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HENMT1通过激活PI3K-AKT-mTOR信号通路促进胃癌的增殖与迁移
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作者 杨娜 刘俊丽 +3 位作者 白静 杨思怡 韩继明 张华华 《上海交通大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第6期717-726,共10页
目的·探究HEN甲基转移酶1(HEN methyltransferase 1,HENMT1)在胃癌(gastric cancer,GC)增殖和迁移中的作用及潜在的分子机制。方法·利用生物信息学数据库、Western blotting和实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qP... 目的·探究HEN甲基转移酶1(HEN methyltransferase 1,HENMT1)在胃癌(gastric cancer,GC)增殖和迁移中的作用及潜在的分子机制。方法·利用生物信息学数据库、Western blotting和实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)检测HENMT1在GC中的表达。使用Kaplan-Meier Plotter和BEST在线分析HENMT1表达与临床GC患者总生存期、神经侵袭、亚型、肿瘤发生部位及Lauren分型的相关性。体外培养胃癌细胞,采用靶向HENMT1的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)及其过表达载体联合PI3K激活剂(740 Y-P)和PI3K抑制剂(3-MA)处理胃癌细胞,通过细胞计数试剂盒8(cell counting kit-8,CCK-8)实验、克隆形成实验、细胞划痕实验以及Transwell迁移实验,检测HENMT1在胃癌细胞增殖及迁移中的作用。结果·HENMT1在GC中的表达显著升高,且其高表达与神经侵袭呈正相关;HENMT1的表达与GC的亚型密切相关,在增殖型中最为显著;在Lauren分型中的肠型胃癌表达更高。HENMT1的表达与患者的总生存期和GC发生部位(如胃体、贲门、胃窦和全胃)无明显相关性。功能实验结果表明,沉默HENMT1能够抑制胃癌细胞的增殖和迁移能力,而过表达HENMT1则促进这些功能。进一步的机制研究发现,沉默HENMT1导致PI3K-AKT-mTOR信号通路关键蛋白p-PI3K、p-AKT和p-mTOR水平下降,同时PI3K、AKT和mTOR的总蛋白表达也降低;相反,过表达HENMT1则使这些蛋白的表达上调。此外,siHENMT1联合PI3K激活剂740 Y-P能够有效逆转740 Y-P诱导的胃癌细胞增殖和迁移效应,而over-HENMT1联合3-MA则能够有效逆转3-MA抑制的胃癌细胞增殖和迁移作用。结论·HENMT1在GC中呈高水平表达,并通过激活PI3K-AKT-mTOR信号通路正向调控胃癌细胞的增殖与迁移能力。 展开更多
关键词 HEN甲基转移酶1 胃癌 PI3K-AKT-mTOR信号通路 增殖 迁移
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小RNA 2’-O-甲基转移酶Henmt1在小鼠精子发生中的作用 被引量:1
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作者 戴馨缘 王仿竹 +2 位作者 靳佳川 李伟 沈彬 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1263-1268,1296,共7页
目的:通过构建基因突变小鼠模型,研究小RNA 2’-O-甲基转移酶Henmt1在小鼠精子发生中的作用。方法:利用CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated protein 9)技术,构建Henmt1基因... 目的:通过构建基因突变小鼠模型,研究小RNA 2’-O-甲基转移酶Henmt1在小鼠精子发生中的作用。方法:利用CRISPR/Cas9(clustered regularly interspaced short palindromic repeats and CRISPR-associated protein 9)技术,构建Henmt1基因突变小鼠,通过计算机辅助精子分析、HE染色及免疫荧光检测等技术对小鼠表型进行分析。结果:成功构建Henmt1基因突变小鼠模型;生育力测试结果提示Henmt1基因突变雄鼠不育;Henmt1基因突变导致雄性小鼠精子发生阻滞;突变小鼠睾丸中逆转座子元件LINE1表达上调。结论:Henmt1对雄性小鼠精子发生有重要调控作用。 展开更多
关键词 henmt1 精子发生 RNA修饰 雄性不育
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miR-106b-5p 3'-末端2'-O-甲基化对乳腺癌细胞的影响 被引量:1
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作者 李双健 李丹 +3 位作者 丰锦春 李宇翔 迪力夏提·金斯汗 赵倩 《生物技术》 CAS 2023年第5期586-591,550,共7页
[目的]探讨miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化修饰在乳腺癌细胞中的影响。[方法]纳入2019年9月-2021年9月收治的乳腺癌患者,收集其乳腺癌组织和癌旁组织。敲低或过表达miR-106b-5p后,检测乳腺癌细胞的增值水平。乳腺癌和癌旁组... [目的]探讨miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化修饰在乳腺癌细胞中的影响。[方法]纳入2019年9月-2021年9月收治的乳腺癌患者,收集其乳腺癌组织和癌旁组织。敲低或过表达miR-106b-5p后,检测乳腺癌细胞的增值水平。乳腺癌和癌旁组织中纯化的miR-106b-5p进行质谱分析以确定分子质量和LC-MS/MS确定核苷修饰。分析甲基转移酶HENMT1对miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化作用。[结果]敲低miR-106b-5p后,乳腺癌细胞的增值水平下降(P<0.05)。乳腺组织中miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化显著高于癌旁中的水平(P<0.05)。敲低HENMT1后,乳腺癌细胞MCF7中miR-106b-5p的3'-末端2'-O-甲基化水平下降(P<0.05)。敲低HENMT1后,miR-106b-5p的半衰期下降(P<0.05)。[结论]HENMT1能对miR-106b-5p进行3'-末端2'-O-甲基化修饰(65.32±16.40 vs 11.49±3.20)。3'-末端2'-O-甲基化能提升miR-106b-5p的半衰期(0.79±0.05 vs 0.98±0.07)并促进miR-106b-5p的促乳腺癌细胞增殖(1.70±0.08 vs 1.04±0.06)。 展开更多
关键词 miR-106b-5p 3'-末端2'-O-甲基化 乳腺癌 增殖 henmt1
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