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川芎嗪对人小细胞肺癌H446细胞的增殖抑制作用 被引量：24
1
作者 张会军 阎蕴力 +3 位作者 张朱欣 李建科 刘金锋 王运仓 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 2003年第6期452-454,共3页
目的　观察中药川芎的提取物川芎嗪对人小细胞肺癌H4 4 6细胞的增殖抑制作用。方法　用MTT法、吖啶橙 /溴乙啶 (AO/EB)双荧光染色法、流式细胞术及扫描电镜观察川芎嗪对体外培养的人小细胞肺癌H4 4 6细胞存活率的影响、检测凋亡、分析... 目的　观察中药川芎的提取物川芎嗪对人小细胞肺癌H4 4 6细胞的增殖抑制作用。方法　用MTT法、吖啶橙 /溴乙啶 (AO/EB)双荧光染色法、流式细胞术及扫描电镜观察川芎嗪对体外培养的人小细胞肺癌H4 4 6细胞存活率的影响、检测凋亡、分析其对细胞形态学及细胞周期的影响。结果　川芎嗪对小细胞肺癌H4 4 6细胞有增殖抑制作用 ,细胞形态学发生变化 ,如细胞体积缩小、细胞质空泡化、细胞核碎裂 ;川芎嗪可诱导H4 4 6细胞凋亡并使细胞生长停滞在S期 ,抑制细胞有丝分裂及DNA合成。结论川芎嗪对小细胞肺癌H4 4 6细胞具有增殖抑制作用 ,呈浓度相关性 ,川芎嗪可诱导H4 4 6细胞凋亡 ,其机制可能与其导致细胞S期阻滞有关。 展开更多
关键词 川芎嗪 小细胞肺癌 h446细胞 增殖抑制作用
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槲皮素对人小细胞肺癌H446细胞增殖和凋亡的影响 被引量：13
2
作者 刘涛 张雅雅 +1 位作者 许英艺 包传恩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期169-174,共6页
目的:观察槲皮素(Quercetin)对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:MTT法检测20、40、80、160、200μmol/L槲皮素对H446细胞增殖的抑制作用,共聚焦显微镜观察100、200μmol/L槲皮素处理48 h对H446细胞增... 目的:观察槲皮素(Quercetin)对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响,并初步探讨其可能的作用机制。方法:MTT法检测20、40、80、160、200μmol/L槲皮素对H446细胞增殖的抑制作用,共聚焦显微镜观察100、200μmol/L槲皮素处理48 h对H446细胞增殖的影响,流式细胞术检测槲皮素对H446细胞凋亡和细胞周期的影响,Western blotting检测槲皮素对H446细胞内P53、Bcl-2和Bax蛋白表达的影响。结果:槲皮素对H446细胞的增殖抑制具有显著的剂量和时间依赖性(P<0.05),在12、24、48及72 h四个时间点,槲皮素作用于H446细胞的IC50值分别为(172.2±2.6)、(102.4±5.3)、(68.6±2.7)及(48.8±1.9)μmol/L。槲皮素处理后,随着H446细胞密度的降低,细胞核部分皱缩并裂解为凋亡小体,其对H446细胞的促凋亡作用呈现出显著的剂量依赖性,40μmol/L组H446细胞的凋亡率即显著高于对照组[(8.3±0.4)%vs(4.0±0.5)%;P<0.01],当药物浓度达到200μmol/L时凋亡率达到最高。槲皮素能将H446细胞周期特异性地阻滞于G2/M期。与对照组相比,200μmol/L槲皮素处理组P53[(4.98±0.91)vs(0.68±0.26),P<0.01]和Bax蛋白[(4.26±0.23)vs(0.89±0.29),P<0.01]表达显著升高,Bcl-2蛋白表达[(0.36±0.06)vs(8.23±1.65),P<0.01]显著下降。结论:槲皮素能够抑制H446细胞的增殖并促进其凋亡,其机制可能与调控Bax、p53和Bcl-2等细胞凋亡相关蛋白有关。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 h446细胞 槲皮素 凋亡 增殖 BAX P53 BCL-2
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葛根粗提物、葛根素对肺癌H446细胞增殖的抑制作用及其机制 被引量：10
3
作者 韩萍 裴兰英 +3 位作者 李娟 张蕾 张洪权 许东 《山东医药》 CAS 北大核心 2008年第15期7-9,共3页
