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2023-2024年湖南省长沙市H3N2流感流行株血凝素蛋白鸡胚适应性关键突变研究
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作者 裴瑞青 叶文 +5 位作者 姚栋 欧新华 张如胜 黄政 曾琴 扶会媛 《疾病监测》 北大核心 2026年第1期80-86,共7页
目的本研究旨在分析2023—2024年湖南省长沙市H3N2亚型流感病毒在鸡胚中复制能力提高的分子机制,为疫苗株筛选提供依据。方法选取2023—2024年长沙市H3N2流行期间6例流感样病例的H3N2核酸阳性样本,分别接种犬肾上皮细胞和无特定病原鸡... 目的本研究旨在分析2023—2024年湖南省长沙市H3N2亚型流感病毒在鸡胚中复制能力提高的分子机制,为疫苗株筛选提供依据。方法选取2023—2024年长沙市H3N2流行期间6例流感样病例的H3N2核酸阳性样本,分别接种犬肾上皮细胞和无特定病原鸡胚进行病毒分离,通过红细胞凝集试验与凝集抑制试验鉴定病毒滴度。采用Illumina测序平台对血凝素基因进行全长测序,使用MEGA 11.0软件用邻接法构建系统进化树,并通过多序列比对重点分析抗原决定簇及受体结合位点氨基酸突变,鉴定与鸡胚适应性相关的关键位点。结果6株H3N2鸡胚毒株HA滴度为1∶8~1∶64,鸡胚一代分离阳性率83.33%。进化分析显示2023—2024年长沙市H3N2流行株归属于3C.2a1b.2a.2a.3a.1谱系,与2023—2024年世界卫生组织推荐疫苗株序列一致性达99.10%~99.60%;与鸡胚生长不良型参考毒株HA蛋白序列比对分析发现了H156S、Y159N、G186D、F193S等与鸡胚内流感病毒发育适应相关的氨基酸突变位点。在鸡胚传代过程中,H3N2流感病毒出现了D186N、N246K两个鸡胚适应性突变,均不在抗原决定簇。结论2023—2024年长沙市H3N2流行株通过HA蛋白受体结合域关键氨基酸位点突变,重新获得在鸡胚良好的生长复制能力;鸡胚适应性突变D186N、N246K对病毒抗原性影响有限。本研究为疫苗生产株筛选提供了分子标记,但需持续监测这些突变对病毒传播力及疫苗有效性的潜在影响。 展开更多
关键词 h3N2流感病毒 血凝素 鸡胚 适应性突变 分子进化
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考虑V2H的智能社区能量交易方案
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作者 刘迪迪 姚欣欣 +3 位作者 廖志贤 杨文宇 沈阳 胡聪 《华北电力大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第1期71-81,105,I0005,I0006,共14页
针对含光伏(photovoltaic,PV)、电动汽车(electric vehicle,EV)及家庭电器负荷的智能社区,以车入户(vehicle to home,V2H)的形式将EV纳入家庭需求响应框架,利用EV的双向输能特性并考虑EV充/放电带来的电池容量退化成本,协同PV、电网的... 针对含光伏(photovoltaic,PV)、电动汽车(electric vehicle,EV)及家庭电器负荷的智能社区,以车入户(vehicle to home,V2H)的形式将EV纳入家庭需求响应框架,利用EV的双向输能特性并考虑EV充/放电带来的电池容量退化成本,协同PV、电网的实时电价和用户需求的可容忍时延,基于Lyapunov优化理论提出随机环境下V2H用户的EV充/放电调度策略和每户家庭的负荷响应策略,最小化家庭用户的长期平均购电成本。并提出一种智能社区在线能量交易方案,旨在最小化智能社区总的购电成本、最大限度提高社区能源利用率。理论分析和仿真结果表明,所提算法无需实时电价、PV出力、用户负荷需求的先验概率信息,仅基于当前系统状态就可使优化目标趋于最优值,实现家庭用户的能量调度和家庭用户之间的能量共享,减少家庭购电成本,提高用户之间能量交易的灵活性。 展开更多
关键词 智能社区 Lyapunov优化 电动汽车 V2h 能量共享
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长沙市2019—2024年甲型H3N2流感病毒血凝素与神经氨酸酶分子遗传特征
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作者 裴瑞青 黄政 +5 位作者 李灵之 姚栋 叶文 肖姗 扶会媛 刘晓蕾 《中国热带医学》 北大核心 2026年第1期88-94,共7页
目的通过系统分析长沙市2019—2024年甲型H3N2型流感病毒流行株的分子进化特征,揭示其基因变异规律,为长沙地区流感的精准防控和疫苗株选择提供科学依据。方法选取2019—2024年长沙市国家哨点监测分离的16株H3N2流感毒株作为代表株,采取... 目的通过系统分析长沙市2019—2024年甲型H3N2型流感病毒流行株的分子进化特征,揭示其基因变异规律,为长沙地区流感的精准防控和疫苗株选择提供科学依据。方法选取2019—2024年长沙市国家哨点监测分离的16株H3N2流感毒株作为代表株,采取RT-PCR扩增病毒血凝素(hemagglutinin,HA)和神经氨酸酶(neuraminidase,NA)的基因全长片段,通过下一代测序(next generation sequencing,NGS)技术得到完整基因序列,使用Megalign软件进行序列同源性分析,采用MEGA 11.0软件的Clustal W法进行多重序列比对和氨基酸突变位点分析。采用邻接法(neighbor-joining,N-J法)构建HA和NA基因系统发育进化树(Bootstrap=1000)。结果2019—2024年长沙市16株H3N2分离株HA蛋白均属于3C.2a进化分支,2019年分化出3C.2a1b.1b与3C.2a1b.22个亚分支,2022年后逐步演化为3C.2a1b.2a.2a分支,2023和2024年毒株全部归属于3C.2a1b.2a.2a.3a.1进化分支。