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基于甲型H1N1流感病毒继发金黄色葡萄球菌感染小鼠模型探究金银花药效及作用机制 被引量：2
1
作者 王晨 李勋 +7 位作者 高燕 毛志海 周思琴 吴高峰 才太吉 高树华 张永文 赵渤年 《药物评价研究》 北大核心 2025年第5期1155-1166,共12页
目的建立甲型H1N1流感病毒(H1N1)继发金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus感染模型,探讨金银花水提物(LJAE)对该模型药效及机制。方法小鼠按体质量随机分为对照组、模型组、磷酸奥司他韦(OT,抗病毒阳性药,11 mg·kg^(-1),临床等效... 目的建立甲型H1N1流感病毒(H1N1)继发金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus感染模型,探讨金银花水提物(LJAE)对该模型药效及机制。方法小鼠按体质量随机分为对照组、模型组、磷酸奥司他韦(OT,抗病毒阳性药,11 mg·kg^(-1),临床等效剂量)组、头孢克洛缓释片(CF,抗菌阳性药,106.38 mg·kg^(-1),临床等效剂量)组和LJAE低、中、高剂量(6.5、13.0、26.0 mL·kg^(-1))组,除对照组外,建立致死型H1N1继发S.aureus模型,连续给药5 d,观察死亡率;除对照组外,建立亚致死性H1N1继发S.aureus模型,连续给药5 d,测定肺指数,通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测肺病毒量,平板法检测肺菌量,苏木精-伊红(HE)染色观察肺损伤;瑞氏-吉姆萨染色法测定肺泡灌洗液中巨噬细胞和中性粒细胞数目;通过qRT-PCR法检测肺单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素-γ(IFN-γ)、白介素-4(IL-4)、趋化因子(C-X-C基序)配体1(CXCL-1)m RNA表达量;ELISA法检测肺组织MCP-1、TNF-α、IFN-γ水平;流式细胞术测定外周血CD4+IFN-γ+(Th1)和CD4+IL-4+(Th2)细胞比例。结果与模型组比较,LJAE显著降低致死型H1N1继发S.aureus模型小鼠的死亡率(P<0.05、0.01、0.001),显著降低亚致死型H1N1继发S.aureus模型小鼠的肺指数(P<0.001)、肺病毒量(P<0.001)和肺菌量(P<0.001),减轻肺病理损伤;LJAE显著减少肺部中性粒细胞和巨噬细胞的募集(P<0.001),显著降低趋化因子MCP-1和促炎细胞因子TNF-α和IFN-γmRNA和蛋白的表达(P<0.001),降低外周血单核细胞CD4+IFN-γ+/CD4+IL-4+(P<0.001)。结论LJAE具有显著的抗H1N1继发S.aureus感染的活性,能够通过调节过激的Th1型免疫反应,抑制Th1型细胞因子MCP-1、TNF-α和IFN-γ的释放,减轻肺部炎症细胞的过度浸润,修复H1N1继发S.aureus引发的肺损伤。 展开更多
关键词 金银花 甲型h1N1流感病毒 金黄色葡萄球菌 继发感染 巨噬细胞 Th1/TH2
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2023年中国A(H1N1)pdm09亚型流感病毒抗原和基因特性分析 被引量：1
2
作者 成艳辉 隗合江 +7 位作者 李希妍 曾晓旭 肖宁 唐静 谢怡然 杨磊 王大燕 黄维娟 《疾病监测》 北大核心 2025年第4期492-498,共7页
目的分析2023年中国分离的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒的抗原和基因特性。方法对2148株A(H1N1)pdm09亚型流感毒株用红细胞凝集抑制试验进行抗原分析,对其中505株毒株进行序列测定和分析。结果2023年检测的2148株毒株中,95.00%以上的毒株... 目的分析2023年中国分离的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒的抗原和基因特性。方法对2148株A(H1N1)pdm09亚型流感毒株用红细胞凝集抑制试验进行抗原分析,对其中505株毒株进行序列测定和分析。结果2023年检测的2148株毒株中,95.00%以上的毒株抗原性与疫苗株A/Victoria/4897/2022和A/West Virginia/30/2022类似;98.42%(497/505)测序毒株的血凝素(HA)基因属于C.1分支,在此分支中存在多个有共同氨基酸位点变异的小分支;在测序毒株中,11株毒株有已知对神经氨酸酶抑制剂耐药的E119A、Q136K和H275Y氨基酸位点变异。结论2023年中国流行的A(H1N1)pdm09亚型流感病毒与同期的疫苗株抗原性匹配,但HA基因存在多样性的特点。 展开更多
关键词 A(h1N1)pdm09亚型流感病毒 抗原性 基因特性
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基于H1 Connect的多元化评价标签相关分析及综合评价指标体系建立研究 被引量：1
3
作者 许丹 罗祥东 +1 位作者 王雯霞 徐爽 《江苏科技信息》 2025年第5期93-98,共6页
文章基于H1 Connect对生物医学科技论文各类同行评议标签进行相关性分析研究,结合多元化指标尝试构建更为全面、科学的论文评价指标体系。从H1 Connect、Altmetric、WoS(Web of Science)平台获取同行评议、社会影响力、学术影响力代表... 文章基于H1 Connect对生物医学科技论文各类同行评议标签进行相关性分析研究,结合多元化指标尝试构建更为全面、科学的论文评价指标体系。从H1 Connect、Altmetric、WoS(Web of Science)平台获取同行评议、社会影响力、学术影响力代表性指标和评价标签,根据规则计算出综合评分,运用SPSS软件进行斯皮尔曼相关性比较分析。H1 Connect中同行评议各指标与不同评价标签之间大多呈低相关或不相关关系。相对引用率与同行评级之间也呈低相关或不相关关系,而星级权重与同行评级“Very Good”和“Exceptional”呈中度相关。文章提出综合评分指标CS,该指标与同行评议结果呈中度相关性,与社会影响力和学术影响力评价结果也高度一致,可为生物医学领域的学术评价提供新视角。 展开更多
