Numb基因过表达的人脐带间充质干细胞移植对胆汁淤积性肝纤维化的干预作用及其机制

1

作者 张士豪 赵长青 +6 位作者 杨明艳 邢飞飞 刘伟 陈高峰 陈佳美 刘平 慕永平 《临床肝胆病杂志》 北大核心 2026年第1期80-89,共10页

目的 探讨Numb基因过表达的人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)移植对胆汁淤积性肝纤维化(CLF)的干预作用及其机制。方法 采用慢病毒转染技术过表达hUC-MSC的Numb基因(hUC-MSC^(Numb-OE)),并以空载慢病毒转染的hUC-MSC(hUC-MSC^(OE-EV))为阴... 目的 探讨Numb基因过表达的人脐带间充质干细胞(hUC-MSC)移植对胆汁淤积性肝纤维化(CLF)的干预作用及其机制。方法 采用慢病毒转染技术过表达hUC-MSC的Numb基因(hUC-MSC^(Numb-OE)),并以空载慢病毒转染的hUC-MSC(hUC-MSC^(OE-EV))为阴性对照。采用胆管结扎(BDL)建立CLF大鼠模型,随机分为BDL组、hUC-MSC组、hUC-MSC^(OE-EV)组和hUC-MSC^(Numb-OE)组,同时设有假手术组(Sham组)。各干预组于BDL后经脾脏一次性注射相应细胞,4周末取材。检测血清生化学、肝组织病理、肝组织羟脯氨酸(Hyp)水平、肝星状细胞活化、胆管反应、肝再生及Numb-p53信号轴关键分子的表达水平。计量资料多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果 与BDL组比较,hUC-MSC组和hUC-MSC^(OE-EV)组血清生化学指标(天冬氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酰转移酶、总胆汁酸、总胆红素和直接胆红素)、肝纤维化相关指标(Hyp、α-平滑肌肌动蛋白、肿瘤坏死因子-α和转化生长因子-β1)、胆管反应指标(细胞角蛋白7、细胞角蛋白19)均显著降低,差异有统计学意义(P值均<0.05);且hUC-MSC^(Numb-OE)组的上述指标较hUC-MSC^(OE-EV)组进一步改善,差异有统计学意义(P值均<0.05)。此外,与hUC-MSC^(OE-EV)组比较,hUC-MSC^(Numb-OE)组肝再生相关指标(白蛋白、肝细胞核因子4α)、Numbp53信号轴相关分子(Numb、pNumb、Mdm2、p53)的表达水平均较hUC-MSC^(OE-EV)组显著改善,差异有统计学意义(P值均<0.05)。结论 过表达Numb基因可增强hUC-MSC对CLF的干预效果,其机制可能与激活Numb-PTB^(L)-p53-HNF4α轴,促hUC-MSC肝向分化,进而促进肝再生有关。 展开更多

关键词 肝纤维化 numb基因 脐带间充质干细胞 胆管反应 numb-PTB^(L)-p53-HNF4α轴

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宫颈癌组织细胞中Numb基因表达及相关性研究 被引量：5

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作者 田英 王双勇 +1 位作者 赵雅 兰雅娴 《现代检验医学杂志》 CAS 2015年第6期42-45,共4页

目的探讨Numb基因在宫颈癌组织中的表达及对宫颈癌细胞增殖的影响。方法收集30例正常宫颈组织、56例宫颈癌组织和17例原位癌组织采用免疫组织化学染色观察Numb基因的表达情况。通过构建siRNA表达载体下调宫颈癌HeLa细胞株中内源性Numb... 目的探讨Numb基因在宫颈癌组织中的表达及对宫颈癌细胞增殖的影响。方法收集30例正常宫颈组织、56例宫颈癌组织和17例原位癌组织采用免疫组织化学染色观察Numb基因的表达情况。通过构建siRNA表达载体下调宫颈癌HeLa细胞株中内源性Numb基因表达，MTT实验检测下调Numb表达后细胞增殖能力的变化。结果免疫组织化学染色结果显示，Numb在宫颈癌及原位癌中的表达明显高于正常宫颈组织，其阳性表达率分别为72．2％，69．6％和60％，（χ^2=30．259，P〈0．05）。siRNA干扰宫颈癌HeLa细胞，干扰后Numb基因的蛋白表达水平（灰度值分别为：0．51±0．04和0．56±0．05）较对照组（灰度值分别为：0．78±0．06和0．75±0．05）明显下降（t=4．2，P〈0．05）。MTT实验显示，干扰Numb基因后HeLa细胞培养第1，3，5和7天时，增殖活力（吸光度值分别为：0．211±0．06l，0．235±0．013，0．438±0．05l和0．773±0．032）较对照组（吸光度值分别为：0．225±0．047，0．300±0．026，0．549±0．039和1．023士0．041）显著下降，差异具有统计学意义（t=5．1，P〈0．05）。结论Numb基因在宫颈癌组织中高表达，Numb在宫颈癌中可能通过促进癌细胞的增殖而促进宫颈癌的进展。 展开更多

