卵母细胞成熟过程受组蛋白H3K4me3(trimethylation of lysine 4 on histone 3)和H3K27me3(trimethylation of lysine 27 on histone 3)及其相关的甲基化和去甲基化酶的调控,因此考虑对鸡的卵泡发育也存在一定的影响。选取“苏禽3号”配...卵母细胞成熟过程受组蛋白H3K4me3(trimethylation of lysine 4 on histone 3)和H3K27me3(trimethylation of lysine 27 on histone 3)及其相关的甲基化和去甲基化酶的调控,因此考虑对鸡的卵泡发育也存在一定的影响。选取“苏禽3号”配套系第一母本为研究对象,采用Western blot法探究组蛋白H3K4me3和H3K27me3在鸡卵泡不同发育阶段颗粒层中蛋白的表达模式。结果表明:在苏禽3号卵泡颗粒层中,组蛋白H3K4me3在卵泡发育不同阶段表达模式呈降低→升高→降低→升高的波浪形趋势,波浪变化较为平缓,在F5、F2和F13个表达高点的表达量与SWF(small white follicle)、LWF(large white follicle)、SYF(small yellow follicle)和F34个表达低点的表达差异显著(P<0.05)。组蛋白H3K27me3在不同发育阶段表达模式亦呈波浪形表达趋势,波浪变化起伏较明显,在SWF、SYF和F33个表达高点的表达量与F5、F4、F1和F24个表达低点的表达差异显著(P<0.05)。相关性分析显示,组蛋白H3K4me3与H3K27me3在不同发育阶段卵泡颗粒细胞中的表达呈较强的负线性相关(R=-0.808,P=0.000)。结果提示:组蛋白H3K4me3和H3K27me3在不同发育阶段卵泡颗粒层中的表达具有组织差异性,呈负相关的动态修饰性,可能共同协调卵泡生长过程中各基因的表达与功能,研究结果为鸡繁殖性状调控机理提供了理论依据。展开更多
目的:探讨检测肝癌组织中组蛋白第三亚基四号赖氨酸的三甲基化(H3K4me3)蛋白的表达与肿瘤病理特点和肝癌患者生存预后的相关性。方法:免疫组化和Western-blot检测H3K4me3和组蛋白甲基转移酶(SET and MYND domain-containing protein 3,S...目的:探讨检测肝癌组织中组蛋白第三亚基四号赖氨酸的三甲基化(H3K4me3)蛋白的表达与肿瘤病理特点和肝癌患者生存预后的相关性。方法:免疫组化和Western-blot检测H3K4me3和组蛋白甲基转移酶(SET and MYND domain-containing protein 3,SMYD3)在肝癌组织(n=168)和细胞株中的表达。此外,实验结果还在另外一个肝癌组织芯片(n=147)中进行验证。H3K4me3表达的最佳分界点(optimal cut-point)由X-tile程序确定,患者的预后由Kaplan-meier生存曲线描述。结果:H3K4me3高表达于肝癌细胞系和肝癌组织,其高表达与肝癌尤其是早期TNM1/2期患者的较差总体生存显著相关。单因素和多因素分析均提示H3K4me3表达水平是患者预后的独立危险因素。此外,H3K4me3和SMYD3在两组肝癌组织中均存在正相关表达。结论:H3K4me3表达水平能成为肝癌患者术后生存的预测因子,其高表达可能与SMYD3有关。展开更多
目的建立检测人血清中抗白色念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段（N—terminal region of histone 3 lysine 4 methyhransferase，Setl-208p）IgG类抗体的ELISA方法，评估其在侵袭性念珠菌病（invasive candidiasis，IC）患者中的早期诊断...目的建立检测人血清中抗白色念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段（N—terminal region of histone 3 lysine 4 methyhransferase，Setl-208p）IgG类抗体的ELISA方法，评估其在侵袭性念珠菌病（invasive candidiasis，IC）患者中的早期诊断价值。