关键词 h1 Connect 综合评分 评价标签 对比分析
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2015—2018年大连市流感监测及甲型H1N1流感病毒HA基因特征分析 被引量：1
4
作者 韩焱 吕秋月 +3 位作者 纪颖 刘大鹏 滕雪 孙楠 《医学动物防制》 2025年第3期209-214,共6页
目的本研究旨在了解2015—2018年大连市流感病毒的流行特征并分析甲型H1N1流感病毒的血凝素(hemagglutinin,HA)基因的遗传变异情况,为流感防控提供参考。方法对2015年7月—2018年6月流感监测哨点医院采集的3936份流感样病例(influenza-l... 目的本研究旨在了解2015—2018年大连市流感病毒的流行特征并分析甲型H1N1流感病毒的血凝素(hemagglutinin,HA)基因的遗传变异情况,为流感防控提供参考。方法对2015年7月—2018年6月流感监测哨点医院采集的3936份流感样病例(influenza-like illness,ILI)标本,采用实时荧光定量PCR方法进行流感病毒核酸检测,检测结果用SPSS 22.0软件进行统计分析。核酸阳性标本使用犬肾(madin-darby canine kidney,MDCK)细胞进行病毒分离,并随机选取每年的甲型H1N1流感病毒毒株进行基因测序,使用MEGA 5.0软件分析其HA1基因特征。结果流感病毒核酸检测阳性共590份,阳性率总体呈上升趋势,2017—2018年流感病毒阳性率最高(20.1%),2015—2016年流感病毒阳性率最低(10.9%),不同年份流感病毒阳性率差异有统计学意义(χ^(2)=45.124,P<0.001)。共分离出甲型流感病毒H1N1亚型毒株94株,将随机选取的39株分离株的HA编码区与疫苗株及参考株的HA编码区进行比较,所有分离株均观察到P83S、D97N、K163Q、S185T、S203T和K283E位点突变。高比例的毒株(84.6%)具有S84N、S162N和I216T位点突变。结论系统发育分析证实,大多数在流行的毒株与上一流行季分离的参考株及疫苗株A/Michigan/45/2015亲缘关系较近,而与A/California/7/2009疫苗株的亲缘关系较远,揭示毒株积累氨基酸变异和形成新的系统发育群的趋势。 展开更多
关键词 流感监测 甲型流感病毒h1N1亚型 HA基因 进化分析 变异分析
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抗感方对实验小鼠免疫调节及抗H1N1流感病毒作用探究 被引量：1
5
作者 王祺 白长川 +4 位作者 于雪峰 张宏 甘雨 翟娜 孟硕 《辽宁中医药大学学报》 2025年第7期10-15,共6页
目的探讨抗感方对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用及抗H1N1流感病毒作用。方法采用小鼠网状内皮系统吞噬能力试验(非特异性免疫),小鼠血清溶血素生成试验(体液免疫),小鼠迟发超敏反应试验(细胞免疫),小鼠免疫因子调控试验,观察抗感方对... 目的探讨抗感方对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用及抗H1N1流感病毒作用。方法采用小鼠网状内皮系统吞噬能力试验(非特异性免疫),小鼠血清溶血素生成试验(体液免疫),小鼠迟发超敏反应试验(细胞免疫),小鼠免疫因子调控试验,观察抗感方对免疫功能低下小鼠的免疫调节作用;采用药物对流感病毒感染BALB/C小鼠死亡的保护实验,观察抗感方抗H1N1流感病毒作用。结果与模型组比较,各给药组小鼠网状内皮系统吞噬能力有升高的趋势,玉屏风颗粒组(1.95 g/kg)、匹多莫德组(0.21 g/kg)差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠血清溶血素生成OD值都有升高的趋势,其中抗感方高剂量组(27.30 g生药/kg)、匹多莫德组(0.21 g/kg)升高差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。与模型组比较,各给药组小鼠迟发超敏反应有下降的趋势,其中抗感方低剂量组(6.82 g生药/kg)、高剂量组(27.30 g生药/kg)、匹多莫德组(0.21 g/kg)降低明显(P<0.05或P<0.01)。与模型对照组比较,抗感方高剂量组(27.30 g生药/kg)、玉屏风颗粒组(1.95 g/kg)、匹多莫德组(0.21 g/kg)能够促进IL-4分泌(P<0.05或P<0.01),抗感方高剂量组(27.30 g生药/kg)、匹多莫德组(0.21 g/kg)能够促进IFN-γ的分泌(P<0.01、P<0.05),抗感方高剂量组(27.30 g生药/kg)能够抑制TNF-α的分泌(P<0.05)。与模型组比较,抗感方中剂量组(13.65 g生药/kg)、奥司他韦胶囊组(19.50 mg/kg)平均生存日数延长(P<0.05或P<0.01)。结论抗感方具有提高机体免疫力及抗H1N1流感病毒作用,其机制可能与促进IL-4、IFN-γ分泌,抑制TNF-α的生成有关。 展开更多
关键词 免疫调节作用 抗感方 h1N1流感病毒
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粤港澳大湾区冬季甲型H1N1流感传播的气候适宜性及其时空分异规律
6
