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凝集素Q-Griffithsin的克隆表达及其对猪流行性腹泻病毒的抑制作用 被引量：1
1
作者 周炫汝 刘子岚 +5 位作者 林起鑫 梅朋 蔡淑铭 姜文亿 吴异健 刘萍 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第5期632-639,共8页
为探究抗氧化衍生物Q-Griffithsin(Q-GRFT)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的抑制作用,构建重组表达质粒pGEX-4T-Q-GRFT,并在原核表达体系中表达重组蛋白Q-GRFT。随后利用镍离子亲和层析技术纯化目标蛋白,并验证其浓缩后蛋白的特异性。通过体... 为探究抗氧化衍生物Q-Griffithsin(Q-GRFT)对猪流行性腹泻病毒(PEDV)的抑制作用,构建重组表达质粒pGEX-4T-Q-GRFT,并在原核表达体系中表达重组蛋白Q-GRFT。随后利用镍离子亲和层析技术纯化目标蛋白,并验证其浓缩后蛋白的特异性。通过体外试验进一步证实其抗PEDV作用。结果表明,pGEX-4T-Q-GRFT转化至感受态细胞中,在22℃下诱导14 h后,表达出与预期大小一致的Q-GRFT蛋白,纯化效率为3.01 mg/L。在细胞水平上,Q-GRFT显著减轻了PEDV感染引发的细胞病变,抑制了PEDV在细胞中的复制,且其抗病毒效果呈质量浓度依赖性。综上所述,成功制备了具有抗PEDV活性的重组蛋白Q-GRFT,为抗动物冠状病毒药物的研发提供了理论依据,并为PEDV的防治提供了新的策略。 展开更多
关键词 Q-griffithsin 猪流行性腹泻病毒 蛋白表达 抗病毒活性
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凝集素Griffithsin抗冠状病毒作用的研究进展
2
作者 梅朋 黄晓紫 +3 位作者 周炫汝 崔红杰 吴异健 刘萍 《动物医学进展》 北大核心 2025年第6期97-104,共8页
冠状病毒(CoVs)因其对人类和动物健康造成的严重威胁而广受关注。凝集素格瑞弗森(GRFT)在冠状病毒感染防控中显示出优良的抗病毒作用,已成为研究热点。论文重点剖析了冠状病毒囊膜蛋白的糖基化修饰特征、GRFT结构及其抗病毒机制,总结了G... 冠状病毒(CoVs)因其对人类和动物健康造成的严重威胁而广受关注。凝集素格瑞弗森(GRFT)在冠状病毒感染防控中显示出优良的抗病毒作用,已成为研究热点。论文重点剖析了冠状病毒囊膜蛋白的糖基化修饰特征、GRFT结构及其抗病毒机制,总结了GRFT抗人类和动物冠状病毒的研究进展,并分析GRFT作为潜在抗冠状病毒药物的优势与面临的挑战。未来可通过多种抗病毒成分联合应用和优化GRFT递送系统,进一步提升其在人类临床和兽医领域中的应用潜力。此外,结合基因编辑技术,有望降低GRFT生产成本并提高其治疗效果,为防控人类和动物冠状病毒性疫病提供新的策略。 展开更多
关键词 格瑞弗森 冠状病毒 刺突蛋白 糖基化修饰 抗病毒感染
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新型抗HIV-1蛋白GRFT的构建、表达及活性研究 被引量：4
3
作者 李昌 李霄 +7 位作者 刘玉生 于芳 韩佳丽 胡博 叶明 王婧 杜寿文 金宁一 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2011年第1期95-99,共5页
根据已知的新型抗HIV-1蛋白Griffithsin(GRFT)基因氨基酸序列,推测其DNA编码序列,对密码子优化及修饰后进行全基因化学合成,连接到原核表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,获得目的蛋白.SDS-PAGE和Western Blot分... 根据已知的新型抗HIV-1蛋白Griffithsin(GRFT)基因氨基酸序列,推测其DNA编码序列,对密码子优化及修饰后进行全基因化学合成,连接到原核表达载体pET28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,获得目的蛋白.SDS-PAGE和Western Blot分析结果表明,目的蛋白得到良好表达并具有抗原活性.对表达条件进行了优化,在最佳表达条件下,目的蛋白的表达量可占菌体总蛋白的55.84%.利用Ni2+-NTA柱亲和层析法进行目的蛋白的复性和纯化,凝胶成像系统扫描分析表明,其纯度可达94.06%.运用Dot-ELISA法进行复性蛋白的抗原结合活性检测发现,目的蛋白可与HIV-1膜蛋白抗原特异性结合,初步证明所表达的重组蛋白具有良好的体外结合活性.基于制备的能够表达HIV-1 gp120基因的靶细胞模型,运用IFA法开展目的蛋白的细胞结合活性研究,结果发现,目的蛋白能够与靶细胞发生特异性反应,表明成功制备了具有生物活性的新型抗HIV-1蛋白GRFT,为进一步研制新型抗HIV-1基因工程药物及其靶向治疗制剂奠定了基础. 展开更多
关键词 HIV-1 抗病毒蛋白 GRFT 表达 生物活性
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重组海藻凝集素通过诱导细胞凋亡与自噬抑制宫颈癌细胞增殖
4
作者 陈思琦 朱漪涵 +3 位作者 义塘苇 曹国梅 代益 刘文权 《生物化工》 2021年第6期8-13,共6页
目的:探究重组海藻凝集素rGRFT是否具有抗肿瘤活性,并进一步阐明rGRFT的抗癌分子机制。方法:通过"GRFT-linker-GRFT"的形式构建重组GRFT(rGRFT)蛋白,在宫颈癌HeLa细胞、乳腺癌MCF-7细胞、胰腺癌PANC-1细胞和肝癌HepG2细胞分... 目的:探究重组海藻凝集素rGRFT是否具有抗肿瘤活性,并进一步阐明rGRFT的抗癌分子机制。方法:通过"GRFT-linker-GRFT"的形式构建重组GRFT(rGRFT)蛋白,在宫颈癌HeLa细胞、乳腺癌MCF-7细胞、胰腺癌PANC-1细胞和肝癌HepG2细胞分别进行rGRFT的抗肿瘤实验及机制研究。结果:rGRFT对HeLa细胞的增殖抑制作用明显高于其他癌细胞,对人包皮成纤维细胞(HFF)无细胞毒性,且通过诱导HeLa细胞凋亡和自噬发挥抗宫颈癌活性。结论:rGRFT具有抑制宫颈癌HeLa细胞增殖的功能,有望在未来的临床治疗中作为一种新的安全有效的抗宫颈癌药物。 展开更多
关键词 重组海藻凝集素(rGRFT) 宫颈癌 抗肿瘤 凋亡 自噬
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