关键词 numb基因 宫颈癌 细胞增殖

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过表达Numb基因对人膀胱癌5637细胞周期和增殖的影响 被引量：1

3

作者 司马晋 张保 +3 位作者 艾青 王保军 马鑫 张旭 《肿瘤预防与治疗》 2016年第1期1-4,共4页

目的:探讨Numb基因对人膀胱癌细胞周期和增殖能力的影响及相关机制。方法:选取人膀胱癌细胞5637为研究对象,采用Numb-ORF表达质粒转染细胞为实验组,设置阴性对照和空白对照组。采用荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹技术检测各组中Num... 目的:探讨Numb基因对人膀胱癌细胞周期和增殖能力的影响及相关机制。方法:选取人膀胱癌细胞5637为研究对象,采用Numb-ORF表达质粒转染细胞为实验组,设置阴性对照和空白对照组。采用荧光定量聚合酶链式反应和蛋白质印迹技术检测各组中Numb基因和细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)的表达;采用流式细胞技术检测各组的细胞周期;采用酶标仪检测细胞在490nm的吸光度值,评价各组细胞的增殖活力。结果:实验组Numb的△C_T值为1.58±0.41,阴性对照组为5.66±0.53,空白对照组为5.81±0.47,差异有统计学意义(F=77.39,P=0.00);实验组Cyclin D1的△C_T值为4.92±0.73,阴性对照组为2.59±0.33,空白对照组为2.45±0.26,差异有统计学意义(F=11.70,P=0.01)。实验组中G_0/G_1期细胞的比例(%)为49.76±7.07,明显高于阴性对照组的36.52±3.32和空白对照组的38.21±2.06,差异有统计学意义(F=7.17,P=0.03)。增殖实验中,实验组24 h的吸光度值为0.35±0.08,明显低于阴性对照组0.52±0.06和空白对照组0.55±0.04(F=9.03,P=0.02)。结论:Numb基因可以提高G_0/G_1期细胞比例,抑制膀胱癌细胞增殖,其机制可能是通过抑制Cyclin D1表达实现。 展开更多

关键词 膀胱肿瘤 numb基因 细胞周期蛋白D1

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Numb基因调控前列腺癌PC-3细胞生长的研究

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作者 张建育 潘振良 《福建医药杂志》 CAS 2021年第5期115-117,F0004,共4页

目的探讨Numb基因与前列腺癌发生发展的关联性及其与p53、Notch信号通路之间的关系。方法通过构建Numb过表达质粒,转染人PC-3细胞(CRPC细胞),建立稳转细胞株并验证,通过CCK-8检测肿瘤细胞的增殖水平;通过免疫印迹检测过表达Numb后对细胞... 目的探讨Numb基因与前列腺癌发生发展的关联性及其与p53、Notch信号通路之间的关系。方法通过构建Numb过表达质粒,转染人PC-3细胞(CRPC细胞),建立稳转细胞株并验证,通过CCK-8检测肿瘤细胞的增殖水平;通过免疫印迹检测过表达Numb后对细胞中p53与Notch1的表达影响;将PC-3细胞植入裸鼠皮下,建立人去势抵抗性前列腺癌裸鼠移植瘤模型;计算并绘制肿瘤的生长曲线,通过流式细胞技术检测细胞的生长周期,并对移植瘤进行病理鉴定。结果过表达Numb可抑制PC-3细胞增殖水平。过表达Numb可抑制PC-3细胞中Notch1表达、促进p53的表达。过表达Numb可抑制裸鼠种植瘤的生长,主要是通过减少PC-3细胞中S期细胞比例,并且免疫组化也证实过表达Numb可抑制肿瘤中Notch1表达并促进p53表达。结论Numb基因的过表达会促进抑癌基因p53的激活以及癌基因Notch表达下调,抑制前列腺癌的发生发展。 展开更多

