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细菌GntR家族转录调控因子的研究进展 被引量:4
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作者 刘国芳 王欣欣 +1 位作者 苏辉昭 陆光涛 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期66-73,共8页
GntR家族转录调控因子是细菌中分布最为广泛的一类螺旋–转角–螺旋(helix-turn-helix,HTH)转录调控因子,此家族转录调控因子包含两个功能域,分别是N端的DNA结合结构域和C端的效应物结合结构域/寡聚化作用结构域。DNA结合结构域的氨基... GntR家族转录调控因子是细菌中分布最为广泛的一类螺旋–转角–螺旋(helix-turn-helix,HTH)转录调控因子,此家族转录调控因子包含两个功能域,分别是N端的DNA结合结构域和C端的效应物结合结构域/寡聚化作用结构域。DNA结合结构域的氨基酸序列是非常保守的,但效应物结合结构域/寡聚化作用结构域的氨基酸序列却存在很大的差异性。目前许多GntR家族的转录调控因子已经被鉴定,这些转录因子调控细菌许多不同的细胞过程,如运动性、葡萄糖代谢、细菌的耐药性、病原细菌的致病力等。本文主要阐述了GntR家族转录调控因子的发现、二级结构、生物学功能、调控模式等方面的研究进展,旨在为研究者全面、深入地了解GntR家族转录调控因子的功能及作用机理提供帮助。 展开更多
关键词 gntr家族转录调控因子 二级结构 生物学功能 调控模式
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产酶溶杆菌OH11中LysR和GntR家族基因的功能分析 被引量:3
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作者 林龙 葛程程 +1 位作者 蒋建东 钱国良 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2021年第1期130-138,共9页
产酶溶杆菌Lysobacter enzymogenes OH11可以通过蹭行运动(Twitching motility)接近并附着在病原真菌和卵菌上,进而分泌各种胞外酶和次级代谢产物抑制病原菌的生长,其中热稳定抗真菌因子(heat-stable antifungal factor,HSAF)是一种新... 产酶溶杆菌Lysobacter enzymogenes OH11可以通过蹭行运动(Twitching motility)接近并附着在病原真菌和卵菌上,进而分泌各种胞外酶和次级代谢产物抑制病原菌的生长,其中热稳定抗真菌因子(heat-stable antifungal factor,HSAF)是一种新型的抗真菌代谢物,具有研发为新型生防杀真菌剂的潜力。转录因子在基因的转录调控中起到关键的作用,鉴于LysR和GntR家族的转录因子在病原细菌中对运动性和致病性具有重要调控作用,本研究在OH11基因组中选取了3个LysR家族蛋白(Le1404、Le2114和Le3293)以及2个GntR蛋白(Le1155和Le1310)的编码基因进行敲除,构建相应的突变体,以明确它们是否可以调控OH11的蹭行运动和HSAF的合成。结果表明,在OH11中分别敲除Le2114和Le1155均导致该菌株丧失蹭行运动;而敲除Le1155能显著降低HSAF的产量,说明Le2114可以特异地调控蹭行运动,而Le1155可以调控蹭行运动和HSAF合成两个生理过程。 展开更多
关键词 产酶溶杆菌 蹭行运动 HSAF LYSR gntr
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转录调控因子GntR10在布鲁氏菌感染细胞和小鼠模型中的毒力作用研究
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作者 李志强 王书利 +4 位作者 席丽 崔艳艳 张春梅 施传信 张辉 《商丘师范学院学报》 CAS 2021年第3期40-43,共4页
探讨转录调控因子GntR10在布鲁氏菌感染过程中的毒力作用.采用分子生物学方法,构建牛种布鲁氏菌2308 gntR10基因突变株(2308ΔGntR10)和互补株(2308ΔGntR10-C),利用突变株和互补株感染上皮细胞系(HPT-8)、小鼠巨噬细胞系(RAW 264.7)和... 探讨转录调控因子GntR10在布鲁氏菌感染过程中的毒力作用.采用分子生物学方法,构建牛种布鲁氏菌2308 gntR10基因突变株(2308ΔGntR10)和互补株(2308ΔGntR10-C),利用突变株和互补株感染上皮细胞系(HPT-8)、小鼠巨噬细胞系(RAW 264.7)和小鼠模型(BALB/c),检测突变株在细胞和小鼠模型中的胞内存活能力和毒力.2308ΔgntR10突变株在细胞模型中的胞内存活能力显著降低,在小鼠模型中是减毒的.转录调控因子GntR10的缺失影响了布鲁氏菌在细胞和小鼠内的毒力,并且在布鲁氏菌感染期间,GntR10基因与细菌的存活和胞内繁殖有关. 展开更多
关键词 布鲁氏菌 2308Δgntr10突变株 毒力
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流产布鲁氏菌转录调控因子GntR在小鼠模型上诱导的辅助性T细胞免疫应答 被引量:2
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作者 王书利 赵书杰 +5 位作者 罗怡馨 杨岚 郭文静 田婷婷 李志强 原宝东 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期805-814,共10页
