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A Study on the Molecular Switch of Gene Expression of the Mouse Heart Nuclear DNA Fragments
1
作者 袁明秀 JIN +6 位作者 Rui Niu Weiran Chen Zhijun Zhang Zhihong 《High Technology Letters》 EI CAS 2001年第4期1-7,共7页
It is observed by in situ stain that LDH (1 5) ...nNAD + can probably enter the nucleopore and can be bound bound specifically with the genes that encode them. During the in vitro expression, the dilution of heart nuc... It is observed by in situ stain that LDH (1 5) ...nNAD + can probably enter the nucleopore and can be bound bound specifically with the genes that encode them. During the in vitro expression, the dilution of heart nuclear DNA fragments could enhance the expression activity of LDH/DNA and the amount of expressed LDH (1 5) is in proportion to the amount of dissociable LDH (1 5) on the LDH/DNA. With the integration of 14C Leu to the proteins, it is also observed that the addition of LDH (1 5) ...nNAD + can suppress the in vitro expression activity of LDH/DNA. AFM observation shows that the regulation sequence at the both ends of active genes may be bound with such active factors as proteins encoded by the genes which probably is the main molecular switch of gene expression and regulation we have been always searching for. Our work shows the prospective application of the combination of AFM and isotope labeling in the research of biological reaction. 展开更多
关键词 Molecular switch of gene expression Positive and negative feedback regulation mechanism gene expression and regulation AFM
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HIF-1a、G0S2、C5AR1及BDKRB1在胃癌组织中的表达及临床意义
2
作者 蒲钦 孟宪梅 年媛媛 《内蒙古医学杂志》 2025年第8期912-918,共7页
目的探讨缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)、G0/G1开关基因2(G0S2)、补体C5a受体1(C5AR1)及缓激肽受体B1(BDKRB1)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法收集我院2020年1月至2023年8月行胃癌根治性手术112例患者的临床资料,采用免疫组化检测胃癌... 目的探讨缺氧诱导因子-1a(HIF-1a)、G0/G1开关基因2(G0S2)、补体C5a受体1(C5AR1)及缓激肽受体B1(BDKRB1)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法收集我院2020年1月至2023年8月行胃癌根治性手术112例患者的临床资料,采用免疫组化检测胃癌组织中HIF-1α、G0S2、C5AR1及BDKRB1的表达,分析其与临床病理特征的相关性。用Spearman相关性分析四者关联,以受试者工作特征曲线评估四者及其联合对胃癌患者淋巴结转移的预测价值,通过GEPIA2数据库分析四者表达对胃癌患者总生存期的影响。结果胃癌组织中HIF-1α、G0S2、C5AR1及BDKRB1的阳性表达率分别为67.86%(76/112)、50.89%(57/112)、54.46%(61/112)、69.64%(78/112)。四种因子的表达与胃癌的淋巴结转移情况、周围神经侵犯程度和病理分期呈正相关;HIF-1α的表达与胃癌的大体类型和侵犯深度有关;C5AR1的表达与胃癌大体类型也有关。Spearman相关性显示,四种蛋白的表达在胃癌组织中均呈正相关性。HIF-1α、G0S2、C5AR1及四者联合预测胃癌患者淋巴结转移具有一定的价值,BDKRB1无预测价值。GEPIA2数据库分析显示G0S2、C5AR1高表达的胃癌患者总生存期缩短。结论胃癌组织中HIF-1α、G0S2、C5AR1及BDKRB1的表达与肿瘤的淋巴结转移情况、侵犯程度及病理分期联系紧密,高表达的G0S2与C5AR1是胃癌预后的不利因素,四种因子可作为胃癌患者病情预估及个体化诊疗的参考指标。 展开更多
