期333-336,共4页
目的　用构建的HIV 2外膜蛋白gp1 0 5和核心蛋白gag基因的DNA疫苗免疫小鼠 ,评价其免疫效果。方法　将HIV 2型gp1 0 5和gag基因克隆到表达载体pIRES1neo中 ,构建重组DNA疫苗质粒。间接免疫荧光试验证明 ,构建的DNA疫苗在真核细胞中表达... 目的　用构建的HIV 2外膜蛋白gp1 0 5和核心蛋白gag基因的DNA疫苗免疫小鼠 ,评价其免疫效果。方法　将HIV 2型gp1 0 5和gag基因克隆到表达载体pIRES1neo中 ,构建重组DNA疫苗质粒。间接免疫荧光试验证明 ,构建的DNA疫苗在真核细胞中表达了gp1 0 5或 /和gag。构建的疫苗免疫小鼠后 ,用流式细胞仪测定CD4+ 、CD8+ T淋巴细胞亚类数 ,并用HIV 2抗体ELISA检测试剂盒检测免疫鼠血清中抗HIV 2抗体水平。结果　构建了 3种HIV 2DNA疫苗pIRES1gag、pIRES1gp1 0 5和pIRES1gag gp1 0 5 ,转染BHK细胞后均能表达抗原蛋白 ,免疫小鼠后可有效地刺激淋巴细胞增殖并诱导产生抗HIV 2特异性抗体 ,其中pIRES1gag gp1 0 5免疫鼠中 ,淋巴细胞增殖最显著 ,而pIRES1gp1 0 5免疫鼠中HIV 2特异性抗体水平最高。结论　构建的DNA疫苗均能诱导机体产生免疫反应 ,其中pIRES1gp1 0 5诱导的体液免疫应答最显著 ,而pIRES1gag gp1 0 5诱导的细胞免疫响应最显著。 展开更多
关键词 免疫应答 艾滋病 hiv-2 DNA疫苗 小鼠
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应用P_RP_L串联启动子表达HIV-2gag蛋白
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作者 王秀清 金宁一 +6 位作者 田梅 李体远 李钟洙 郭志儒 李萍 赵丽娟 殷震 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期293-294,共2页
目的 :探讨HIV 2gag非融合蛋白的表达。方法 :应用DNA重组技术 ,将HIVgag基因全序列 (gag)和部分 (gag’)cDNA片段克隆到pBV2 2 0载体PRPL 串联启动子下游 ,构建成HIV 2gag重组表达载体pBV gag和pBV gag’ ,在大肠杆菌中表达。结果 :SDS... 目的 :探讨HIV 2gag非融合蛋白的表达。方法 :应用DNA重组技术 ,将HIVgag基因全序列 (gag)和部分 (gag’)cDNA片段克隆到pBV2 2 0载体PRPL 串联启动子下游 ,构建成HIV 2gag重组表达载体pBV gag和pBV gag’ ,在大肠杆菌中表达。结果 :SDS PAGE显示pBV gag’在 2 1kD处可见一明显的额外蛋白带 ,经薄层扫描分析占菌体总蛋白的 6 .1% ,蛋白印迹结果证明 ,表达出的特异蛋白分子量pBV gag为 5 7kD和 47kD ;pBV gag’为 47kD和 2 1kD。经提取包涵体证明 ,表达的蛋白主要以包涵体形式存在于菌体中。结论 :HIV 展开更多
关键词 艾滋病 hiv-2gag蛋白 PRPL串联启动子 基因表达
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小鼠对HIV-2嵌合结构基因重组鸡痘病毒的免疫反应
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作者 李子健 张立树 +2 位作者 金宁一 江文正 李昌 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2006年第7期730-734,共5页
将HIV-2嵌合结构基因gag-gp105插入到转移载体pUTA2复合启动子ATI-P7.5×20下游,构建出鸡痘病毒重组转移质粒pA-gg;经转染和BrdU加压筛选,以基因组PCR和Western blot法鉴定重组病毒;将获得的重组病毒大量制备并纯化后,肌肉注射免疫B... 将HIV-2嵌合结构基因gag-gp105插入到转移载体pUTA2复合启动子ATI-P7.5×20下游,构建出鸡痘病毒重组转移质粒pA-gg;经转染和BrdU加压筛选,以基因组PCR和Western blot法鉴定重组病毒;将获得的重组病毒大量制备并纯化后,肌肉注射免疫BALB/c小鼠,ELISA法检测小鼠血清HIV-2抗体,流式细胞仪测定CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞亚类数量,乳酸脱氢酶（LDH）释放法检测脾特异性CTL杀伤活性.结果表明,成功筛选出一株可稳定表达HIV-2嵌合蛋白Gag-gp105的重组鸡痘病毒rFPV-gg;该重组病毒免疫组小鼠的血清出现HIV-2抗体,脾T细胞亚类数量增加,并产生针对HIV-2靶细胞的特异性CTL杀伤活性.本研究提示,HIV-2 gag-gp105重组病毒能诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫应答. 展开更多
关键词 人免疫缺陷病毒Ⅱ型(hiv-2) 结构基因 重组 鸡痘病毒 免疫反应
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HIV-2 env 基因在重组痘苗病毒中的表达
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作者 田梅 金宁一 +4 位作者 王秀清 郭志儒 方厚华 范洪学 殷震 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 1998年第4期48-52,共5页
以痘苗病毒复制非必需区血凝素（ＨＡ）基因为侧翼，将人Ⅱ型免疫缺陷病毒ｇｐ１２０和ｇｐ３６基因分别置于不同类型的自然型痘苗病毒复合启动子下游，构建了４种表达质粒，经同源重组和血凝素阴性空斑筛选，获得了４株重组痘苗病毒，... 以痘苗病毒复制非必需区血凝素（ＨＡ）基因为侧翼，将人Ⅱ型免疫缺陷病毒ｇｐ１２０和ｇｐ３６基因分别置于不同类型的自然型痘苗病毒复合启动子下游，构建了４种表达质粒，经同源重组和血凝素阴性空斑筛选，获得了４株重组痘苗病毒，经免疫荧光试验和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测证明，４株重组病毒均能表达目的蛋白。在重组病毒感染早期、晚期，不同株表达量略有不同，表达产物分子量分别约为５７ｋＤａ和４２ｋＤａ，具有良好的反应原性。 展开更多
关键词 hiv-2 ENV基因 重组痘苗病毒 表达
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