同源性分析表明,2019年H3N2流行株HA和NA基因与疫苗株相似性最低,2024年相似性最高。HA蛋白关键位点发生显著变异,包括受体结合位点(re⁃ceptor binding site,RBS)区域的N190D、Y195F,以及抗原表位区域的T135K、H156S、N158K等抗原漂移。2022年毒株新增的NYTY糖基化基序可能导致红细胞凝集能力下降;所有分离株的NA蛋白催化中心高度保守,未检出E119V/R292K等神经氨酸酶抑制剂耐药性突变。结论2019—2024年间长沙市H3N2流感病毒毒株持续发生抗原漂移和遗传进化,已形成了新的优势流行进化分支3C.2a1b.2a.2a.3a.1,HA蛋白的抗原决定簇及RBS区域出现的多个氨基酸位点变异涉及到受体结合特性和病毒抗原性的改变,应及时更新流感疫苗。NA蛋白未出现耐药位点突变,提示对神经氨酸酶抑制剂等药物仍然敏感。 展开更多
关键词 h3N2流感病毒 血凝素 神经氨酸酶 分子进化 基因变异 抗原表位
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GalNAc-T4通过细胞外信号调节激酶1/2信号通路参与缺氧复氧诱导的高糖H9c2心肌细胞自噬机制研究
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作者 丁大有 赵广荣 《细胞与分子免疫学杂志》 北大核心 2026年第2期129-139,共11页
目的探讨N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GalNAc-T4)对高糖(HG)环境下缺氧/复氧(H/R)导致的H9c2细胞损伤模型中线粒体自噬的影响,以及其对细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号的调控机制。方法细胞实验分为:正常对照组(Control):细胞转染pc-NC... 目的探讨N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GalNAc-T4)对高糖(HG)环境下缺氧/复氧(H/R)导致的H9c2细胞损伤模型中线粒体自噬的影响,以及其对细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号的调控机制。方法细胞实验分为:正常对照组(Control):细胞转染pc-NC;HG组:培养基中加入50 mmol/L葡萄糖,细胞转染pc-NC;HG联合H/R组:HG处理的同时,进行低氧培养6 h,细胞转染pc-NC;过表达组(pc):细胞在进行HG联合H/R处理的同时,细胞转染pc;ERK1/2激动剂表皮生长因子(EGF)组:细胞在进行HG联合H/R以及细胞转染pc处理的同时,细胞的培养基中添加20 ng/mL的EGF。检测各组细胞的增殖活性、凋亡率、线粒体膜电位、活性氧(ROS)和铁离子以及线粒体自噬的水平,检测细胞中GalNAc-T4、ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、线粒体外膜转位酶20(TOM20)、线粒体内膜转位酶23(TIM23)、B淋巴细胞瘤2(Bcl2)和Bcl2相关X蛋白(BAX)的表达。结果过表达GalNAc-T4,能明显升高HG联合H/R中的H9c2细胞增殖活性、线粒体膜电位以及细胞中TOM20、TIM23和Bcl2的表达,降低细胞的凋亡率、ROS以及铁离子水平,抑制线粒体自噬,下调细胞中p-ERK1/2/ERK1/2和BAX的表达,EGF可部分逆转过表达GalNAc-T4对心肌细胞的保护作用,差异均具有统计学意义。结论过表达GalNAc-T4后,能明显改善高糖环境下缺氧复氧H9c2细胞的线粒体的功能障碍,抑制氧化应激以及过度的线粒体自噬,降低心肌细胞的凋亡率,这可能与其能抑制ERK1/2信号的激活有关。 展开更多
关键词 线粒体自噬 N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GalNAc-T4) 缺氧/复氧(h/R) 高糖(hG) 心肌细胞 细胞外信号调节激酶1/2信号
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IKKε激酶对大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤的影响
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作者 郭伟崇 李晨 +4 位作者 胡明振 樊琳 蔡晓航 谭鑫 马金霞 《基础医学与临床》 2026年第2期177-185,共9页
目的探讨IKKε激酶对大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤的影响。方法体外培养H9c2细胞以及敲低和过表达IKKε的H9c2细胞,建立低氧损伤的H9c2模型,并将细胞分为对照组、急性低氧组、IKKε过表达组、IKKε敲低组、急性低氧+IKKε过表达组、急性... 目的探讨IKKε激酶对大鼠心肌细胞系H9c2低氧损伤的影响。方法体外培养H9c2细胞以及敲低和过表达IKKε的H9c2细胞,建立低氧损伤的H9c2模型,并将细胞分为对照组、急性低氧组、IKKε过表达组、IKKε敲低组、急性低氧+IKKε过表达组、急性低氧+IKKε敲低组。CCK-8法检测细胞活力,试剂盒检测乳酸脱氢酶(LDH)的活性,Lyso-Tracker检测溶酶体酸化水平,免疫荧光检测Beclin-1、LC3-Ⅱ/Ⅰ、IL-1β表达,ELISA检测IL-1β浓度,Western blot检测IKKε、自噬相关蛋白(Beclin-1、LC3、p62)、凋亡相关蛋白(Bcl-2、Caspase-3、Bax)表达。结果与对照组相比,急性低氧组的H9c2心肌细胞活力减弱,LDH活性明显升高,溶酶体酸化水平明显降低,自噬增强,凋亡增加;与急性低氧组相比,急性低氧+IKKε敲低组H9c2心肌细胞活力增强,LDH活性明显降低,自噬增强,凋亡减少,炎性反应减弱,急性低氧+IKKε过表达组表现与急性低氧+IKKε敲低组相反的结果。结论敲低IKKε可减轻低氧诱导的H9c2心肌细胞损伤,其机制可能与增强自噬、减少凋亡、减弱炎性反应有关。 展开更多