关键词 胃癌 缺氧诱导因子-1Α G0/G1开关基因2 补体C5a受体1 缓激肽受体B1 免疫组化 生物标志物
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Sin3A基因变异致Witteveen-Kolk综合征遗传学分析
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作者 卢亚亚 彭慧芳 +1 位作者 王剑 娄丹 《检验医学》 CAS 2024年第2期126-131,共6页
目的 探讨开关不敏感3转录调节因子家族成员A(Sin3A)基因变异导致的Witteveen-Kolk综合征临床表型和遗传学特点。方法 收集1例发育迟缓患儿的临床资料,对患儿及其父母进行全外显子基因测序,采用Sanger测序验证可疑变异,并进行家系分析... 目的 探讨开关不敏感3转录调节因子家族成员A(Sin3A)基因变异导致的Witteveen-Kolk综合征临床表型和遗传学特点。方法 收集1例发育迟缓患儿的临床资料,对患儿及其父母进行全外显子基因测序,采用Sanger测序验证可疑变异,并进行家系分析。结合文献分析Witteveen-Kolk综合征的临床特征和基因变异特点。结果 Witteveen-Kolk综合征患儿临床表现主要为轻中度智力障碍或发育迟缓、特殊面容(长脸、前额突出、鼻梁凹陷、长人中等)、身材矮小。颅脑磁共振成像(MRI)显示不同程度的脑畸形。全外显子基因测序结果显示,患儿Sin3A基因存在移码变异c.803dupC(p.Leu269Thrfs*37)(杂合)。Sanger测序证实存在变异位点,患儿父母该位点均为正常基因型。gnomAD等对照人群数据库未收录该变异位点,根据美国医学遗传学和基因组学学会(ACMG)/美国分子病理学学会(AMP)指南归类为“致病性”变异。结论 Sin3A基因变异可导致Witteveen-Kolk综合征。基因检测可明确生长发育迟缓伴特殊面容患儿的病因。 展开更多
关键词 开关不敏感3转录调节因子家族成员A基因 全外显子组测序 Witteveen-Kolk综合征 智力发育障碍 发育迟缓
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昆虫蜕皮激素受体及其类似物的杀虫机制研究进展 被引量:26
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作者 刘永杰 徐蓬军 +2 位作者 李艳伟 束怀瑞 黄大卫 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期67-73,共7页
昆虫的蜕皮、变态和繁殖受到蜕皮激素的严格调控。蜕皮激素作用靶标由蜕皮激素受体(ecdysteroidreceptor,EcR)和超气门蛋白(ultraspiracleprotein,USP)组成,蜕皮激素与EcR/USP作用启动蜕皮级联反应过程。昆虫EcR具有种类或类群的特异性... 昆虫的蜕皮、变态和繁殖受到蜕皮激素的严格调控。蜕皮激素作用靶标由蜕皮激素受体(ecdysteroidreceptor,EcR)和超气门蛋白(ultraspiracleprotein,USP)组成,蜕皮激素与EcR/USP作用启动蜕皮级联反应过程。昆虫EcR具有种类或类群的特异性,研究其结构、功能和调控机理在开发环境友好型新药剂和基因调控开关等方面具有重要指导作用。该文介绍了昆虫EcR的结构和功能特点,蜕皮激素及其类似物与EcR/USP的分子作用方式,以及基于EcR/USP的新杀虫剂创制和基因调控开关设计等方面的重要进展。 展开更多
关键词 蜕皮激素受体 超气门蛋白 配体结合域 级联反应 活性筛选 基因开关
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在杂交作物分子育种中利用普通核雄性不育的几个可能途径 被引量:4
5
作者 李新奇 袁隆平 +1 位作者 邓启云 肖金华 《植物学通报》 CSCD 北大核心 2003年第5期625-631,共7页
由一对隐性基因控制的普通核雄性不育性遗传方式能够满足对植物最佳雄性不育系选育的要求 ,是水稻等作物杂种优势利用的极好遗传工具。如果能解决其不育系繁殖问题 ,将优于现有的其他杂种优势利用方式。克隆出普通核雄性不育性的可育基... 由一对隐性基因控制的普通核雄性不育性遗传方式能够满足对植物最佳雄性不育系选育的要求 ,是水稻等作物杂种优势利用的极好遗传工具。如果能解决其不育系繁殖问题 ,将优于现有的其他杂种优势利用方式。克隆出普通核雄性不育性的可育基因 ,通过叶绿体转化 ,将核雄性不育性可育基因向普通核雄性不育株细胞质转移 ,创造普通核雄性不育株的保持系 ;通过种子成熟后表达的启动子 ;和以位点特异性重组技术为基础的基因开关以及化学诱导启动子的利用 ,都可能繁殖出 1 0 0 %不育株率的普通核雄性不育系 ,创造普通核雄性不育性利用的新途径 。 展开更多
关键词 普通核雄性不育性 诱导启动子 叶绿体转化 基因开关 杂交作物 分子育种
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转基因表达的精细调控 被引量:2
