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白芍总苷通过调控JAK/STAT3/BCL-XL信号通路对HaCaT细胞增殖的影响 被引量:1
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作者 张莉 孙淑娜 +5 位作者 刘桂英 薛玉增 王兴臣 邹永新 睢勇 曹怀宁 《陕西中医》 CAS 2025年第1期3-7,共5页
目的:探讨白芍总苷(TGP)对白介素22(IL-22)诱导的HaCaT银屑病细胞模型的抗凋亡作用,探索其在银屑病治疗中的机制,为银屑病的临床研究用药提供理论依据。方法:IL-22刺激HaCaT细胞,检测细胞活性,筛选IL-22干预的最佳剂量和最佳作用时间,... 目的:探讨白芍总苷(TGP)对白介素22(IL-22)诱导的HaCaT银屑病细胞模型的抗凋亡作用,探索其在银屑病治疗中的机制,为银屑病的临床研究用药提供理论依据。方法:IL-22刺激HaCaT细胞,检测细胞活性,筛选IL-22干预的最佳剂量和最佳作用时间,构建银屑病细胞模型。用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(WB)测定银屑病细胞模型中的抗凋亡分子的表达。TGP处理银屑病细胞模型后,用MTT检测细胞的活性。免疫荧光染色测定银屑病细胞模型中STAT3的定位。抑制STAT3的表达后,用RT-PCR和WB检测下游抗凋亡分子BCL-XL的表达。实验采用随机分组,通过GraphPad-Prism 6软件对数据进行处理,结果差异进行t检验。结果:MTT实验发现,IL-22处理HaCaT细胞的最佳剂量和时间分别为12.5 mmol/L,48 h。银屑病细胞模型中,抗凋亡相关通路JAK/STAT3/BCL-XL的表达显著增加。通过TGP处理后,细胞活性明显下降,同时细胞核内STAT3明显减少。抑制STAT3表达后,银屑病细胞模型活性指标显著降低,尤其是STAT3下游的分子BCL-XL的表达下降。结论:TGP基于调节抗凋亡通路JAK/STAT3/BCL-XL的表达,降低IL-22诱导的银屑病细胞模型的活性。 展开更多
关键词 银屑病 白芍总苷 hacat细胞 抗凋亡 STAT3 BCL-XL
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紫草素抑制EGF对HaCaT细胞促增殖作用的影响
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作者 陈微 曹毅 杨晓红 《浙江临床医学》 2025年第9期1268-1270,共3页
目的探究紫草素对表皮生长因子(EGF)诱导的HaCaT细胞增殖的影响及其作用机制。方法在紫草素和EGF作用于HaCaT细胞后,通过倒置显微镜、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术检测紫草素对外源性EGF刺激下的角质形成细胞增殖及凋亡;采用蛋白... 目的探究紫草素对表皮生长因子(EGF)诱导的HaCaT细胞增殖的影响及其作用机制。方法在紫草素和EGF作用于HaCaT细胞后,通过倒置显微镜、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、流式细胞术检测紫草素对外源性EGF刺激下的角质形成细胞增殖及凋亡;采用蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测Notch1、Jagged1、Hes5、Bax、Bcl-2和Icad蛋白的表达水平。结果紫草素与EGF联合干预后,HaCaT细胞增殖受到明显抑制,凋亡明显增加(P<0.05)。蛋白质免疫印迹结果显示,与对照组相比,EGF组Notch1、Jagged1、Hes5、Bcl-2和Icad蛋白表达增加,紫草素组和联合干预组表达减少,紫草素组减少更明显(P<0.05)。Bax蛋白表达情况则相反。结论紫草素能够抑制EGF诱导的HaCaT细胞增殖并诱导细胞凋亡,Notch1信号通路在这一过程中发挥关键作用。 展开更多
关键词 紫草素 表皮细胞生长因子 hacat细胞 Notch-1信号通路 增殖 凋亡
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S100A4在HaCat细胞中的调控机制研究
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作者 李响 王慧琴 +1 位作者 丁媛 吴卫东 《临床皮肤科杂志》 北大核心 2025年第9期534-537,共4页
钙结合蛋白S100A(calcium binding protein S100A,S100A)4是经RNA互作组技术发现的一种新型RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)[1],能够识别特定RNA结合域并与RNA相互作用,在转录后基因表达调控中起着重要作用[2]。先前的研究发现,... 钙结合蛋白S100A(calcium binding protein S100A,S100A)4是经RNA互作组技术发现的一种新型RNA结合蛋白(RNA-binding proteins,RBPs)[1],能够识别特定RNA结合域并与RNA相互作用,在转录后基因表达调控中起着重要作用[2]。先前的研究发现,S100A4不仅在银屑病患者皮肤的真皮组织中表达上调,而且能通过影响表皮细胞增殖和真皮血管增生参与银屑病的发生发展,然而其中潜在的调控机制尚不清楚[3]。 展开更多
关键词 S100A4 hacat细胞 RNA结合蛋白 银屑病 基因表达
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沉香提取物通过调控NF-κB通路改善HaCaT细胞银屑病样炎症
4
