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钙调蛋白基因缺陷HIS3酵母菌株的构建和鉴定
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作者 陈孙孝 廖万清 +3 位作者 温海 姚志荣 邓安梅 仲人前 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第9期827-829,共3页
目的 :构建白念珠菌钙调蛋白基因 (CMD1)缺陷 HIS3酵母菌株 ,为进一步探讨钙调蛋白基因突变对真菌生长周期及致病性的影响奠定基础。方法 :首先将含 cmd1::TRP1置换序列的质粒 转化二倍体酵母菌株 YPH5 0 1(his3trp1ura1) ,经Southern... 目的 :构建白念珠菌钙调蛋白基因 (CMD1)缺陷 HIS3酵母菌株 ,为进一步探讨钙调蛋白基因突变对真菌生长周期及致病性的影响奠定基础。方法 :首先将含 cmd1::TRP1置换序列的质粒 转化二倍体酵母菌株 YPH5 0 1(his3trp1ura1) ,经Southern印迹法筛选出含 TRP1序列的菌株。其次 ,将含 CMD1序列的质粒 转化以上 TRP1阳性菌株 ,进行减数分裂后选择得到 TRP1阳性酵母菌株单倍体。最后 ,将含 trp1::HIS3置换序列质粒 转化上述 TRP1阳性单倍体菌株 ,用不含 His培养基培养得到钙调蛋白基因缺陷 HIS3酵母菌株。结果 :经 Southern印迹法证实 cmd1::TRP1基因置换克隆 ;减数分裂后选择得到了 TRP1阳性酵母菌株单倍体 ;质粒 转化单倍体后经不含 His培养基培养得到 CMD1缺陷 HIS3菌株 ,接种于不含Trp培养基上未见有菌落生长 ,说明质粒 转化单倍体后已将 his3TRP1置换成 HIS3trp1。 结论 :成功构建了钙调蛋白基因缺陷 HIS3酵母菌株 ,基因型为 cm d1trp1HIS3。 展开更多
关键词 白色念珠菌 钙调蛋白 基因转染 基因缺失 his3酵母菌体
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子囊菌门赤壳科指赤壳属(Dactylonectria)真菌引起云南地区苹果根腐病初报
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作者 毕潮龙 莫艳芳 +5 位作者 普特 施竹凤 裴卫华 吴德喜 陈齐斌 杨佩文 《中国南方果树》 北大核心 2025年第1期127-131,137,共6页
云南苹果主产区根腐病发生为害严重,病原真菌种类复杂。为明确其病原真菌种类及分布,以及是否有新病原的存在,在云南苹果主产区进行病样采集,运用组织分离法获取病原菌,通过科赫法则验证致病性;通过形态学鉴定初步确定病原菌生物学分类... 云南苹果主产区根腐病发生为害严重,病原真菌种类复杂。为明确其病原真菌种类及分布,以及是否有新病原的存在,在云南苹果主产区进行病样采集,运用组织分离法获取病原菌,通过科赫法则验证致病性;通过形态学鉴定初步确定病原菌生物学分类地位,进一步基于Internal Transcribed Spacer(ITS)、β-tubulin(β-tub)和histone H3(HIS3)多位点基因序列联合建进化树的方法进行分子生物学鉴定。从昆明市富民县、丽江市古城区和宁蒗县分离得到3株真菌,致病性测定结果表明3株真菌均能使苹果根部出现腐烂症状。形态学结合分子生物学将其鉴定为指赤壳属(Dactylonectria)的D.macrodidyma、D.estremocensis和D.torresensis。这是病原D.macrodidyma和D.estremocensis引起苹果根腐病的首次报道。研究结果为病害的发生流行监测和综合防治技术制定提供了依据。 展开更多
关键词 苹果根腐病 Dactylonectria macrodidyma Dactylonectria estremocensis Dactylonectria torresensis ITS β-TUB his3
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