期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
降低mRNA翻译起始区的稳定性原核非融合表达HAb18GEF 被引量：9
1
作者 张思河 邢金良 +1 位作者 姚西英 陈志南 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期175-180,共6页
为在大肠杆菌中非融合表达肝癌相关抗原HAb18G胞外区片段 (HAb18GEF) ,将HAb18GEF基因的cDNA插入原核表达载体pET2 1a +。通过计算机辅助设计 ,对重组的HAb18GEF pET2 1a +的mRNA翻译起始区 (TIR)的二级结构和密码子偏性同时进行预测。... 为在大肠杆菌中非融合表达肝癌相关抗原HAb18G胞外区片段 (HAb18GEF) ,将HAb18GEF基因的cDNA插入原核表达载体pET2 1a +。通过计算机辅助设计 ,对重组的HAb18GEF pET2 1a +的mRNA翻译起始区 (TIR)的二级结构和密码子偏性同时进行预测。结果发现其存在稳定的茎环结构和许多稀有密码子。通过优化二级结构和优化密码子偏性二种策略分别来降低HAb18GEF pET2 1a +的mRNA翻译起始区 (TIR)的稳定性。在不改变氨基酸序列的前提下 ,利用密码子的简并性 ,通过非连续定点突变实现这两种优化。将突变前后的重组子经酶切鉴定和测序验证后 ,转化感受态JM10 9 DE3宿主菌后 ,随机挑菌 3 7℃下用IPTG诱导表达。SDS PAGE、间接ELISA、Westernblot和细胞分级分离法分析这些重组子的诱导表达情况。RNAdotblot对比分析优化前后目的基因mRNA的量。结果证明 ,成功地构建了HAb18GEF pET2 1a +及其二种优化突变体。仅优化TIR区二级结构或仅优化TIR区密码子偏性均能实现HAb18GEF蛋白的非融合表达 ,而未优化的重组子不表达任何HAb18GEF。非融合表达产物在大肠杆菌中主要以包涵体形式存在 ,高达 2 9 3 %。由于过表达和细胞渗漏 ,培养基和周质腔中也可检测到少许的HAb18GEF。优化二级结构和优化密码子偏性二种策略的HAb18GEF的非融合? 展开更多
关键词 MRNA 翻译起始区 非融合表达 habl8g胞外区 二级结构 密码子偏性 肝癌 粘附分子
在线阅读 下载PDF
稳定表达肝癌相关抗原HAb18G/CD147成纤维细胞株的建立及其意义 被引量：2
2
作者 黄勇 蒋建利 +3 位作者 周筠 姚西英 窦科峰 陈志南 《第四军医大学学报》 北大核心 2004年第8期673-676,共4页
目的 :探讨将HAb1 8G全长cDNA转染成纤维细胞NIH/ 3T3的可行性及其意义 .方法 :将含有肝癌相关抗原HAb1 8G全长cDNA的真核表达载体 pcDNA3.0 /HAb1 8G利用脂质体介导法转染小鼠成纤维细胞NIH/ 3T3,G4 1 8筛选建立稳定表达阳性克隆细胞株... 目的 :探讨将HAb1 8G全长cDNA转染成纤维细胞NIH/ 3T3的可行性及其意义 .方法 :将含有肝癌相关抗原HAb1 8G全长cDNA的真核表达载体 pcDNA3.0 /HAb1 8G利用脂质体介导法转染小鼠成纤维细胞NIH/ 3T3,G4 1 8筛选建立稳定表达阳性克隆细胞株t3T3;利用流式细胞仪、间接免疫荧光染色方法鉴定目的蛋白转染情况 ;RT PCR琼脂糖电泳、明胶酶谱分别从mRNA和蛋白水平检测转染前后HAb1 8G刺激 3T3细胞分泌基质金属蛋白酶 (MMP 2、MMP 9)的情况 .结果 :利用脂质体介导法将HAb1 8G全长cDNA转染入成纤维细胞NIH/ 3T3,G4 1 8筛选 ,流式细胞仪分析、间接免疫荧光染色证实成功建立了稳定表达HAb1 8G的阳性克隆株 ;RT PCR琼脂糖电泳证实t3T3细胞MMP 2、MMP 9mRNA转录水平较未转染前增多 ;明胶酶谱表明t3T3分泌MMPs能力较未转染前增强 .结论 :HAb1 8G全长cDNA可以稳定转染成纤维细胞 ,并能从核酸和蛋白水平诱导基质金属蛋白酶高表达 。 展开更多
关键词 转染 抗原 肿瘤 habl8g 成纤维细胞 金属蛋白酶类
暂未订购
HAb18G/CD147拮抗肽对荷瘤裸鼠的实验性治疗作用 被引量：1
3
作者 商澎 骞爱荣 +4 位作者 李郁 黄宝成 梅其炳 朱平 陈志南 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期279-282,共4页