关键词 IKKε激酶 自噬 凋亡 心肌细胞低氧损伤 h9C2细胞
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IGF2BP2通过GPX4/SLC7A11/ACSL4信号轴介导OGD/R诱导的H9c2细胞铁死亡的作用机制
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作者 郭道通 张宗雷 +1 位作者 孟凡华 程云涛 《中国医药导报》 2026年第5期67-73,共7页
目的探究胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)在氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的环境下对H9c2细胞铁死亡的保护作用及其机制。方法通过OGD/R诱导建立H9c2细胞损伤模型,并将细胞分为对照组、OGD/R组、OGD/R+si-NC组和OGD/R+si-IGF2BP... 目的探究胰岛素样生长因子2-mRNA结合蛋白2(IGF2BP2)在氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)诱导的环境下对H9c2细胞铁死亡的保护作用及其机制。方法通过OGD/R诱导建立H9c2细胞损伤模型,并将细胞分为对照组、OGD/R组、OGD/R+si-NC组和OGD/R+si-IGF2BP2组。通过CCK8评估细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡和周期,生化试剂盒检测还原型谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)和亚铁离子(Fe^(2+))含量,透射电镜观察细胞线粒体形态变化,Western blot法检测IGF2BP2蛋白及铁死亡相关蛋白谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和长链酰基辅酶A合成酶4(ACSL4)水平。结果与对照组比较,OGD/R组细胞增殖活性下降且细胞凋亡率升高,细胞中GSH含量下降而MDA和Fe^(2+)含量升高(P<0.05);线粒体出现体积缩小、嵴的数量急剧减少、结构模糊甚至完全消失及外膜破裂等现象;细胞中GPX4、SLC7A11蛋白表达降低,而IGF2BP2和ACSL4蛋白水平升高(P<0.05)。与OGD/R组比较,OGD/R+si-IGF2BP2组细胞增殖活性升高而凋亡率下降,细胞中GSH含量升高而MDA和Fe^(2+)含量下降(P<0.05);线粒体结构恢复正常;细胞中GPX4、SLC7A11蛋白表达升高,而IGF2BP2和ACSL4蛋白水平下降(P<0.05)。结论IGF2BP2下调可能通过调节GPX4/SLC7A11/ACSL4信号轴抑制细胞铁死亡,从而减轻OGD/R诱导的H9c2细胞损伤。 展开更多
关键词 IGF2BP2 氧糖剥夺/再灌注 h9C2细胞 铁死亡
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基于5W2H分析法的高校图书馆口述历史特藏资源建设路径探析
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作者 高冕 戴子涵 王鹏 《传播与版权》 2026年第2期71-75,共5页
文章运用5W2H分析法,从类型与内容、价值与意义、主体构成与角色分工、空间规划与资源获取、时序规划与进度管理、实施路径、投入与回报等七个维度,对我国高校图书馆口述历史特藏资源建设展开系统分析。基于此,文章提出多方协同采集口... 文章运用5W2H分析法,从类型与内容、价值与意义、主体构成与角色分工、空间规划与资源获取、时序规划与进度管理、实施路径、投入与回报等七个维度,对我国高校图书馆口述历史特藏资源建设展开系统分析。基于此,文章提出多方协同采集口述资源以构建区域性馆藏网络体系、拓宽筹资渠道并加强职业培训、挖掘口述专题资源并整合创新服务等路径,以期为高校图书馆口述历史特藏资源建设的专业性、规范化和可持续性发展提供参考和借鉴。 展开更多
关键词 高校图书馆 口述历史 特藏资源 5W2h分析法
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淫羊藿苷通过Toll样受体4/核因子-κB信号通路抑制高糖诱导H9c2细胞凋亡与细胞焦亡的作用及其机制研究
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作者 刘静 杨姚瑶 +2 位作者 王沣 王继政 莫雁飞 《中国药业》 2026年第7期55-62,共8页
目的探讨淫羊藿苷(ICA)对高糖诱导H9c2细胞凋亡和细胞焦亡的作用,并从Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路角度探讨其作用机制。方法将对数生长期的H9c2细胞分为对照组(A组),高糖组(B组),ICA低、高剂量组(C组、D组)。A组用Dulb... 目的探讨淫羊藿苷(ICA)对高糖诱导H9c2细胞凋亡和细胞焦亡的作用,并从Toll样受体4/核因子-κB(TLR4/NF-κB)信号通路角度探讨其作用机制。方法将对数生长期的H9c2细胞分为对照组(A组),高糖组(B组),ICA低、高剂量组(C组、D组)。A组用Dulbecco′s Modified Eagle Medium与Ham′s F-12营养混合物的1∶1混合物[DMEM/F12(1∶1,m/m)]培养基(含11 mmol/L葡萄糖)孵育培养48 h;B组、C组、D组用DMEM/F12(1∶1,m/m)培养基(33 mmol/L葡萄糖)孵育培养48 h,以构建糖尿病心肌病(DCM)细胞模型,建模时C组、D组分别加10,20μmol/L ICA孵育培养48 h。