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大豆GmbZIP60转录因子对植物核盘菌抗性的影响
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作者 刘婷钰 杨帆 +6 位作者 蔡舒萍 豆丹琳 徐晓源 刘子祺 曹海霞 柴梦楠 蔡汉阳 《福建农林大学学报(自然科学版)》 北大核心 2026年第1期1-11,共11页
【目的】研究GmbZIP60在拟南芥和大豆抵抗核盘菌中的作用,为大豆抗病育种提供依据。【方法】采用同源重组方法构建GmbZIP60的过表达载体,遗传转化获得转基因拟南芥和大豆,筛选转基因株系(OE-GmbZIP60)。大豆野生型(William 82)接种核盘... 【目的】研究GmbZIP60在拟南芥和大豆抵抗核盘菌中的作用,为大豆抗病育种提供依据。【方法】采用同源重组方法构建GmbZIP60的过表达载体,遗传转化获得转基因拟南芥和大豆,筛选转基因株系(OE-GmbZIP60)。大豆野生型(William 82)接种核盘菌后,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)技术检测GmbZIP60的表达量;观察OE-GmbZIP60转基因拟南芥和大豆接种核盘菌后的表型变化;在核盘菌侵染下,对OE-GmbZIP60转基因拟南芥和大豆抗病相关基因的表达量进行RT-qPCR检测。采用染色质免疫共沉淀(ChIP)结合RT-qPCR(ChIP-qPCR)检测GmbZIP60转基因大豆抗病相关基因的表达量。【结果】RT-qPCR检测表明,William 82接种核盘菌后12 h,GmbZIP60表达量显著上调,36 h的表达量达到峰值。OE-GmbZIP60转基因拟南芥和大豆接种核盘菌并进行二氨基联苯胺(DAB)染色发现,拟南芥和大豆野生型病斑面积显著小于OE-GmbZIP60。GmbZIP60转基因拟南芥接种核盘菌后,AtPR1、AtACS4、AtABI5、AtPDF1.2、AtLOX4和AtNPR3在OEGmbZIP60中的表达量显著上调;OE-GmbZIP60转基因大豆接种核盘菌后,GmABA2、GmERF1、GmNCED1、GmPR1、GmPPO、GmERF5、GmETR2、GmERF7、GmNPR3和GmCOI1在OE-GmbZIP60中的表达量显著上调。ChIP-qPCR检测表明,GmbZIP60能够直接与乙烯(ETH)、茉莉酸(MeJA)、水杨酸(SA)和脱落酸(ABA)诱导的抗病相关基因(GmETR2、GmERF7、GmNPR3、GmPR1、GmCOI1等)启动子结合。【结论】核盘菌可以诱导GmbZIP60的表达,GmbZIP60通过调控多种激素信号通路,正向调控拟南芥和大豆对核盘菌的免疫反应。 展开更多
关键词 gmbzip60 核盘菌 抗病 ChIP-qPCR RT-QPCR
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