目的观察葛根粗提物(CP)和葛根素纯品(SP)对小细胞肺癌H446细胞增殖的影响,并探讨其机制。方法用含不同浓度的SP和CP培养H446细胞,用MTT法检测细胞生长抑制率。用流式细胞术检测细胞周期和凋亡率、细胞免疫化学技术检测Bcl-2和Bax蛋白... 目的观察葛根粗提物(CP)和葛根素纯品(SP)对小细胞肺癌H446细胞增殖的影响,并探讨其机制。方法用含不同浓度的SP和CP培养H446细胞,用MTT法检测细胞生长抑制率。用流式细胞术检测细胞周期和凋亡率、细胞免疫化学技术检测Bcl-2和Bax蛋白。另设空白对照组和溶剂对照组。结果CP作用72h的半数抑制浓度(IC50)为435μg/ml,SP为1403μg/ml。此浓度作用72h,细胞凋亡率分别为14.71%和2.61%,两组相比P<0.05;G0/G1期细胞构成比分别为79.20%和72.20%,G2/M期细胞构成比分别为8.94%和10.50%,与对照组相比P均<0.05;CP作用于H446细胞后,细胞内Bcl-2蛋白表达量降低,Bax的蛋白表达量增加,与对照组相比P均<0.05。结论SP和CP对小细胞肺癌H446细胞具有增殖抑制作用,呈浓度相关性;SP和CP可诱导细胞凋亡且CP强于SP,其机制可能与阻滞细胞周期于G0/G1期、上调Bax表达、下调Bcl-2表达有关。 展开更多
关键词 葛根素 肺肿瘤 小细胞肺癌 h446细胞 细胞凋亡
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山奈酚对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响 被引量：7
4
作者 廖峥嵘 沈永青 +3 位作者 赵娟 吕品 王忠海 雷宇华 《河北师范大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2011年第5期510-514,共5页
研究山奈酚诱导人小细胞肺癌H446细胞凋亡的作用及可能的作用机制.采用MTT法检测山奈酚对小细胞肺癌H446细胞增殖的抑制作用;采用DAPI染色检测经山奈酚处理后细胞凋亡的形态变化;采用RT-PCR和Western-blot技术检测山奈酚处理前后H446细... 研究山奈酚诱导人小细胞肺癌H446细胞凋亡的作用及可能的作用机制.采用MTT法检测山奈酚对小细胞肺癌H446细胞增殖的抑制作用;采用DAPI染色检测经山奈酚处理后细胞凋亡的形态变化;采用RT-PCR和Western-blot技术检测山奈酚处理前后H446细胞p53,bax,bcl-2 mRNA和蛋白的表达.结果显示,不同浓度的山奈酚能抑制人小细胞肺癌H446细胞生长,且随浓度增加抑制作用增强;H446细胞在山奈酚诱导下出现典型的凋亡形态;20μmol/L以上浓度的山奈酚处理后,p53,bax mRNA和相应蛋白表达均升高,而bcl-2 mRNA和蛋白表达降低.研究表明,山奈酚对H446细胞增殖有抑制作用,并能促进其凋亡.p53,bax和bcl-2在山奈酚诱导人小细胞肺癌H446细胞凋亡中起重要作用. 展开更多
关键词 山奈酚 人小细胞肺癌h446 p53 BAX BCL-2 细胞凋亡
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人小细胞肺癌多药耐药细胞系H446/VP的建立及其生物学性状 被引量：6
5
作者 张会军 阎蕴力 +1 位作者 郑力芬 樊平 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期233-236,共4页
目的　建立人小细胞肺癌足叶乙甙多药耐药细胞系H4 4 6 /VP ,进行生物学性状的研究 ,分析其耐药特点。方法　采用高浓度反复间歇诱导的方法 ,建立人小细胞肺癌足叶乙甙多药耐药细胞系H4 4 6 /VP ,并对其光镜形态、超微结构、生长特点进... 目的　建立人小细胞肺癌足叶乙甙多药耐药细胞系H4 4 6 /VP ,进行生物学性状的研究 ,分析其耐药特点。方法　采用高浓度反复间歇诱导的方法 ,建立人小细胞肺癌足叶乙甙多药耐药细胞系H4 4 6 /VP ,并对其光镜形态、超微结构、生长特点进行了研究 ;流式细胞术对细胞周期分布的变化进行了分析 ;采用MTT法分析其耐药谱。结果　H4 4 6 /VP的光镜形态与亲代细胞相似 ,但透射电镜畸形核多见 ,胞浆内有较多的线粒体、核糖体及滑面内质网 ;H4 4 6 /VP的生长速度减慢 ,细胞倍增时间为 35 .7h ,比亲代细胞系长 7.9h ;其细胞周期分布G0 /G1期细胞增多 ,为 6 5 .12± 1.6 7% ,G2 /M细胞为 3.99± 1.4 9% ,较亲代细胞减少 ;MTT法耐药谱分析表明 ,该细胞系对VP 16的耐药倍数为 17.8,除此之外 ,该细胞系对ADR、NVT、VCR、MMC、CDDP等药物也产生了交叉耐药 ,耐药倍数分别为 8.9、5 .4、4 .7、4 .4、1.7,对 5 FU、MTX、CTX仍保持敏感。结论　本实验建立了稳定的人小细胞肺癌多药耐药细胞系H4 4 6 /VP 。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 多药耐药 h446/VP细胞 生物学性状 超微结构
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刺五加多糖通过ERK信号转导途径诱导H446细胞G_2/M期阻滞 被引量：7
6
作者 赵俊霞 闫永鑫 +2 位作者 王彦玲 韩硕 闫蕴力 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2010年第1期59-62,共4页