关键词 前列腺癌 numb基因 NOTCH基因 P53基因 裸鼠移植瘤

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Numb基因不同亚型对乳腺癌细胞MCF-7增殖和迁移能力的影响 被引量：2

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作者 苏杭 王保垒 +1 位作者 李华顺 朱晨光 《上海大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第3期476-485,共10页

[目的]探讨Numb基因的4种不同亚型对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响.[方法]应用转录激活样效应因子核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)技术敲除乳腺癌细胞MCF-7中Numb基因,分别将p65,p66,p71和p72这4种Num... [目的]探讨Numb基因的4种不同亚型对乳腺癌细胞增殖和迁移能力的影响.[方法]应用转录激活样效应因子核酸酶(transcription activator-like effector nuclease,TALEN)技术敲除乳腺癌细胞MCF-7中Numb基因,分别将p65,p66,p71和p72这4种Numb亚型的表达载体转染进Numb-KO MCF-7细胞,应用CCK-8细胞增殖实验、细胞划痕实验、流式细胞术检测Numb基因及其4种亚型对MCF-7细胞增殖和迁移能力的影响.[结果]利用TALEN技术可以有效敲除MCF-7细胞中Numb基因,Numb-KO MCF-7组细胞的增殖和侵袭能力明显高于正常MCF-7细胞,Numb亚型p72对Numb-KO MCF-7细胞的增殖有明显的抑制作用,Numb亚型p65,p66,p71和p72均对Numb-KO MCF-7细胞的迁移有明显抑制作用. 展开更多

关键词 乳腺癌 numb基因 亚型 增殖 迁移

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原发性肝癌中Numb和VEGF的表达及临床意义 被引量：21

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作者 万健 唐才喜 +2 位作者 冯斌 陈迅 王志明 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期39-44,共6页

目的:探讨Numb和VEGF在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义。方法:免疫组化法检测60例HCC患者癌组织与癌旁组织,以及27例肝外伤与肝血管瘤患者正常肝组织中Numb与VEGF的表达,分析两者表达与HCC患者临床病理因素以及预后的关系。结果:... 目的:探讨Numb和VEGF在原发性肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义。方法:免疫组化法检测60例HCC患者癌组织与癌旁组织,以及27例肝外伤与肝血管瘤患者正常肝组织中Numb与VEGF的表达,分析两者表达与HCC患者临床病理因素以及预后的关系。结果:与正常肝组织及癌旁组织比较,HCC组织中Numb阳性表达率明显降低,而VEGF的阳性表达率明显升高(均P<0.05),且在HCC组织中两者表达呈负相关(r=-0.5248,P=0.01);Numb与VEGF的表达均与患者TNM分期、Edmondson分级、门脉癌栓及包膜有无有关(均P<0.05);Numb阴性表达患者的总的生存期明显短于阳性表达者,而VEGF情况则相反(均P<0.05)。结论:在HCC组织中,Numb表达下调,而VEGF表达上调,且两者之间的消长可能与HCC的侵袭性及不良预后密切相关。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 numb基因 血管内皮生长因子类 肿瘤侵润

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民猪NUMB基因克隆与组织表达分析

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作者 刘娣 王鑫鑫 +4 位作者 别墅 张冬杰 汪亮 李苓 曹越 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期51-57,共7页

研究采用RT-PCR技术结合克隆测序方法,克隆出全长2 004 bp NUMB基因序列,其中包括1 782 bp开放读码框,该基因编码592个氨基酸。利用生物信息学分析软件对该基因氨基酸序列预测与分析发现:NUMB蛋白二级结构中,转角占很大比例,且蛋白亲水... 研究采用RT-PCR技术结合克隆测序方法,克隆出全长2 004 bp NUMB基因序列,其中包括1 782 bp开放读码框,该基因编码592个氨基酸。利用生物信息学分析软件对该基因氨基酸序列预测与分析发现:NUMB蛋白二级结构中,转角占很大比例,且蛋白亲水性较强,结构功能域分析发现该蛋白多肽链存在一个N端磷酸酪氨酸结构域(PTB),位于第37~162氨基酸之间。基于不同物种NUMB蛋白序列所构建分子进化树表明,猪与牛、骆驼亲缘关系最近,而与斑马鱼最远。在m RNA水平上,NUMB基因肺中表达量最高,大肠中表达量最低。 展开更多

