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GPRC6A过表达前列腺癌细胞株构建及EMT相关研究 被引量：4
1
作者 盛彬 杨帆 +5 位作者 孙心旖 陈瑶 李莉 杨建一 杜圣家 刘铭 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期18-26,共9页
目的:构建GPRC6A基因过表达的前列腺癌LncapC4-2细胞株,检测细胞迁移和侵袭能力改变及EMT相关基因表达,为研究GPRC6A介导的EMT在前列腺癌发生发展过程中的作用奠定基础。方法:构建过表达GPRC6A的慢病毒载体pCDH-GPRC6A,人胚肾293T细胞... 目的:构建GPRC6A基因过表达的前列腺癌LncapC4-2细胞株,检测细胞迁移和侵袭能力改变及EMT相关基因表达,为研究GPRC6A介导的EMT在前列腺癌发生发展过程中的作用奠定基础。方法:构建过表达GPRC6A的慢病毒载体pCDH-GPRC6A,人胚肾293T细胞包被病毒并感染Lncap C4-2细胞株,Puromycin筛选获得稳定过表达GPRC6A的细胞株。RT-PCR和Western blot验证细胞GPRC6A的过表达情况。划痕和transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,qPCR检测EMT相关基因表达。结果:成功构建GPRC6A表达的慢病毒载体,RT-PCR和Western blot检测LncapC4-2 GPRC6A过表达细胞株中GPRC6A的mRNA和蛋白质表达增高,与对照相比较,在过表达GPRC6A的LncapC4-2细胞中,细胞迁移和侵袭能力增强,并且EMT相关基因E-cadherin表达降低而SNAIL表达增高。结论:成功构建过表达的GPRC6A的前列腺癌细胞株,肿瘤细胞中的GPRC6A可能通过增强细胞迁移和侵袭能力并促进细胞EMT而参与前列腺癌发生发展过程。 展开更多
关键词 gprc6a 前列腺癌 上皮间质转化
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原位杂交研究GPRC6AmRNA在小鼠组织中的分布规律
2
作者 罗俊铭 刘昭前 +1 位作者 刘景诗 Chin Y.Eugene 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期1-10,共10页
目的:探讨G蛋白偶联受体C组6A(Gprotein-coupled receptor family C,group6,subtype A,GPRC6A)mRNA在小鼠体内的分布规律。方法:比较传统和TSA信号放大系统分析石蜡包埋的小鼠组织中GPRC6A mRNA的分布情况。为了确保信号特异性,将GPRC6... 目的:探讨G蛋白偶联受体C组6A(Gprotein-coupled receptor family C,group6,subtype A,GPRC6A)mRNA在小鼠体内的分布规律。方法:比较传统和TSA信号放大系统分析石蜡包埋的小鼠组织中GPRC6A mRNA的分布情况。为了确保信号特异性,将GPRC6A基因剔除小鼠组织放在同一张切片上作阴性对照。结果:建立了一种用非同位素标记的互补RNA探针原位杂交检测石蜡包埋的小鼠组织中低表达GPRC6A mRNA的方法。TSA信号放大系统明显提高原位杂交检测该受体的敏感性。GPRC6A基因剔除小鼠组织中没有可测信号。GPRC6A mRNA至少在消化腺、副消化腺中表达,同时也在肾、睾丸、子宫、脑、肌肉脂肪中有表达。结论:GPRC6A mRNA的分布模式与GPRC6A基因剔除小鼠的基因表型基本一致。 展开更多
关键词 gprc6a MRNA 小鼠 分布模式 TSA信号放大系统 原位杂交
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GPRC6A及其糖稳态调节作用研究进展 被引量：2
3
作者 杜婧 包玉倩 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期128-131,共4页
G蛋白耦联受体C家族6组A(GPRC6A)是近年来新发现的一种G蛋白耦联受体,可与多种配体如钙离子、碱性氨基酸、骨钙素、睾酮等结合发挥生理作用,并参与机体的糖稳态调节。GPRC6A缺失可能引起糖代谢失衡。深入研究GPRC6A及其糖稳态调节作用... G蛋白耦联受体C家族6组A(GPRC6A)是近年来新发现的一种G蛋白耦联受体,可与多种配体如钙离子、碱性氨基酸、骨钙素、睾酮等结合发挥生理作用,并参与机体的糖稳态调节。GPRC6A缺失可能引起糖代谢失衡。深入研究GPRC6A及其糖稳态调节作用可能为糖尿病提供一个新的药物治疗靶点。 展开更多
关键词 gprc6a 糖稳态 G蛋白耦联受体 骨钙素
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抑制Gprc6a基因对染氟睾丸间质细胞睾酮生成功能的影响
4
作者 赵雨欣 赵嘉乐 +4 位作者 陈邬锦 李秀梅 许彭 秦培钢 白生宾 《解放军医学院学报》 CAS 2024年第10期1048-1053,共6页