作者 段海来 刘畅 杜尧东 《生态学杂志》 北大核心 2025年第7期2377-2382,共6页
基于粤港澳大湾区逐日气象资料与甲型H1N1流感病例数据,运用气候适宜度模型对粤港澳大湾区冬季甲型H1N1流感传播的气候适宜性及其时空差异进行了计算、评价和预测。结果表明:12月下旬到次年2月中旬气候适宜性指数较高,且变异系数较小,其... 基于粤港澳大湾区逐日气象资料与甲型H1N1流感病例数据,运用气候适宜度模型对粤港澳大湾区冬季甲型H1N1流感传播的气候适宜性及其时空差异进行了计算、评价和预测。结果表明:12月下旬到次年2月中旬气候适宜性指数较高,且变异系数较小,其中1月下旬适宜性指数最高,是甲型H1N1流感传播的最适宜时期;近42年来粤港澳大湾区冬季甲型H1N1流感传播的气候适宜性指数呈下降趋势,2015年以后适宜性指数降幅较大;从冬季各月来看,12月和1月呈现一致性增加趋势,2月呈现显著下降趋势;粤港澳大湾区冬季甲型H1N1流感传播的气候适宜性呈现西北向东南递减的区域分异规律,其中西北地区适宜性指数是东南沿海地区的1.5~2.0倍;从变化趋势来看,珠江口以西区域的东部以及惠州部分地区的H1N1传播适宜性呈上升趋势,尤其以佛山和中山地区升幅最为显著,增加速度达到1.0(10 a)^(-1)以上,沿海地区则在下降,减少速度在0.05(10 a)^(-1)以上。由此可见,粤港澳大湾区甲型H1N1流感传播的关键时期是冬至前后至翌年立春前后,重点关注区域是珠江口以西核心城市。 展开更多
关键词 气候适宜性指数 甲型h1N1流感 气候变化 粤港澳大湾区
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衰老抑制C57BL/6J小鼠肺部CD8^(+)T细胞对甲型H1N1流感病毒的记忆性免疫应答
7
作者 王超 李顺 +4 位作者 任晓楠 杨华 陈丽香 徐春华 周晓辉 《实验动物与比较医学》 2025年第5期515-523,共9页
目的比较年轻与老年C57BL/6J小鼠感染甲型H1N1流感病毒后肺组织中CD8^(+)T细胞在收缩期及记忆性免疫应答期的功能差异。方法摘取未行流感病毒感染的年轻(3月龄)与老年(24月龄)雌性C57BL/6J小鼠肺组织,制备单细胞悬液,分别用佛波酯(phorb... 目的比较年轻与老年C57BL/6J小鼠感染甲型H1N1流感病毒后肺组织中CD8^(+)T细胞在收缩期及记忆性免疫应答期的功能差异。方法摘取未行流感病毒感染的年轻(3月龄)与老年(24月龄)雌性C57BL/6J小鼠肺组织,制备单细胞悬液,分别用佛波酯(phorbol 12-myristate 13-acetate,PMA)/离子霉素或分化簇(cluster of differentiation,CD)3/CD28抗体(T细胞抗原受体/共刺激信号)进行非特异性抗原刺激,通过流式细胞术对肺CD8^(+)T细胞行细胞内细胞因子染色(flow cytometry intracellular cytokine staining,ICS)以检测其分泌肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)和干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)的能力。以490 PFUPR8流感病毒滴鼻感染年轻和老年C57BL/6J小鼠,28天后进行同源流感病毒的二次感染,于初次感染后第28天(收缩期)、第32天(记忆性免疫应答期)分离肺组织,采用流感病毒特异性MHC-Ⅰ四聚体染色法检测病毒特异性CD8^(+)T细胞在肺组织CD8^(+)T细胞中的比例,ICS法分析CD8^(+)CD44^(high) T细胞亚群TNF-α、IFN-γ及颗粒酶B(granzyme B)的表达。结果非特异性抗原刺激后,老年组小鼠的肺组织CD8^(+)T细胞中TNF-α、IFN-γ分泌能力显著高于年轻组(P<0.05)。病毒特异性抗原刺激后,收缩期的两组小鼠间病毒特异性CD8^(+)T细胞比例以及TNF-α、IFN-γ、granzymeB的表达水平差异均无统计学意义(P>0.05);而在记忆性免疫应答期,老年组小鼠的病毒特异性CD8^(+)T细胞比例以及TNF-α、IFN-γ、granzymeB的表达水平均显著低于年轻组(P<0.05)。结论老年小鼠肺部CD8^(+)T细胞在非特异性抗原刺激下免疫相关因子表达功能正常,但在抗原特异性记忆免疫应答阶段的免疫相关因子表达功能受损,提示衰老导致CD8^(+)T细胞免疫记忆形成或维持发生缺陷。 展开更多
关键词 甲型h1N1流感病毒 CD8^(+)T细胞 免疫衰老 记忆性免疫应答 小鼠
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白蜡树FcF6′H1基因的密码子偏好性分析
8
作者 孙晓春 黄文静 李会容 《山西农业科学》 2025年第1期35-47,共13页
利用CodonW、EMBOSS在线程序分析白蜡树FcF6'H1基因的密码子偏好性,对芸香科、豆科、伞形科、木犀科以及模式植物拟南芥、烟草和番茄中F6'H1的基因密码子进行聚类分析、中性绘图、ENC-plot分析和PR2-plot偏倚分析,研究影响白蜡... 利用CodonW、EMBOSS在线程序分析白蜡树FcF6'H1基因的密码子偏好性,对芸香科、豆科、伞形科、木犀科以及模式植物拟南芥、烟草和番茄中F6'H1的基因密码子进行聚类分析、中性绘图、ENC-plot分析和PR2-plot偏倚分析,研究影响白蜡树FcF6'H1基因密码子偏好性形成的因素,通过FcF6'H1与模式生物的密码子使用频率比较获得最佳受体。结果表明,白蜡树FcF6'H1的GC、GC1、GC2、GC3和GC12含量分别为0.4312、0.5125、0.3490、0.4321和0.4308,CAI值为0.216,ENC值为57.84,表明白蜡树FcF6'H1基因的偏好性较弱;中性绘图、ENC-plot和PR2-plot偏倚分析结果表明,碱基突变和自然选择均会影响FcF6'H1密码子的偏好性;CDS进化树和RSCU值聚类分析结果不完全一致,但是均表明白蜡树FcF6'H1与木樨榄XM_023028611.1、XM_023036788.1、XM_023034893.1聚为一类,确定了F6'H1基因的6个最优密码子,分别是CUC、AUC、AAG、GAG、UCG和ACA;密码子使用频率分析表明,模式生物中番茄和烟草适合作为遗传转化受体,大肠杆菌表达系统适合作为FcF6'H1的异源表达载体。文章初步阐明了白蜡树FcF6'H1基因密码子的使用规律。 展开更多