6
作者 储成才 陈帅 司丽珍 《杭州师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2001年第4期43-45,共3页
将细胞特异性表达启动子与可诱导系统相结合 ,建立可用于植物转基因表达时、空、量三维调控的基因开关系统 。
关键词 基因开关 基因表达 启动子
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构建Tet-on调控稳定表达肝细胞生长因子、成纤维细胞生长因子-4的人类MSCs细胞株 被引量:2
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作者 肖江强 施晓雷 +1 位作者 袁献温 丁义涛 《世界华人消化杂志》 CAS 2015年第27期4317-4325,共9页
目的:通过慢病毒转染UE7T-13细胞,构建Tet-on基因开关调控稳定表达肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、成纤维细胞生长因子-4(fibroblast growth factor 4,FGF4)的人类骨髓间充质干细胞株.方法:全基因合成HGF和FGF4序列,通... 目的:通过慢病毒转染UE7T-13细胞,构建Tet-on基因开关调控稳定表达肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)、成纤维细胞生长因子-4(fibroblast growth factor 4,FGF4)的人类骨髓间充质干细胞株.方法:全基因合成HGF和FGF4序列,通过酶切、重组分别构建包含目的基因HGF、FGF4的两个慢病毒载体plenti6.3/TO-HGF和plenti6.3/TO-FGF4,包装并计算其滴度.以U E7T-13细胞最适M O I值稀释慢病毒Lenti3.3/T R,并转染U E7T-13细胞,加入抗生素Zeocin筛选,获得带有Tet-on基因调控开关的UE7T-13-TR细胞株.采用已构建好的慢病毒plenti6.3/TO-HGF和plenti6.3/TOF G F4分别转染U E7T-13-T R细胞并经过抗生素Blasticidin筛选,构建Tet-on调控稳定表达HGF的UE7T-13-TR-HGF细胞株和Tet-on调控稳定表达FGF4的UE7T-13-TR-FGF4细胞株.通过Q-PCR、Western blot及ELISA在基因、蛋白及蛋白分泌水平检测目的基因HGF、FGF4的表达情况.结果:成功构建UE7T-13-TR-HGF和UE7T-13-TR-FGF4细胞株.经Q-PCR检测,当Tet存在时,HGF基因在UE7T-13-TR-HGF中的表达为无Tet时的78倍;FGF4基因则超过2万倍,且1μg/m L的Tet为较佳浓度.Western blot及ELISA结果在蛋白表达水平及蛋白分泌水平验证了以上结果,证明已合成的HGF及FGF4能成功分泌到细胞外.结论:通过慢病毒转染UE7T-13细胞,我们成功构建出Tet可调控稳定表达HGF、FGF4细胞株(UE7T-13-TR-HGF和UE7T-13-TRF G F4细胞株),为进一步的研究奠定了良好的实验基础. 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 诱导分化 基因开关 人肝细胞 再生医学
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MBL调节白假丝酵母菌相态转化的作用及机制的初步分析 被引量:5
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作者 翟晶晶 王明永 +8 位作者 凌明智 王凡平 郭康 宋士军 段巨洪 张娜 李梦杰 左萌洁 赵雯瑕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1153-1156,1160,共5页
目的:探讨甘露聚糖结合凝集素(Mannan-binding lectin,MBL)对白假丝酵母菌(Candida albicans,C.albicans)相态转化的调节作用及机制。方法:以人MBL处理C.albicans 2、4、8 h,37℃200 r/min震荡培养,倒置相差显微镜下观察C.albican... 目的:探讨甘露聚糖结合凝集素(Mannan-binding lectin,MBL)对白假丝酵母菌(Candida albicans,C.albicans)相态转化的调节作用及机制。方法:以人MBL处理C.albicans 2、4、8 h,37℃200 r/min震荡培养,倒置相差显微镜下观察C.albicans的菌丝形成情况;FACS分析MBL与C.albicans的结合情况;RT-PCR分析C.albicans相态转化调控基因HWP1、DDR48的表达。结果:倒置相差显微镜观察发现MBL在早期(2~4 h)能够抑制C.albicans酵母相(Yeast form,Y)向菌丝相(Hyphal form,H)转化;FACS分析表明MBL能够以Ca2+浓度依赖关系与C.albicans细胞结合;RT-PCR结果表明MBL能够减少C.albicans相态转化调控基因HWP1的表达,而其对DDR48表达的影响尚无规律可循。结论:MBL能够通过调控HWP1的表达抑制C.albicans酵母相向菌丝相转化。 展开更多
关键词 甘露聚糖结合凝集素 白假丝酵母菌 相态转化 基因表达
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调控进化与形态多样性 被引量:1