目的研究刺五加多糖(ASPS)对人小细胞肺癌H446细胞G2/M期阻滞的诱导作用及对ERK信号传导途径的影响。方法流式细胞技术(FCM)检测H446细胞周期;Western blot分析检测ASPS对ERK、p-ERK蛋白的影响。结果与对照组相比,各ASPS处理组G2/M期细... 目的研究刺五加多糖(ASPS)对人小细胞肺癌H446细胞G2/M期阻滞的诱导作用及对ERK信号传导途径的影响。方法流式细胞技术(FCM)检测H446细胞周期;Western blot分析检测ASPS对ERK、p-ERK蛋白的影响。结果与对照组相比,各ASPS处理组G2/M期细胞所占的比例明显增高(P<0.01),G0/G1期细胞所占的比例没有差异;加入ERK抑制剂PD98059后,G2/M期和G0/G1期细胞所占的比例与对照组没有差异;p-ERK的量显著高于对照组(P<0.01),而对ERK蛋白表达没有明显影响。结论ASPS可能通过激活ERK信号转导途径诱导H446细胞发生G2/M期阻滞。 展开更多
关键词 刺五加多糖 小细胞肺癌h446细胞株 G2/M期阻滞 ERK P38
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刺五加多糖诱导人小细胞肺癌H446细胞凋亡 被引量：22
7
作者 赵俊霞 闫永鑫 +2 位作者 赵娟 王彦玲 闫蕴力 《细胞生物学杂志》 CSCD 2008年第2期239-242,共4页
研究刺五加多糖(Acanthopanax senticosus polysaccharide,ASPS)诱导H446细胞凋亡及其可能的作用机制。采用MTT法检测ASPS对小细胞肺癌H446细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色和流式细胞技术检测经ASPS处理后H446细胞凋亡的形态特征... 研究刺五加多糖(Acanthopanax senticosus polysaccharide,ASPS)诱导H446细胞凋亡及其可能的作用机制。采用MTT法检测ASPS对小细胞肺癌H446细胞增殖的抑制作用;Hoechst33258染色和流式细胞技术检测经ASPS处理后H446细胞凋亡的形态特征及凋亡率的变化;Western印迹方法检测凋亡相关基因bax、bcl-2、p53表达的变化。MTT分析表明,ASPS作用48h后可明显抑制H446细胞的增殖,半数抑制浓度(IC50值)为476.36μg/ml;Hoechst染色结果:H446细胞在ASPS诱导下出现典型的凋亡形态;流式细胞术检测结果显示:对照组及浓度为240、480、960μg/ml药物处理组凋亡率分别是(5.02±0.4)%、(11.12±1.8)%、(19.89±2.5)%、(22.54±1.8)%;Western印迹显示:在ASPS的诱导下bax、p53的表达量提高,而bcl-2的表达量下降。研究表明,ASPS对H446细胞增殖有抑制作用,并能促进其凋亡;ASPS通过上调bax、p53表达,下调bcl-2表达促进H446细胞凋亡。 展开更多
关键词 刺五加多糖 小细胞肺癌h446细胞株 BAX基因 BCL-2基因 P53基因
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千金苇茎汤调控人肺小细胞癌H446细胞凋亡的分子机制研究 被引量：8
8
作者 蒋凤荣 蒋日磊 +1 位作者 张旭 黄玉芳 《辽宁中医杂志》 CAS 北大核心 2009年第10期1633-1635,共3页
目的:研究千金苇茎汤对人肺小细胞癌H446增殖与凋亡的影响。方法:将千金苇茎汤通过化学分离法制得水提部位;分为不同药物浓度,与H446共同培养,流式细胞仪细胞周期检测以及荧光显微镜线检测凋亡结果;AgNOR染色观察以及免疫组织化学检测P... 目的:研究千金苇茎汤对人肺小细胞癌H446增殖与凋亡的影响。方法:将千金苇茎汤通过化学分离法制得水提部位;分为不同药物浓度,与H446共同培养,流式细胞仪细胞周期检测以及荧光显微镜线检测凋亡结果;AgNOR染色观察以及免疫组织化学检测PCNA、caspase-3蛋白的变化。结果:不同浓度的千金苇茎汤水提部位与H446培养后,细胞凋亡率明显升高、AgNOR数目减少以及PCNA、caspase-3蛋白明显的改变(P<0.01),并有一定的浓度依赖性。结论:千金苇茎汤水提部位可以有效抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 千金苇茎汤 人肺细胞株(h446) 肺癌
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小细胞肺癌细胞系H446中肿瘤干细胞的分选与鉴定 被引量：4
9
作者 孟祥姣 李明 +2 位作者 王秀问 王亚伟 马道新 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期533-537,共5页