通过Hoechst 33258染液检测细胞凋亡水平,通过JC-1检测细胞线粒体膜电位水平,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测白细胞介素(IL)-6、IL-1β、IL-18、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,采用免疫印迹(Western blot)法检测剪切胱天蛋白酶(cleaved caspase)-3、cleaved caspase-1、核苷酸结合结构域富含亮氨酸重复序列和含热蛋白结构域受体3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)、IL-1β、TLR4、磷酸化NF-κB p65(p-NF-κB p65)的蛋白表达水平,将ICA和TLR4蛋白的三维(3D)结构导入AutoDock 1.5.7软件进行分子对接。另增设ICA高剂量+脂多糖(LPS)组(E组,20μmol/L ICA+1μg/mL LPS),采用Western blot法检测cleaved caspase-3,cleaved caspase-1,NLRP3,GSDMD,IL-1β的蛋白表达水平,考察LPS的逆转作用。结果与B组比较,C组、D组的细胞凋亡率,JC-1绿色荧光与红色荧光的比值及H9c2细胞IL-6,IL-1β,IL-18,TNF-α水平,cleaved caspase-3,NLRP3,cleaved caspase-1,GSDMD,IL-1β,TLR4,p-NF-κB p65的蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与D组比较,E组H9c2细胞cleaved caspase-3,NLRP3,cleaved caspase-1,GSDMD,IL-1β的蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。结论ICA对高糖诱导H9c2细胞凋亡和细胞焦亡有明确的保护作用,其作用机制可能与抑制TLR4/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 糖尿病心肌病 淫羊藿苷 高糖 h9C2细胞 细胞凋亡 细胞焦亡 Toll样受体4/核因子-κB信号通路
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基于H2A组蛋白家族成员X、非SMC缩合蛋白Ⅰ复合物亚基G、异常纺锤体样小头畸形相关基因表达水平评估神经母细胞瘤患儿预后及早期防治策略
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作者 李静 张晓光 +3 位作者 许晓华 朱欢欢 岳铮 孙彩云 《儿科药学杂志》 2026年第4期9-13,共5页
目的:探讨神经母细胞瘤患儿组织H2A组蛋白家族成员X(H2AFX)、非SMC缩合蛋白Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)、异常纺锤体样小头畸形相关基因(ASPM)表达水平及其与临床特征、预后的关系。方法:选取2017年12月至2021年12月我院收治的93例神经母细胞... 目的:探讨神经母细胞瘤患儿组织H2A组蛋白家族成员X(H2AFX)、非SMC缩合蛋白Ⅰ复合物亚基G(NCAPG)、异常纺锤体样小头畸形相关基因(ASPM)表达水平及其与临床特征、预后的关系。方法:选取2017年12月至2021年12月我院收治的93例神经母细胞瘤患儿,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)法检测患儿H2AFX、NCAPG、ASPM在病灶组织及癌旁组织中的表达情况;Kaplan-Meier生存分析探讨H2AFX、NCAPG、ASPM表达与神经母细胞瘤患儿预后的关系;COX分析神经母细胞瘤患儿预后影响因素。结果:病灶组织H2AFX、NCAPG、ASPM水平高于癌旁组织(P<0.05)。H2AFX、NCAPG、ASPM表达与MYCN基因状态、性别、病灶部位、年龄无关,与危险度、国际神经母细胞瘤分期系统(INSS)分期、肿瘤转移有关(P<0.05)。死亡组H2AFX、NCAPG、ASPM水平高于生存组(P<0.05)。H2AFX≥1.73、NCAPG≥1.77、ASPM≥1.92表达的患儿预后3年生存率低于H2AFX<1.73、NCAPG<1.77、ASPM<1.92表达的患儿(P<0.05)。多因素COX回归分析表明,高危、INSS分期处于Ⅲ~Ⅳ-S期、肿瘤发生转移及H2AFX、NCAPG、ASPM水平均为神经母细胞瘤患儿危险因素(P<0.05)。结论:神经母细胞瘤患儿组织H2AFX、NCAPG、ASPM表达水平升高,三者与患儿临床特征及预后生存率密切相关。 展开更多
关键词 神经母细胞瘤 h2A组蛋白家族成员X 非SMC缩合蛋白Ⅰ复合物亚基G 异常纺锤体样小头畸形相关基因 临床特征 预后
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象草C2H2基因家族鉴定及表达分析
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作者 杨丹 靳雅荣 +8 位作者 毛春力 王碧娴 张雅宁 杨智怡 周芷瑶 杨锐鸣 范恒睿 黄琳凯 严海东 《生物技术通报》 北大核心 2026年第1期251-261,共11页
