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大肠杆菌E.coli HB101(pBR322)高密度培养过程质粒的稳定性 被引量：12
1
作者 喻国策 焦瑞身 +1 位作者 王骥程 王树青 《过程工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期185-188,共4页
通过正交实验考察了大肠杆菌E.coli HB101-pBR322)高密度培养过程中，不同培养条件对质粒的稳定性和β(内酰胺酶活力的影响. 结果表明，当温度在33(39oC、pH为6.4-7.2、DO为 40%-80%、 补料速率在5.4-10.8 g/h范围内变化，以及细胞密度... 通过正交实验考察了大肠杆菌E.coli HB101-pBR322)高密度培养过程中，不同培养条件对质粒的稳定性和β(内酰胺酶活力的影响. 结果表明，当温度在33(39oC、pH为6.4-7.2、DO为 40%-80%、 补料速率在5.4-10.8 g/h范围内变化，以及细胞密度达到27.3 g/L、比生长速率达到0.73 h-1时，质粒没有发生丢失现象，但在培养过程中β-内酰胺酶的活力降低. 展开更多
关键词 大肠杆菌E.coli hb101 (pBR322) 高密度培养 质粒稳定性 Β-内酰胺酶 基因工程菌 发酵
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大肠杆菌HB101感受态的热化学研究 被引量：13
2
作者 谢志雄 陈向东 +2 位作者 沈萍 刘义 屈松生 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2000年第2期153-156,共4页
利用LKB-2277生物活性检测系统,测定了在生理盐水中,采用氯化钙法建立大肠杆菌感受态过程中的代谢热输出.生理盐水中大肠杆菌及其感受态进行内源代谢的热化学方程满足:P=Kc+Adc/dP_0=K’c^0氯化钙处理后,K与P_0均增大,说明内源代谢活性... 利用LKB-2277生物活性检测系统,测定了在生理盐水中,采用氯化钙法建立大肠杆菌感受态过程中的代谢热输出.生理盐水中大肠杆菌及其感受态进行内源代谢的热化学方程满足:P=Kc+Adc/dP_0=K’c^0氯化钙处理后,K与P_0均增大,说明内源代谢活性增强,这与大肠杆菌感受态建立过程中一系列生理生化活性的调整是一致的,表明大肠杆菌感受态的建立很可能有其内在的调节机制,而不完全是人工诱导的. 展开更多
关键词 大肠杆菌 感受态 热化学 hb101 生理生化活性
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大肠杆菌HB101感受态细胞的显微观察与分析 被引量：3
3
作者 谢志雄 陈向东 +2 位作者 李文化 沈 萍 庞代文 《武汉大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期253-256,共4页
对数生长前期的大肠杆菌在生理盐水中用CaCl2可以直接诱导建立感受态并完成转化过程.利用H-8100透射电子显微镜观察用CaCl2直接在生理盐水中诱导建立感受态的大肠杆菌细胞,发现感受态细胞整体电子密度趋于均匀,但存在有电子密度较高颗粒... 对数生长前期的大肠杆菌在生理盐水中用CaCl2可以直接诱导建立感受态并完成转化过程.利用H-8100透射电子显微镜观察用CaCl2直接在生理盐水中诱导建立感受态的大肠杆菌细胞,发现感受态细胞整体电子密度趋于均匀,但存在有电子密度较高颗粒,表明大肠杆菌感受态建立过程中,细胞整体对电子通透性增强,可能存在涉及细胞膜通透性的复合物重新形成相关的胞内物质代谢及其在细胞内定位的受控改变,暗示大肠杆菌可能具有建立自然感受态的能力. 展开更多
关键词 大肠杆菌 hb101 感受态细胞 显微观察 透射电子显微镜 电子密度 电子通透性 膜通透性
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大肠杆菌HB101感受态细胞制备条件的优化 被引量：4
4
作者 冯建成 牛成 +1 位作者 邢旭 王超 《热带生物学报》 2010年第3期224-227,共4页
为探讨大肠杆菌HB101感受态细胞制备的最优条件,从菌种来源、感受态细胞的生长状态及其储存方式等3个方面进行了优化。结果表明:从-70℃冰箱中保存的菌种活化大肠杆菌HB101,当细胞的OD600值为0.3～0.4时制备感受态,4℃冰箱放置1d,-70℃... 为探讨大肠杆菌HB101感受态细胞制备的最优条件,从菌种来源、感受态细胞的生长状态及其储存方式等3个方面进行了优化。结果表明:从-70℃冰箱中保存的菌种活化大肠杆菌HB101,当细胞的OD600值为0.3～0.4时制备感受态,4℃冰箱放置1d,-70℃下放置1个月,均可获得较高的转化效率,每微克DNA最高可达1.18×107cfu。 展开更多