目的明确能否以表面黏附分子CD133为干细胞标志物,使用免疫磁珠分选(magnetic cell separation,MACS)法分离小细胞肺癌细胞系H446细胞中的肿瘤干细胞。方法以CD133为特异性分子标志物,使用MACS方法分选H446细胞,比较CD133阳性(CD133+)... 目的明确能否以表面黏附分子CD133为干细胞标志物,使用免疫磁珠分选(magnetic cell separation,MACS)法分离小细胞肺癌细胞系H446细胞中的肿瘤干细胞。方法以CD133为特异性分子标志物,使用MACS方法分选H446细胞,比较CD133阳性(CD133+)细胞与CD133阴性(CD133-)细胞在集落形成、自我更新、增殖分化、侵袭性、耐药性和成瘤性方面的不同。结果CD133+细胞和CD133-细胞在集落形成能力、自我更新能力、增殖能力、分化能力、侵袭能力和耐药性方面基本相同。集落形成和成瘤性实验结果显示:CD133+或CD133-细胞中40%以上的细胞都能够形成含有100个细胞以上的大集落,增殖成为与未分选细胞相同的细胞群,并能在裸鼠身上成瘤。结论表面黏附分子CD133不能作为分选小细胞肺癌H446细胞系中肿瘤干细胞的分子标志物,分选后的CD133+与CD133-细胞中含有相同的肿瘤干细胞。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 h446细胞系 CD133 肿瘤干细胞
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金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446细胞增殖的影响 被引量：15
10
作者 孙黎 程建贞 +3 位作者 罗强 张秀昌 白雪梅 安芳 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第5期981-983,共3页
目的:观察金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞增殖的影响。方法:①采用CCK-8法检测0.793、1.586、3.172、6.344、9.516、12.688g/L金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞株增殖的影响。②采用流式细胞术观察... 目的:观察金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞增殖的影响。方法:①采用CCK-8法检测0.793、1.586、3.172、6.344、9.516、12.688g/L金莲花黄酮对K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞株增殖的影响。②采用流式细胞术观察0.793、1.586、3.172g/L金莲花黄酮对K562细胞周期的影响。结果:①金莲花黄酮在0.793～12.688g/L范围内对体外培养的K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞生长均有明显的抑制作用,且抑制作用呈剂量依赖性(F=6.72,9.81,8.54,4.83,P均<0.05)。②金莲花黄酮可使K562G0/G1期细胞增多,S期细胞减少(F=12.56,20.86,P均<0.05)。结论:金莲花黄酮对体外培养的K562、HeLa、Ec-109、NCI-H446肿瘤细胞株的增殖均有很强的抑制作用;金莲花黄酮可使体外培养的K562细胞周期阻滞在G0/G1期,可能是其抑制K562肿瘤细胞增殖的机制。 展开更多
关键词 金莲花黄酮 K562 HELA Ec-109 NCI-h446 增殖
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千金苇茎汤调控人肺小细胞癌H446中caspase-3、cox-2抗凋亡的研究 被引量：8
11
作者 蒋凤荣 蒋日磊 张旭 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期278-279,I0003,共3页
目的研究千金苇茎汤对人肺小细胞癌H446凋亡的影响。方法将千金苇茎汤通过化学分离法制得水提部位;分为不同药物浓度,与H446共同培养,流式细胞仪细胞周期检测以及荧光显微镜检测凋亡结果;免疫组织化学检测caspase-3、cox-2蛋白的变化;re... 目的研究千金苇茎汤对人肺小细胞癌H446凋亡的影响。方法将千金苇茎汤通过化学分离法制得水提部位;分为不同药物浓度,与H446共同培养,流式细胞仪细胞周期检测以及荧光显微镜检测凋亡结果;免疫组织化学检测caspase-3、cox-2蛋白的变化;real time PCR检测caspase-3 mRNAc、ox-2 mRNA的表达量。结果不同浓度的千金苇茎汤水提部位与H446培养后,细胞凋亡率明显升高以及PCNAc、aspase-3 RNA水平和蛋白明显的改变(P<0.05),并有一定的浓度依赖性。结论千金苇茎汤水提部位可以有效促进细胞凋亡,抑制肿瘤细胞转移。 展开更多
关键词 千金苇茎汤 肺小细胞癌h446 CASPASE-3 COX-2 凋亡