关键词 白蜡树 FcF6'h1 密码子偏好性 ENC-plot PR2-plot 异源表达
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欧亚类禽H1N1猪流感病毒适应性突变氨基酸的鉴定及其功能分析 被引量：2
9
作者 万云飞 杨玉莹 +4 位作者 张乃心 许萌萌 于钦浩 乔传玲 陈化兰 《中国农业科学》 北大核心 2025年第10期2035-2044,共10页
【目的】A型流感病毒通过适应性突变跨越种间屏障,感染包括人类在内的多种哺乳动物,对全球公共卫生构成持续威胁。基于细胞传代培养鉴定流感病毒发生的适应性突变,并对突变氨基酸的功能进行分析,为流感的监测和防控提供理论指导。【方... 【目的】A型流感病毒通过适应性突变跨越种间屏障,感染包括人类在内的多种哺乳动物,对全球公共卫生构成持续威胁。基于细胞传代培养鉴定流感病毒发生的适应性突变,并对突变氨基酸的功能进行分析,为流感的监测和防控提供理论指导。【方法】将一株欧亚类禽H1N1猪流感病毒(EA H1N1 SIV)(A/swine/Zhejiang/199/2013,简称ZJ199)在MDCK细胞中传代培养,测序发现病毒在第3代发生适应性突变,并将其命名为ZJ199-P3。之后比较ZJ199与ZJ199-P3病毒在体内外的复制能力和对小鼠的感染性。建立ZJ199的反向遗传系统,并以rZJ199为骨架拯救分别含有单点突变的重组病毒,测定亲本病毒和单点突变重组病毒在体外的复制能力,确定影响病毒复制的关键氨基酸位点;通过测定病毒聚合酶活性、神经氨酸酶活性以及ISRE和NF-κB报告基因活性,确定病毒适应性突变对病毒生物学活性的影响。【结果】分析比较ZJ199与ZJ199-P3病毒的氨基酸序列,结果发现ZJ199-P3病毒在NP、NA和NS2蛋白分别含有A234T、S21G和M100I突变。测定ZJ199-P3病毒在体内外的复制能力,结果与ZJ199病毒相比,ZJ199-P3病毒在体内外的复制能力均下降。利用反向遗传技术,分别拯救了病毒rZJ99及单点突变病毒rZJ199-NA-S21G、rZJ199-NP-A234T和rZJ199-NS2-M100I;体外复制能力测定结果显示与rZJ199病毒相比,NP蛋白A234T突变导致rZJ199-NP-A234T病毒复制能力下降,而NA蛋白S21G和NS2蛋白M100I突变对病毒的复制能力无明显影响。进一步研究发现,NP蛋白A234T突变导致病毒聚合酶活性下降;NA蛋白S21G突变导致病毒神经氨酸酶活性下降;NS2蛋白M100I突变减弱了对ISRE和NF-κB报告基因活性的抑制作用。【结论】通过在细胞上的传代培养,鉴定了EA H1N1 SIV的3个适应性突变氨基酸,发现NP蛋白A234T突变通过降低病毒聚合酶活性,使得病毒的体外复制能力下降;NA蛋白S21G突变和NS2蛋白M100I突变均影响病毒的生物学活性。以上突变氨基酸的发现,提示我们需进一步加强流感病毒的监测,为流感的防控提供科学依据。 展开更多
关键词 h1N1 猪流感病毒 复制 适应性突变
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莫诺拉韦在体外/体内抗H1N1流行性感冒病毒感染特点的研究 被引量：1
10
作者 冯茜莉 王进千 +3 位作者 杨宣叶 胡欣妍 丁玉林 马晓霞 《中国感染控制杂志》 北大核心 2025年第4期478-485,共8页
目的分析莫诺拉韦在体内和体外对流行性感冒(流感)病毒的抗病毒效果。方法检测莫诺拉韦对流感病毒H1N1 PR8毒株在体外和体内的抗病毒能力。以人源非小细胞肺癌细胞系(A549细胞)作为PR8感染的体外模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-... 目的分析莫诺拉韦在体内和体外对流行性感冒(流感)病毒的抗病毒效果。方法检测莫诺拉韦对流感病毒H1N1 PR8毒株在体外和体内的抗病毒能力。以人源非小细胞肺癌细胞系(A549细胞)作为PR8感染的体外模型,采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、免疫印迹试验(WB)、噬斑的方法,分析莫诺拉韦体外对病毒复制、蛋白合成及病毒颗粒形成方面的抗病毒效果。以PR8滴鼻感染C57BL/6雌性小鼠为体内感染模型,分别从病毒载量、病理变化及免疫组化方面,对对照组、给药组、接毒组和接毒-给药组进行检测,以评估莫诺拉韦的抗病毒能力。结果体外试验结果显示,莫诺拉韦对流感病毒的复制、蛋白合成及病毒颗粒形成没有明显抑制作用(均P>0.05)。小鼠体内试验结果显示,与单纯感染H1N1小鼠相比,接受莫诺拉韦治疗的小鼠肺组织病毒载量明显下降,病理变化程度较轻,免疫组化检测显示核蛋白(NP)抗原信号明显减弱,干扰素(IFN)-α、白细胞介素(IL)-4和IL-6在肺中的表达水平较低(均P<0.01)。结论作为具有抗病毒活性的前体物,莫诺拉韦无法在体外培养的肺源细胞中发挥抗病毒活力,但可以在宿主体内转化为活性形式,显著降低H1N1流感病毒在肺增殖的能力,进而减轻病毒对肺组织的损伤。 展开更多
关键词 莫诺拉韦 流行性感冒 抗病毒 感染模型 病理变化 h1N1
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积雪草苷调控PIK3C3/DYNC2H1/TUB减轻转化生长因子-β1诱导的心肌成纤维细胞活化 被引量：1
11
作者 曹策 杨丽丽 +4 位作者 宋鉴书 刘子馨 李磊 付建华 刘建勋 《中草药》 北大核心 2025年第14期5108-5118,共11页
