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应用SSH技术研究H2O2胁迫下细粒棘球蚴基因的表达 被引量:1
1
作者 侯秋莲 王慧 +3 位作者 张壮志 李江伟 张富春 张文宝 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期17-21,共5页
目的构建H2O2胁迫下细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)与正常组织差异表达的消减cDNA文库。方法以H2O2胁迫细粒棘球蚴cDNA为试验方(tester),正常生长的细粒棘球蚴cDNA为驱动方(driver),应用抑制性消减杂交技术(suppression ... 目的构建H2O2胁迫下细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus)与正常组织差异表达的消减cDNA文库。方法以H2O2胁迫细粒棘球蚴cDNA为试验方(tester),正常生长的细粒棘球蚴cDNA为驱动方(driver),应用抑制性消减杂交技术(suppression subtraetive hybridization,SSH)研究H2O2胁迫下细粒棘球蚴基因的表达。结果文库扩增后得到124个阳性克隆,菌落PCR分析,均得到200~1000bp插入片段。将整个文库克隆进行测序,测得序列结果利用BLAST在线软件与GenBank数据库进行同源序列比对分析和BlastX分析。结果获得重要基因的cDNA序列,如氧化还原酶、蛋白激酶、生长因子等。另有部分克隆在GenBank中无法查到对应的同源基因,可能代表了新基因。结论成功构建了H2O2胁迫与正常组织差异表达的消减cDNA文库,为研究细粒棘球蚴在抗氧化过程中的相关靶基因筛选奠定基础。 展开更多
关键词 细粒棘球蚴 h2o2胁迫 抑制性消减杂交
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H2O2胁迫对叶片光合细胞Chla荧光动力学参数的影响
2
作者 卢洪 《海口经济学院学报》 2010年第1期93-96,共4页
采用叶绿素荧光分析技术,对不同浓度的双氧水(H2O2)胁迫下鹅掌木(Schefflera)叶片的Chla荧光动力学参数进行了测量和分析。结果表明:H2O2各浓度氧化胁迫下,在处理时间内,参数Fv/Fo,Fv/Fm,△Fv/T呈现先下降后回升,最后趋于... 采用叶绿素荧光分析技术,对不同浓度的双氧水(H2O2)胁迫下鹅掌木(Schefflera)叶片的Chla荧光动力学参数进行了测量和分析。结果表明:H2O2各浓度氧化胁迫下,在处理时间内,参数Fv/Fo,Fv/Fm,△Fv/T呈现先下降后回升,最后趋于下降的趋势;参数Fvi/Fv呈现一直上升的趋势。Chla荧光动力学参数灵敏地反映了叶片光合细胞对H2O2氧化胁迫下的适应、恶化和死亡的过程。 展开更多
关键词 h2o2胁迫 Chla荧光动力学参数 光合细胞
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松材线虫BxPrx基因抗H2O2胁迫的转录模式及功能 被引量:1
3
作者 许佳瑶 王博文 李丹蕾 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期491-495,共5页
为探究松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)响应H2O2胁迫的分子机制,利用荧光定量PCR测定松材线虫过氧化物还原酶基因BxPrx在不同浓度(2.5、5.0、7.5、10.0 mmol/L)H2O2胁迫下的转录水平;利用RNA干扰技术,沉默松材线虫BxPrx基因,比较H... 为探究松材线虫(Bursaphelenchus xylophilus)响应H2O2胁迫的分子机制,利用荧光定量PCR测定松材线虫过氧化物还原酶基因BxPrx在不同浓度(2.5、5.0、7.5、10.0 mmol/L)H2O2胁迫下的转录水平;利用RNA干扰技术,沉默松材线虫BxPrx基因,比较H2O2胁迫下BxPrx基因沉默组与非基因沉默组松材线虫存活率的差异。结果显示:松材线虫的存活率与H2O2胁迫浓度呈负相关;松材线虫BxPrx在H2O2胁迫下的转录水平均提高;在5.0、7.5、10.0 mmol/L H2O2胁迫下,经过BxPrx基因沉默处理的松材线虫存活率显著低于对照组。 展开更多
关键词 松材线虫 过氧化物还原酶基因 h2o2胁迫
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外源H_2O_2胁迫对大蒜试管苗玻璃化的影响 被引量:12
4
作者 杨芸 吴震 +2 位作者 李翠花 龙玉娟 曾旋睿 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期1637-1642,共6页