【目的】鉴定象草(Cenchrus purpureus)C2H2型锌指蛋白基因家族成员,探究其在低温胁迫下的调控作用,为解析C2H2转录因子的功能机制奠定基础。【方法】基于象草全基因组数据,利用生物信息学方法系统鉴定C2H2基因家族成员,结合转录组数据... 【目的】鉴定象草(Cenchrus purpureus)C2H2型锌指蛋白基因家族成员,探究其在低温胁迫下的调控作用,为解析C2H2转录因子的功能机制奠定基础。【方法】基于象草全基因组数据,利用生物信息学方法系统鉴定C2H2基因家族成员,结合转录组数据及RT-qPCR分析了象草C2H2在低温胁迫下的表达情况,并通过酿酒酵母异源表达验证关键基因功能。【结果】在象草中鉴定出144个CpC2H2基因,同时通过系统进化分析发现其可以分为10个亚组。基因结构与保守基序分析表明,同亚组成员的基因结构与保守基序呈现高度保守性;顺式作用元件分析表明,CpC2H2成员的启动子区域有65个携带低温应答相关顺式调控元件。CpC2H2基因家族的表达分析表明,该家族基因在象草中展现出显著的组织表达特异性,其中CpC2H2-33、CpC2H2-107、CpC2H2-108和CpC2H2-131在低温胁迫下显著上调,且通过酿酒酵母异源表达发现这些基因可显著增强酵母的低温耐受性。【结论】共鉴定出144个象草C2H2基因,该家族成员具有显著的组织特异性和低温胁迫表达差异性,其中CpC2H2-33/107/108/131可增强酵母的低温耐受性,暗示其可能在象草低温胁迫响应中发挥关键作用,为深入探讨C2H2家族基因的功能提供有价值的信息。 展开更多
关键词 象草 C2h2基因家族 低温胁迫 生物信息学
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MDCK细胞悬浮培养制备流感病毒H3N2灭活疫苗研究
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作者 阮朝列 杨璐洁 +2 位作者 廖国阳 李卫东 周健 《云南大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第1期192-200,共9页
以鸡胚为基质生产流感疫苗已有近70年的历史,但该生产平台存在一系列问题,因此,开发细胞培养替代鸡胚培养生产流感疫苗已势在必行.本研究建立了基于MDCK细胞悬浮培养的流感病毒H3N2生产与纯化工艺.首先,采用小规模悬浮培养制备H3N2病毒,... 以鸡胚为基质生产流感疫苗已有近70年的历史,但该生产平台存在一系列问题,因此,开发细胞培养替代鸡胚培养生产流感疫苗已势在必行.本研究建立了基于MDCK细胞悬浮培养的流感病毒H3N2生产与纯化工艺.首先,采用小规模悬浮培养制备H3N2病毒,经0.65μm滤柱过滤、300 ku超滤浓缩、核酸酶处理、Capto Core 700层析、Capto Q层析、病毒灭活等步骤,制备流感病毒H3N2单价疫苗原液.参考《中国药典》第三部(2020年版)相关附录,对各工艺步骤进行质量控制,检测宿主DNA质量浓度、血凝效价、总蛋白质量浓度、血凝素(HA)质量浓度及Vero细胞宿主蛋白质量浓度等指标,以评估纯化效果.结果表明,该工艺流程总蛋白去除率为(97.94±0.09)%,宿主蛋白去除率为(99.46±0.03)%,宿主DNA去除率为(99.99±0.01)%,血凝素回收率为(19.63±2.25)%.最终配制的H3N2单价疫苗各项质量指标均符合《中国药典》要求.在动物实验中,4~6周龄BALB/c小鼠经皮下免疫两次后采集尾静脉血清,采用红细胞凝集抑制试验评估免疫效果.结果显示,MDCK悬浮培养制备的H3N2单价疫苗与传统鸡胚疫苗在免疫效力上无显著差异,且具有良好的安全性.本研究成功建立了基于MDCK悬浮培养的H3N2流感病毒疫苗的生产与纯化工艺,所制备疫苗具有良好的免疫原性与安全性,为细胞基质流感疫苗的工业化生产提供了技术支撑. 展开更多
关键词 流感病毒 h3N2病毒 悬浮培养 MDCK细胞 疫苗
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梅花C2H2-ZFP基因家族鉴定及低温应答模式分析
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作者 袁重阳 郭娜娜 +3 位作者 陈可 李雪 张启翔 郑唐春 《河北农业大学学报》 北大核心 2026年第1期46-58,67,共14页
锌指蛋白(zinc-finger protein,ZFP)作为真核生物中重要的转录因子家族,广泛参与植物逆境响应,其中C2H2型ZFP在低温胁迫中具有潜在调控功能。本研究通过生物信息学方法对梅花C2H2-ZFP基因家族进行全基因组鉴定,并分析其进化关系、基因... 锌指蛋白(zinc-finger protein,ZFP)作为真核生物中重要的转录因子家族,广泛参与植物逆境响应,其中C2H2型ZFP在低温胁迫中具有潜在调控功能。本研究通过生物信息学方法对梅花C2H2-ZFP基因家族进行全基因组鉴定,并分析其进化关系、基因结构、保守基序、染色体分布、共线性及启动子顺式作用元件,并结合转录组与qRT-PCR验证其表达模式,筛选与低温应答相关的候选基因。结果表明:梅花全基因组中鉴定出56个PmC2H2-ZFPs,不均匀分布于7条染色体;系统进化分析将其分为3个亚家族;亚细胞定位预测显示该家族成员主要定位于细胞核;启动子顺式元件分析表明PmC2H2-ZFPs含有多种激素响应元件和胁迫响应元件,其中18个成员含有低温响应元件。PmC2H2-ZFPs在梅花不同器官、不同温度处理下呈现组织特异性表达,PmZFP18在各检测组织中均有表达,而PmZFP03/11/37/44等在根中高表达,PmZFP18/49在茎中表达较高;季节动态表达分析表明PmZFP03/11/18/44在冬季表达量最高。人工低温处理下,PmZFP03/11表达变化显著,PmZFP08/16的表达随冷处理时间延长呈持续增强趋势,表明这些家族成员在梅花低温胁迫响应中起关键作用。该研究结果为深入解析梅花C2H2型ZFP家族成员在低温胁迫中的功能提供了理论基础,为梅花抗寒分子育种提供了候选基因资源。 展开更多
关键词 梅花 C2h2型ZFP 低温胁迫 基因家族分析 表达模式
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H2H营养管理模式下的持续营养补充对食管癌患者术后营养状况及生活质量的改善作用
