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LTF基因在鼻咽癌细胞系中生物学功能的初步研究
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作者 单文姣 郝一 +4 位作者 廖鸿纯 张军 李亚林 杨姣 楚艳娥 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第25期4843-4846,4890,共5页
目的:初步探讨野生型LTF基因在鼻咽癌细胞系中的生物学功能。方法:野生型LTF导入鼻咽癌细胞系,G418筛选,RT-PCR和Western-blotting分别在mRNA和蛋白质水平进行验证,得到稳定表达LTF基因的鼻咽癌细胞系。流式细胞术、平板克隆形成实验和... 目的:初步探讨野生型LTF基因在鼻咽癌细胞系中的生物学功能。方法:野生型LTF导入鼻咽癌细胞系,G418筛选,RT-PCR和Western-blotting分别在mRNA和蛋白质水平进行验证,得到稳定表达LTF基因的鼻咽癌细胞系。流式细胞术、平板克隆形成实验和MTT法分别检测细胞周期、细胞的克隆形成能力和细胞生长曲线。结果:成功导入LTF并稳定表达的鼻咽癌细胞系,G0-G1期细胞百分比例明显增加(72.01%vs 62.31%),G2-M期细胞百分比例减少(6.26%vs 10.81%);克隆形成能力降低(39.5%vs 59.7%),体外瘤细胞增殖能力降低(P<0.05)。结论:LTF基因可阻滞细胞周期、抑制鼻咽癌细胞系的增殖能力和克隆形成率,同时为进一步的体内试验研究奠定基础。 展开更多
关键词 ltf 鼻咽癌 真核表达 抑瘤基因
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地西他滨对急性T淋巴细胞白血病细胞株Molt4细胞的作用及其机制研究 被引量：10
2
作者 刘进 黄崇媚 +5 位作者 程辉 唐古生 胡晓霞 周虹 王健民 杨建民 《中华血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期230-234,共5页
目的 探讨去甲基化药物地西他滨对急性T淋巴细胞白血病细胞株Molt4细胞的影响及其可能的作用机制.方法 CCK-8法检测地西他滨对细胞增殖的影响;Annexin Ⅴ/PI双重染色法检测地西他滨对细胞凋亡的影响;PI染色法检测细胞周期变化;转录组高... 目的 探讨去甲基化药物地西他滨对急性T淋巴细胞白血病细胞株Molt4细胞的影响及其可能的作用机制.方法 CCK-8法检测地西他滨对细胞增殖的影响;Annexin Ⅴ/PI双重染色法检测地西他滨对细胞凋亡的影响;PI染色法检测细胞周期变化;转录组高通量测序筛选组间差异基因;亚硫酸氢盐测序法检测地西他滨作用Molt4细胞前后乳铁蛋白（LTF）基因启动子CpG岛的甲基化水平变化;实时定量RT-PCR及Western blot法分别检测LTF mRNA及蛋白的表达变化.结果 地西他滨能有效抑制Molt4细胞的增殖,抑制率呈时间和剂量依赖性增加,并能诱导细胞凋亡,使细胞阻滞于G0/G1期.0.50 μmol/L地西他滨处理72 h后,Molt4细胞LTF基因启动子甲基化率较对照组降低（45.0％对72.3％）,差异有统计学意义（P＜0.05）,mRNA和蛋白表达增加（P值均＜0.05）,同时还检测到caspase 3、caspase 9凋亡蛋白表达增加（P值均＜0.05）.结论 地西他滨诱导Molt4细胞凋亡,阻滞细胞周期在G0/G1期,抑制细胞增殖.LTF基因是地西他滨作用的重要靶点. 展开更多
关键词 地西他滨 白血病 T细胞 Molt4细胞
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