关键词 民猪 numb基因 反转录PCR 克隆 生物信息学

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卵巢癌组织中Numb、TFR1表达量的变化及其临床病理价值研究

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作者 黄武 张勇 +1 位作者 邓晓杨 樊元春 《海南医学院学报》 CAS 2019年第16期1251-1255,共5页

目的:探讨卵巢癌组织中Numb、TFR1表达量的变化及其临床病理价值。方法:选择在本院及成都医学院附属医院、绵阳市中心医院接受根治性手术治疗的卵巢癌患者90例,同期接受手术治疗的卵巢巧克力囊肿患者115例,留取两组术中病灶组织标本分... 目的:探讨卵巢癌组织中Numb、TFR1表达量的变化及其临床病理价值。方法:选择在本院及成都医学院附属医院、绵阳市中心医院接受根治性手术治疗的卵巢癌患者90例,同期接受手术治疗的卵巢巧克力囊肿患者115例,留取两组术中病灶组织标本分别作为卵巢癌组、卵巢巧克力囊肿组。检测卵巢病灶组织中Numb、TFR1基因、卵巢癌相关增殖、侵袭及自噬基因表达量。采用Pearson检验评估卵巢癌组织中Numb、TFR1基因表达量与癌细胞增殖、侵袭、自噬活力的相关关系。结果:卵巢癌组病灶中Numb mRNA的表达量低于卵巢巧克力囊肿组,TFR1 mRNA的表达量高于卵巢巧克力囊肿组;增殖基因C3G、Clusterin、FUNDC1、PIWIL4、TNFAIP8 mRNA的表达量高于卵巢巧克力囊肿组,Let-7i mRNA的表达量低于卵巢巧克力囊肿组;侵袭基因BRMS1、XAV939、OVCA1 mRMA的表达量低于卵巢巧克力囊肿组,CUL4A、MTA1 mRNA的表达量高于卵巢巧克力囊肿组;自噬基因FTY720、Beclin1 mRNA的表达量低于卵巢巧克力囊肿组,NAC-1 mRNA的表达量高于卵巢巧克力囊肿组。相关性分析显示,卵巢癌组织中Numb、TFR1基因表达量与癌细胞的增殖、侵袭、自噬活力直接相关。结论:卵巢癌组织中Numb基因表达量异常降低、TFR1基因表达量异常增高,与癌细胞的恶性生物学行为直接相关。 展开更多

关键词 卵巢癌 numb TFR1 增殖基因 侵袭基因 自噬基因

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Numb基因对膀胱癌细胞侵袭和迁移能力的影响及机制研究 被引量：10

9

作者 司马晋 张保 +3 位作者 马鑫 王保军 艾青 张旭 《中华泌尿外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期226-229,共4页

目的 研究Numb基因对膀胱癌细胞侵袭和迁移能力的影响及相关机制.方法 2013年6月我们使用Numb-ORF表达质粒和pCMV6-Entry空载体质粒转染人膀胱癌细胞T24,作为实验组和阴性对照组,无质粒转染的人膀胱癌细胞T24作为空白对照组,采用荧光定... 目的 研究Numb基因对膀胱癌细胞侵袭和迁移能力的影响及相关机制.方法 2013年6月我们使用Numb-ORF表达质粒和pCMV6-Entry空载体质粒转染人膀胱癌细胞T24,作为实验组和阴性对照组,无质粒转染的人膀胱癌细胞T24作为空白对照组,采用荧光定量PCR和蛋白质印迹技术检测各组的Numb和基质金属蛋白酶-9（MMP-9）的表达情况,采用细胞划痕实验和Transwell小室法分别检测细胞的迁移和侵袭能力.结果 荧光定量PCR检测显示,与阴性对照组（△CT值5.871±0.685）和空白对照组（△CT值5.618±0.597）比较,实验组中Numb表达（△CT值1.655±0.432）显著升高（P＜0.01）.实验组的MMP-9表达（△CT值8.423±0.202）低于阴性对照组（△CT值7.294±0.138）和空白对照组（△CT值7.220±0.118）,差异有统计学意义（P＜0.01）.划痕实验中,12h的划痕修复比实验组为0.525±0.037,阴性对照组为0.693±0.034,空白对照组为0.701±0.038,组间比较差异有统计学意义（P=0.004）.侵袭实验中,实验组的穿膜细胞数为（12.6±3.2）个,明显少于阴性对照组[（130.8±9.2）个]和空白对照组[（132.2±10.6）个],差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 上调Numb基因可以降低人膀胱癌细胞T24的侵袭和迁移能力,其机制可能是通过Numb负性调节MMP-9实现的. 展开更多