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MDR相关新基因CA916798真核表达载体的构建及其对H446细胞增殖的影响 被引量：5
12
作者 王海晶 杨和平 周向东 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第24期2315-2318,共4页
目的构建新基因CA916798真核表达载体,并观察其对H446增殖的影响。方法以人A549细胞总RNA为模板,用RT-PCR技术扩增获得CA916798开放阅读框序列,连接入pBluescriptⅡSK克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,酶切与DNA... 目的构建新基因CA916798真核表达载体,并观察其对H446增殖的影响。方法以人A549细胞总RNA为模板,用RT-PCR技术扩增获得CA916798开放阅读框序列,连接入pBluescriptⅡSK克隆载体上,将重组质粒转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,酶切与DNA测序鉴定准确,再用双酶切方法将CA916798开放阅读框序列定向连接到真核表达载体pQE-Trisystem中,构成pQE-Tri-CA916798,将pQE-Tri-CA916798转化入大肠杆菌DH5α内并提取质粒,双酶切鉴定、DNA测序鉴定准确,脂质体转染人小细胞肺癌细胞系H446细胞,选取稳定转染不同质粒的H446细胞,采用MTT绘制细胞增殖曲线,流式细胞仪检测细胞周期和细胞凋亡率。结果扩增出CA916798开放阅读框序列,大小约为350bp,重组质粒的酶切鉴定结果与预期一致,测序结果完全正确。转染了pQE-Tri-CA916798的H446细胞顺铂作用后增殖速度加快,凋亡率下降。结论成功构建了pQE-Tri-CA916798真核表达质粒,并初步证实了其与顺铂诱导的肺癌多药耐药相关。 展开更多
关键词 肺癌多药耐药相关基因 CA916798基因 h446细胞 表达载体
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葛根素对人小细胞肺癌H446细胞周期和相关周期蛋白表达的影响 被引量：13
13
作者 李娟 胡永华 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2008年第10期1535-1537,共3页
目的观察葛根素诱导人小细胞肺癌H446细胞周期的阻滞作用,进一步探讨其作用机制。方法采用MTT法测定葛根素对H446细胞生长的影响;采用流式细胞术检测处理后H446细胞周期分布和周期蛋白cyclinD1、CDK4和P27表达水平。结果MTT法表明葛根素... 目的观察葛根素诱导人小细胞肺癌H446细胞周期的阻滞作用,进一步探讨其作用机制。方法采用MTT法测定葛根素对H446细胞生长的影响;采用流式细胞术检测处理后H446细胞周期分布和周期蛋白cyclinD1、CDK4和P27表达水平。结果MTT法表明葛根素对H446细胞生长有较强的抑制作用;流式细胞仪检测结果发现细胞周期阻滞在G0/G1期,量效关系良好,并检测到细胞周期蛋白cyclin D1、CDK4表达减弱,P27表达增强。结论葛根素可通过诱导细胞周期阻滞而发挥体外抗肺癌作用,其机制可能涉及细胞周期相关蛋白cyclin D1、CDK4和P27表达的调控。 展开更多
关键词 葛根素 h446细胞 cyclin D1蛋白 CDK4蛋白 P27蛋白
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旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对H446小细胞肺癌的抑制作用 被引量：3
14
作者 常红敏 关晓东 +5 位作者 李丹 赵蕾 罗婧梅 邴玉艳 陈晓宁 杜娈英 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2013年第12期1061-1063,1068,共4页
目的研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对H446小细胞肺癌的抑制作用。方法试验随机分为3组。A组(实验组):将提取的旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白用无血清培养基稀释成浓度为0.075、0.15和0.3mg/ml,分别与H446细胞共培养;B组(标准对照):将顺铂稀... 目的研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对H446小细胞肺癌的抑制作用。方法试验随机分为3组。A组(实验组):将提取的旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白用无血清培养基稀释成浓度为0.075、0.15和0.3mg/ml,分别与H446细胞共培养;B组(标准对照):将顺铂稀释成12.8、6.4、3.2、1.6、0.8、0.4和0.2μg/ml,分别与H446细胞共培养;C组(空白对照组):H446细胞培养过程中不作任何处理。