目的探究积雪草苷抑制转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的心肌成纤维细胞活化的作用机制。方法采用TGF-β1诱导建立心肌成纤维细胞活化模型,给予积雪草苷处理后,采用CCK-8法检测积雪草苷对TGF-β1诱导的... 目的探究积雪草苷抑制转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)诱导的心肌成纤维细胞活化的作用机制。方法采用TGF-β1诱导建立心肌成纤维细胞活化模型,给予积雪草苷处理后,采用CCK-8法检测积雪草苷对TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞活力的影响;采用免疫荧光检测积雪草苷对TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞活化的影响;采用划痕实验检测积雪草苷对TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞迁移能力的影响。通过GEO数据库筛选纤维化相关转录组数据,对差异表达基因进行基因本体(gene ontology,GO)功能及京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)通路富集分析,采用分子对接和分子动力学模拟检测积雪草苷与核心靶点的结合能力。通过q RT-PCR检测积雪草苷对核心靶点m RNA表达的影响,采用ELISA试剂盒检测积雪草苷对TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞上清液中软骨寡聚蛋白(cartilage oligomeric protein,COMP)和甘露糖结合凝集素2(mannose-binding lectin 2,MBL2)水平的影响。结果积雪草苷显著抑制TGF-β1诱导的心肌成纤维细胞活化(P<0.05、0.01),并提高细胞迁移能力(P<0.01)。GEO数据库筛选出542个差异表达基因,主要影响MHCⅡ类蛋白复合物结合、浓缩染色体、超分子纤维组织等生物功能和吞噬体、细胞黏附分子、哮喘等信号通路。分子对接结果显示,积雪草苷与吞噬体通路中的磷脂酰肌醇3-激酶催化亚基3(phosphatidylinositol 3-kinase catalytic subunit 3,PIK3C3)、动力蛋白细胞质2重链1(dynein cytoplasmic 2 heavy chain 1,DYNC2H1)、微管蛋白(tubulin,TUB)结合密切。分子动力学模拟结果显示,积雪草苷可以促进PIK3C3的结构稳定。q RTPCR结果显示,积雪草苷显著下调PIK3C3、DYNC2H1、TUB的m RNA表达(P<0.01)。ELISA结果显示,积雪草苷显著降低COMP和MBL2的释放(P<0.01)。结论积雪草苷可以通过抑制PIK3C3、DYNC2H1、TUB的表达,抑制吞噬体的形成,进而减少COMP、MBL2等促纤维化因子的释放,降低心肌成纤维细胞活化,减轻TGF-β1诱导的细胞损伤。 展开更多
关键词 积雪草苷 心肌成纤维细胞 转化生长因子-Β1 纤维化 吞噬体 PIK3C3 DYNC2h1 TUB
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无偿献血者接种甲型H1N1流感疫苗效果的初步评价 被引量：6
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作者 车嘉琳 梁兵 +3 位作者 王德文 师玲玲 陈少彬 刘赴平 《中国输血杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期171-173,共3页
目的初步评价无偿献血者接种甲型H1N1型流感(简称甲流)疫苗的效果,为临床采集、储备甲流抗体血浆提供依据。方法对2010年1月—2010年2月的1027名东莞市无偿献血者分为甲流疫苗接种组(n=899)和对照组(n=128),应用ELISA法检测2组的人H1N1... 目的初步评价无偿献血者接种甲型H1N1型流感(简称甲流)疫苗的效果,为临床采集、储备甲流抗体血浆提供依据。方法对2010年1月—2010年2月的1027名东莞市无偿献血者分为甲流疫苗接种组(n=899)和对照组(n=128),应用ELISA法检测2组的人H1N1IgG抗体,并对检测结果进行统计分析。结果抗-H1N1阳性率:甲流疫苗接种组为77.53%(697/899),对照组为15.63%(20/128),2组比较具统计学意义(χ2=203.76,P<0.01);抗-H1N1阳性结果S/CO值,甲流疫苗接种组为1.27±0.18,对照组为1.08±0.07(t=4.71,P<0.01);甲流疫苗接种者中,接种时间71—80d组的抗-H1N1阳性率、S/CO值均高于接种时间小于70d的各组。在甲流疫苗接种组中37例自诉有接种副反应,占4.12%,但无严重副反应。结论无偿献血者接种甲流疫苗安全且能有效产生抗-H1N1IgG,建议在接种疫苗70d后采集甲流抗体血浆。 展开更多
关键词 甲型流感(h1N1) 无偿献血者 h1N1疫苗 抗-h1N1 献血者免疫 血液安全
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miR-23a过表达调控C3H10T1/2细胞成软骨分化与肥大分化的作用研究
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作者 闫继红 高函微 于睿 《实用骨科杂志》 2025年第7期609-614,共6页
