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无氰化物降解—亲水保留液相色谱—荧光检测法测定婴幼儿配方奶粉中维生素B_(12)
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作者 李樑 邓文娟 +2 位作者 黄伟乾 吴俊发 覃天福 《食品与机械》 北大核心 2025年第7期39-45,共7页
[目的]建立一种基于间接检测维生素B_(12)降解产物α-核唑(维生素B_(12)的核苷组分)测定总维生素B_(12)含量的检验方法,用于测定婴幼儿配方奶粉中维生素B_(12)总量。[方法]试样经蛋白质变性与糖类去除后,进行酸水解与酶解去磷酸化,释放... [目的]建立一种基于间接检测维生素B_(12)降解产物α-核唑(维生素B_(12)的核苷组分)测定总维生素B_(12)含量的检验方法,用于测定婴幼儿配方奶粉中维生素B_(12)总量。[方法]试样经蛋白质变性与糖类去除后,进行酸水解与酶解去磷酸化,释放α-核唑,通过硼酸亲和柱净化,最终采用亲水保留液相色谱—荧光检测法(HILIC-FLD)进行定量分析。[结果]α-核唑在1.00~10.0μg/L范围内线性关系良好,相关系数R^(2)为0.999 1,加标回收率为72.5%~78.3%,相对标准偏差(RSD)为4.56%~7.28%,方法检出限(LOD)为0.4μg/100 g,定量限(LOQ)为1.2μg/100 g。Bland-Altman分析结果表明,该方法和国标法的测定结果之间无明显差异且一致性较好。[结论]该方法灵敏度高,重现性好,无需氰化物进行前处理即可准确测定婴幼儿配方奶粉中维生素B_(12)总含量。 展开更多
关键词 液相色谱—荧光检测法 婴幼儿配方奶粉 维生素B_(12) α-核唑
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不同CHO工程细胞株表达的VEGFR-Fc唾液酸化修饰的研究
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作者 刘培 宋礼华 +4 位作者 范清林 刘道琴 张伟 魏利 赵婷 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2016年第6期778-782,共5页
目的比较中国仓鼠卵巢细胞（CHO）工程细胞株表达的VEGFR-Fc的唾液酸化程度的差异,为CHO工程细胞株的筛选提供参数依据。方法从唾液酸单糖、寡糖链这两个层次分析VEGFR-Fc的唾液酸化程度。唾液酸单糖的定量：酸水解释放出的唾液酸用荧... 目的比较中国仓鼠卵巢细胞（CHO）工程细胞株表达的VEGFR-Fc的唾液酸化程度的差异,为CHO工程细胞株的筛选提供参数依据。方法从唾液酸单糖、寡糖链这两个层次分析VEGFR-Fc的唾液酸化程度。唾液酸单糖的定量：酸水解释放出的唾液酸用荧光试剂1,2-diamino-4,5-methylenedioxybenzene（DMB）衍生后,采用荧光-亲水保留液相色谱（HILIC-FLD）检测。寡糖链的结构分析：糖苷酶PNGase F释放出的寡糖链经邻氨基苯甲酰胺（2-AB）衍生后,一部分利用阴离子交换色谱原理分析寡糖链上唾液酸的平均数;一部分经HILIC原理分析VEGFR-Fc寡糖链指纹图谱。结果 6株工程细胞株表达的VEGFR-Fc唾液酸含量在3-12 mol NANA/mol蛋白之间,参考品Aflibercept为10.46 mol NANA/mol蛋白;每个寡糖链的唾液酸平均数在0.28-1.0之间;寡糖链的特征指纹谱图显示VEGFR-Fc有12个共有峰,各样品、参考品均有以上共有峰,但各峰的峰高有差异。结论不同的CHO工程细胞株所表达的糖蛋白的唾液酸化程度存在差异。 展开更多
关键词 唾液酸 唾液酸化 糖基化 hilic-fld
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