作者 黄薇薇 张琪 +5 位作者 赵斌斌 李文宇 郭婷 温斯健 曹存巍 林有坤 《广西医科大学学报》 2025年第2期247-254,共8页
目的:探讨沉香提取物(AE)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的角质形成细胞(HaCaT)银屑病样炎症模型的影响及作用机制。方法:使用40 ng/mL的TNF-α诱导HaCaT细胞银屑病样炎症模型,后分别用16μg/mL(低浓度)、24μg/mL(中浓度)、32μg/mL(... 目的:探讨沉香提取物(AE)对肿瘤坏死因子-α(TNF-α)诱导的角质形成细胞(HaCaT)银屑病样炎症模型的影响及作用机制。方法:使用40 ng/mL的TNF-α诱导HaCaT细胞银屑病样炎症模型,后分别用16μg/mL(低浓度)、24μg/mL(中浓度)、32μg/mL(高浓度)AE干预。应用细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测HaCaT细胞活力,流式细胞术检测HaCaT细胞凋亡,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)、酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测多种炎症介质、κB抑制蛋白α(IκBα)mRNA表达和分泌,蛋白质印迹(western blotting)实验检测NF-κB通路关键蛋白表达。结果:40 ng/mL TNF-α刺激后HaCaT细胞活力升高(P<0.01),早期细胞凋亡率和IκBαmRNA水平下降(P<0.05),白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-17A(IL-17A)、TNF-α、趋化因子配体20(CCL20)mRNA水平和含量升高(P<0.05),磷酸化核因子-κB p65(p-p65)蛋白水平升高(P<0.01)。一定浓度AE干预后HaCaT细胞活力下降(P<0.01);低、中、高浓度AE可升高TNF-α预处理的HaCaT早期细胞凋亡率和IκBαmRNA水平(P<0.01),降低IL-6、IL-1β、IL-17A、TNF-α、CCL20 mRNA表达和含量(P<0.05)及p-p65蛋白水平(P<0.01)。结论:AE可通过抑制NF-κB通路中p65蛋白磷酸化以降低HaCaT细胞银屑病样炎症模型中炎症因子和趋化因子释放,诱导细胞凋亡,改善炎症反应。 展开更多
关键词 沉香提取物 银屑病 hacat细胞 NF-ΚB信号通路 炎症因子 凋亡
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基于AhR/NLRP3信号通路探究靛蓝对脂多糖诱导的HaCaT细胞的影响
5
作者 雷海青 林钰 +5 位作者 徐木晨 郑继源 黄伟乐 杨丽红 韩凌 刘靖 《广州中医药大学学报》 2025年第11期2831-2839,共9页
【目的】探讨靛蓝对脂多糖(LPS)诱导的角质形成细胞(HaCaT)炎症因子及芳香烃受体(AhR)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路的影响。【方法】建立LPS诱导的HaCaT细胞模型,设置实验分组:空白组、模型组、靛蓝组、AhR激动剂[2,... 【目的】探讨靛蓝对脂多糖(LPS)诱导的角质形成细胞(HaCaT)炎症因子及芳香烃受体(AhR)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)信号通路的影响。【方法】建立LPS诱导的HaCaT细胞模型,设置实验分组:空白组、模型组、靛蓝组、AhR激动剂[2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)]组、AhR抑制剂(CH-223191)组、靛蓝+AhR抑制剂组。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测不同浓度靛蓝、TCDD、CH-223191干预24 h对HaCaT细胞活性的影响。通过实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测各组细胞中白细胞介素1β(IL-1β)、核因子κB(NF-κB)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、AhR、细胞色素P450家族1亚家族A成员1(CYP1A1)、NLRP3、半胱天冬酶1(Caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的mRNA表达水平。采用蛋白质免疫印迹(Western Blot)法分析AhR蛋白表达的细胞定位变化。【结果】(1)靛蓝干预HaCaT细胞的半抑制浓度(IC50)为118.7μmol·L^(-1)。不同浓度的CH-223191及TCDD处理24 h对HaCaT细胞活力无明显影响。(2)与模型组比较,靛蓝组IL-1β、NF-κB、NLRP3及Caspase-1的mRNA表达水平下降(P<0.05或P<0.0001),而AhR、CYP1A1的mRNA表达水平显著升高(P<0.05或P<0.0001)。(3)与空白组比较,靛蓝组细胞质内AhR蛋白表达水平下降,细胞核内AhR蛋白表达水平升高(P<0.001或P<0.0001)。(4)与模型组比较,靛蓝组和AhR激动剂组AhR的mRNA表达水平显著上升(P<0.05),AhR抑制剂组的AhR、CYP1A1的mRNA表达水平下降(P<0.05),而IL-1β、NLRP3的mRNA表达水平上升(P<0.05)。(5)与AhR抑制剂组比较,靛蓝+AhR抑制剂组中AhR、CYP1A1的mRNA表达水平上升(P<0.05),NLRP3、Caspase-1、IL-1β的mRNA表达水平下降(P<0.05)。【结论】靛蓝可降低LPS诱导的HaCaT细胞炎症因子,且通过激活AhR负调控炎症小体NLRP3参与抑制银屑病的发生发展。 展开更多
