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GLPG1205介导GPR84/NLRP3调节巨噬细胞极化改善脓毒症诱导的急性肺损伤
1
作者 张慧璠 张飞燕 +1 位作者 吕洁 郭宏鹏 《解剖科学进展》 2025年第5期683-686,690,共5页
目的探究GLPG1205对脓毒症诱导的急性肺损伤的改善作用及其介导GPR84调节巨噬细胞极化发挥作用的机制。方法C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)和GLPG1205治疗组(GLPG1205组),每组10只,采用盲肠结扎穿刺(CLP)法... 目的探究GLPG1205对脓毒症诱导的急性肺损伤的改善作用及其介导GPR84调节巨噬细胞极化发挥作用的机制。方法C57BL/6小鼠随机分为假手术组(Sham组)、脓毒症模型组(CLP组)和GLPG1205治疗组(GLPG1205组),每组10只,采用盲肠结扎穿刺(CLP)法建立小鼠脓毒症模型。HE染色观察小鼠肺组织病理损伤;检测小鼠肺组织湿干重比;TUNEL染色观察小鼠肺组织细胞凋亡情况;ELISA检测小鼠血清和BALF中炎性因子水平;流式细胞术检测小鼠肺组织中M1/M2型巨噬细胞比例;RT-qPCR检测小鼠肺组织中GPR84 mRNA表达;Western blot检测肺组织中NLRP3炎症小体相关蛋白表达。结果GLPG1205治疗改善CLP小鼠肺组织病理损伤,降低肺组织湿干重比和细胞凋亡水平以及血清和BALF中IL-6、TNF-α和IL-1β水平,降低CLP小鼠肺组织中M1型巨噬细胞比例,并增加M2型巨噬细胞比例。GLPG1205治疗未能降低CLP诱导的肺组织中GPR84表达,但下调CLP小鼠肺组织中NLRP3、ASC和cleaved caspase1蛋白表达。结论GLPG1205改善CLP诱导的小鼠急性肺损伤,其机制与抑制GPR84介导的NLRP3炎症小体激活改善CLP诱导的小鼠肺组织M1/M2型巨噬细胞失衡有关。 展开更多
关键词 GLPG1205 脓毒症 急性肺损伤 巨噬细胞极化 G蛋白偶联受体84 NLRP3炎症小体 小鼠
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猪GPR84和MPEG1基因的分子克隆和表达分析 被引量：2
2
作者 王秋实 武春艳 +4 位作者 李朋 邵思宇 张姣 朱蒙 杨秀芹 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期699-705,共7页
本研究旨在克隆猪GPR84和MPEG1基因的完整编码区,对其进行序列分析,并研究它们的组织表达和诱导表达情况。以民猪为试验材料,应用RT-PCR方法克隆猪GPR84和MPEG1基因并进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR方法构建组织表达谱,分析其... 本研究旨在克隆猪GPR84和MPEG1基因的完整编码区,对其进行序列分析,并研究它们的组织表达和诱导表达情况。以民猪为试验材料,应用RT-PCR方法克隆猪GPR84和MPEG1基因并进行生物信息学分析,利用实时荧光定量PCR方法构建组织表达谱,分析其在PK15细胞内的poly(I:C)诱导表达情况。结果表明,猪GPR84(GenBank accession No.JX280456)和MPEG1(GenBank accession No.JQ907392)基因编码区全长分别为1 191和2 154bp,预期分别编码396和717个氨基酸残基的蛋白质,与人和牛相应蛋白序列的同源性均在83%以上。猪GPR84和MPEG1基因在11种组织中均有不同程度的表达,其中GPR84基因在肺中表达量最高,MPEG1基因在脾中表达量最高,二者在肌肉中的表达量均最低。在poly(I:C)的诱导下,GPR84基因的表达增强,MPEG1基因的表达则受到抑制。本研究成功地克隆了猪GPR84和MPEG1基因的全长编码区序列,并确定了它们的组织表达和诱导表达情况,为进一步揭示GPR84和MPEG1在抗病育种中的作用提供了基础。 展开更多
关键词 猪 gpr84 MPEG1 克隆 表达
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以中链脂肪酸受体GPR84为靶点的药物高通量筛选模型的建立和应用 被引量：2
3
作者 张庆 杨慧 +2 位作者 李佳 谢欣 李静 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2015年第4期337-347,共11页
