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C-MET、Golph2、EZH2及DKK1蛋白在肝细胞肝癌中的表达及相关性 被引量：7
1
作者 付尧 吴鸿雁 +5 位作者 顾劲扬 陈骏 余慧萍 孙琦 孟凡青 史炯 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第12期1334-1338,共5页
目的探讨肝细胞生长因子受体(C-MET)、高尔基磷酸化蛋白2(Golph2)、组蛋白甲基转移酶(EZH2)及Dickkopf-1蛋白(DKK1)在原发性肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及癌旁组织中的表达,进一步明确其在肿瘤诊断与进展中的作用。方法... 目的探讨肝细胞生长因子受体(C-MET)、高尔基磷酸化蛋白2(Golph2)、组蛋白甲基转移酶(EZH2)及Dickkopf-1蛋白(DKK1)在原发性肝细胞肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)及癌旁组织中的表达,进一步明确其在肿瘤诊断与进展中的作用。方法采用免疫组化En Vision两步法对75例HCC及癌旁组织的组织芯片分别进行C-MET、Golph2、EZH2及DKK1检测,进一步分析其表达特点及与肿瘤分期、分级之间的相关性。结果 C-MET、Golph2、EZH2和DKK1在HCC组织中的阳性率分别为90.67%(68/75)、93.33%(70/75)、42.67%(32/75)和84.00%(63/75);在癌旁组织中的阳性率分别为88.00%(66/75)、89.33%(67/75)、6.67%(5/75)和68.00%(51/75)。EZH2蛋白对HCC的诊断特异性达93.33%。C-MET、Golph2、EZH2、DKK1蛋白表达与HCC患者年龄、性别、肿瘤最大径、结节数量及脉管侵犯均无明显相关性(P>0.05)。在不同分级HCC组织中C-MET、Golph2、EZH2表达差异具有统计学意义(P<0.05);在不同分期HCC组织中C-MET、Golph2、EZH2、DKK1表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论 EZH2在HCC中的表达具有较高特异性,其可作为诊断HCC的辅助标记,但其敏感性略低。C-MET、Golph2、EZH2、DKK1表达与肿瘤分级具有一定的相关性,其表达与肿瘤进展无显著相关性。C-MET、Golph2、DKK1三者之间具有相关性,共同促进HCC的进展。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞肝癌 C-MET golph2 EZH2 DKK1 免疫组织化学
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GOLPH2的原核表达、纯化、抗体制备和初步应用 被引量：1
2
作者 李峰 刘艳红 +2 位作者 谢平丽 李跃辉 李官成 《生命科学研究》 CAS CSCD 2011年第5期438-442,共5页
目前发现GOLPH2蛋白与肝癌密切相关,将golph2基因进行克隆、表达并制备多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定基础.应用RT-PCR技术,从人肝癌细胞系HepG2细胞中扩增得到golph2 cDNA,将其克隆到原核表达载体pET21a(+)-TRX内、转化大肠杆菌DH... 目前发现GOLPH2蛋白与肝癌密切相关,将golph2基因进行克隆、表达并制备多克隆抗体,为进一步研究其功能奠定基础.应用RT-PCR技术,从人肝癌细胞系HepG2细胞中扩增得到golph2 cDNA,将其克隆到原核表达载体pET21a(+)-TRX内、转化大肠杆菌DH5a,用IPTG诱导其在大肠杆菌BL21(DE3)中表达.His-tag磁珠纯化试剂盒纯化重组蛋白GOLPH2,SDS-PAGE鉴定.将纯化的重组蛋白免疫BALB/c小鼠制备多克隆抗体,采用ELISA、Western blot方法检测抗体的灵敏度和特异性,并测定临床血清标本中GOLPH2蛋白水平.成功地构建了表达TRX-GOLPH2融合蛋白的原核表达质粒pET21a(+)-TRX-GOLPH2.并在大肠杆菌BL21(DE3)内得以高效表达,且以可溶性的形式存在.SDS-PAGE和Western blot证实,重组GOLPH2蛋白质与预期结果一致.抗血清能够特异地识别52 kD重组蛋白、73 kD细胞裂解液和血清蛋白质.成功制备了GOLPH2蛋白质和多克隆抗体,能用于后续研究. 展开更多