采用噻唑蓝比色法(MTT法)检测各组不同时间细胞抑制率;采用原位末端转移酶标记法(TUNEL法)观察细胞凋亡情况。结果 MTT法检测各实验组细胞抑制率均随药物浓度的增高和作用时间的延长而升高,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.01);TUNEL法检测A、B、C组细胞凋亡率分别为85%、43%和2%,差异有统计学意义(P<0.01);A组与B组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对H446细胞有抑制作用,可能是潜在的抗小细胞肺癌的生物制剂。 展开更多
关键词 旋毛虫 排泄分泌蛋白 顺铂 凋亡 h446小细胞肺癌细胞 抑制作用
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替莫唑胺对小细胞肺癌H446细胞的凋亡诱导作用 被引量：4
15
作者 苏雷 史鸿云 +4 位作者 刘妙玲 商琰红 贾友超 刘斌 胡玲 《中国生化药物杂志》 CAS 2015年第4期55-58,共4页
目的探讨替莫唑胺对小细胞肺癌(SCLC)细胞H446的凋亡诱导作用及具体分子生物学机制。方法通过MTT法检测替莫唑胺对H446细胞活力的影响;流式细胞术检测替莫唑胺对H446细胞周期的影响;Western blot分析磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/AKT通路的... 目的探讨替莫唑胺对小细胞肺癌(SCLC)细胞H446的凋亡诱导作用及具体分子生物学机制。方法通过MTT法检测替莫唑胺对H446细胞活力的影响;流式细胞术检测替莫唑胺对H446细胞周期的影响;Western blot分析磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/AKT通路的激活状况及其下游靶基因细胞周期蛋白B1(Cyclin B1),细胞分裂周期基因2(Cdc2),Bax,Bcl-2和生存素(Survivin)的表达。结果替莫唑胺(50,100,200μmol/L)可显著抑制细胞的活力,并且在48h抑制程度最高,并使细胞周期阻滞在G2/M期。Western blot结果显示替莫唑胺能抑制PI3K表达及Akt磷酸化,进而下调Cyclin B1,Cdc2,Bcl-2和Survivin的表达,上调Bax的表达。结论替莫唑胺可通过阻断PI3K/AKT信号通路来诱导SCLC细胞H446凋亡。 展开更多
关键词 替莫唑胺 小细胞肺癌细胞h446 凋亡 PI3K/AKT信号通路
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葛根素对人小细胞肺癌H446细胞增殖与凋亡的影响及其作用机制研究 被引量：7
16
作者 张蕾 李娟 +1 位作者 王彦平 韩萍 《中国实用医药》 2009年第34期17-19,共3页
目的观察葛根素对人小细胞肺癌H446细胞增殖与凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT比色法和流式细胞术检测葛根素对H446细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用;免疫组化法检测葛根素对PCNA、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。结果40、80μg... 目的观察葛根素对人小细胞肺癌H446细胞增殖与凋亡的影响,并初步探讨其作用机制。方法采用MTT比色法和流式细胞术检测葛根素对H446细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用;免疫组化法检测葛根素对PCNA、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。结果40、80μg/ml浓度的葛根素体外作用24、48h,对H446细胞有促增殖作用,在160～640μg/ml浓度范围内,葛根素能够抑制H446细胞的生长,并呈现良好的剂量依赖和时间依赖关系。435μg/ml的葛根素可以诱导H446细胞凋亡。检测葛根素对PCNA、Bax和Bcl-2蛋白表达的影响显示葛根素能够下调PCNA和Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达。结论在一定浓度范围内,葛根素可能通过下调PCNA和Bcl-2蛋白的表达,上调Bax蛋白的表达而诱导H446细胞凋亡。 展开更多
关键词 葛根素 h446细胞 细胞增殖 细胞凋亡 PCNA BAX BCL-2
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Notch3信号通路介导SAHA诱导的小细胞肺癌H446细胞凋亡 被引量：3