G蛋白偶联受体84(GPR84)是C9-C14的中链脂肪酸受体,不仅在脂肪酸代谢和机体免疫反应中发挥着重要作用,而且与多发性硬化症、内毒素血症等炎症性免疫疾病有着密切联系.因此,找到以GPR84为靶点的配体,可能为治疗这些疾病提供一种有效的方... G蛋白偶联受体84(GPR84)是C9-C14的中链脂肪酸受体,不仅在脂肪酸代谢和机体免疫反应中发挥着重要作用,而且与多发性硬化症、内毒素血症等炎症性免疫疾病有着密切联系.因此,找到以GPR84为靶点的配体,可能为治疗这些疾病提供一种有效的方法.构建稳定过表达GPR84受体蛋白的细胞系,为筛选GPR84为靶点的配体和研究这些免疫疾病提供了重要途径.本文将含GPR84和Gα16基因质粒共转染到HEK293细胞中,经过抗生素抗性筛选,挑取稳定表达GPR84蛋白的HEK293细胞系.用RT-PCR、免疫荧光染色等实验方法检测了GPR84基因和其编码受体蛋白的表达;用钙流实验、环腺苷酸实验、蛋白质印迹分析、流式细胞分析证实了表达的GPR84具有完整的生物学活性,并利用该细胞系进行了药物高通量筛选,得到了新的GPR84拮抗剂,为进一步阐明GPR84的生物学功能,研究并治疗与其相关免疫疾病奠定了基础. 展开更多
关键词 gpr84 稳定表达 钙流实验 高通量筛选
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中链脂肪酸受体GPR84对小鼠糖脂代谢的影响 被引量：4
4
作者 方友臣 郑洋 +2 位作者 张庆 李静 谢欣 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第8期853-864,共12页
目前,全球肥胖及肥胖引发的并发症如2型糖尿病、心血管疾病等患病率呈上升趋势,并逐渐成为一个重大的公共卫生问题.与肥胖相关疾病的发病机制是由多种因素共同作用的结果,游离脂肪酸受体在其中就扮演着重要角色.G蛋白偶联受体84(GPR84)... 目前,全球肥胖及肥胖引发的并发症如2型糖尿病、心血管疾病等患病率呈上升趋势,并逐渐成为一个重大的公共卫生问题.与肥胖相关疾病的发病机制是由多种因素共同作用的结果,游离脂肪酸受体在其中就扮演着重要角色.G蛋白偶联受体84(GPR84)是中链脂肪酸(C9-C14)受体,其在糖脂代谢方面的功能尚不清楚.因此,探究中链脂肪酸受体GPR84在小鼠糖脂代谢方面的作用,具有重要意义.本文利用高脂饲料在GPR84野生型(WT)和基因敲除型(GPR84^(-/-))小鼠中诱导肥胖模型.研究发现,在常规饲料(normal chow,NC)喂养组和高脂饲料(high-fat diet,HFD)喂养组,与WT小鼠相比,GPR84^(-/-)小鼠在体重、摄食量、葡萄糖耐量、胰岛素敏感性、空腹血糖值、血清中胰岛素含量、组织器官重量、脂质合成与脂肪酸氧化、白色脂肪形成方面无显著性差异;在血脂水平,GPR84^(-/-)小鼠与WT小鼠相比,甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇无显著性差异;但是在高脂饲料喂养组,GPR84^(-/-)小鼠总胆固醇浓度显著性降低.同时,我们发现,在HFD组,与WT小鼠相比,GPR84^(-/-)小鼠肝脏中B类Ⅰ型清道夫受体表达显著上调.综上所述,中链脂肪酸受体GPR84在高脂诱导的肥胖模型中不影响小鼠糖脂代谢,但可能在由高胆固醇引起的高胆固醇血症发挥一定的功能. 展开更多
关键词 gpr84 中链脂肪酸受体 肥胖 脂类代谢 高胆固醇血症
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奶山羊中链脂肪酸受体GPR84基因的克隆及表达分析 被引量：1
5
作者 孙雨婷 罗军 +1 位作者 朱江江 孙佳慧 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第5期1970-1975,共6页
本研究旨在克隆奶山羊(Capra hircus)中链脂肪酸受体GPR84基因并分析其在不同组织及不同泌乳时期的表达情况,为进一步探讨其生理功能奠定基础。根据GenBank上已登录的牛、人、鼠等物种的GPR84基因序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR方... 本研究旨在克隆奶山羊(Capra hircus)中链脂肪酸受体GPR84基因并分析其在不同组织及不同泌乳时期的表达情况,为进一步探讨其生理功能奠定基础。根据GenBank上已登录的牛、人、鼠等物种的GPR84基因序列设计一对特异性引物,利用RT-PCR方法克隆奶山羊GPR84基因的CDS,利用实时荧光定量PCR方法分析奶山羊GPR84基因的组织表达谱。测序结果表明奶山羊GPR84基因CDS为1191 bp,编码396个氨基酸。序列同源性分析表明:奶山羊的GPR84基因核苷酸序列与牛(NM;01038568.1)、人(NM;20370.2)、鼠(NM_30720.1)的相似性分别为96%、88%和82%。实时定量分析结果表明脾脏是GPR84表达量最高的组织,然后是小肠和瘤胃组织,在皮下脂肪、肺脏、乳腺组织中的表达量相对较少,心脏组织中的表达量最少。奶山羊不同泌乳时期乳腺组织表达分析表明GPR84基因在泌乳盛期和泌乳中期的表达量显著高于其它泌乳阶段(P<0.05),而泌乳前期和后期表达量相对较少。本研究结果表明GPR84具有一定的组织表达特异性,并且GPR84可能在泌乳的乳腺组织中发挥着重要的生理作用。 展开更多