关键词 靛蓝 银屑病 AHR NLRP3 炎症 hacat细胞
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健脾解毒汤对TNF-α诱导的HaCaT细胞氧化应激和炎症因子的影响
6
作者 许孟月 刘学伟 +2 位作者 姚文汇 左永杰 刘红霞 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第8期1428-1433,共6页
目的 探讨健脾解毒汤对肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α诱导的人永生化角质形成细胞(human immortalized keratinocytes, HaCaT)模型氧化应激和炎症的影响。方法 采用TNF-α诱导HaCaT细胞建立模型。设空白对照组、模型组... 目的 探讨健脾解毒汤对肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor, TNF)-α诱导的人永生化角质形成细胞(human immortalized keratinocytes, HaCaT)模型氧化应激和炎症的影响。方法 采用TNF-α诱导HaCaT细胞建立模型。设空白对照组、模型组、甲氨蝶呤组、健脾解毒汤低、中、高剂量组、模型+ZnPP组、健脾解毒汤高剂量+ZnPP组。检测活性氧(reactive oxygen species, ROS)、白介素(interleukin, IL)-17A、丙二醛(malondialdehyde, MDA)、谷胱甘肽(glutathione, GSH)的含量及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活力,Western blot检测血红素氧合酶1(Heme oxygenase-1, HO-1)蛋白表达。结果 根据不同浓度健脾解毒汤对TNF-α诱导的HaCaT细胞增殖率及IL-17A含量的影响,选择80,60,40μg/mL为高、中、低剂量。模型组与空白对照组相比,ROS、MDA、IL-17A显著升高,HO-1蛋白表达、SOD活力、GSH含量显著降低(P<0.05)。健脾解毒汤中、高剂量组和甲氨蝶呤组可降低ROS、MDA、IL-17A水平,增加SOD活力、GSH含量,提高HO-1表达(P<0.05);健脾解毒汤低剂量组在IL-17A、SOD活力上无显著变化(P>0.05)。HO-1抑制剂ZnPP削弱健脾解毒汤对氧化应激及炎症的作用(P<0.05)。结论 健脾解毒汤可能通过提高TNF-α诱导HaCaT细胞中HO-1蛋白表达水平而发挥抗氧化应激、抗炎的作用,为其治疗银屑病的作用机制之一。 展开更多
关键词 健脾解毒汤 银屑病 hacat细胞 氧化应激 炎症 HO-1蛋白 IL-17A 活性氧
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骆驼刺种子多糖提取工艺优化及其对丙酮醛诱导HaCaT细胞损伤的保护作用与机制研究
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作者 陈权星 梅漫雪 +3 位作者 朱伟 舒鹏 李名洁 宋健平 《中药新药与临床药理》 北大核心 2025年第3期453-462,共10页
目的优化骆驼刺种子多糖(ACSP)的提取工艺及探讨ACSP对丙酮醛(MGO)诱导HaCaT细胞损伤的保护作用及机制。方法考察不同提取温度、提取时间、提取次数、液料比因素对ACSP提取量的影响,并在此基础上采用响应面试验法优化ACSP的提取条件,筛... 目的优化骆驼刺种子多糖(ACSP)的提取工艺及探讨ACSP对丙酮醛(MGO)诱导HaCaT细胞损伤的保护作用及机制。方法考察不同提取温度、提取时间、提取次数、液料比因素对ACSP提取量的影响,并在此基础上采用响应面试验法优化ACSP的提取条件,筛选出ACSP的最佳提取条件。采用MGO复制HaCaT细胞损伤模型,观察ACSP对HaCaT细胞损伤模型的细胞存活率、氧化相关指标[超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)]及p53、p21、SOD、CAT、磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)mRNA表达水平和p21、p53、p-p53蛋白表达的影响,探讨ACSP对MGO诱发HaCaT细胞损伤的保护效果及作用机制。结果当提取温度为90℃、提取时间为120 min、提取次数为3次、液料比为25∶1(mL∶g)时,ACSP提取量最高,为43.25 mg·g^(-1)。细胞实验显示,ACSP能够增加MGO诱导HaCaT细胞的细胞存活率、GSH含量及SOD、CAT的酶活力(P<0.05,P<0.01),上调SOD、CAT mRNA表达(P<0.05,P<0.01);降低MDA酶活力(P<0.05),下调p53、p21、PI3K、Akt、mTOR mRNA表达和p-p53/p53、p21蛋白表达(P<0.05,P<0.01)。结论该研究开发了一种简便高效的ACSP提取工艺,该工艺得到的ACSP有抗氧化作用,能够改善MGO诱导的HaCaT细胞损伤,其作用机制与调控p53/p21信号通路有关。 展开更多
关键词 骆驼刺种子多糖 提取工艺 丙酮醛 hacat细胞 抗氧化 p53/p21信号通路
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Bach1在HaCaT细胞中对抗氧化应激的调控作用
8
作者 邹荟 陈教全 +6 位作者 欧珊珊 林天一 陈紫嫣 李华平 李润祥 彭丽倩 朱慧兰 《皮肤性病诊疗学杂志》 2025年第2期77-84,共8页