方法收集IC患者（105例）、定植患者（37例）、细菌感染患者（25例）、其他真菌感染患者（10例）以及健康体检者（200例）血清，用Setl-208p作为包被抗原，血清1：500稀释，以羊抗人IgG-HRP为二抗，测定人血清中相应的抗Setl-208p抗体水平，确定cut-off值并考查方法的敏感度、特异度和准确度。结果以重组Setl-208p抗原建立的ELISA法精密度良好，批内变异系数（coefficient of variation，CV）为5．5％，批间CV为10．4％。重组抗原对血清中相应抗体的阻断率为91．8％，根据ROC曲线，选择吸光度（absorbance，A）值0．40作为cut off值，对IC的诊断敏感度为79．2％，特异度为90％，且与细菌感染及其他真菌感染病人（如曲霉）无非特异交叉反应。此外，IC患者中抗Setl-208p抗体阳性率（76．1％，80／105）显著高于念珠菌定植者抗Setl-208p抗体阳性率（32．4％，12／37）（χ^2=22．9，P〈0．01）。结论建立了检测抗白念珠菌抗Setl-208p抗体的ELISA法，在IC早期诊断中具有潜在应用价值。展开更多
在氮源缺乏及信息素存在的条件下,裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)进行减数分裂并完成产孢。在此过程中,信息素介导的MAPK(Mitogen-activated protein kinases)信号通路调控减数分裂相关基因的表达。Spk1是MAPK通路的核心成员,通...在氮源缺乏及信息素存在的条件下,裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)进行减数分裂并完成产孢。在此过程中,信息素介导的MAPK(Mitogen-activated protein kinases)信号通路调控减数分裂相关基因的表达。Spk1是MAPK通路的核心成员,通过蛋白磷酸化的方式激活转录因子Ste11,从而激活mei2+、mam2+和map3+等减数分裂相关基因的表达。尽管组蛋白H3K4甲基化参与基因转录激活、染色质重塑等诸多生物学过程,但其在裂殖酵母产孢过程中的作用并不清楚。文章通过序列比对,发现裂殖酵母Ash2作为H3K4甲基转移酶复合物COMPASS的亚基具有两个保守的结构域,定位于细胞核内参与H3K4的甲基化修饰。ash2+的缺失引起裂殖酵母在氮源缺乏时产孢过程的延迟及产孢率下降。ChIP、定量PCR分析结果显示,ash2+的缺失降低了spk1+编码区H3K4的二甲基化水平,造成spk1+mRNA水平的明显下调。在ash2Δ细胞中,虽然ste11+的转录水平没有变化,但Ste11的靶基因mei2+、mam2+和map3+的转录水平明显下降。在裂殖酵母中,组蛋白H3K4甲基转移酶复合物COMPASS的亚基Ash2通过调控二甲基化水平修饰从而调节MAPK信号通路,参与裂殖酵母的有性生殖,为建立表观遗传修饰与减数分裂之间的联系提供了新的线索。展开更多
文摘卵母细胞成熟过程受组蛋白H3K4me3(trimethylation of lysine 4 on histone 3)和H3K27me3(trimethylation of lysine 27 on histone 3)及其相关的甲基化和去甲基化酶的调控,因此考虑对鸡的卵泡发育也存在一定的影响。选取“苏禽3号”配套系第一母本为研究对象,采用Western blot法探究组蛋白H3K4me3和H3K27me3在鸡卵泡不同发育阶段颗粒层中蛋白的表达模式。结果表明:在苏禽3号卵泡颗粒层中,组蛋白H3K4me3在卵泡发育不同阶段表达模式呈降低→升高→降低→升高的波浪形趋势,波浪变化较为平缓,在F5、F2和F13个表达高点的表达量与SWF(small white follicle)、LWF(large white follicle)、SYF(small yellow follicle)和F34个表达低点的表达差异显著(P<0.05)。组蛋白H3K27me3在不同发育阶段表达模式亦呈波浪形表达趋势,波浪变化起伏较明显,在SWF、SYF和F33个表达高点的表达量与F5、F4、F1和F24个表达低点的表达差异显著(P<0.05)。相关性分析显示,组蛋白H3K4me3与H3K27me3在不同发育阶段卵泡颗粒细胞中的表达呈较强的负线性相关(R=-0.808,P=0.000)。结果提示:组蛋白H3K4me3和H3K27me3在不同发育阶段卵泡颗粒层中的表达具有组织差异性,呈负相关的动态修饰性,可能共同协调卵泡生长过程中各基因的表达与功能,研究结果为鸡繁殖性状调控机理提供了理论依据。