目的本研究探索过表达微小RNA-23a(miR-23a)在小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2细胞成软骨分化和肥大分化中的作用,为利用干细胞治疗骨关节炎和软骨损伤修复提供新的思路。方法构建过表达miR-23a慢病毒载体并感染C3H10T1/2细胞(miR-23a组)... 目的本研究探索过表达微小RNA-23a(miR-23a)在小鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2细胞成软骨分化和肥大分化中的作用,为利用干细胞治疗骨关节炎和软骨损伤修复提供新的思路。方法构建过表达miR-23a慢病毒载体并感染C3H10T1/2细胞(miR-23a组),感染miR-NC作为对照组(miR-NC组)。采用转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β3诱导不同感染组的C3H10T1/2细胞成软骨分化。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(real time-quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)法、蛋白质免疫印迹法(western blot)、番红O染色和免疫组织化学染色检测C3H10T1/2细胞成软骨分化过程中软骨标志物SRY-盒转录因子9(SRY-related high mobility group-box gene 9,SOX9)、聚集蛋白聚糖(aggrecan,ACAN)、Ⅱ型胶原蛋白alpha-1链(collagen typeⅡalpha 1 chain,COL2A1)及肥大标志物X型胶原蛋白α链[collagen alpha-1(X)chain,COL10A1]蛋白的表达。结果在诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化早期14 d内,miR-23a的表达持续升高(P<0.05),且在第10天达到顶峰。在诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化过程中,miR-23a组软骨标志物表达高于miR-NC组(P<0.05),而肥大标志物表达低于miR-NC组(P<0.05)。进一步研究发现过表达miR-23a后,Runt相关转录因子2(Runt related transcription factor 2,Runx2)表达降低。结论miR-23a在C3H10T1/2细胞成软骨分化早期高表达。过表达miR-23a促进其成软骨分化并抑制肥大分化,其机制可能通过抑制肥大化转录因子Runx2而抑制其肥大分化。 展开更多
关键词 微小RNA-23a C3h10T1/2细胞 成软骨分化 肥大分化
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欧亚类禽H1N1亚型猪流感全病毒灭活疫苗的免疫保护效力评价
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作者 陈荣琳 邢燕茹 +13 位作者 王娟 李健楠 高硕磊 刘清艳 祝宇翔 周艳君 单同领 童武 郑浩 刘长龙 姜一峰 孔宁 童光志 于海 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期35-42,共8页
本研究以Madin-Darby犬肾(MDCK)细胞作为培养基质扩增猪流感病毒,并选择甲醛和β-丙内酯(BPL)两种化学灭活剂对病毒灭活。这两种灭活试剂最佳灭活条件为0.1%甲醛终浓度及37℃灭活24 h,以及0.02%BPL终浓度及4℃灭活18 h,灭活后抗原血凝... 本研究以Madin-Darby犬肾(MDCK)细胞作为培养基质扩增猪流感病毒,并选择甲醛和β-丙内酯(BPL)两种化学灭活剂对病毒灭活。这两种灭活试剂最佳灭活条件为0.1%甲醛终浓度及37℃灭活24 h,以及0.02%BPL终浓度及4℃灭活18 h,灭活后抗原血凝效价比原始病毒低1个滴度左右。在不同灭活剂基础上分别配伍油佐剂ISA 201 VG和水佐剂HA 208乳化,在BALB/c小鼠上对灭活疫苗进行免疫评估及攻毒保护评价,攻毒使用剂量为1×10~6 TCID50/只。甲醛灭活苗相比BPL灭活苗更能刺激小鼠产生高水平的HI抗体,佐剂选用油佐剂ISA 201 VG相比水佐剂HA 208所产生的HI抗体效价更高。攻毒后疫苗免疫组的存活率均达到100%,与对照组相比免疫组肺脏样品中病毒含量明显减少。据以上试验结果,初步认为甲醛+ISA 201 VG佐剂灭活苗对BALB/c小鼠所产生的免疫效果最佳并能较好地抵抗欧亚类禽猪流感病毒的攻击。以上研究结果为后续猪流感全病毒灭活疫苗的设计以及病毒灭活生产工艺提供了一定的研究基础。 展开更多
关键词 欧亚类禽h1N1 甲醛 BPL 全病毒灭活疫苗 免疫效力评价
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肺炎支原体和流感病毒H1N1共感染动物模型实验研究
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作者 马骏驰 靳玮华 +9 位作者 李艳艳 解学谦 李艾亦 杨凤梅 段素琴 唐洁 李明学 吴雅楠 和占龙 赵远 《中国实验动物学报》 北大核心 2025年第12期1772-1783,共12页
目的建立肺炎支原体和流感病毒H1N1共感染动物模型。旨在阐明两种病原体共感染的协同致病机制,为呼吸道混合感染的临床干预提供理论基础。方法将24只叙利亚仓鼠分为对照(C)组、感染组(流感病毒H1N1单独感染(Flu)组、肺炎支原体单独感染(... 目的建立肺炎支原体和流感病毒H1N1共感染动物模型。旨在阐明两种病原体共感染的协同致病机制,为呼吸道混合感染的临床干预提供理论基础。方法将24只叙利亚仓鼠分为对照(C)组、感染组(流感病毒H1N1单独感染(Flu)组、肺炎支原体单独感染(MP)组、流感病毒H1N1和肺炎支原体共感染(F+M)组),采用滴鼻和气管注射的方式攻毒。记录14 d临床指标,检测生理指标以及排毒情况,感染后7和14 dpi选取动物进行组织病理学和病毒抗原与核酸检测。结果Flu组、MP组和F+M组的叙利亚仓鼠均出现类似人类流感或肺炎支原体感染的临床症状;在鼻拭子、咽拭子、肛拭子、血液和组织中均能检测到两种病原体的核酸;组织病理结果显示,感染组的不同部位均出现不同程度的病理损伤。结论从临床症状、病毒复制以及病理表现等结果表明成功构建了肺炎支原体和流感病毒H1N1共感染叙利亚仓鼠的动物模型,该模型可以为阐明呼吸道共感染机制及开展疫苗和药物研究、临床治疗策略提供了重要实验基础。 展开更多