目的探讨调控转录因子BTB-CNC同源体1(Bach1)对下游相关抗氧化靶基因的调控机制及其防护氧化应激损伤的作用。方法构建Bach1敲低的shRNA以及Bach1过表达克隆,通过慢病毒包装构建人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)整合株分别得到Bach1敲低... 目的探讨调控转录因子BTB-CNC同源体1(Bach1)对下游相关抗氧化靶基因的调控机制及其防护氧化应激损伤的作用。方法构建Bach1敲低的shRNA以及Bach1过表达克隆,通过慢病毒包装构建人永生化角质形成细胞(HaCaT细胞)整合株分别得到Bach1敲低组(Bach1-shRNA)、Bach1过表达组(Bach1-OE),同时分别用敲低和过表达对应的慢病毒空质粒和包装质粒整合收集后感染HaCat细胞得到敲低对照组(KD-control)、过表达对照组(OE-control)。采用RT-qPCR以及Western blot验证Bach1的敲低及过表达效率,并分析下游相关抗氧化靶基因血红素氧合酶1(HO-1)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)和超氧化物歧化酶(SOD)的表达差异。设置H_(2)O_(2)浓度梯度构建HaCaT细胞氧化应激损伤模型,采用CCK8检测各组细胞活性,予H_(2)O_(2)、UVB处理各整合株细胞后采用流式细胞仪检测各组细胞中的活性氧(ROS)水平。结果与对照组KD-control比较,Bach1-shRNA组的Bach1 mRNA及蛋白的表达水平均下降(均P<0.01);与对照组OE-control比较,Bach1-OE组的Bach1 mRNA及蛋白水平均升高(均P<0.01)。与对照组KD-control比较,Bach1-shRNA组的HO-1 mRNA表达水平升高(t=7.66,P<0.01),而CAT、GPX、SOD mRNA的表达水平下降(均P<0.01)。CCK8检测显示,野生型HaCaT细胞经0~250μM H_(2)O_(2)处理后细胞活性无明显变化,而经300μM H_(2)O_(2)处理后细胞活性下降(P<0.001)。予250μM H_(2)O_(2)或300 mJ/cm 2 UVB处理HaCaT整合株细胞后,Bach1-shRNA组相较于KD-control组的ROS水平均明显上升(H_(2)O_(2):t=40.12;UVB:t=52.41,均P<0.001),而Bach1-OE组相较于OE-control组的ROS水平均明显下降(H_(2)O_(2):t=4.85;UVB:t=59.49,均P<0.01)。结论下调转录因子Bach1表达可加剧HaCaT细胞氧化应激,而Bach1过表达可正向调控HaCaT抗氧化应激。 展开更多
关键词 Bach1 氧化应激 hacat细胞 活性氧
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紫外线辐照对HaCaT细胞JAK-STAT信号通路和炎症相关因子的影响
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作者 喻晶 张宜 +2 位作者 朱以良 陈芳 刘琴 《西部医学》 2025年第3期338-342,共5页
目的探讨紫外线辐照对人永生化表皮细胞(HaCaT)中酪氨酸激酶(JAK)-信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路和炎症因子白细胞介素23(IL-23)、纤维连接蛋白1(FN1)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的影响。方法实验分为正常对照组(0 mj/cm 2)和3... 目的探讨紫外线辐照对人永生化表皮细胞(HaCaT)中酪氨酸激酶(JAK)-信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路和炎症因子白细胞介素23(IL-23)、纤维连接蛋白1(FN1)和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)的影响。方法实验分为正常对照组(0 mj/cm 2)和3个不同剂量辐照组,辐照组分别采用紫外线(30、60、90 mj/cm 2)辐照HaCaT细胞,照射后24 h,通过光镜观察细胞形态的变化;采用酶联免疫吸附试验(Elisa)检测IL-23、FN1和MCP-1的含量;实时荧光定量PCR检测IL-23 mRNA、FN1 mRNA和MCP-1 mRNA的表达水平;蛋白免疫印迹实验(Western-blot)检测TYK2、p-STAT4和p-STAT6的表达情况。结果与正常对照组相比,HaCaT细胞经不同剂量紫外线照射24 h后,IL-23、FN1和MCP-1的含量均增加(P<0.05),且与辐照剂量呈剂量依赖性;IL-23 mRNA、FN1 mRNA和MCP-1 mRNA表达水平均升高(P<0.05),且与辐照剂量呈剂量依赖性;TYK2、p-STAT4和p-STAT6蛋白表达均升高(P<0.05),且上调程度与照射剂量呈剂量依赖性。结论JAK-STAT信号通路及炎症因子IL-23、FN1、MCP-1参与紫外线照射HaCaT细胞损伤的调控。 展开更多
关键词 紫外线 hacat JAK-STAT信号通路 IL-23 FN1 MCP-1
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转录因子YAP1在X线诱导的HaCaT细胞损伤中的作用和作用机制
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作者 黄腾 于大海 +1 位作者 王万霞 鹿红 《生物加工过程》 2025年第2期207-211,共5页