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作者 陈红莲 刘辉 +1 位作者 杨旭光 袁磊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1556-1561,共6页
目的:观察辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法:选取人小细胞肺癌H446细胞作为研究对象,采用CCK-8法检测SAHA的细胞毒作用并测定IC50,采用流式细胞术检... 目的:观察辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoylanilide hydroxamic acid,SAHA)对人小细胞肺癌H446细胞凋亡的影响,并探讨其分子机制。方法:选取人小细胞肺癌H446细胞作为研究对象,采用CCK-8法检测SAHA的细胞毒作用并测定IC50,采用流式细胞术检测细胞凋亡,转染N3ICD真核表达质粒构建高表达N3ICD的H446细胞系,采用RT-PCR法检测Notch3的mRNA水平,采用Western blot法检测Notch3、N3ICD、Puma和cleaved caspase-3的蛋白水平。结果:SAHA可显著降低H446细胞存活率且呈剂量依赖性(P<0.05),SAHA作用48 h的IC50为1.91μmol/L;SAHA可诱导H446细胞凋亡且具有剂量依赖性(P<0.05);H446细胞中Notch3基因表达呈阴性,SAHA可使H446细胞Notch3基因恢复表达并激活Notch3信号通路(P<0.05);沉默Notch3基因可抑制SAHA对H446细胞的促凋亡作用(P<0.05);N3ICD高表达使H446细胞中Puma和cleaved caspase-3蛋白水平升高(P<0.01)。结论:在体外SAHA可激活人小细胞肺癌H446细胞Notch3信号通路,上调Puma蛋白表达水平,诱导H446细胞凋亡。 展开更多
关键词 辛二酰苯胺异羟肟酸 小细胞肺癌 NOTCH3 细胞凋亡 h446细胞
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志苓胶囊对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446增殖抑制和诱导凋亡的影响 被引量：7
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作者 陈英玉 潘云苓 +3 位作者 刘庭波 潘明继 胡辉亮 胡建达 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期531-534,共4页
目的研究志苓胶囊(ZLJN)对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446增殖影响及诱导凋亡作用。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成分配制成不同浓度的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,采用MTT比色法、集落形成试验,分别检测细胞存活率和集... 目的研究志苓胶囊(ZLJN)对人小细胞肺癌细胞系NCI-H446增殖影响及诱导凋亡作用。方法将志苓胶囊按其不同的中西药成分配制成不同浓度的中药组、西药组和复方组,与NCI-H446共培养后,采用MTT比色法、集落形成试验,分别检测细胞存活率和集落形成率。通过流式细胞仪进行DNA倍体分析、Bcl-2蛋白表达、线粒体跨膜电位及Caspase-3活性检测;DNA片段化分析法、Annexin V-FITC标记法、TdT酶介导的原位缺口末端标记法(TUNEL)检测凋亡细胞。结果不同浓度的药物组与NCI-H446共培养后,细胞生长明显受抑制,细胞集落形成率明显降低,呈浓度依赖性;各药物组处理后的细胞线粒体跨膜电位和Bcl-2蛋白表达水平下降,Caspase-3活性增强;琼脂糖凝胶电泳可见典型的DNA梯形带;各药物组均检测到明显的亚二倍体G1峰(凋亡峰);Annexin V-FITC法检测到早期凋亡细胞;TUNEL法检测到晚期凋亡细胞。复方组诱导细胞凋亡作用强于中药组和西药组。结论志苓胶囊可以有效抑制NCI-H446细胞增殖,诱导其凋亡,细胞线粒体跨膜电位水平降低,Caspase-3活性增强和Bcl-2表达下调可能参与了该过程。 展开更多
关键词 小细胞肺癌细胞系NCI-h446 志苓胶囊 增殖 凋亡
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Notch3诱导人小细胞肺癌H446细胞G_0/G_1期阻滞及其机制 被引量：3
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作者 刘辉 陈红莲 袁磊 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期791-795,共5页