关键词 肝细胞癌 蛋白质表达 golph2 多克隆抗体
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Golph2蛋白质的原核表达及多克隆抗体制备
3
作者 谭龙益 陈洁 +4 位作者 王皓 叶寒清 厉倩 顾继安 孔宪涛 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期443-445,449,共4页
目的:新近发现Golph2蛋白与肝癌关系密切,制备Golph2重组蛋白质和多克隆抗体,建立Western blot检测技术,为后续研究提供基础。方法:RT-PCR从人肝癌细胞株WBF44钓取Golph2基因序列,PCR回复突变制备全长完整基因(1206bp),将其插入至原核... 目的:新近发现Golph2蛋白与肝癌关系密切,制备Golph2重组蛋白质和多克隆抗体,建立Western blot检测技术,为后续研究提供基础。方法:RT-PCR从人肝癌细胞株WBF44钓取Golph2基因序列,PCR回复突变制备全长完整基因(1206bp),将其插入至原核表达载体pET-21、转化大肠杆菌DH5a,IPTG诱导表达,镍柱亲和层析纯化蛋白,SDS-PAGE鉴定。将纯化蛋白质免疫家兔,制备多克隆抗血清。建立Western blot鉴定重组蛋白和抗血清特异性,测定临床血清标本中Golph2蛋白水平。结果:从肝癌细胞中钓取的基因,出现2个碱基置换突变和1个碱基缺失突变,经回复突变,获得与NM177937完全一致序列。SDS-PAGE和Western blot证实,重组Golph2蛋白质与预期结果一致。抗血清能够特异地识别52kD重组蛋白质和73kD血清蛋白质。结论:Golph2蛋白质表达和抗血清制备完全成功。 展开更多
关键词 golph2蛋白质 多克隆抗体 蛋白质表达
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高尔基体磷酸化蛋白GOLPH2的研究及其潜在的应用价值
4
作者 胡斌 田晓慧 孟祥军 《现代生物医学进展》 CAS 2013年第26期5176-5179,共4页
高尔基体磷酸化蛋白(Golgi phosphoprotein 2,GOLPH2又称GP73)是一种II型高尔基体跨膜糖蛋白,与肝炎、肝硬化和肝癌等的发生发展密切相关。GP73是一个可靠的诊断HCC及监测复发的血清标记物,其敏感性和特异性均高于传统的AFP。GP73在目... 高尔基体磷酸化蛋白(Golgi phosphoprotein 2,GOLPH2又称GP73)是一种II型高尔基体跨膜糖蛋白,与肝炎、肝硬化和肝癌等的发生发展密切相关。GP73是一个可靠的诊断HCC及监测复发的血清标记物,其敏感性和特异性均高于传统的AFP。GP73在目前的肝癌早期诊断和治疗中的显示出重要的作用,有可能成为临床上新的肝癌血清标记物。而且部分研究发现GP73对肝癌的转移潜能和预后有重要的预测价值,抑制其表达可显著降低肝癌细胞的恶性表型,这似乎提示GP73可以成为肝癌治疗的新靶点。 展开更多
关键词 golph2 GP73 肿瘤 肝癌 早期诊断 肿瘤标志物
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GOLPH2在恶性肿瘤中作用及机制的研究进展
5
作者 方杏华 宋英 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2017年第5期458-462,共5页
目前检测血清肿瘤标记物仍被认为是早期诊断肿瘤及监测肿瘤的有效手段之一。高尔基体磷酸化蛋白2(Golgi phosphoprotein 2,GOLPH2)是存在于高尔基体的一种Ⅱ型跨膜蛋白,近年来很多研究认为GOLPH2是最有潜力的早期诊断肿瘤的血清标志物... 目前检测血清肿瘤标记物仍被认为是早期诊断肿瘤及监测肿瘤的有效手段之一。高尔基体磷酸化蛋白2(Golgi phosphoprotein 2,GOLPH2)是存在于高尔基体的一种Ⅱ型跨膜蛋白,近年来很多研究认为GOLPH2是最有潜力的早期诊断肿瘤的血清标志物之一。此外,亦有多项研究显示GOLPH2与肺癌、胃癌、前列腺癌等癌症的预后相关,GOLPH2参与机体免疫调节、细胞内信号因子的激活和降解以及促进上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT),并且通过这些机制促进肿瘤的进展和转移,从而降低患者的无病生存率(Disease-free survival,DFS)和总生存率(Overall survival,OS)。本文就目前GOLPH2在各种恶性肿瘤中的作用及机制研究进展作一综述。 展开更多