关键词 大肠杆菌hb101 感受态 制备 优化
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质粒对E.coli HB101生长影响的微量热研究
5
作者 刘义 王戈林 +2 位作者 赵儒铭 沈萍 屈松生 《云南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 1999年第S3期361-362,共2页
关键词 生长影响 微量热 嗜麦芽假单胞菌 hb101 生命科学学院 武汉大学 质粒 速率常数 环境科学 保存时间
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嗜盐古菌染色体DNA片段在大肠杆菌中的启动子功能(英文)
6
作者 刘义 黄玉屏 +3 位作者 高振霆 段珍红 沈萍 屈松生 《物理化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第9期800-804,共5页
以启动子探针质粒pKK232-8为载体,用微量量热法研究了源自盐生盐杆菌R1染色体的RM13DNA片段在大肠杆菌HB101中的真细菌启动子功能,该启动子RM13 DNA片段的大小为1000bp(碱基对),它能启动探针质粒pKK232-8上的氯霉素乙酰水解酶基因(即:... 以启动子探针质粒pKK232-8为载体,用微量量热法研究了源自盐生盐杆菌R1染色体的RM13DNA片段在大肠杆菌HB101中的真细菌启动子功能,该启动子RM13 DNA片段的大小为1000bp(碱基对),它能启动探针质粒pKK232-8上的氯霉素乙酰水解酶基因(即:氯霉素抗性基因Cm),氯霉素抗性水平可达到150 mg·L^(-1),抗性水平较高,启动活性较大.研究结果表明,在盐生盐杆菌染色体上可能存在具有双功能或多功能的启动子DNA片段,这对系统发育、微生物遗传学和生物热化学等均有重要的意义. 展开更多
关键词 嗜盐古菌染色体 DNA片段 大肠杆菌 启动子功能 盐生盐杆菌 Rl染色体 质粒pKK232-8 微量量热法 微生物遗传学 物热化学
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利用微生物直接生产羟基丁酸单体
7
作者 李冬梅 林文雄 《广州化学》 CAS 2007年第4期39-43,共5页
利用重组大肠杆菌E.coli HB101来进行直接生产羟基丁酸(HB)手性单体,研究了含pUCAB质粒的重组体E.coli HB101在各种条件下生长及积累HB单体的情况,研究了HB单体的积累随pH值变化的规律。结果表明,pH=6.8时,48 h内细菌可生产0.5 g/L以上... 利用重组大肠杆菌E.coli HB101来进行直接生产羟基丁酸(HB)手性单体,研究了含pUCAB质粒的重组体E.coli HB101在各种条件下生长及积累HB单体的情况,研究了HB单体的积累随pH值变化的规律。结果表明,pH=6.8时,48 h内细菌可生产0.5 g/L以上的HB单体。 展开更多
关键词 重组 大肠杆菌E.coli hb101 聚羟基脂肪酸酯 手性化合物 羟基丁酸
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草生欧文氏菌(E.herbicola)CSH1065质粒的重组标记及Fib基因的遗传转移
8
作者 赵扬 P.Tenning 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 1992年第1期76-85,共10页
利用DNA分子克隆技术及遗传重组方法,在E.herbicola CSH1065质粒上插入了Km_R及Mob基因,利用细菌间的接合转移,使E.herbicola CSH1065质粒转移到E.coli HB101中,从而获得了E.herbicola CSH1065的Fib(fungi inhibition)基因在E.coli HB10... 利用DNA分子克隆技术及遗传重组方法,在E.herbicola CSH1065质粒上插入了Km_R及Mob基因,利用细菌间的接合转移,使E.herbicola CSH1065质粒转移到E.coli HB101中,从而获得了E.herbicola CSH1065的Fib(fungi inhibition)基因在E.coli HB101中的表达,进一步证明E.herbicola CSH1065 Fib基因功能只涉及其细胞内的大质粒,与其染色体基因组无关,其黄色色素基因与Fib功能无关。这些结果还为DNA分子杂交方法所证实。 展开更多
关键词 草生欧文氏菌 质粒 遗传转移
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