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题名陆地棉GhASMT17基因的克隆及功能分析
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作者
马鑫
郭云龙
侯奥成
陈梦
李月
代培红
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机构
新疆农业大学生命科学学院
新疆农业大学新疆极端环境生物生态适应与进化重点实验室
新疆农业大学高效基因组编辑技术研发与精准育种应用创新中心
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出处
《中国农业大学学报》
北大核心
2025年第6期47-56,共10页
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基金
新疆维吾尔自治区自然科学基金(2022D01A184,2023D01E03)
新疆农业大学创新团队开放课题(ITB202106)
+1 种基金
新疆维吾尔自治区大学生创新项目(S202310758061)
新疆维吾尔自治区“天山英才”培养计划(2023SNGGNT063)。
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文摘
为探究陆地棉N-乙酰血清素甲基转移酶基因(GhASMT17)在棉花抗黄萎病中的功能,从陆地棉标准体系‘TM-1’中克隆GhASMT17基因并测序,利用生物信息学在线工具分析该基因编码蛋白的理化性质、结构、进化及启动子元件特性,运用qRT-PCR检测其组织表达特异性及黄萎病菌侵染后的表达模式,并用病毒诱导的基因沉默(VIGS)技术分析GhASMT17基因功能。结果表明:1)克隆的棉花GhASMT17基因开放阅读框(ORF)长度为726 bp,编码241个氨基酸、分子量为26650.66 U,理论PI 4.80,不稳定指数为26.62,平均亲水指数为0.022,表明其为酸性、稳定且亲水的蛋白,可能定位于叶绿体中。2)GhASMT17基因启动子序列存在脱落酸响应元件(ABRE)和低温胁迫响应元件(LTR)。3)qRT-PCR结果显示,在黄萎病菌侵染24和48 h后,未接种(CK)与接种黄萎病(V991)植株的GhASMT17基因表达量均差异显著(P<0.05)。4)VIGS结果显示,GhASMT17沉默植株对棉花黄萎病菌的抵抗力显著降低(P<0.05),维管束褐变严重,并且在茎段恢复培养试验中长出真菌的茎段数量比CK多40%,说明GhASMT17在棉花抗黄萎病中起着正调控作用。
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关键词
棉花
ghasmt17
基因克隆
表达模式分析
VIGS
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Keywords
cotton
ghasmt17
gene cloning
expression pattern analysis
VIGS
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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