放射性皮肤损伤是放射治疗过程中常见的并发症。利用人永生化表皮细胞(HaCaT),采用X线体外照射,构建放射性皮肤损伤细胞模型,并采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,5乙炔基2’脱氧尿苷(EDU)增殖实验和单克隆实验证实:X线能够抑制HaCaT细胞... 放射性皮肤损伤是放射治疗过程中常见的并发症。利用人永生化表皮细胞(HaCaT),采用X线体外照射,构建放射性皮肤损伤细胞模型,并采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法,5乙炔基2’脱氧尿苷(EDU)增殖实验和单克隆实验证实:X线能够抑制HaCaT细胞的活性和增殖能力。通过2’,7’二氯荧光素二乙酸酯(DCFH DA)和二氢乙锭(DHE)探针检测X线对细胞内活性氧(ROS)水平的影响,并通过定量聚合酶链反应(qPCR),Western blotting和免疫荧光实验探讨X线抑制细胞增殖的机制。结果显示:X线能够抑制HaCaT细胞活力和增殖能力,诱导细胞内ROS的增加,下调细胞周期蛋白D1(CyclinD1)和细胞周期蛋白E1(CyclinE1)的表达。进一步的机制研究显示:X线能够抑制转录因子Yes相关蛋白1(YAP1)的表达和核转位,可能是导致细胞增殖能力降低的重要原因。本研究揭示了X线造成HaCaT细胞损伤的分子机制,为预防和治疗放射性皮肤损伤提供了分子靶点。 展开更多
关键词 放射损伤 hacat细胞 YAP1 细胞增殖 氧化应激
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槟榔碱诱导HaCaT细胞P16基因甲基化的浓度依赖性调控机制
11
作者 肖新宇 李希冲 许乐 《继续医学教育》 2025年第10期137-142,共6页
目的探讨槟榔碱对人永生化角质形成细胞Ha-CaT中P16基因启动子区甲基化的浓度依赖性调控作用。方法采用不同浓度槟榔碱(0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL)处理HaCaT细胞24小时,通过甲基化特异性PCR和亚硫酸氢钠测序检测P16基因... 目的探讨槟榔碱对人永生化角质形成细胞Ha-CaT中P16基因启动子区甲基化的浓度依赖性调控作用。方法采用不同浓度槟榔碱(0μg/mL、50μg/mL、100μg/mL、200μg/mL)处理HaCaT细胞24小时,通过甲基化特异性PCR和亚硫酸氢钠测序检测P16基因甲基化水平,Westernblotting检测DNA甲基转移酶表达,实时荧光定量PCR检测P16mRNA表达,流式细胞术分析细胞周期。结果槟榔碱处理组P16基因甲基化率呈浓度依赖性升高,200μg/mL组甲基化率(68.5±5.2)%高于对照组(12.3±2.1)%。亚硫酸氢钠测序显示,200μg/mL组CpG位点平均甲基化率为(71.3±6.1)%,显著高于对照组的(15.8±3.2)%。DNMT1蛋白表达为对照组的(2.8±0.3)倍,DNMT3b为(2.2±0.2)倍。P16 mRNA表达降至对照组的(21.0±4.0)%。G1期细胞比例从(58.3±3.2)%降至(42.1±2.8)%,S期细胞比例升高与细胞增殖率增加呈显著正相关(r=0.876,P<0.01)。5-Aza-dC预处理可部分逆转上述改变。结论槟榔碱通过上调DNMT1和DNMT3b表达,诱导P16基因高甲基化和转录沉默,破坏细胞周期调控,可能参与口腔黏膜恶性转化。 展开更多
关键词 槟榔碱 DNA甲基化 P16基因 DNA甲基转移酶 hacat细胞 细胞周期
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玫瑰中药复方对紫外线诱导HaCaT细胞损伤的修复作用
12
作者 沈秋雨 杨珏 +4 位作者 李莉 李兴美 李晓飞 杨恩虎 周旭红 《中南药学》 2025年第2期377-384,共8页
目的研究玫瑰中药复方对紫外线(UV)诱导HaCaT细胞损伤的修复作用。方法用UV诱导HaCaT细胞损伤模型;采用CCK8法检测玫瑰中药复方对HaCaT正常细胞和损伤细胞的影响;DPPH法和ABTS+法检测玫瑰中药复方的自由基清除能力;β-半乳糖苷酶染色法... 目的研究玫瑰中药复方对紫外线(UV)诱导HaCaT细胞损伤的修复作用。方法用UV诱导HaCaT细胞损伤模型;采用CCK8法检测玫瑰中药复方对HaCaT正常细胞和损伤细胞的影响;DPPH法和ABTS+法检测玫瑰中药复方的自由基清除能力;β-半乳糖苷酶染色法检测玫瑰中药复方对UV诱导HaCaT细胞损伤的保护作用;流式细胞术检测玫瑰中药复方对细胞凋亡的影响;采用试剂盒检测细胞内丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)含量和超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)活性;采用试剂盒检测玫瑰中药复方处理后细胞内活性氧(ROS)的水平变化;RT-qPCR检测细胞中p16和p21基因的表达水平。结果结果显示玫瑰中药复方具有体外抗氧化能力,同时对UV诱导的HaCaT损伤细胞具有抑制细胞凋亡和促增殖的作用,并通过增强抗氧化酶(CAT、SOD、GPx)活性来降低细胞内ROS水平,降低氧化产物MDA水平,增强损伤细胞ABTS+和DPPH自由基清除能力,以及显著降低损伤细胞内氧化损伤标志基因p16和p21 mRNA水平。结论玫瑰中药复方对UV损伤的细胞具有修复作用。 展开更多
关键词 玫瑰中药复方 hacat 抗氧化 修复作用
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罗汉果醇对UVB诱导HaCaT细胞紫外损伤的保护作用
13
作者 崔智 侯新月 +3 位作者 李洪娟 何叶 何舒颖 王娟 《华夏医学》 2025年第4期37-44,共8页