背景 氟化物从多种途径诱导异常成骨细胞活化,促进骨钙素(osteocalcin,OCN)表达,过量氟会降低睾丸间质细胞中睾酮的产生,睾丸间质细胞中表达的骨钙素特异性受体Gprc6a与骨钙素结合能够调节睾酮的生物合成。目的 探究Gprc6a基因对NaF干... 背景 氟化物从多种途径诱导异常成骨细胞活化,促进骨钙素(osteocalcin,OCN)表达,过量氟会降低睾丸间质细胞中睾酮的产生,睾丸间质细胞中表达的骨钙素特异性受体Gprc6a与骨钙素结合能够调节睾酮的生物合成。目的 探究Gprc6a基因对NaF干预睾丸间质细胞睾酮生成的影响。方法 采用正常小鼠睾丸间质TM3细胞系和Gprc6a^(-/-)TM3细胞系,分为TM3组、Gprc6a^(-/-)TM3组、TM3 (NaF)组、Gprc6a^(-/-)TM3 (NaF)组、TM3 (NaF)+OCN组、Gprc6a^(-/-)TM3 (NaF)+OCN组,检测各组细胞活性,并在干预48 h时,以倒置荧光显微镜观察其细胞形态,荧光定量PCR检测Creb、Star、Cyp11a1和3β-HSD基因转录的表达,酶联免疫检测细胞分泌睾酮的表达。结果 MTT法检测细胞增殖活性显示Gprc6a^(-/-)TM3各实验组较TM3相应各组细胞活性减弱(P<0.05),TM3 (NaF)+OCN和Gprc6a^(-/-)TM3 (NaF)+OCN组细胞较TM3 (NaF)组细胞活性增强;荧光显微镜下观察到Gprc6a抑制仅影响TM3细胞增殖数量,不影响细胞形态,单一NaF刺激后,Gprc6a^(-/-)TM3细胞更易脱壁,部分细胞回缩明显;荧光定量PCR检测基因显示,与TM3 (NaF)组相比,Gprc6a^(-/-)TM3 (NaF)组Creb、Star、Cyp11a1基因表达下调(P=0.032);与TM3 (NaF)+OCN组相比,Gprc6a^(-/-)TM3 (NaF)+OCN组Creb、Star、Cyp11a1、3β-HSD基因表达下调(P=0.029);与Gprc6a^(-/-)TM3 (NaF)组相比,Gprc6a^(-/-)TM3 (NaF)+OCN组Star、Cyp11a1、3β-HSD基因表达上调(P=0.012);加入OCN干预后,原本被抑制的Gprc6a基因表达上调(P=0.010)。酶联免疫法检测细胞分泌睾酮表达结果显示,正常培养时,Gprc6a^(-/-)TM3组睾酮量分泌少于TM3组(P=0.004);NaF刺激后,各组细胞睾酮分泌量减少(P=0.001);NaF+OCN刺激,TM3组睾酮分泌量回升(P=0.003);Gprc6a^(-/-)TM3细胞与同种刺激的TM3组细胞相比睾酮分泌量降低(P=0.007)。结论 抑制Gprc6a基因会促进过量氟诱导的睾丸间质细胞睾酮生成减少;Gprc6a参与过量氟-骨钙素对睾丸间质细胞生成睾酮的调控。 展开更多
关键词 gprc6a 氟化钠 睾丸间质细胞 睾酮 骨钙素 氟中毒
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骨骼与性腺的交互作用及运动调控机制 被引量：2
5
作者 徐帅 李世昌 《山东体育学院学报》 CSSCI 北大核心 2018年第2期81-86,共6页
近年来骨骼作为独立的内分泌器官越来越受到研究者的认可,其分泌的骨钙素可作用于性腺,调节GPRC6A的分泌,从而影响睾酮的含量,最终改善男性生殖能力。GPRC6A又可反过来刺激骨骼的生长,促进骨健康;GPRC6A还参与骨钙素作用下的糖稳态,刺... 近年来骨骼作为独立的内分泌器官越来越受到研究者的认可,其分泌的骨钙素可作用于性腺,调节GPRC6A的分泌,从而影响睾酮的含量,最终改善男性生殖能力。GPRC6A又可反过来刺激骨骼的生长,促进骨健康;GPRC6A还参与骨钙素作用下的糖稳态,刺激胰腺中β细胞分泌胰岛素。运动干预能够增强骨内分泌功能,增加骨钙素分泌量,引起GPRC6A水平升高,睾酮水平上升。 展开更多
关键词 骨钙素 性腺 生殖能力 gprc6a 运动
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骨钙素及其受体对能量代谢的调节机制 被引量：3
6
作者 金实 赵玉岩 都健 《国际内分泌代谢杂志》 2017年第6期390-393,共4页
骨钙素主要是由成熟的成骨细胞分泌的特异性的非胶原蛋白，可分为羧化骨钙素和非羧化骨钙素。越来越多的研究显示，骨钙素除了可以调节骨基质矿化和骨形成外，还可以增加胰岛素的分泌和胰岛β细胞增殖、减少内脏脂肪、改善胰岛素抵抗，... 骨钙素主要是由成熟的成骨细胞分泌的特异性的非胶原蛋白，可分为羧化骨钙素和非羧化骨钙素。越来越多的研究显示，骨钙素除了可以调节骨基质矿化和骨形成外，还可以增加胰岛素的分泌和胰岛β细胞增殖、减少内脏脂肪、改善胰岛素抵抗，与能量代谢密切相关。G蛋白耦联受体C家族6组成员A（GPRC6A）为骨钙素的受体，参与了相关的机体生理反应。胰岛素信号通路对骨钙素合成起到了调节作用。骨钙素有望成为治疗2型糖尿病、肥胖症等代谢性疾病的新靶点。 展开更多
关键词 骨钙素 非羧化骨钙素 gprc6a 能量代谢
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