以大蒜品种二水早为材料,研究不同浓度外源H2O2胁迫对大蒜试管苗的玻璃化发生及生理生化变化的影响.结果表明,在不同浓度外源H2O2处理下,大蒜玻璃化试管苗百分率、组织含水量、MDA含量、电解质渗透率、SOD和POD活性均高于对照,且随H2O2... 以大蒜品种二水早为材料,研究不同浓度外源H2O2胁迫对大蒜试管苗的玻璃化发生及生理生化变化的影响.结果表明,在不同浓度外源H2O2处理下,大蒜玻璃化试管苗百分率、组织含水量、MDA含量、电解质渗透率、SOD和POD活性均高于对照,且随H2O2浓度的增加而升高,叶绿素含量则表现相反的趋势;在同一H2O2浓度下,大蒜玻璃化试管苗的组织含水量、MDA含量、电解质渗透率、SOD、POD和CAT活性均显著高于大蒜正常试管苗,叶绿素含量低于正常试管苗.研究发现,外源H2O2胁迫对大蒜试管苗玻璃化有促进作用. 展开更多
关键词 大蒜(Alliumsativum L.) h2o2胁迫 试管苗 玻璃化 活性氧
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外源ABA对短期H_2O_2胁迫下侧柏幼苗活性氧代谢及相关基因的影响 被引量:4
5
作者 姚侠妹 常二梅 +5 位作者 纪敬 岳剑云 谢田田 邓楠 史胜青 江泽平 《林业科学研究》 CSCD 北大核心 2017年第4期624-632,共9页
[目的]研究外源ABA处理对H_2O_2胁迫下侧柏幼苗活性氧代谢系统的影响,探讨ABA调控侧柏氧化胁迫的可能作用机制。[方法]以侧柏幼苗为试验材料,采用水培方式,研究外施低浓度(0.5μmol·L^(-1))和高浓度(200μmol·L^(-1))ABA对100... [目的]研究外源ABA处理对H_2O_2胁迫下侧柏幼苗活性氧代谢系统的影响,探讨ABA调控侧柏氧化胁迫的可能作用机制。[方法]以侧柏幼苗为试验材料,采用水培方式,研究外施低浓度(0.5μmol·L^(-1))和高浓度(200μmol·L^(-1))ABA对100 mmol·L^(-1)H_2O_2胁迫下侧柏幼苗活性氧代谢的影响。[结果](1)100 mmol·L^(-1)H_2O_2胁迫48 h显著增加了侧柏幼苗叶片过氧化氢(H_2O_2)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)和脯氨酸含量、抗氧化物酶(SOD和CAT)活性,而可溶性蛋白含量降低。(2)相较于高浓度200μmol·L^(-1)ABA,施加0.5μmol·L^(-1)ABA显著减少了H_2O_2胁迫下侧柏幼苗H_2O_2和MDA的积累,进一步提高了侧柏幼苗叶片SOD、POD和CAT活性,同时促进GSH、脯氨酸和可溶性蛋白的合成。(3)100 mmol·L^(-1)H_2O_2胁迫处理48 h,侧柏幼苗叶片活性氧代谢相关基因Cu/Zn-SOD、CAT、GR、APX、MDAR和GST表达水平较对照CK均有显著性提高;正常和H_2O_2胁迫下侧柏幼苗外施0.5μmol·L^(-1)ABA相较于200μmol·L^(-1)更有利于提高侧柏叶片活性氧代谢相关基因Cu/Zn-SOD、CAT、GR、APX、MDAR和GST的表达量。[结论]低浓度0.5μmol·L^(-1)ABA有效地增强抗氧化系统的防御能力,减弱幼苗的氧化胁迫和膜脂过氧化水平,从而降低活性氧对侧柏的伤害。 展开更多
关键词 侧柏 h2o2胁迫 ABA 活性氧代谢 基因表达
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植物叶片H_2O_2胁迫应答蛋白质组学分析 被引量:1
6
作者 孙晓梅 喻娟娟 +2 位作者 高田祥 孙旭武 戴绍军 《上海师范大学学报(自然科学版)》 2017年第5期713-719,共7页
植物叶片是感知外界H_2O_2胁迫信号的重要器官.整合分析了水稻(Oryza sativa)、小麦(Triticum aestivum)、二穗短柄草(Brachypodium distachyon)和柑橘(Citrus aurantium)在应对不同程度H_2O_2胁迫时蛋白质表达模式的变化特征.阐明了H_2... 植物叶片是感知外界H_2O_2胁迫信号的重要器官.整合分析了水稻(Oryza sativa)、小麦(Triticum aestivum)、二穗短柄草(Brachypodium distachyon)和柑橘(Citrus aurantium)在应对不同程度H_2O_2胁迫时蛋白质表达模式的变化特征.阐明了H_2O_2胁迫应答网络体系中的信号与代谢通路(如:光合作用、糖类与能量代谢、转录调控、蛋白质合成与命运、胁迫防御、信号转导和基础代谢等)的变化及植物叶片应答H_2O_2胁迫的分子调控机制. 展开更多
关键词 植物 叶片 h2o2胁迫 蛋白质组学
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Participation of H_2O_2 in Enhancement of Cold Chilling by Salicylic Acid in Banana Seedlings 被引量:27
7
作者 康国章 王正询 孙谷畴 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 2003年第5期567-573,共7页