目的探讨罗汉果醇(MO)通过激活HaCaT细胞中的腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制DNA损伤标记物磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)发挥抗衰老的作用。方法将HaCaT细胞分组后梯度加入MO,通过MTT实验检测最佳给药浓度;Western blot检测MO对中波紫外线(U... 目的探讨罗汉果醇(MO)通过激活HaCaT细胞中的腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制DNA损伤标记物磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)发挥抗衰老的作用。方法将HaCaT细胞分组后梯度加入MO,通过MTT实验检测最佳给药浓度;Western blot检测MO对中波紫外线(UVB)照射后HaCaT细胞中AMPK、γ-H2AX和β-actin蛋白表达造成的影响;流式细胞术检测MO能否治疗UVB照射后HaCaT细胞中出现的凋亡情况。结果MO可以降低UVB诱导的β半乳糖甘酶的表达含量。与模型组比较,MV组细胞凋亡率显著降低(P<0.01),同时DNA损伤标志物γ-H2AX表达水平明显下降(P<0.01),表明MV干预可减轻HaCaT细胞损伤,具有抗衰老作用。此外,MO组AMPK蛋白表达较空白组显著升高(P<0.05)。结论MO可以明显减轻UVB诱导HaCaT细胞紫外损伤,具有潜在的抗衰老作用。 展开更多
关键词 罗汉果醇 hacat细胞 腺苷酸活化蛋白激酶 紫外损伤模型 DNA损伤
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寻常型银屑病患者血清Tfh细胞、IL-21水平对HaCaT细胞增殖周期的影响
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作者 李锋 徐钰 岳敏 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第4期705-708,712,共5页
目的探讨寻常型银屑病患者Tfh、IL-21水平对HaCaT细胞增殖周期的影响。方法收集102例寻常型银屑病患者(研究组)及98名健康体检者(对照组)的外周血。将HaCaT细胞分为正常培养组、IL-21+HaCaT组、Tfh+HaCaT基础组,并在此基础上进一步分为... 目的探讨寻常型银屑病患者Tfh、IL-21水平对HaCaT细胞增殖周期的影响。方法收集102例寻常型银屑病患者(研究组)及98名健康体检者(对照组)的外周血。将HaCaT细胞分为正常培养组、IL-21+HaCaT组、Tfh+HaCaT基础组,并在此基础上进一步分为加IL-21组及加IL-21中和抗体组。采用CCK-8法检测细胞增殖活性,流式细胞术检测细胞周期。结果研究组Tfh及IL-21表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001);HaCaT细胞与IL-21共培养时,G0/G1期缩短,细胞增殖活性及增殖指数均升高,差异有统计学意义(P<0.05);Tfh与HaCaT共培养时,研究组增殖活性更高,差异有统计学意义(P<0.05)。加入IL-21后研究组增殖指数升高,加入IL-21中和抗体则减弱,差异有统计学意义(P<0.05)。结论寻常型银屑病患者Tfh与IL-21表达上升,并促进HaCaT细胞增殖,IL-21中和抗体可减弱此作用,提示Tfh调控IL-21影响角质形成细胞增殖。 展开更多
关键词 寻常型银屑病 细胞增殖 白细胞介素-21 hacat细胞 细胞周期 滤泡辅助性T细胞
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G蛋白偶联受体107的缺失对HaCaT细胞生物学行为的影响 被引量:1
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作者 汪璟 赵韦 +3 位作者 徐德苹 廖开楠 臧丹丹 周海胜 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第3期385-391,共7页
目的构建稳定敲除G蛋白偶联受体107(GPR107)基因的人类角质形成细胞系(HaCaT),并初步探究GPR107的缺失对HaCaT细胞生物学行为的影响。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建敲除GPR107基因的HaCaT细胞,并通过有限稀释法获得GPR107缺失... 目的构建稳定敲除G蛋白偶联受体107(GPR107)基因的人类角质形成细胞系(HaCaT),并初步探究GPR107的缺失对HaCaT细胞生物学行为的影响。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术,构建敲除GPR107基因的HaCaT细胞,并通过有限稀释法获得GPR107缺失的单克隆细胞;利用Western blot和PCR扩增基因组DNA并测序验证验证敲除GPR107的单细胞克隆。运用流式细胞分析术检测细胞周期变化;利用CCK-8检测细胞增殖;运用流式细胞术检测细胞凋亡水平;运用Western blot检测细胞分化标记分子的变化;运用细胞划痕实验等方法分析细胞迁移能力。结果成功将LentiCas9-Blast与plenti-guide-RNA-GPR107质粒转染进HaCaT细胞,并通过有限稀释法得到了21株单克隆细胞,Western blot显示其中8株细胞GPR107表达显著降低;进一步采用细胞基因组PCR测序,显示获得了C4与2D82株GPR107-/-HaCaT单克隆细胞株。CCK-8检测、流式细胞术检测显示GPR107基因缺失导致HaCaT细胞出现G0G1期阻滞,增殖能力显著减弱,凋亡水平增加;Western blot显示敲除GPR107后HaCaT细胞分化加快;细胞划痕实验结果表明敲除GPR107后HaCaT细胞迁移能力增强。结论成功构建GPR107基因缺失的HaCaT细胞株;GPR107缺失阻滞HaCaT细胞G0G1期从而抑制了HaCaT细胞增殖并促进细胞凋亡,敲除GPR107后HaCaT细胞分化能力与迁移能力均增强。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体107 人类角质形成细胞 CRISPR/Cas9 细胞增殖 细胞周期