关键词 奶山羊 gpr84 克隆 组织表达
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Gpr84基因在小鼠感染牛分枝杆菌卡介苗中的调控作用研究
6
作者 马嘉烨 卢水华 《微生物与感染》 2024年第5期280-291,共12页
结核病仍然是严重危害人类健康的慢性传染性疾病,目前结核病防控形势严峻,宿主导向疗法可能是一种值得关注和探究的新的抗结核治疗方式。本研究旨在探究G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor, GPCR)家族成员GPR84在小鼠感染牛分枝... 结核病仍然是严重危害人类健康的慢性传染性疾病,目前结核病防控形势严峻,宿主导向疗法可能是一种值得关注和探究的新的抗结核治疗方式。本研究旨在探究G蛋白偶联受体(G protein-coupled receptor, GPCR)家族成员GPR84在小鼠感染牛分枝杆菌卡介苗(Mycobacterium bovis Bacillus Calmette-Guérin, BCG)中的调控作用。本研究将野生型C57BL/6小鼠(WT组)和Gpr84基因缺陷小鼠(Gpr84^(-/-)组)作为对照建立高剂量BCG感染小鼠模型,通过平板菌落形成(colony-forming unit, CFU)实验、肺组织苏木精-伊红染色(hematoxylin-eosin staining, HE staining)和抗酸染色评估Gpr84基因缺陷小鼠和野生型小鼠肺、脾、肝、肾等脏器荷菌量以及肺部病理损害严重程度的差异,并观察两组小鼠感染后的体重和一般状态变化。提取小鼠肺细胞,通过流式细胞术分析小鼠肺组织髓系细胞群变化。发现Gpr84基因缺陷小鼠感染BCG后较未感染时体重有明显下降,CFU结果和抗酸染色结果均显示Gpr84^(-/-)组小鼠肺组织中荷菌量高于WT组,脾脏、肝脏中荷菌量的差异与肺中一致;HE染色结果显示,BCG感染后Gpr84^(-/-)组小鼠肺组织正常肺泡结构损坏明显比WT组严重,病灶数多于WT组;流式细胞术分析小鼠肺细胞结果显示,未感染时,Gpr84敲除对肺中常驻肺泡巨噬细胞(alveolar macrophages, AMs)和肺间质巨噬细胞(interstitial macrophages, IMs)的数量无明显影响,急性感染时,Gpr84^(-/-)组小鼠肺中AMs比例明显较WT组升高,而IMs比例较WT组明显降低,单核吞噬细胞(mononuclear phagocytes, MNPs)Ly6Chi亚群比例升高,Ly6Clo亚群数量减少,中性粒细胞(neutrophils, Neuts)浸润增加。结果表明,Gpr84敲除后加重的细菌负荷和病理损害可能与IMs/AMs相对比例的降低,Ly6Chi MNPs亚群增加及其向Ly6Clo亚群转化受阻,增加Neuts浸润有关。因此,Gpr84基因可能通过调节机体免疫功能成为宿主导向治疗结核病的候选靶点之一。 展开更多
关键词 gpr84基因 巨噬细胞 分枝杆菌 BCG 结核病
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脂肪酸受体GPR84及其调节剂的研究进展
7
作者 刘阳 陈林海 +1 位作者 吕伟 南发俊 《生命的化学》 CAS CSCD 2016年第4期548-555,共8页
G蛋白偶联受体84(GPR84)属于脂肪酸受体,能被中链脂肪酸(C9-C14)激活。人体内GPR84主要表达在骨髓,其次表达在外周白细胞和肺,在生理状态下GPR84表达量较低,炎症刺激(如脂多糖)可诱导GPR84在单核/巨噬细胞中高表达,可知GPR84与炎症有很... G蛋白偶联受体84(GPR84)属于脂肪酸受体,能被中链脂肪酸(C9-C14)激活。人体内GPR84主要表达在骨髓,其次表达在外周白细胞和肺,在生理状态下GPR84表达量较低,炎症刺激(如脂多糖)可诱导GPR84在单核/巨噬细胞中高表达,可知GPR84与炎症有很大关系。许多疾病的发生发展伴随着炎症反应,而GPR84小分子调节剂能调节炎症反应,从而干预相关疾病的进程。本文主要就GPR84与各类疾病的关系,以及GPR84小分子调节剂的研究展开综述。 展开更多
关键词 G蛋白偶联受体 中链脂肪酸 G蛋白偶联受体84 炎症 调节剂