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作者 王子兵 刘晓燕 +3 位作者 刘海珍 李小玢 丁宝龙 李伟 《现代食品科技》 北大核心 2026年第2期50-56,共7页
为了探讨了H2H(Hospital To Home)营养管理模式下的持续营养补充对食管癌患者术后营养状况及生活质量的影响,选取了在胸外科首次确诊为食管癌并接受手术治疗的81例患者为研究对象,随机分为实验组和对照组。对照组实行常规营养管理,实验... 为了探讨了H2H(Hospital To Home)营养管理模式下的持续营养补充对食管癌患者术后营养状况及生活质量的影响,选取了在胸外科首次确诊为食管癌并接受手术治疗的81例患者为研究对象,随机分为实验组和对照组。对照组实行常规营养管理,实验组采取H2H营养管理模式进行持续营养补充。结果显示,两组患者术后血红蛋白浓度均有不同程度下降,且实验组术后3 d的血红蛋白浓度低于对照组(P=0.037)。术后3 d的血清白蛋白(38.2 g·L^(-1))及前白蛋白(256.7 g·L^(-1))浓度实验组均高于对照组(36.3、180.9 g·L^(-1),均有P<0.05)。两组患者术后总蛋白和前白蛋白浓度均有下降,出院后逐渐回升,实验组的总体趋势高于对照组。对生活质量进行评估,实验组术后6个月的躯体功能、情绪功能及总体健康水平得分均显著高于对照组(81.7 vs 70.2,85.5 vs 75.0,73.0 vs 62.8,均有P<0.05)。综上,H2H营养管理模式下的持续营养补充可改善食管癌患者术后营养状况,提高生活质量,有助于改善预后。H2H营养管理模式可为肿瘤患者术后长期营养管理提供参考模式。 展开更多
关键词 持续营养补充 h2h营养管理模式 食管癌 营养状况 生活质量
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碱金属改性对FAU型分子筛脱除高炉煤气中H2S性能的影响
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作者 彭晨曦 郭燕 +2 位作者 赵传军 常丽萍 廖俊杰 《煤炭转化》 北大核心 2026年第1期62-72,共11页
高炉煤气中的H2S需深度脱除以满足燃烧烟气超低排放要求。FAU型分子筛脱硫因操作简单、可循环再生成为关注热点。FAU型分子筛吸附剂的脱硫性能与其碱性位密切相关,然而碱性位种类与脱硫性能的关联仍需进一步探讨。基于此,选用NaFAU型分... 高炉煤气中的H2S需深度脱除以满足燃烧烟气超低排放要求。FAU型分子筛脱硫因操作简单、可循环再生成为关注热点。FAU型分子筛吸附剂的脱硫性能与其碱性位密切相关,然而碱性位种类与脱硫性能的关联仍需进一步探讨。基于此,选用NaFAU型分子筛为研究对象,采用离子交换法对其进行K和Li改性制得了一系列碱性位数量和强度不同的吸附剂,采用固定床脱硫装置对其脱除模拟高炉煤气中H2S的性能进行了评价,采用XRD、XRF、N2吸附-脱附和CO_(2)-TPD分析了吸附剂的物化性质,探讨了碱金属种类对脱硫性能的影响,考察了不同强度的碱性位与脱硫性能的关系。结果表明:K改性可增加NaFAU型分子筛吸附剂的碱性位数量,进而提高其脱除H2S的性能;Li改性会减少碱性位数量,导致其脱硫性能降低。当K浓度从0.05 mol/L增加到1.0 mol/L时,吸附剂表面碱性位呈现先增多后减少的变化趋势,脱硫性能呈先提高后降低的趋势。吸附剂表面的弱碱性位数量与脱硫性能存在线性正相关。 展开更多
关键词 碱金属改性 吸附脱硫 FAU型分子筛 高炉煤气 h2S
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上海市2016—2024年H9N2亚型禽流感病毒遗传进化及血凝素蛋白分子特征
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作者 宋倩倩 丰俊 +5 位作者 滕峥 房方皓 吴寰宇 陈昕 谢幼华 陈敏 《中国热带医学》 北大核心 2026年第2期213-220,共8页
目的分析上海市H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的流行规律、遗传进化特征及分子变异特点,为制定AIV感染针对性防控措施提供依据。方法对上海市2016—2024年家禽养殖和交易场所开展持续监测,采集家禽喉拭子和粪便拭子及... 目的分析上海市H9N2亚型禽流感病毒(avian influenza virus,AIV)的流行规律、遗传进化特征及分子变异特点,为制定AIV感染针对性防控措施提供依据。方法对上海市2016—2024年家禽养殖和交易场所开展持续监测,采集家禽喉拭子和粪便拭子及环境标本共43484份,通过核酸检测、病毒分离培养、基因组测序及生物信息学分析,解析病毒阳性率、区域/年份分布、谱系分支、分子特征及重组情况。结果甲型流感病毒总阳性率为8.10%(3521/43484),其中H9N2亚型阳性样本有2334份。H9N2亚型阳性样本时间分布上集中于2016—2019年(2166/2334,92.8%),区域分布主要集中在浦东(800/2334份,34.3%)、松江(395/2334份,16.9%)、崇明(248/2334份,10.6%)等区,主要来源于活禽市场(1475/2334份,63.2%)和养殖场(459/2334份,19.7%),样本类型主要是喉拭子(504/2334份,21.6%)和粪便样本(405/2334份,17.4%);成功分离并测序86条H9N2亚型AIV序列,病毒均属于B谱系,优势分支为B4.7.4(33/86条,38.4%)和B4.7.1(18/86条,20.9%);血凝素(hemagglutinin,HA)蛋白切割位点均为低致病性特征序列RSSR,HA片段高频突变位点为Q227M(100.0%),Q156R(88.4%)和T192R(87.2%)等;重组分析提示FX201712051_HA序列可能为PD18_022_0204112_HA与FX201610007_HA的重组产物。结论尽管上海地区暂无H9N2人感染禽源H9N2流感病毒病例报告,但其流行毒株在与国内主流分支同步演进的同时,呈现出区域性重组特征,需引起关注。建议加强对重组毒株的持续性监测与风险评估,明确病毒在养殖场内的传播途径(如空气传播、接触传播)。 展开更多