【目的】通过对布鲁氏菌gntR基因进行原核表达,分析其诱导机体产生的Th1和Th2型免疫反应。【方法】以布鲁氏菌S2308基因组为模板,根据GenBank上公布的S2308 gntR基因序列设计引物,利用分子克隆技术,将gntR基因片段克隆至原核表达载体pET... 【目的】通过对布鲁氏菌gntR基因进行原核表达,分析其诱导机体产生的Th1和Th2型免疫反应。【方法】以布鲁氏菌S2308基因组为模板,根据GenBank上公布的S2308 gntR基因序列设计引物,利用分子克隆技术,将gntR基因片段克隆至原核表达载体pET-30a,转化至大肠杆菌BL21感受态细胞中,诱导GntR蛋白表达;利用SDS-PAGE对GntR重组蛋白(rGntR)进行分析;利用AKTAxpress智能多维纯化系统对rGntR进行纯化;利用Western blotting分析其免疫反应性;用rGntR刺激小鼠巨噬细胞RAW 264.7和小鼠脾细胞,利用ELISA试剂盒检测细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-4和IL-5,以及IgG抗体的水平。将rGntR免疫小鼠,检测小鼠血清中IFN-γ和IL-4的水平。【结果】gntR基因大小为735 bp,编码245个氨基酸,大约在35 kDa处出现蛋白条带,纯化后为单一条带。WB显示,rGntR具有较好的免疫反应性。rGntR可诱导宿主细胞和小鼠产生较高水平的IFN-γ、IL-4和IgG。【结论】rGntR可在体内或体外诱导辅助性T细胞(Th1和Th2型)免疫反应。本研究可为布鲁氏菌病疫苗的研发提供科学依据。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 转录调控因子gntr 免疫反应
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Systematic insertion mutagenesis of GntR family tran-scriptional regulator genes in Sinorhizobium meliloti 被引量:1
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作者 YU AiYuan CHEN AiMin +4 位作者 WANG Yi LUO Li ZHU JiaBi YU GuanQiao WANG YanZhang 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2008年第2期215-226,共12页
GntR-type transcriptional regulators regulate the most diverse biological processes in bacteria. Al- though GntR-type transcriptional regulators consist of the second largest family of transcriptional regulators in Si... GntR-type transcriptional regulators regulate the most diverse biological processes in bacteria. Al- though GntR-type transcriptional regulators consist of the second largest family of transcriptional regulators in Sinorhizobium meliloti, little is known about their functions. In this study, we investigated 54 putative genes encoding GntR family of transcriptional regulators in S. meliloti Rm1021. Secondary structure analysis of the C-terminal domain of these putative transcriptional regulators indicated that thirty-seven were members of the FadR subfamily, ten of the HutC subfamily and five of the MocR subfamily. The remaining two did not fall into any specific subfamily category, and may form two new subfamilies. The 54 gntR genes were mutagenized by plasmid insertion mutagenesis to investigate their roles. We found that, of the 54 mutants, only the gtrA1 and gtrB1 mutants had slower growth rates and cell maximal yields on both rich medium and minimal medium, and lower cell motility on swarming plate than wild