关键词 golph2 肿瘤 血清标记物 转移
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GOLPH2蛋白在皮肤黑色素瘤中的表达及其临床意义
6
作者 蒋小君 张春荣 《医学理论与实践》 2018年第15期2223-2225,共3页
目的:探讨高尔基磷酸化蛋白2(GOLPH2)在皮肤黑色素瘤中的表达及其临床意义。方法:选取我院2010年6月—2011年6月期间我院收治的皮肤黑色素瘤患者24例作为观察组,同时另选取在我院进行常规体检的正常居民24例作为对照组。使用免疫组化法... 目的:探讨高尔基磷酸化蛋白2(GOLPH2)在皮肤黑色素瘤中的表达及其临床意义。方法:选取我院2010年6月—2011年6月期间我院收治的皮肤黑色素瘤患者24例作为观察组,同时另选取在我院进行常规体检的正常居民24例作为对照组。使用免疫组化法检测GOLPH2蛋白表达及临床意义。结果:皮肤黑色素瘤组织中GOLPH2蛋白阳性率为79.12%,明显高于正常皮肤16.67%(P<0.05)。GOLPH2蛋白表达与患者的年龄、性别无明显相关(P>0.05),而与肿瘤大小、TNM分期、分化程度及淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。GOLPH2蛋白表达D阴性的患者术后生存率明显高于阳性患者(P<0.05)。结论:GOLPH2蛋白的阳性表达与皮肤黑色素瘤的发生、进展有关,检测GOLPH2蛋白有助于判断皮肤黑色素瘤的早期诊断、病情进展及预后。 展开更多
关键词 golph2蛋白 皮肤黑色素瘤 临床意义
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GOLPH2在肿瘤中的研究
7
作者 李文智 王翔 陈刚 《国际肿瘤学杂志》 CAS 2013年第2期89-92,共4页
作为新型高尔基蛋白，GOLPH2的表达与维持高尔基体结构的完整性相关。作为癌蛋白，GOLPH2的表达与肿瘤细胞恶性生物学行为相关。GOLPH2在肿瘤发生和转移中的重要作用使之成为肿瘤诊断和治疗的新靶点。
关键词 golph2 肿瘤
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应用流式细胞仪检测聚合物纳米胶束表面抗体偶联效率
8
作者 田九博 张丽娜 +6 位作者 王萱 马培元 穆秀丽 孟涛涛 孟凡秀 弓韬 于保锋 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2019年第9期1020-1024,共5页
目的探索应用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测纳米级聚合物胶束(polymeric micelles,PMs)表面偶联抗体效率的方法。方法将DMPE-PEG-Maleimide、DPPE-PEG-Maleimide、DSPE-PEG-Maleimide、DOPE-PEG-Malei-mide、DLPE-PEG-Maleimide... 目的探索应用流式细胞仪(flow cytometer,FCM)检测纳米级聚合物胶束(polymeric micelles,PMs)表面偶联抗体效率的方法。方法将DMPE-PEG-Maleimide、DPPE-PEG-Maleimide、DSPE-PEG-Maleimide、DOPE-PEG-Malei-mide、DLPE-PEG-Maleimide聚合物纳米胶束分别与Anti-GOLPH2抗体共同孵育,使其彼此偶联;再与SNU-423细胞共同孵育,采用FCM检测SNU-423细胞膜表面GOLPH2抗原的阳性表达率,并比较各类聚合物纳米胶束与AntiGOLPH2抗体的相对偶联效率。结果 SNU-423细胞表面GOLPH2抗原的阳性表达率为1.23%;在各类聚合物纳米胶束中,DLPE-PEG-Maleimide与Anti-GOLPH2抗体的相对偶联效率最高,且与抗体浓度呈正相关。结论应用FCM检测聚合物纳米胶束表面抗体偶联效率的方法,能在一定程度上反映抗体与聚合物纳米胶束的抗体偶联情况,其检测结果具有一定的参考价值。 展开更多