The possible physiological mechanism of enhancement of cold tolerance by salicylic acid (SA) in banana seedlings ( Musa acuminata cv. Williams 8188) was explored. Measurements of leakage electrolyte after 2 d of re... The possible physiological mechanism of enhancement of cold tolerance by salicylic acid (SA) in banana seedlings ( Musa acuminata cv. Williams 8188) was explored. Measurements of leakage electrolyte after 2 d of recovery at 30/22 ℃ (day/night) following 3 d of cold stress at 7 ℃ showed that pretreatment with hydroponic solution containing SA 0.3-0.9 mmol/L as foliar spray under normal growth conditions (30/22 ℃) could significantly enhance cold tolerance of banana plants. The highest enhancing effect of SA occurred at 0.5 mmol/L and it showed the lowest leakage rate of electrolyte or smaller leaf wilting area after 2 d of recovery at normal temperature from 3 d of 7 ℃ or 5 ℃ cold stress. Higher concentrations (≥2.5 mmol/L) of SA, however, caused more electrolyte leakage, indicating that they aggravated chilling damage. Enhanced cold tolerance by SA could be related to H 2O 2 metabolism. Compared with water_treated seedlings (control), SA 0.5 mmol/L treatment inhibited activities of catalase (CAT) and ascorbate peroxidase (APX), increased peroxidase (POX) activity, but did not affect the activity of superoxide dismutase (SOD) under normal growth conditions, and these changes might lead to an accumulation of H 2O 2, whereas SA pretreatment enhanced the activities of CAT and APX, and reduced the increase in productions of H 2O 2 and thiobarbituric acid_reaction substances (TBARS) during subsequent 7 ℃ cold stress and recovery periods. Exogenous H 2O 2 treatments (1.5 -2.5 mmol/L) also increased cold tolerance of banana seedlings. Furthermore, pretreatment of banana seedlings with dimethylthiourea (a trap for H 2O 2) significantly inhibited cold tolerance induced by SA. These results suggested that endogenous H 2O 2 may be required for SA_enhanced cold tolerance. The significance of the interaction of SA, H 2O 2 and H 2O 2_metabolizing enzymes during cold stress has been discussed. 展开更多
关键词 salicylic acid banana ( Musa acuminata cv. Williams 8188) cold stress antioxidant enzyme activities cold tolerance h 2o 2 metabolism
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枣树ZjSOD1基因参与非生物胁迫响应的研究 被引量:1