type Rm1021. All mutants, with the exception of gtrA1 and gtrB1, can establish effective symbioses with alfalfa. Plants inoculated with gtrA1 and gtrB1 mutants grew shorter than those in- oculated with wild type, and formed relatively smaller, round and light pink nodules, which were mainly located on lateral roots. And there was an abnormal increase in the number of nodules induced by both mutants. These results suggested that the gtrA1 and gtrB1 mutants were symbiotically deficient. Our work presents a global overview of GntR-like transcriptional regulators involved in symbiosis in S. meliloti, and provides new insight into the functions of GntR-like transcriptional regulators. 展开更多
关键词 细菌 诱变 质粒插入 调节剂
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洋葱伯克霍尔德氏菌JX−1防治番茄青枯病机理的初步分析 被引量:17
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作者 许萌杏 李凤芳 +2 位作者 袁高庆 黎起秦 吴小刚 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2021年第2期304-314,共11页
本研究分离得到一株对茄科雷尔氏菌Ralstonia solanacearum具有明显拮抗作用的根围细菌JX−1,其温室防治番茄青枯病的防效达80.89%。形态学、生理生化、16S rDNA序列和gyrB序列分析表明,该菌株属于洋葱伯克霍尔德氏菌Burkholderia cepaci... 本研究分离得到一株对茄科雷尔氏菌Ralstonia solanacearum具有明显拮抗作用的根围细菌JX−1,其温室防治番茄青枯病的防效达80.89%。形态学、生理生化、16S rDNA序列和gyrB序列分析表明,该菌株属于洋葱伯克霍尔德氏菌Burkholderia cepacia。生防相关性状分析表明,菌株JX−1可产生嗜铁素、蛋白酶等抗菌物质。抗生素合成相关基因分析发现,菌株JX−1还可能产生硝吡咯菌素和藤黄绿脓菌素。转座子随机突变获得2株明显影响菌株JX−1拮抗能力的突变菌株,其中突变体M1710对茄科雷尔氏菌拮抗作用完全消失,序列分析表明Tn5破坏了与非核糖体寡肽产生相关基因tlpks/nrps;而突变体M645则对茄科雷尔氏菌的拮抗作用显著增强,序列分析表明Tn5破坏了gntR基因。上述结果表明,菌株JX−1可产生多种次生代谢产物,并且tlpks/nrps基因和gntR基因在防治番茄青枯病过程中起到重要调整作用。 展开更多
关键词 Burkholderia cepacia 番茄青枯病 拮抗作用 gntr转录调控因子
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通过阻断调控基因ygrA挖掘海洋链霉菌OUC6819中抗MDR菌活性次级代谢产物 被引量:2
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作者 刘晶 李通 +7 位作者 刘增智 姚婷婷 夏娟 李花月 车茜 李德海 李静 李文利 《中国海洋药物》 CAS CSCD 2017年第5期16-22,共7页
目的激活南海红树林来源链霉菌Streptomyces sp.OUC6819菌株中不表达或表达量低的隐性生物合成基因簇,挖掘具有优良多重耐药菌(MDR)抗菌活性的次级代谢产物。方法通过生物信息学分析推测Streptomyces sp.OUC6819基因组中可能的GntR家族... 目的激活南海红树林来源链霉菌Streptomyces sp.OUC6819菌株中不表达或表达量低的隐性生物合成基因簇,挖掘具有优良多重耐药菌(MDR)抗菌活性的次级代谢产物。方法通过生物信息学分析推测Streptomyces sp.OUC6819基因组中可能的GntR家族调控子,采用PCR-targeting策略敲除其中的ygrA基因,HPLC分析突变株和野生株的发酵产物的差异,并比较粗提物对5株MDR菌抑制活性。结果 HPLC分析结果表明与野生株相比,突变株中化合物1和化合物2产量分别提高了9倍和7倍;突变株发酵液粗提物对其中3株MDR菌抑制活性较野生株明显提高。结论通过阻断GntR家族调控子ygrA激活了Streptomyces sp.OUC6819菌株中具有抗MDR菌活性次级代谢产物合成基因簇的表达,为从中发掘新的抗MDR菌抗生素奠定了必要基础;同时,将为其他海洋链霉菌中隐性基因簇的激活提供重要参考。 展开更多
关键词 STREPTOMYCES sp.OUC6819 PCR-targeting gntr家族调控基因 多重耐药菌
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