关键词 膀胱癌 numb基因 基质金属蛋白酶-9 侵袭 迁移

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MSI-2小干扰RNA对急性髓系白血病细胞株THP-1细胞增殖及NUMB表达的影响 被引量：2

10

作者 黄芸菲 牧启田 +2 位作者 余梦霞 王云贵 金洁 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期858-861,共4页

目的：探讨Musashi-2（MSI-2）基因小干扰RNA（siRNA）对急性髓系白血病细胞株THP-1细胞增殖的抑制作用及其下游通路基因NUMB表达的影响。方法选择针对MSI-2基因三种不同的siRNA片段，在脂质体介导下转染THP-1细胞，采用MTT法、集落形... 目的：探讨Musashi-2（MSI-2）基因小干扰RNA（siRNA）对急性髓系白血病细胞株THP-1细胞增殖的抑制作用及其下游通路基因NUMB表达的影响。方法选择针对MSI-2基因三种不同的siRNA片段，在脂质体介导下转染THP-1细胞，采用MTT法、集落形成实验及AnnexinⅤ/PI法分别观察沉默MSI-2基因后对细胞增殖、集落生成和细胞凋亡的影响；Western blot法检测caspase-3、PARP和NUMB蛋白表达水平。结果 HSS 133730片段干扰后MSI-2 mRNA及蛋白水平的降低最明显。转染MSI-2 siRNA 24 h后，THP-1细胞增殖抑制率为（47.89±7.64）%，明显高于阴性对照组（无关序列）（P=0.005）。培养9 d后，MSI-2 siRNA组细胞集落数为7.50±1.53，明显低于阴性对照组的35.75±7.46（P＆lt;0.001）；转染MSI-2 siRNA 24和48 h后，THP-1细胞凋亡率分别为（15.22±1.52）%和（33.83±3.96）%，均明显高于阴性对照组的（9.67±1.27）%和（12.42±2.07）%（P值分别为0.008和0.001），并伴随caspase-3和PARP剪切增加；同时也观察到潜在下游基因NUMB上调。结论沉默MSI-2基因能抑制THP-1细胞增殖，诱导细胞凋亡；上调NUMB可能是其分子作用机制之一。 展开更多

关键词 基因 MSI-2 RNA 小分子干扰 THP-1细胞 基因 numb

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Numb基因抑制细胞周期蛋白D1表达影响人肾癌细胞Caki-1的细胞周期和增殖 被引量：1

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作者 司马晋 张保 +3 位作者 夏志国 王保军 马鑫 张旭 《肿瘤研究与临床》 CAS 2016年第1期1-5,共5页