关键词 叙利亚仓鼠 呼吸道传染疾病 肺炎支原体 流感病毒h1N1 动物模型
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山茱萸CoG10H1基因的克隆和表达分析
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作者 原梦 谭新杰 +7 位作者 邓萍 王盼盼 许家齐 李文文 李义龙 吕淑芳 王玉龙 侯典云 《中草药》 北大核心 2025年第11期4036-4042,共7页
目的克隆山茱萸Cornus officinalis G10H1基因(CoG10H1),并进行相关的生物信息学分析、表达分析和亚细胞定位研究。方法基于山茱萸转录组数据筛选并克隆CoG10H1基因,并对其CoG10H1及其编码蛋白的理化性质、二级结构、三级结构等进行分... 目的克隆山茱萸Cornus officinalis G10H1基因(CoG10H1),并进行相关的生物信息学分析、表达分析和亚细胞定位研究。方法基于山茱萸转录组数据筛选并克隆CoG10H1基因,并对其CoG10H1及其编码蛋白的理化性质、二级结构、三级结构等进行分析。利用实时荧光定量聚合酶链式反应PCR(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,qRT-PCR)对CoG10H1进行组织特异性表达分析。构建pCAMBIA1300-CoG10H1-GFP融合表达载体并侵染烟草叶片,激光共聚焦显微镜观察CoG10H1蛋白的亚细胞定位。结果CoG10H1的c DNA长度为1497 bp,编码499个氨基酸,有1个信号肽,在茎中表达量稍高,果实和叶片中次之,激光共聚焦显微镜下观察到CoG10H1蛋白定位于内质网中。结论CoG10H1蛋白属于细胞色素P450蛋白家族,可能在马钱苷合成通路中的发挥关键作用,为后续研究CoG10H1基因在马钱苷合成通路调控中的作用研究提供参考。 展开更多
关键词 山茱萸 CoG10h1 生物信息学 亚细胞定位 实时荧光定量PCR
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血清CRP、SAA、IL-6水平联合检测对甲型H1N1流感的诊断价值 被引量：1
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作者 赵静 杜豪伟 杨翠 《淮海医药》 2025年第1期5-8,共4页
目的:探究甲型H1N1流感患者血清C-反应蛋白(CRP)、淀粉酶A蛋白(SAA)、白细胞介素-6(IL-6)水平并分析其对甲型H1N1流感的诊断价值。方法:选取2020年6月—2023年6月某院收治的102例甲型H1N1流感患儿为甲流组,乙型流感病毒患儿102例为乙流... 目的:探究甲型H1N1流感患者血清C-反应蛋白(CRP)、淀粉酶A蛋白(SAA)、白细胞介素-6(IL-6)水平并分析其对甲型H1N1流感的诊断价值。方法:选取2020年6月—2023年6月某院收治的102例甲型H1N1流感患儿为甲流组,乙型流感病毒患儿102例为乙流组,另选取同期健康志愿者34例为对照组。比较3组血清CRP、SAA、IL-6水平及实验室指标,依据病情严重程度将甲流组分为轻症者76例、重症者26例,比较其血清CRP、SAA、IL-6水平,分析血清CRP、SAA、IL-6水平与实验室指标、病情严重程度相关性,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析各血清指标对甲型H1N1流感的诊断价值。结果:甲流组血清CRP、SAA、IL-6水平分别为(5.62±1.47)mg/L、(43.26±11.42)mg/L、(15.96±4.32)ng/mL,高于乙流组的(4.11±1.30)mg/L、(36.57±11.19)mg/L、(12.24±3.08)ng/mL和对照组的(2.18±0.70)mg/L、(12.52±4.08)mg/L、(6.85±2.18)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。重症者血清CRP、SAA、IL-6水平分别为(8.16±2.52)mg/L、(52.32±11.44)mg/L、(24.55±6.18)ng/mL,高于轻症者的(4.75±1.38)mg/L、(40.16±10.38)mg/L、(13.02±3.34)ng/mL,差异有统计学意义(P<0.05)。血清CRP、SAA、IL-6水平与中性粒细胞百分比呈负相关,与单核细胞百分比、病情严重程度呈正相关(P<0.05);血清CRP、SAA、IL-6水平单项及联合诊断甲型H1N1流感的AUC值分别为0.761、0.746、0.780、0.932。结论:甲型H1N1流感患儿血清CRP、SAA、IL-6水平升高,且与病情严重程度呈正相关,联合检测对甲型H1N1流感具有一定诊断价值。 展开更多
关键词 甲型h1N1流感 C-反应蛋白 淀粉酶A蛋白 白细胞介素-6 诊断价值
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云南省第4例人感染欧亚类禽H1N1亚型猪流感病毒分子流行病学调查 被引量：1
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作者 孙艳红 陈瑶瑶 +3 位作者 周洁楠 张美玲 刘照生 赵晓南 《昆明医科大学学报》 2025年第4期20-28,共9页