目的　研究肝癌转移相关因子HAb18G /CD14 7的合成拮抗肽 (APs)对荷人肝癌裸鼠的实验性治疗作用。方法　采用皮下接种人肝癌细胞系HHCC和肝脏原位接种人高转移肝癌细胞系MHCC97 H形成瘤块的BALB /C裸鼠模型 ,静脉给予APs :2 .5mg /kg ,... 目的　研究肝癌转移相关因子HAb18G /CD14 7的合成拮抗肽 (APs)对荷人肝癌裸鼠的实验性治疗作用。方法　采用皮下接种人肝癌细胞系HHCC和肝脏原位接种人高转移肝癌细胞系MHCC97 H形成瘤块的BALB /C裸鼠模型 ,静脉给予APs :2 .5mg /kg ,皮下组 :隔日 1次 ,共 12次 ;原位组 :每日 1次 ,共 15次。皮下组 :观察接种HHCC细胞后皮下肿瘤生长情况 ,从d 10开始 ,每 4d测定 1次肿瘤体积 ;观察 15 0d裸鼠生存情况。原位组 :接种MHCC97 H后 ,d 2 1杀裸鼠 ,观察肝脏各叶肿瘤播散情况 ,计数灶数 ;观察肺脏和腹腔淋巴结转移情况 ;肝脏、肺脏和淋巴结结合病理学切片检查。结果　皮下荷HHCC实验 :在d 30AP I治疗组瘤体积 2 15 .0± 2 5 9.5mm3 ,对照组 4 71.4± 187.5mm3 ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。AP 1和AP 6治疗组与对照组比较 ,15 0d生命延长率分别为 4 9.8% (P <0 .0 1)和 4 3.7% (P <0 .0 5 )。肝脏原位荷MHCC97 H实验 :AP 1和AP 6治疗组 ,肝内播散灶数少于对照组 ;肺脏、淋巴结转移也少于对照组。结论　HAb18G /CD14 7拮抗多肽AP 1和AP 6对裸鼠皮下和肝脏原位接种人肝癌的生长抑制和延长生命有明显的作用。 展开更多
关键词 肝癌 肿瘤转移 habl8g/CDl47 拮抗肽
暂未订购
抗人HAb18G分子单链抗体基因的构建及在大肠杆菌中的分泌表达
4
作者 邢金良 杨向民 +2 位作者 王永庆 姚西英 陈志南 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期479-482,共4页
目的 :构建抗人HAb18G分子单链抗体基因 ,并在大肠杆菌中进行分泌表达。方法 :通过连接肽 (Gly4Ser) 3基因序列将已成功克隆的抗人肝癌单抗HAb18轻、重链可变区基因拼接成单链抗体 (ScFv)基因 ,并在 5′和 3′端引入相应的酶切位点 ,克... 目的 :构建抗人HAb18G分子单链抗体基因 ,并在大肠杆菌中进行分泌表达。方法 :通过连接肽 (Gly4Ser) 3基因序列将已成功克隆的抗人肝癌单抗HAb18轻、重链可变区基因拼接成单链抗体 (ScFv)基因 ,并在 5′和 3′端引入相应的酶切位点 ,克隆至改造的分泌性表达载体pCANTAB 5His之中 ,转化到E coliHB2 15 1中进行诱导表达。亲和层析纯化表达蛋白后 ,以SDS PAGE电泳、Westernblot及ELISA等方法分析检测表达产物。结果 :经限制性酶切鉴定及DNA测序分析 ,证实基因构建正确。SDS PAGE电泳和Westernblot分析表明ScFv基因在大肠杆菌中成功表达。表达产物的相对分子质量 (Mr)为 31kD ,与理论预期值相符 ,并且可与相应的抗原特异结合。结论 :成功实现了抗人HAb18G分子单链抗体的原核分泌表达 ,为其在人肝癌诊治中的进一步应用奠定了基础。 展开更多
关键词 抗人habl8g分子 单链抗体 基因 大肠杆菌 分泌表达
在线阅读 下载PDF
HAb18G/CD147拮抗肽的筛选及对肝癌细胞侵袭力的抑制 被引量：13
5
作者 黄宝成 商澎 +3 位作者 骞爱荣 王贤辉 施光华 陈志南 《中华肿瘤杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期111-114,共4页
目的　筛选能与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,从中寻找该因子的肽类拮抗剂 ,抑制肝癌的恶性转移。方法　利用亲和层析法获得HAb18G/CD14 7抗原 ,在此基础上通过筛选噬菌体 12肽库得到与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,以固相法合成这些多肽... 目的　筛选能与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,从中寻找该因子的肽类拮抗剂 ,抑制肝癌的恶性转移。方法　利用亲和层析法获得HAb18G/CD14 7抗原 ,在此基础上通过筛选噬菌体 12肽库得到与HAb18G/CD14 7相结合的多肽 ,以固相法合成这些多肽并用质谱仪进行鉴定。最后利用侵袭力抑制实验从中筛选拮抗肝癌细胞转移的功能多肽。结果　经纯化的HAb18G/CD14 7分子量为6 5 0 0 0 ,Westernblot验证结果阳性。用此纯化分子筛选噬菌体肽库 ,得到 9条多肽。经体外功能验证 ,9条肽抑制肝癌细胞侵袭力的活性不一 ,其中 3条有显著活性 (P <0 .0 1) ,活性最好的一条肽能使穿过Boyden小室膜的肝癌细胞数量较对照减少 90 .1%。结论　以亲和层析法和噬菌体随机肽库法相结合 ,筛选获得了有抗肝癌细胞侵袭力功能的多肽 ,此结果为抗肝癌转移肽类药物的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 肝癌 肿瘤转移 抑制 habl8g/CD147拮抗肽 亲和层析法 噬菌体随机肽库法
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部