目的研究Numb基因对人肾癌细胞的细胞周期和增殖能力的影响及相关机制。方法选取人肾癌Caki-1细胞为研究对象，采用Numb—ORF表达质粒转染细胞为实验组，设置阴性对照和空白对照组。采用荧光定量聚合酶链反应（RT—qPCR）和蛋白质印迹... 目的研究Numb基因对人肾癌细胞的细胞周期和增殖能力的影响及相关机制。方法选取人肾癌Caki-1细胞为研究对象，采用Numb—ORF表达质粒转染细胞为实验组，设置阴性对照和空白对照组。采用荧光定量聚合酶链反应（RT—qPCR）和蛋白质印迹法检测各组中Numb和细胞周期蛋白D1（cvclin D1）的表达，采用流式细胞术检测各组的细胞周期，采用酶标仪检测细胞在波长490nm处的吸光度值，评价各组细胞的增殖活力。结果实验组PCR扩增Numb的△Ct值为1．92±0．39，阴性对照组为5．05±0．45，空白对照组为5．13±0．31；实验组蛋白质相对表达强度为6．67±0．83，阴性对照组为3．08±0．47，空白对照组为2．85±0．36，差异有统计学意义（P=0．00）；实验组cyclin D1的△Ct值为6．20±0．87，阴性对照组为4．35±0．51，空白对照组为4．56±0．31，差异有统计学意义（P=0．02）。实验组蛋白质相对表达强度为5．85±0．72，阴性对照组为10．04．±0．83，空白对照组为11．88±1．26，差异有统计学意义（P=0．00）。实验组中G0／G1期细胞的比例为（54．29±4．15）％，高于阴性对照组的（38．69±2．60）％和空白对照组的（41．28±1．29）％，差异有统计学意义（P=0．00）。增殖实验中，实验组24h的吸光度值为0．67±0．07，低于阴性对照组（0．93±0．10）和空白对照组（1．02±0．06），差异有统计学意义（P=0．00）。结论Numb基因可以提高肾癌Caki-1细胞岛／G。期细胞比例，抑制细胞增殖，其机制可能是通过抑制cyclin D1表达实现的。 展开更多

关键词 肾肿瘤 基因 numb 细胞周期蛋白D1

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Numb基因过表达对人肾癌细胞侵袭和迁移能力的影响 被引量：2

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作者 司马晋 张保 +3 位作者 毛燕新 司马欣元 艾青 张旭 《肿瘤研究与临床》 CAS 2015年第9期582-585,共4页

目的：研究Numb基因对人肾癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其相关机制。方法选取人肾癌细胞786-O为研究对象，采用Numb-ORF表达质粒转染细胞为实验组，设置阴性对照组及空白对照组。采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白质印迹技术检测... 目的：研究Numb基因对人肾癌细胞侵袭和迁移能力的影响及其相关机制。方法选取人肾癌细胞786-O为研究对象，采用Numb-ORF表达质粒转染细胞为实验组，设置阴性对照组及空白对照组。采用荧光定量聚合酶链反应（PCR）和蛋白质印迹技术检测各组中Numb和基质金属蛋白酶9（MMP-9）的表达情况，采用细胞划痕实验和Transwell小室法分别检测细胞的迁移和侵袭能力。结果实验组中Numb的相对表达水平为36.13±8.33，阴性对照组为2.51±0.27，空白对照组为2.87±0.21，差异有统计学意义（P＝0.00）；实验组MMP-9相对表达水平为2.36±0.29，阴性对照组为8.73±0.91，空白对照组为8.99±0.78，差异有统计学意义（P＝0.00）。划痕实验中，12 h划痕修复比为：实验组0.53±0.06，阴性对照组0.73±0.09，空白对照组0.75±0.08，差异有统计学意义（P＝0.02）。侵袭实验中，实验组的穿膜细胞数为（31.40±5.96）个，少于阴性对照组的（126.93±13.61）个和空白对照组的（131.87±15.42）个，差异有统计学意义（P＝0.00）。结论上调Numb基因可以降低人肾癌细胞786-O的侵袭和迁移能力，该作用可能是通过Numb负性调节MMP-9实现的。 展开更多

关键词 肾肿瘤 numb基因 基质金属蛋白酶9 侵袭 迁移

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NUMB shRNA真核表达载体构建及对人U87胶质瘤细胞NUMB、p53表达的影响研究

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作者 顾小宇 赵卫国 +3 位作者 尚寒冰 张卫峰 赵开军 赵建祥 《中国临床神经科学》 2010年第3期248-251,共4页