关键词 h9N2亚型禽流感病毒 家禽养殖场所 遗传进化 血凝素蛋白 分子特征 重组分析
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H9N2猪流感病毒通过TRPM2介导肺微血管上皮细胞铁死亡的机制
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作者 袁佳欣 刘天赐 +6 位作者 刘婷婷 刘达一 许磊 周子贺 夏宇 徐彤 李龙飞 《中国兽医科学》 北大核心 2026年第2期152-160,共9页
为确定H9N2猪流感病毒(H9N2-SIV)通过瞬时受体电位通道M2(TRPM2)介导肺微血管上皮细胞(PMVEC)铁死亡的分子机制,使用H9N2-SIV接种PMVEC,构建TRPM2-siRNA质粒并转染细胞。用透射电镜观察细胞超微结构,用荧光探针法检测活性氧(ROS)、Ca^(... 为确定H9N2猪流感病毒(H9N2-SIV)通过瞬时受体电位通道M2(TRPM2)介导肺微血管上皮细胞(PMVEC)铁死亡的分子机制,使用H9N2-SIV接种PMVEC,构建TRPM2-siRNA质粒并转染细胞。用透射电镜观察细胞超微结构,用荧光探针法检测活性氧(ROS)、Ca^(2+)和Fe^(2+);用生化试剂盒检测丙二醛(MDA)和谷胱甘肽(GSH)含量,并通过荧光定量PCR和Western-blot检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78)、TRPM2、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、活化转录因子4(ATF4)、阳离子转运调控样蛋白1(CHAC1)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)的m RNA和蛋白表达水平。结果显示,H9N2-SIV感染可诱导细胞铁死亡,敲低TRPM2可以减少细胞内ROS水平,降低Ca^(2+)、Fe^(2+)及MDA含量,GSH水平明显增加;此外,GRP78、PERK、ATF4、CHAC1 m RNA和蛋白表达水平下调,GPX4的m RNA和蛋白表达水平上调。结果表明,H9N2-SIV感染可诱导细胞铁死亡,其可通过激活TRPM2使Ca^(2+)内流增多,进而激活PERK/ATF4/CHAC1信号通路,加速GSH耗竭,抑制GPX4的活性,促进细胞铁死亡。 展开更多
关键词 h9N2猪流感病毒 TRPM2 肺微血管上皮细胞 铁死亡
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甲型H3N2流感病毒候选标准株的筛选及其评价
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作者 纪洵敏 谭丽容 +3 位作者 彭晓放 汤莉 柯昌文 张磊 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 北大核心 2026年第1期134-146,共13页
目的:依据《病原微生物菌(毒)种国家标准株评价技术标准》(WS/T 812-2022),筛选甲型H3N2流感病毒的候选标准毒株,并进行实验室评价,旨在为我国流感病毒检测、疫苗研发和疾病防控提供本土化、标准化的毒株资源。方法:从广东省2020年分离... 目的:依据《病原微生物菌(毒)种国家标准株评价技术标准》(WS/T 812-2022),筛选甲型H3N2流感病毒的候选标准毒株,并进行实验室评价,旨在为我国流感病毒检测、疫苗研发和疾病防控提供本土化、标准化的毒株资源。方法:从广东省2020年分离的甲型H3N2流感病毒毒株中筛选出2株候选株,通过蚀斑纯化技术获得单克隆毒株,结合细胞病变效应(CPE)情况、电镜形态学观察、基因型鉴定、病毒血凝实验、支原体检测及全基因组测序,对毒株生物学、活性和稳定性进行评价。结果:筛选出的2株甲型H3N2流感病毒毒株均无支原体污染,且同一样本产生的空斑均为同一基因型,感染MDCK细胞后可引发典型CPE。电镜观察显示病毒颗粒符合典型的甲型H3N2流感病毒颗粒特征。病毒连续传代5次后,红细胞凝集实验结果均稳定在1∶32~1∶64,均获得血凝素蛋白(HA)、神经氨酸酶(NA)、基质蛋白(MP)、非结构蛋白(NS)、核蛋白(NP)、聚合酶酸性蛋白(PA)、聚合酶碱性蛋白1(PB1)和聚合酶碱性蛋白2(PB2) 8个节段全基因组序列,这2株毒株的核苷酸序列与氨基酸序列均未发生突变。结论:本研究建立并验证了甲型H3N2流感病毒的候选标准株,为病原检测、诊断试剂开发及疫苗药物研发提供了关键物质基础,同时为其他病原微生物国家候选标准株的建立提供了技术参考。 展开更多
关键词 甲型h3N2流感病毒 病毒标准株 蚀斑纯化 实验室评价
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2020-2025年云南部分地区27株H9N2亚型禽流感病毒的HA和NA基因序列分析
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作者 刘照生 周洁楠 +6 位作者 赵晓南 陈瑶瑶 孙艳红 张美玲 韩晓宇 倪瑞泽 伏晓庆 《病毒学报》 北大核心 2026年第1期173-186,共14页
