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纳米生物传感协同环介导恒温扩增技术对乙型肝炎病毒高灵敏可视化检测方法的建立与应用
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作者 谢玲 谷媛媛 +4 位作者 唐东 谢雯 石元芳 谭燕 陈旭 《疾病监测》 北大核心 2026年第1期94-101,共8页
目的基于环介导等温扩增(LAMP)结合纳米金横向流生物传感(AuNPs-LFB)技术,构建一种新型乙型肝炎病毒(HBV)便捷、可视化分子检测方法并评价其应用。方法以我国主要流行HBV基因型(B、C、D、B/C重组和C/D重组)的S基因为检测靶点,设计HBV-L... 目的基于环介导等温扩增(LAMP)结合纳米金横向流生物传感(AuNPs-LFB)技术,构建一种新型乙型肝炎病毒(HBV)便捷、可视化分子检测方法并评价其应用。方法以我国主要流行HBV基因型(B、C、D、B/C重组和C/D重组)的S基因为检测靶点,设计HBV-LAMP简并引物并建立HBV-LAMP-AuNPs-LFB方法。对HBV-LAMP-AuNPs-LFB方法的反应温度和时间进行优化。检测HBV-LAMP-AuNPs-LFB方法的特异性和灵敏性。采用传统荧光定量PCR方法和新构建的HBVLAMP-AuNPs-LFB技术分别对临床疑似HBV感染者血清样本进行检测,评价新构建方法的临床应用性。结果本研究成功设计出一套HBV-LAMP简并引物用于构建HBV-LAMP-AuNPs-LFB检测方法。该方法的最佳反应条件为68℃、30 min,其特异性为100.00%,未与其他病原体发生交叉反应。该方法可检测含目标基因(HBV-S)质粒模板的最低浓度为10拷贝/反应。经临床样本验证,HBV-LAMP-AuNPs-LFB技术对HBV的检测结果与传统荧光定量PCR技术一致。结论本研究构建了一种操作便捷、特异性强、灵敏度高、无需昂贵检测仪器的HBV即时检测方法HBV-LAMP-AuNPs-LFB,可为HBV感染的治疗和防控提供新的实验室诊断依据。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 纳米金横向流生物传感 环介导恒温扩增 快速检测
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交叉置换扩增联合纳米生物传感器检测乙肝病毒方法的建立与应用 被引量：5
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作者 贾楠 肖飞 +5 位作者 周娟 伏瑾 黄小兰 陈敏 黄辉 王毅 《合肥医科大学学报》 2023年第7期704-711,共8页
目的建立一种敏感、特异的乙肝病毒(HBV)快速检测方法,并评价其应用。方法基于多交叉置换扩增(MCDA)技术和纳米生物传感(LFB)检测技术,以HBV特异性S基因为检测靶标,建立HBV-MCDA-LFB方法,优化反应温度和时间等实验条件,并应用临床样本... 目的建立一种敏感、特异的乙肝病毒(HBV)快速检测方法,并评价其应用。方法基于多交叉置换扩增(MCDA)技术和纳米生物传感(LFB)检测技术,以HBV特异性S基因为检测靶标,建立HBV-MCDA-LFB方法,优化反应温度和时间等实验条件,并应用临床样本进行评价,同时与实时PCR(RT-PCR)进行比较。结果HBV-MCDA-LFB能在30 min内完成HBV检测,最佳反应温度为60℃,其特异性良好,未与其他病毒、细菌发生交叉反应。此外,该方法的检出限低至1×101拷贝/反应,且能准确检测临床样本的HBV,检测灵敏度优于RT-PCR方法。结论本研究建立了一种特异、敏感、便捷的乙肝病毒快速检测方法,即HBV-MCDA-LFB,其诊断效率优于临床采用的RT-PCR方法,可作为临床快速诊断HBV感染的替代方法。 展开更多
关键词 乙肝病毒 多交叉置换扩增 纳米生物传感 HBV-MCDA-LFB RT-PCR
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冻融法制备DNA功能化的金纳米颗粒及其在层析试纸条上的应用
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作者 吕思嘉 文为 +1 位作者 张修华 王升富 《黄冈师范学院学报》 2019年第3期37-43,共7页
简单、高效地制备DNA功能化的金纳米颗粒是构建“金标”层析试纸条生物传感器的关键。本文采用冻融法简单、快速地制备了DNA功能化的金纳米颗粒,并以此为“金标”构建了一种快速、低成本的能用于乙型肝炎病毒基因检测的层析试纸条生物... 简单、高效地制备DNA功能化的金纳米颗粒是构建“金标”层析试纸条生物传感器的关键。本文采用冻融法简单、快速地制备了DNA功能化的金纳米颗粒,并以此为“金标”构建了一种快速、低成本的能用于乙型肝炎病毒基因检测的层析试纸条生物传感器。该层析试纸条的检测原理基于核酸杂交反应,将冻融法制备的DNA功能化的金纳米颗粒与目标物一起加入到该试纸条上,在溶液流经整个测试条带后,纳米金颗粒将逐渐在测试区积累,产生肉眼可见的色带,然后通过便携式试纸条读条器读取测试线给定区域上的信号强度进行定量检测。该层析试纸条有望用于生物标志物监测和临床即时检测,特别是在设备资源相对贫乏的条件下,具有较大的应用前景。 展开更多
关键词 冻融法 金纳米颗粒 层析试纸条 可视化检测
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