目的:构建NUMB shRNA(短发夹RNA)真核表达载体,体外评价其对人U87胶质瘤细胞NUMB及p53 mRNA及P53蛋白表达的影响。方法:免疫荧光细胞化学染色证实NUMB、P53蛋白在U87胶质瘤细胞的表达。构建针对NUMB mRNA表达的一对反向shRNA互补序列,... 目的:构建NUMB shRNA(短发夹RNA)真核表达载体,体外评价其对人U87胶质瘤细胞NUMB及p53 mRNA及P53蛋白表达的影响。方法:免疫荧光细胞化学染色证实NUMB、P53蛋白在U87胶质瘤细胞的表达。构建针对NUMB mRNA表达的一对反向shRNA互补序列,克隆入psilencer 3.1/hygro真核表达载体,在测序鉴定无误后将NUMBshRNA转染至U87胶质瘤细胞,用RT-PCR和Western blot检测U87细胞转染前后NUMB及p53基因和P53蛋白的表达水平变化。结果:基因测序证实质粒构建成功,RT-PCR和Western blot结果证实U87细胞转染NUMB shRNA后48 h NUMB mRNA及蛋白表达水平均下降,P53蛋白表达水平也明显下调。结论:在U87胶质瘤细胞中,NUMB参与了P53蛋白表达水平的调控,提示NUMB是一个潜在的脑胶质瘤基因及药物治疗的靶点。 展开更多

关键词 numb 短发夹RNA 胶质瘤 P53基因

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成体肝脏Numb基因过表达可抑制胆汁性肝纤维化进展

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作者 许燕楠 胥文 +5 位作者 陈佳美 刘伟 陈高峰 张华 刘平 慕永平 《中华肝脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期1175-1181,共7页

目的探讨成体肝脏Numb基因过表达是否可有效干预胆汁淤积性肝纤维化(CLF)的进展。方法SD大鼠24只,随机分为假手术组(Sham,n=6)、胆总管结扎组(BDL,n=6)、空载体质粒组(Numb-EV,n=6)和Numb基因过表达组(Numb-OE,n=6)。胆总管结扎制备CLF... 目的探讨成体肝脏Numb基因过表达是否可有效干预胆汁淤积性肝纤维化(CLF)的进展。方法SD大鼠24只,随机分为假手术组(Sham,n=6)、胆总管结扎组(BDL,n=6)、空载体质粒组(Numb-EV,n=6)和Numb基因过表达组(Numb-OE,n=6)。胆总管结扎制备CLF模型,并于造模的同时将载有克隆Numb基因的腺相关病毒(AAV)经脾脏注射至大鼠体内,4周末取材。检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、白蛋白(Alb)、血清总胆红素(TBil)、血清胆汁酸(TBA)、肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量、肝组织中平滑肌肌动蛋白(α-SMA)与细胞角蛋白(CK)7、CK19的表达情况及肝组织病理情况。多组均数比较采用方差分析。结果与Sham组比较,BDL组大鼠肝组织Numb mRNA水平显著降低(0.872±0.237与0.452±0.147,P=0.003);与Numb-EV组比较,Numb-OE组肝组织Numb mRNA水平显著升高(0.487±0.122与1.094±0.345,P<0.01)。与Sham组比较,BDL组肝组织Hyp含量(μg/L)(288.46±49.49与901.98±271.85,P<0.01)及α-SMA mRNA水平(0.858±0.234与8.976±1.398,P<0.01)均显著升高;与Numb-EV组比较,Numb-OE组Hyp含量(μg/L)(864.32±113.54与580.44±171.77,P=0.039)及α-SMA mRNA水平(6.138±1.443与1.322±0.859,P<0.01)以及蛋白水平显著降低。与Sham组比较,BDL组血清ALT、AST、TBil、TBA水平均显著升高(P值均<0.01),Alb含量显著降低(P<0.01);与Numb-EV组比较,Numb-OE组AST、TBil水平均显著降低(P值均<0.01),ALT、TBA水平也明显降低(P值均<0.05),Alb含量显著升高(P值均<0.01),差异有统计学意义。与Sham组比较,BDL组CK7、CK19的mRNA表达水平均显著升高(1.40±0.42与43.78±7.56、1.11±0.51与363.81±134.84,P值均<0.01);与Numb-EV组比较,Numb-OE组CK7、CK19的mRNA表达水平显著降低(343.19±81.22与3.22±2.34、40.53±14.02与15.68±9.36,P值均<0.01)。结论成体肝脏Numb基因过表达可抑制CLF进展,这可能成为CLF治疗的新靶点。 展开更多

关键词 肝纤维化 胆汁淤积 numb基因 胆管增生 腺相关病毒

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