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大鼠脑缺血-再灌注后G蛋白偶联受体84的表达升高 被引量：1
8
作者 赵翀翀 郭文婷 +1 位作者 蔡宏斌 王欢 《基础医学与临床》 2021年第3期398-403,共6页
目的探讨G蛋白偶联受体84(GPR84)在大鼠脑缺-再灌注(I/R)后的表达及其功能。方法构建大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)模型,将大鼠分为假手术组(sham)和脑缺血2 h后再灌注12 h组(I/R 12 h)、24 h组(I/R 24 h)、48 h组(I/R 48 h)、72 h组(I/R 72... 目的探讨G蛋白偶联受体84(GPR84)在大鼠脑缺-再灌注(I/R)后的表达及其功能。方法构建大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)模型,将大鼠分为假手术组(sham)和脑缺血2 h后再灌注12 h组(I/R 12 h)、24 h组(I/R 24 h)、48 h组(I/R 48 h)、72 h组(I/R 72 h);体外培养大鼠原代皮质神经元,将细胞分成对照组(control)、氧糖剥夺1 h复氧复糖24 h组(OGD/R 1 h)和氧糖剥夺2 h复氧复糖24 h组(OGD/R 2 h);GPR84小干扰RNA(siRNA)转染神经元,将细胞分为对照组(control)、氧糖剥夺1 h复氧复糖24 h组(OGD/R 1 h)、神经元转染干扰对照后氧糖剥夺1 h复氧复糖24 h组(NC+OGD/R 1 h)和神经元转染GPR84 siRNA后氧糖剥夺1 h复氧复糖24 h组(GPR84 siRNA+OGD/R 1 h);Western blot检测GPR84的表达;免疫荧光检测脑组织中GPR84蛋白的定位;DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)检测神经元的凋亡比例。结果与假手术组相比,大鼠脑I/R后各时间点GPR84蛋白水平明显升高(P<0.01)。GPR84主要定位于神经元和小胶质细胞,星形胶质细胞几乎不表达,并且神经元中GPR84的表达在脑I/R后明显提高。与对照组相比,OGD/R 1 h和OGD/R 2 h组神经元中GPR84蛋白的表达均明显提高(P<0.01),并且GPR84干扰可以明显抑制氧糖剥夺后复氧复糖诱导的GPR84表达上调。与对照组相比,OGD/R组神经元凋亡明显提高(P<0.01);与NC+OGD/R 1 h组相比,GPR84 siRNA+OGD/R 1 h组神经元凋亡明显减少。结论脑I/R诱导的GPR84表达升高在脑缺血性损伤中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 gpr84 神经元 脑缺血 凋亡
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小鼠脑缺血再灌注损伤不同时间点基因表达谱的变化研究
9
作者 杨春辉 邵贵强 +1 位作者 吴春荣 尹雪 《神经损伤与功能重建》 2018年第10期487-491,共5页
目的:通过生物信息学方法研究小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)所致的损伤模型的基因表达谱变化,寻找疾病相关的关键基因。方法:从Gene Expression Omnibus(GEO)中下载关于小鼠脑损伤GSE23160时间序列基因表达谱芯片的原始数据,分析皮质脑组... 目的:通过生物信息学方法研究小鼠脑缺血再灌注损伤(CIRI)所致的损伤模型的基因表达谱变化,寻找疾病相关的关键基因。方法:从Gene Expression Omnibus(GEO)中下载关于小鼠脑损伤GSE23160时间序列基因表达谱芯片的原始数据,分析皮质脑组织样本和纹状体脑组织样本在缺血再灌注不同时间点基因表达谱的差异,并对差异表达基因进行GO和KEGG功能富集分析。再通过聚类分析挑取表达趋势明显的差异基因进行免疫细胞浸润分析和关键基因分析。并在大鼠CIRI模型上对显著差异基因进行验证。结果:免疫细胞浸润分析发现CIRI过程中出现肥大细胞和巨噬细胞浸润。CIRI过程中的差异基因主要参与愈伤反应、炎性反应和信号转导通路等。在2个组织样本的不同再灌注时间点Timp1和Gpr84基因表达都发生了显著上调。大鼠CIRI模型进一步验证了Timp1和Gpr84基因的上调表达。结论:Timp1和Gpr84基因可能是脑缺血再灌注过程中的关键基因。 展开更多
关键词 脑缺血 再灌注损伤 基因表达 TIMP1 gpr84
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