关键词 流式细胞仪 聚合物纳米胶束 golph2抗原 Anti-golph2抗体 抗体偶联比
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结直肠癌组织中高尔基体磷酸化蛋白的表达与患者中远期预后的关系 被引量：2
9
作者 何欣欣 吴东霞 +1 位作者 陈耿标 赖宇 《中国卫生检验杂志》 CAS 2016年第7期989-991,共3页
目的探讨结直肠癌组织GOLPH2的表达与临床病理参数和预后的关系。方法随机选取145例确诊的结直肠癌患者的癌组织,另选取30例结直肠癌患者的癌旁组织,采用免疫组化法检测GOLPH2的表达,分析其表达程度与临床病理参数和预后的关系。结果 GO... 目的探讨结直肠癌组织GOLPH2的表达与临床病理参数和预后的关系。方法随机选取145例确诊的结直肠癌患者的癌组织,另选取30例结直肠癌患者的癌旁组织,采用免疫组化法检测GOLPH2的表达,分析其表达程度与临床病理参数和预后的关系。结果 GOLPH2在结直肠癌组织中的阳性表达率为81.38%,明显高于癌旁组织,差异有统计学意义（P=0.001）。在中低分化组织、临床分期3期-4期组织和淋巴结转移中GOLPH2均为高表达,其高表达率明显高于高分化、1期-2期及无淋巴结转移组织,差异有统计学意义（P=0.001）。随访5年,GOLPH2阳性表达组术后1年的累积生存率为41.82%,明显低于GOLPH2阴性表达组,差异有统计学意义（P=0.001）,但与术后3年和5年生存率、复发率和转移率差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 GOLPH2在结直肠癌组织中存在高表达,其表达程度与肿瘤分化程度、临床分期及术后短期生存率密切相关,可能是结直肠癌发生、发展的重要机制之一。 展开更多
关键词 结肠癌 直肠癌 高尔基体磷酸化蛋白 预后
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血清Ⅱ型高尔基体膜蛋白与人类肝细胞癌的关系 被引量：9
10
作者 谭龙益 陈洁 +4 位作者 王皓 叶寒清 厉倩 顾继安 韩莉琴 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期288-291,共4页
目的探讨血清Ⅱ型高尔基体膜蛋白（Golph2）在肝癌诊断中的价值。方法应用逆转录聚合酶链反应技术，从人肝癌细胞株WBF44钓取Golph2基因序列，聚合酶链反应回复突变制备全长完整基因（1206bp），将其插入原核表达载体pET21、转化大肠杆... 目的探讨血清Ⅱ型高尔基体膜蛋白（Golph2）在肝癌诊断中的价值。方法应用逆转录聚合酶链反应技术，从人肝癌细胞株WBF44钓取Golph2基因序列，聚合酶链反应回复突变制备全长完整基因（1206bp），将其插入原核表达载体pET21、转化大肠杆菌DH5α，应用异丙基硫代β-D-半乳糖苷诱导其表达，镍柱亲和层析纯化，并经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定。用纯化的蛋白质免疫家兔，制备多克隆抗血清。建立Western blot鉴定重组蛋白和抗血清特异性，建立双抗体夹心酶联免疫吸附法测定150例肝癌、120例其他肝病、200名健康体检者血清Golph2水平。均值比较采用ONO-WAY ANOVA法。结果从肝癌细胞中凋取的基因，出现2个基因置换突变和1个碱基缺失突变，经回复突变，获得与NM 177937完全一致的序列。经十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳和Western blot证实，重组Golph2与预期结果一致。抗血清能够特异地识别相对分子质量为5．2×10^4的重组蛋白质和7.3×10^4的血清蛋白质，与预期结果一致。建立的酶联免疫吸附试验方法检测肝癌、其他肝病患者、对照组血清Golph2，其吸光度值均数相差显著。以吸光度值≥0．40为阈值，其敏感度和特异性分别为44．5％和82．0％。结论Golph2在各组人群中均有表达，在肝癌组最高，在肝癌诊断中有一定价值，但特异性和敏感度不高。 展开更多
关键词 癌 肝细胞 酶联免疫吸附试验 诊断 Ⅱ型高尔基体蛋白质
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