文摘目的:探讨检测肝癌组织中组蛋白第三亚基四号赖氨酸的三甲基化(H3K4me3)蛋白的表达与肿瘤病理特点和肝癌患者生存预后的相关性。方法:免疫组化和Western-blot检测H3K4me3和组蛋白甲基转移酶(SET and MYND domain-containing protein 3,SMYD3)在肝癌组织(n=168)和细胞株中的表达。此外,实验结果还在另外一个肝癌组织芯片(n=147)中进行验证。H3K4me3表达的最佳分界点(optimal cut-point)由X-tile程序确定,患者的预后由Kaplan-meier生存曲线描述。结果:H3K4me3高表达于肝癌细胞系和肝癌组织,其高表达与肝癌尤其是早期TNM1/2期患者的较差总体生存显著相关。单因素和多因素分析均提示H3K4me3表达水平是患者预后的独立危险因素。此外,H3K4me3和SMYD3在两组肝癌组织中均存在正相关表达。结论:H3K4me3表达水平能成为肝癌患者术后生存的预测因子,其高表达可能与SMYD3有关。
文摘目的建立检测人血清中抗白色念珠菌H3K4甲基转移酶N末端肽段（N—terminal region of histone 3 lysine 4 methyhransferase，Setl-208p）IgG类抗体的ELISA方法，评估其在侵袭性念珠菌病（invasive candidiasis，IC）患者中的早期诊断价值。方法收集IC患者（105例）、定植患者（37例）、细菌感染患者（25例）、其他真菌感染患者（10例）以及健康体检者（200例）血清，用Setl-208p作为包被抗原，血清1：500稀释，以羊抗人IgG-HRP为二抗，测定人血清中相应的抗Setl-208p抗体水平，确定cut-off值并考查方法的敏感度、特异度和准确度。结果以重组Setl-208p抗原建立的ELISA法精密度良好，批内变异系数（coefficient of variation，CV）为5．5％，批间CV为10．4％。重组抗原对血清中相应抗体的阻断率为91．8％，根据ROC曲线，选择吸光度（absorbance，A）值0．40作为cut off值，对IC的诊断敏感度为79．2％，特异度为90％，且与细菌感染及其他真菌感染病人（如曲霉）无非特异交叉反应。此外，IC患者中抗Setl-208p抗体阳性率（76．1％，80／105）显著高于念珠菌定植者抗Setl-208p抗体阳性率（32．4％，12／37）（χ^2=22．9，P〈0．01）。结论建立了检测抗白念珠菌抗Setl-208p抗体的ELISA法，在IC早期诊断中具有潜在应用价值。
文摘在氮源缺乏及信息素存在的条件下,裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)进行减数分裂并完成产孢。在此过程中,信息素介导的MAPK(Mitogen-activated protein kinases)信号通路调控减数分裂相关基因的表达。Spk1是MAPK通路的核心成员,通过蛋白磷酸化的方式激活转录因子Ste11,从而激活mei2+、mam2+和map3+等减数分裂相关基因的表达。尽管组蛋白H3K4甲基化参与基因转录激活、染色质重塑等诸多生物学过程,但其在裂殖酵母产孢过程中的作用并不清楚。文章通过序列比对,发现裂殖酵母Ash2作为H3K4甲基转移酶复合物COMPASS的亚基具有两个保守的结构域,定位于细胞核内参与H3K4的甲基化修饰。ash2+的缺失引起裂殖酵母在氮源缺乏时产孢过程的延迟及产孢率下降。ChIP、定量PCR分析结果显示,ash2+的缺失降低了spk1+编码区H3K4的二甲基化水平,造成spk1+mRNA水平的明显下调。在ash2Δ细胞中,虽然ste11+的转录水平没有变化,但Ste11的靶基因mei2+、mam2+和map3+的转录水平明显下降。在裂殖酵母中,组蛋白H3K4甲基转移酶复合物COMPASS的亚基Ash2通过调控二甲基化水平修饰从而调节MAPK信号通路,参与裂殖酵母的有性生殖,为建立表观遗传修饰与减数分裂之间的联系提供了新的线索。