目的探讨2020-2025年云南地区H9N2亚型禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶基因的分子特征与进化趋势,为流行监测和防控策略提供依据。方法从云南省部分地区环境样本中分离获得27株H9N2病毒株,利用生物信息学方法对HA和NA基因进行系统进化分... 目的探讨2020-2025年云南地区H9N2亚型禽流感病毒血凝素和神经氨酸酶基因的分子特征与进化趋势,为流行监测和防控策略提供依据。方法从云南省部分地区环境样本中分离获得27株H9N2病毒株,利用生物信息学方法对HA和NA基因进行系统进化分析及关键氨基酸位点、糖基化位点预测。结果系统进化分析显示,所有分离株均归属于欧亚谱系Y280-like亚分支,其中2024年和2025年分离株在该亚分支下进一步聚集形成独立小支系,提示出现新的局部进化趋势。HA基因核苷酸和氨基酸同源性分别为88%~100%和89.83%~100%,HA蛋白裂解位点为PSRSSRGLF,无连续的碱性氨基酸,符合低致病性特征。受体结合位点第226位和第228位分别为L和G,具备与哺乳动物唾液酸α-2,6受体结合的潜力。部分毒株在抗原位点(如90、168、200、201位)出现新突变,并在313和491位增加糖基化位点,可能影响免疫逃逸和宿主适应性。NA基因核苷酸和氨基酸同源性分别为87.99%~100%和90.5%~100%。所有分离株均存在NA蛋白颈部3个氨基酸缺失,具备增强毒力的分子标志。NA蛋白有6-8个糖基化位点,其中2株在第2位新增位点NPTQ,1株在第67位新增位点NTTI,所有分离株在第402位缺失1个位点,部分毒株在第83位和365位发生缺失。NA蛋白酶活性位点及关键位点氨基酸均未发生突变,对神经氨酸酶抑制剂药物仍保持敏感。结论近年来云南地区H9N2亚型禽流感病毒HA和NA基因持续进化,2024–2025年分离株在Y280-like分支下形成独立支系,关键位点的变异可能增强其跨种传播潜力。建议加强分子监测与风险评估,防范H9N2病毒的跨种传播及潜在公共卫生风险。 展开更多
关键词 云南省 h9N2亚型禽流感病毒 血凝素 神经氨酸酶 遗传进化分析
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科教融合下实验辅助有机反应机理的理解——以3-氨基-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4,6(5H,7H)-二酮为例
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作者 张琪 陶瑾瑾 +2 位作者 赵冉 郭家希 郑斌 《云南化工》 2026年第3期147-150,共4页
旨在将科学研究融入教学活动,通过化合物的合成实验,帮助学生巩固有机化学理论知识,培养学生的创新思维与探索精神。以丙二腈和氢氧化钠为原料,合成中间体1(2-氨基-1-丙烯基-1,1,3-三甲腈);中间体1和肼反应生成中间体2(3-氨基-5-氰甲基-... 旨在将科学研究融入教学活动,通过化合物的合成实验,帮助学生巩固有机化学理论知识,培养学生的创新思维与探索精神。以丙二腈和氢氧化钠为原料,合成中间体1(2-氨基-1-丙烯基-1,1,3-三甲腈);中间体1和肼反应生成中间体2(3-氨基-5-氰甲基-2H-吡唑-4-甲腈);中间体2在盐酸作用下生成3-氨基-2H-吡唑并[4,3-c]吡啶-4,6(5H,7H)-二酮。实验结果通过核磁共振波谱和质谱进行验证,并对其反应机理进行了合理分析。通过将药物中间体的合成转化为教学案例,有效促进了科研与教研的融合,不仅强化了学生对理论知识的掌握,还提升了科研素养与实践能力。 展开更多
关键词 科教融合 3-氨基-2h-吡唑并[4 3-c]吡啶-4 6(5h 7h)-二酮 有机反应机理
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C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞的培养、诱导分化及鉴定
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作者 冯晴晴 陈思沅 +8 位作者 潘静芸 王瑞婷 张纸麟 曾莹 廖俊斌 陈锦贤 陈赣英 林丹蓉 朱伟 《中国病理生理杂志》 北大核心 2026年第2期409-416,共8页
目的:通过对C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞的培养、诱导分化及鉴定,深入探讨棕色脂肪细胞的生物学特性,为人类棕色脂肪细胞的相关研究提供实验参考与理论依据。方法:C3H10T1/2细胞经细胞接种、培养及诱导分化处理,利用光学显微... 目的:通过对C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞的培养、诱导分化及鉴定,深入探讨棕色脂肪细胞的生物学特性,为人类棕色脂肪细胞的相关研究提供实验参考与理论依据。方法:C3H10T1/2细胞经细胞接种、培养及诱导分化处理,利用光学显微镜观察细胞形态变化,并通过油红O染色、免疫荧光法、线粒体探针法以及线粒体电镜技术对分化细胞进行鉴定分析。结果:未分化的C3H10T1/2细胞形态多样,具有突触伸展特征;分化后的细胞逐渐变为圆形或椭圆形,形成环形脂滴;未分化组细胞形态无明显变化。油红O染色显示,未分化组细胞基本无染色,而分化组中约90%的细胞红染,脂滴分布于细胞核周围,吸光度值显著升高(P<0.05)。分化组解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)、过氧化物酶体增殖激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)辅激活因子1α(PPARγco-activator-1α,PGC-1α)、PPARγ和转录因子PRDM16的相对荧光强度和蛋白表达量显著高于未分化组(P<0.05),且线粒体活性增强。结论:本研究成功诱导C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞,结合细胞形态观察、关键蛋白表达检测及线粒体功能分析进行综合评估,证实了细胞的有效分化及成熟棕色脂肪细胞的功能特性。 展开更多
关键词 C3h10T1/2细胞 棕色脂肪细胞 细胞培养 细胞分化 鉴定
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