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缺氧对HaCaT细胞HIF-1α、GLUT-1表达的影响及与细胞增殖的关系 被引量:17
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作者 杨井 陶娟 +3 位作者 李延 刘业强 陆洁捷 涂亚庭 《中国皮肤性病学杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期621-623,共3页
目的探讨缺氧条件下人角质形成细胞株HaCaT细胞HIF-1α、GLUT-1的表达及其与细胞增殖的关系。方法应用实时定量PCR和Western Blotting检测不同缺氧时间段(0h、12h、24h、36h和48h)HaCaT细胞表达HIF-1α、GLUT-1的mRNA及蛋白水平。结果... 目的探讨缺氧条件下人角质形成细胞株HaCaT细胞HIF-1α、GLUT-1的表达及其与细胞增殖的关系。方法应用实时定量PCR和Western Blotting检测不同缺氧时间段(0h、12h、24h、36h和48h)HaCaT细胞表达HIF-1α、GLUT-1的mRNA及蛋白水平。结果缺氧条件下,HaCaT细胞表达HIF-1α蛋白的水平明显增加,mRNA水平变化不明显;GLUT-1的mRNA水平和蛋白水平均明显增加;GLUT-1的蛋白水平变化与HaCaT细胞增殖相关。结论缺氧条件下,HaCaT细胞表达HIF-1α、GLUT-1水平增加,且后者与细胞增殖相关,银屑病皮损中可能存在类似现象。 展开更多
关键词 hacat 缺氧诱导因子 葡萄糖转运体 增殖
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丹参酮ⅡA纳米结构脂质载体的体外评价及其对HaCaT细胞增殖的影响 被引量:12
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作者 郑娟 沈成英 +5 位作者 庞建云 廖卫波 徐平华 刘娟 连王权 袁海龙 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2016年第24期4340-4344,共5页
目的进一步评价丹参酮Ⅱ_A纳米结构脂质载体(TⅡ_A-NLC)的性质,并考察其对HaCaT细胞增殖的影响。方法采用纳米粒度仪及HPLC法对TⅡ_A-NLC的粒径和光稳定性进行考察,透析袋法测定TⅡ_A-NLC在72 h内的累积释放量并绘制释放曲线,MTT法考察T... 目的进一步评价丹参酮Ⅱ_A纳米结构脂质载体(TⅡ_A-NLC)的性质,并考察其对HaCaT细胞增殖的影响。方法采用纳米粒度仪及HPLC法对TⅡ_A-NLC的粒径和光稳定性进行考察,透析袋法测定TⅡ_A-NLC在72 h内的累积释放量并绘制释放曲线,MTT法考察TⅡ_A-NLC对HaCaT细胞增殖的影响。结果 TⅡ_A-NLC的平均粒径为(178±9)nm,多分散度指数(PDI)为0.183±0.017,Zeta电位(-27.5±5.6)m V,体外72 h累积释放量为52.28%,TⅡ_A-NLC能显著降低TⅡ_A的光降解速率,TⅡ_A在一定范围内以剂量依赖性的方式抑制HaCaT细胞增殖,同质量浓度的TⅡ_A-NLC对HaCaT细胞增殖的抑制作用显著高于TⅡ_A溶液。结论 TⅡ_A-NLC稳定性好,具有良好的缓释作用,较好的细胞生物相容性,能显著提高TⅡ_A对HaCaT细胞增殖的抑制作用。 展开更多
关键词 丹参酮ⅡA 纳米结构脂质载体 体外释放 光稳定性 hacat细胞 HPLC 细胞增殖 缓释作用 生物相容性
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扇贝多肽抑制紫外线A波诱导的HaCaT细胞凋亡依赖p38 MAPK通路和caspase-3 被引量:14
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作者 李金莲 严州萍 +4 位作者 陈雪红 王跃军 孙谧 石宇玺 王春波 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期116-120,共5页
目的从p38促细胞分裂剂激活性蛋白激酶(p38MAPK)通路和半胱天冬酶-3(caspase-3)的角度,研究扇贝多肽(poly-peptidefromChlamysfarreri,PCF)抑制紫外线A波(UVA)引起的HaCaT细胞凋亡的分子机制。方法实验分为6组:对照组、UVA模型组、UVA+5... 目的从p38促细胞分裂剂激活性蛋白激酶(p38MAPK)通路和半胱天冬酶-3(caspase-3)的角度,研究扇贝多肽(poly-peptidefromChlamysfarreri,PCF)抑制紫外线A波(UVA)引起的HaCaT细胞凋亡的分子机制。方法实验分为6组:对照组、UVA模型组、UVA+5.68mmol.L-1维生素C阳性对照组、UVA+5.69mmol.L-1PCF组、UVA+2.84mmol.L-1PCF组、UVA+1.42mmol.L-1PCF组。以正交实验设计确立UVA诱导HaCaT细胞凋亡模型;琼脂糖凝胶电泳分析PCF、p38MAPK抑制剂(SB203580)及caspase-3特异性抑制剂(Ac-DEVD-CHO)对细胞凋亡的影响;蛋白质印迹法检测p38MAPK及磷酸化p38MAPK表达;流式细胞术检测caspase-3的活性。结果PCF能明显抑制UVA引起的HaCaT细胞凋亡;SB203580和Ac-DEVD-CHO对UVA诱导的HaCaT细胞凋亡有抑制作用;1.425.69mmol.L-1内的PCF可剂量依赖性抑制UVA引起的p38MAPK磷酸化及caspase-3的活化。结论PCF可抑制UVA诱导的HaCaT细胞凋亡,其作用机制与抑制p38MAPK通路和caspase-3活性有关。 展开更多