目的对2022年云南省境内发现的1例(全省第4例)欧亚类禽猪流感病例进行分子流行病学调查,掌握其基因特征,揭示该新亚型欧亚类禽猪流感病毒对人类健康的潜在影响。方法使用实时荧光定量PCR检测技术对病例的咽拭子标本、密切接触者和居住... 目的对2022年云南省境内发现的1例(全省第4例)欧亚类禽猪流感病例进行分子流行病学调查,掌握其基因特征,揭示该新亚型欧亚类禽猪流感病毒对人类健康的潜在影响。方法使用实时荧光定量PCR检测技术对病例的咽拭子标本、密切接触者和居住环境标本进行核酸检测。使用MDCK细胞进行阳性标本病毒分离,使用豚鼠血红细胞凝集实验和实时荧光定量RT-PCR方法对细胞培养物进行鉴定。通过Illumina Miseq二代基因测序平台进行全基因组测序,使用MEGA7.0软件构建系统发育树并分析其基因分子特征。结果成功分离云南省首例G5基因型欧亚类禽猪流感病毒,并获得该病毒全基因组序列。该病毒具有在哺乳动物的适应性或毒力、传播性增强的相关分子特征,与江苏分离的一株猪源毒株序列具有99.2%~99.7%的核苷酸一致性。该病毒在人群中传播的风险进一步增加。结论加强猪流感监测工作对于预防可感染人类的新型流感病毒亚型具有重要意义。 展开更多
关键词 欧亚类禽h1NI猪流感 二代测序 系统发育分析 氨基酸特征
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上感颗粒对H1N1流感病毒感染小鼠免疫功能及JAK2/STAT3信号通路的影响 被引量：3
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作者 郭志洪 李修元 +3 位作者 张梦楠 刘林洁 杨峰 敖素华 《中成药》 北大核心 2025年第2期606-611,共6页
目的观察上感颗粒对甲型H1N1流感病毒感染小鼠肺部炎症反应的作用。方法42只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、奥司他韦组(1.25 mg/kg)和上感颗粒低、中、高剂量组(4、8、12 g/kg),鼻腔接种H1N1流感病毒建立流感病毒肺部感染小... 目的观察上感颗粒对甲型H1N1流感病毒感染小鼠肺部炎症反应的作用。方法42只雄性C57BL/6小鼠随机分为正常组、模型组、奥司他韦组(1.25 mg/kg)和上感颗粒低、中、高剂量组(4、8、12 g/kg),鼻腔接种H1N1流感病毒建立流感病毒肺部感染小鼠模型,给药干预7 d。记录小鼠的死亡情况,检测肺组织含水量,HE染色观察肺组织病理变化,透射电镜观察肺组织超微结构损伤,ELISA法检测肺组织IL-4、IFN-γ、CCL3、CCL25、CXCL-10水平,流式细胞术检测外周血CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)T细胞数,RT-qPCR和Western blot法检测肺组织JAK2、STAT mRNA和蛋白表达。结果与模型组比较,上感颗粒各剂量组小鼠肺组织含水量降低(P<0.01),肺泡灌洗液病毒滴度降低(P<0.01),肺组织损伤减轻,肺组织IL-4水平升高(P<0.05,P<0.01),IFN-γ、CCL3、CCL25、CXCL-10水平降低(P<0.05,P<0.01),外周血CD3^(+)、CD4^(+)T细胞数量和CD4^(+)/CD8^(+)比值均降低(P<0.01),肺组织JAK2、STAT 3 mRNA和p-JAK2、p-STAT3蛋白表达均降低(P<0.05,P<0.01)。结论上感颗粒可以通过调节T细胞免疫和相关炎症因子的表达,增强流感病毒感染小鼠免疫能力和减轻流感病毒感染小鼠的肺组织损伤,其机制可能与下调JAK2/STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 上感颗粒 h1N1流感病毒 炎症反应 细胞免疫 JAK2/STAT信号通路
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鼻用糖皮质激素联合口服H1抗组胺药治疗过敏性鼻炎有效性与安全性的Meta分析
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作者 陈华娇 骆小华 +1 位作者 熊琼 杨柳 《中国药房》 北大核心 2025年第23期2985-2989,共5页
目的评价鼻用糖皮质激素(INCS)联合口服H1抗组胺药(AH)治疗过敏性鼻炎的有效性和安全性。方法检索PubMed、Embase、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库等,收集INCS联合口服AH(试验组)对比INCS(对照组)治疗过敏性鼻炎的随机对照试验... 目的评价鼻用糖皮质激素(INCS)联合口服H1抗组胺药(AH)治疗过敏性鼻炎的有效性和安全性。方法检索PubMed、Embase、中国期刊全文数据库、中文科技期刊数据库等,收集INCS联合口服AH(试验组)对比INCS(对照组)治疗过敏性鼻炎的随机对照试验(RCT),检索时限为建库起至2024年12月31日。筛选文献、提取资料、评价文献质量后,采用RevMan 5.3软件进行Meta分析。结果共纳入12项RCT,共计1842例患者。Meta分析结果显示,与对照组比较,试验组患者的喷嚏评分、流涕评分、鼻塞评分、鼻痒评分、鼻部症状总评分、眼部症状总评分、鼻结膜炎生活质量调查问卷评分的下降幅度更大(P<0.05);试验组患者的头痛发生率较对照组更低(P<0.05),但两组患者的鼻出血、口鼻干燥、嗜睡、乏力的发生率及总不良事件发生率比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论与单用INCS比较,INCS联合口服AH治疗过敏性鼻炎的疗效和安全性均较好。 展开更多
关键词 过敏性鼻炎 糖皮质激素 h1抗组胺药 口服给药 鼻部给药 META分析 疗效 安全性
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