目的探究Notch3对人小细胞肺癌H446细胞增殖和细胞周期的影响及其分子机制。方法将人Notch3真核表达质粒、人HES1真核表达质粒、人鼠双微基因2(MDM2)基因沉默表达质粒及其空质粒分别转染H446细胞,采用流式细胞术检测细胞周期,采用RT-PC... 目的探究Notch3对人小细胞肺癌H446细胞增殖和细胞周期的影响及其分子机制。方法将人Notch3真核表达质粒、人HES1真核表达质粒、人鼠双微基因2(MDM2)基因沉默表达质粒及其空质粒分别转染H446细胞,采用流式细胞术检测细胞周期,采用RT-PCR法检测Notch3和MDM2的mRNA水平,采用Western blotting方法检测Notch3、HES1、MDM2、Rb和P21蛋白表达水平。结果 Notch3可抑制H446细胞增殖并导致G_0/G_1期阻滞(P<0.05),上调HES1蛋白表达水平和下调MDM2蛋白表达水平(P<0.05);HES1高表达也能使MDM2蛋白表达水平下降(P<0.05),但对其mRNA水平无影响;沉默MDM2基因可抑制H446细胞增殖(P<0.05),并使H446细胞中Rb和P21蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论 Notch3可通过HES1抑制MDM2蛋白表达,进而上调Rb和P21蛋白表达水平,抑制H446细胞增殖并阻滞H446细胞于G_0/G_1期。 展开更多
关键词 NOTCH3 小细胞肺癌 h446细胞 鼠双微基因2 细胞周期 流式细胞术 人
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旋毛虫排泄分泌蛋白对小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响 被引量：8
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作者 常红敏 赵蕾 +4 位作者 王小杰 方艳辉 李丹 罗婧梅 杜娈英 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期299-303,共5页
目的研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响。方法旋毛虫肌幼虫培养24 h,收集培养液,取上清,即为旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白。将人小细胞肺癌NCI-H446细胞(编号A054)随机分为3组,实验组(A组)和细胞凋亡组(B... 目的研究旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白对人小细胞肺癌NCI-H446细胞凋亡的影响。方法旋毛虫肌幼虫培养24 h,收集培养液,取上清,即为旋毛虫肌幼虫排泄分泌蛋白。将人小细胞肺癌NCI-H446细胞(编号A054)随机分为3组,实验组(A组)和细胞凋亡组(B组)的NCI-H446细胞(5×106/ml)分别与旋毛虫排泄分泌蛋白(终浓度为0.3 mg/ml)和顺铂(6.4μg/ml)共培养24 h,空白对照组(C组)的NCI-H446细胞培养24 h,不作任何处理。RT-PCR检测3组NCI-H446细胞中凋亡抑制基因Bcl-2、凋亡相关基因Fas和Fas配体(Fasl)mRNA的表达水平。以抗原癌基因C-myc标签鼠单克隆抗体为一抗,蛋白质印迹(Western blotting)检测3组细胞C-myc蛋白的表达情况。免疫荧光检测3组NCI-H446细胞中C-myc蛋白阳性表达情况。结果 RT-PCR结果显示,经旋毛虫排泄分泌蛋白处理的NCI-H446细胞(A组),Bcl-2 mRNA相对表达水平最低,为(0.575±0.047),与B(0.850±0.073)、C组(0.975±0.069)比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。A组Fas mRNA相对表达量最高,为(0.975±0.115),B(0.817±0.121)、C组(0.769±0.061)相对较低(P<0.05)。A、B和C组细胞Fasl mRNA相对表达水平分别为0.669±0.051、0.787±0.124、0.875±0.125(P<0.05)。A、B和C组细胞Fas/Fasl mRNA比值分别为1.475、1.038和0.878。Western blotting分析结果显示,A组C-myc相对表达水平最低(0.566±0.054),B(1.074±0.069)、C组(1.172±0.026)相对较高(P<0.05)。免疫荧光定位结果显示,旋毛虫排泄分泌蛋白和顺铂作用后24 h,C-myc蛋白在细胞浆/细胞核表达。结论旋毛虫排泄分泌蛋白可促进人小细胞肺癌细胞系NCI-H446细胞凋亡,可能是通过调节凋亡蛋白C-myc表达、进而抑制Bcl-2 mRNA的表达并调节Fas/Fasl mRNA比例来实现的。 展开更多
关键词 旋毛虫 排泄分泌蛋白 小细胞肺癌 NCI-h446 凋亡基因 凋亡蛋白
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