关键词 扇贝多肽 紫外线A波 促细胞分裂剂激活性蛋白激酶 半胱天冬酶-3 凋亡 hacat细胞
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寻常型银屑病患者血清中IL-17的表达及紫草素对IL-17刺激HaCaT细胞分泌IL-6和IL-23的影响 被引量:11
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作者 行敏 任宏伟 +1 位作者 屈慧明 耿龙 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期958-962,共5页
目的:探讨寻常型银屑病患者血清中白细胞介素17(IL-17)的表达水平及IL-17刺激后HaCaT细胞分泌白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素23(IL-23)的变化,阐明其临床意义及紫草素的干预作用。方法:以25名正常对照者、29例寻常型银屑病患者和不同组... 目的:探讨寻常型银屑病患者血清中白细胞介素17(IL-17)的表达水平及IL-17刺激后HaCaT细胞分泌白细胞介素6(IL-6)和白细胞介素23(IL-23)的变化,阐明其临床意义及紫草素的干预作用。方法:以25名正常对照者、29例寻常型银屑病患者和不同组别HaCaT细胞(空白对照组、IL-17刺激24h组、IL-17刺激36h组、IL-17刺激48h组、紫草素+IL-17组、环孢素A+IL-17组和IL-17组)为研究对象,采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测寻常型银屑病患者血清IL-17水平和HaCaT细胞各组上清液中IL-6、IL-23水平;实时荧光免疫定量-聚合酶链式反应法(RT-PCR)检测各组HaCaT细胞中IL-6和IL-23p19mRNA表达水平;采用细胞计数盒-8(CCK-8)法检测各组HaCaT细胞活力。结果:与正常对照组比较,银屑病组患者血清IL-17水平明显升高,以重度皮损银屑病组升高最为明显(P<0.05);IL-17刺激24、36和48h组HaCaT细胞及其培养上清中IL-6和IL-23水平及其mRNA表达水平均高于空白对照组(P<0.01);紫草素+IL-17组和环孢素A+IL-17组HaCaT细胞及其培养上清中IL-6和IL-23水平及其mRAN表达水平均低于IL-17组(P<0.05)。与空白对照组比较,其他各组细胞活力差异无统计学意义(P>0.05)。结论:银屑病患者血清IL-17表达水平升高,尤其是重度皮损银屑病患者血清IL-17表达水平升高明显,IL-17可促进HaCaT细胞分泌IL-6和IL-23,呈时间依赖性,紫草素可抑制IL-17的促炎症作用。 展开更多
关键词 银屑病 hacat细胞 白细胞介素17 白细胞介素6 白细胞介素23 紫草素
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绿茶和红茶提取物抑制中波紫外线诱导HaCaT细胞氧化损伤和凋亡的比较 被引量:10
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作者 马蕊 刘仲华 +3 位作者 黄建安 林勇 陈金华 钟源 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期377-381,共5页
为比较绿茶、红茶提取物对中波紫外线(UVB)诱导角质形成细胞光损伤的抑制作用,用不同浓度的绿茶、红茶提取物对人表皮角质形成细胞(HaCaT)预处理6 h,以60 mJ/cm2的剂量照射细胞,比较细胞生存率和细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱... 为比较绿茶、红茶提取物对中波紫外线(UVB)诱导角质形成细胞光损伤的抑制作用,用不同浓度的绿茶、红茶提取物对人表皮角质形成细胞(HaCaT)预处理6 h,以60 mJ/cm2的剂量照射细胞,比较细胞生存率和细胞上清液中超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH–Px)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性以及丙二醛(MDA)含量的变化,用荧光法检测细胞内活性氧(ROS)的含量,用流式细胞仪检测细胞的凋亡变化,并对绿茶、红茶的茶多酚及儿茶素类物质含量进行比较。结果表明:与空白对照组相比,UVB辐射模型组的HaCaT细胞活性下降了21.61%,细胞损伤严重;与UVB辐射模型组相比,绿茶、红茶提取物可提高UVB辐射后HaCaT细胞的存活率,提高SOD、GSH–Px活性(P<0.01),降低LDH活性、MDA含量和细胞内氧自由基含量(P<0.01),降低由UVB辐射导致的细胞凋亡率(P<0.01),使细胞凋亡率分别降低了6.94%和3.68%;绿茶中茶多酚和儿茶素类物质的含量明显高于红茶,绿茶提取物的抑制效果优于红茶提取物。综合分析以上结果,认为绿茶、红茶提取物可以减少由UVB辐射导致的HaCaT细胞损伤和凋亡,具有光保护作用,其机制与细胞抗氧化能力的增强和氧自由基的加速清除有关,且绿茶提取物的作用效果比红茶提取物的好。 展开更多
关键词 绿茶提取物 红茶提取物 中波紫外线 hacat细胞 氧化损伤 凋亡
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