8
作者 聂园军 郭慧娜 +4 位作者 张春芬 肖蓉 邓舒 李倩 曹秋芬 《果树学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1294-1304,共11页
【目的】克隆1个枣树超氧化物歧化酶基因ZjSOD1,并对其功能进行研究,为其在枣树抗逆基因工程改良中的利用奠定基础。【方法】采用PCR克隆ZjSOD1 cDNA序列,运用实时定量RT-PCR方法研究其在高盐和PEG6000胁迫下转录水平的变化。构建ZjSOD... 【目的】克隆1个枣树超氧化物歧化酶基因ZjSOD1,并对其功能进行研究,为其在枣树抗逆基因工程改良中的利用奠定基础。【方法】采用PCR克隆ZjSOD1 cDNA序列,运用实时定量RT-PCR方法研究其在高盐和PEG6000胁迫下转录水平的变化。构建ZjSOD1过量表达载体转化拟南芥,研究其在拟南芥中响应非生物胁迫应答的功能,测定氧化酶活性及生理指标。【结果】ZjSOD1基因cDNA序列开放阅读框全长为699 bp,编码232个氨基酸,理论等电点为8.59,属于Fe-SOD家族成员。在转录水平上,ZjSOD1明显受NaCl和PEG6000诱导。在拟南芥中过量表达ZjSOD1基因导致植株对干旱、高盐更加敏感,但对H2O2耐受性显著增强。在NaCl、PEG6000和H2O2胁迫条件下,过量表达Zj-SOD1转基因植株中SOD、CAT和POD酶活性、脯氨酸和丙二醛含量、电解质渗透率均显著发生改变。实时定量RTPCR结果显示参与活性氧(ROS)、高盐和干旱胁迫相关信号通路的基因在ZjSOD1转基因株系中表达量发生明显改变。【结论】ZjSOD1在植物生长发育过程中参与氧化、干旱、高盐胁迫应答。 展开更多
关键词 枣树 ZjSoD1 渗透/高盐/h2o2胁迫 幼苗发育
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应用超弱光子辐射评价菠菜叶片衰老方法可行性 被引量:6
9
作者 习岗 贺瑞瑞 +1 位作者 刘锴 赵燕燕 《农业工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2014年第17期268-275,共8页
为了研究植物叶片衰老评价及其无损检测方法,采用外源H2O2诱发菠菜叶片衰老,研究了H2O2胁迫下菠菜叶片细胞超弱光子辐射的变化规律及其与叶片衰老的关系。结果表明,在H2O2胁迫过程中,菠菜叶片自发光子辐射随着胁迫时间的延长而增加,外... 为了研究植物叶片衰老评价及其无损检测方法,采用外源H2O2诱发菠菜叶片衰老,研究了H2O2胁迫下菠菜叶片细胞超弱光子辐射的变化规律及其与叶片衰老的关系。结果表明,在H2O2胁迫过程中,菠菜叶片自发光子辐射随着胁迫时间的延长而增加,外界光诱导的延迟光子辐射也表现出明显的变化。根据细胞自发光子辐射和延迟光子辐射的生物学意义,采用延迟光子辐射积分强度和自发光子辐射的比值作为描述细胞整体状态的状态参量,结果发现,在H2O2胁迫过程中,基于细胞超弱光子辐射的菠菜叶片细胞状态参量的变化与叶绿素含量的变化呈现良好的正相关,相关系数为0.91437,暗示通过细胞状态参量的变化可以推测菠菜叶片细胞的状态与衰老程度,进而实现对菠菜叶片衰老程度的无损检测,为植物叶片衰老评价提供了一种新方法。 展开更多
关键词 辐射 无损检测 叶绿素 叶片衰老评价 h2o2胁迫 细胞超弱光子辐射 细胞状态参量
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过量表达番茄类囊体膜抗坏血酸过氧化物酶基因(StAPX)提高了烟草种苗的抗氧化能力 被引量:9
10
作者 孙卫红 陈相燕 +3 位作者 杜斌 宋皖 周越 王云 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期613-618,共6页
为了探讨叶绿体类囊体膜抗坏血酸过氧化物酶(tAPX)与其抗氧化性的关系,从番茄叶片中分离了叶绿体类囊体膜抗坏血酸过氧化物酶基因(StAPX)并转入到烟草中。以野生型(WT)、转正义StAPX烟草株系T3-3和T3-6为试材,测定了外源过氧化氢诱导的... 为了探讨叶绿体类囊体膜抗坏血酸过氧化物酶(tAPX)与其抗氧化性的关系,从番茄叶片中分离了叶绿体类囊体膜抗坏血酸过氧化物酶基因(StAPX)并转入到烟草中。以野生型(WT)、转正义StAPX烟草株系T3-3和T3-6为试材,测定了外源过氧化氢诱导的氧化胁迫条件下APX酶活性、过氧化氢酶(CAT)活性、过氧化氢(H2O2)含量、叶绿素荧光参数及叶绿素含量等。Northern杂交显示StAPX基因的表达受外源H2O2氧化胁迫的诱导。氧化胁迫下转基因烟草的APX酶活性和清除H2O2的能力都显著高于野生型,并且转基因烟草比野生型具有更高的PSII最大光化学效率及叶绿素含量。结果表明,StAPX的过量表达有助于提高外源H2O2诱导的转基因烟草的抗氧化能力。 展开更多
关键词 番茄类囊体膜抗坏血酸过氧化物酶基因 h2o2氧化胁迫 转基因烟草 抗氧化能力
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