9
作者 国春策 张睿 +1 位作者 山红艳 孔宏智 《生物多样性》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期72-79,共8页
揭示导致生物体形态和结构多样性产生的原因和机制,是进化生物学研究的重要内容。进化发育生物学的研究表明,许多复杂的形态结构及其多样性,都是通过对古老调控网络的修饰或改造来完成的。也就是说,生物体形态和结构的多样化并不是像以... 揭示导致生物体形态和结构多样性产生的原因和机制,是进化生物学研究的重要内容。进化发育生物学的研究表明,许多复杂的形态结构及其多样性,都是通过对古老调控网络的修饰或改造来完成的。也就是说,生物体形态和结构的多样化并不是像以前认为的是由基因编码区的变化造成的,而更多的是取决于基因的调控进化。作为控制基因表达的关键组分,基因调控区的顺式调控元件通过与特定反式作用因子结合,精细调控基因表达的时、空和量。因此,调控元件的获得、丢失、修饰或者改变都能引起基因表达模式的变化,是形态和结构多样性产生的主要原因。本文结合近年来国际上在基因的调控进化方面所取得的进展,总结了真核生物中基因调控的方式和特点,阐述了调控进化的基本式样,揭示了调控进化在生物进化(特别是形态和结构多样化)中的作用。 展开更多
关键词 调控元件 多效基因 遗传开关 平行演化 进化发育生物学
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小白鼠心肌核DNA片段中的基因表达的分子开关的研究 被引量:6
10
作者 袁明秀 侯仲刚 +2 位作者 陈志俊 张志宏 邓爱平 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 2001年第1期7-13,共7页
原位染色发现 ,LDH( 1- 5) …nNAD+(LDH :乳酸脱氢酶 ,NAD+:氢化型辅酶I)可以进入核孔 ,可能与自己编码基因特异结合。体外表达实验中 ,稀释心肌DNA片段 ,促进LDH/DNA 表达LDH( 1- 5) ,LDH( 1- 5) 表达量与LDH/DNA 中可解离的LDH( 1- 5)... 原位染色发现 ,LDH( 1- 5) …nNAD+(LDH :乳酸脱氢酶 ,NAD+:氢化型辅酶I)可以进入核孔 ,可能与自己编码基因特异结合。体外表达实验中 ,稀释心肌DNA片段 ,促进LDH/DNA 表达LDH( 1- 5) ,LDH( 1- 5) 表达量与LDH/DNA 中可解离的LDH( 1- 5) 量呈正相关性。同位素14 C标记Leu法测定加入LDH( 1- 5) …nNAD+可以抑制LDH/DNA 体外表达 ,LDH( 1- 5) 表达抑制量与加入LDH( 1- 5) …nNAD+量呈正相关性。AFM直接观察到活性基因两头的调控序列可能结合自己编码的蛋白等活性因子。基因表达与调控的分子开关主要是自己编码的蛋白等活性因子。 展开更多
关键词 基因表达 分子开关 正负反馈调控机制 AFM 心肌 核DNA片断
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血管再狭窄发生过程中SMα肌动蛋白和SMemb基因表达的变化及其影响机制研究 被引量:19
11
作者 李琦 温进坤 韩梅 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 2000年第6期832-836,共5页
为研究血管再狭窄发生过程中 VSMC表型转化的规律及机制 ,采用大鼠主动脉内皮剥脱后血管再狭窄动物模型和体外培养的 VSMC,通过 Northern印迹分析及 3H- Td R参入实验 ,动态观察血管再狭窄发生过程中 VSMC表型标志基因α肌动蛋白和 SMem... 为研究血管再狭窄发生过程中 VSMC表型转化的规律及机制 ,采用大鼠主动脉内皮剥脱后血管再狭窄动物模型和体外培养的 VSMC,通过 Northern印迹分析及 3H- Td R参入实验 ,动态观察血管再狭窄发生过程中 VSMC表型标志基因α肌动蛋白和 SMemb的表达变化及 b FGF、TNF-α和 IL - 1β对两种基因表达的影响及其与 VSMC增殖之间的关系 .结果表明 ,血管内皮剥脱后 3d,分化型标志基因α肌动蛋白表达活性开始降低 ,去分化型标志基因 SMemb表达明显上调 ,至第 7d,前者的下调与后者的上调均达到最大 ,此后 ,两者的表达活性趋于向正常恢复 .b FGF可明显下调 α肌动蛋白的表达和诱导 SMemb表达 ,对分化型和去分化型 VSMC均有促增殖作用 ,但对后者的作用大于前者 ,TNF- α和 IL- 1 β对 VSMC的促转化及促增殖作用较弱 .提示 b FGF等生长因子介导血管内皮损伤所诱发的 VSMC表型转化并促进其增殖 ,内皮损伤 7d后 ,在发生表型转化并进行增殖的 VSMC中 ,一部分细胞再分化 ,一部分细胞仍处于去分化状态并继续进行增殖并持续较长时间 . 展开更多
关键词 球囊损伤 血管再狭窄 平滑肌细胞 表型转化
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玉米须总皂苷对肥胖大鼠脂肪组织的调节作用研究 被引量:9
12
作者 余渊 程杰 +1 位作者 田鲁 陈晓文 《现代中西医结合杂志》 CAS 2019年第2期115-120,共6页
目的观察玉米须总皂苷对高脂饮食诱导的肥胖大鼠脂肪组织中G0/G1期开关基因(G0S2)和脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)表达的影响。方法将40只适应性喂养7 d后雄性清洁级SD大鼠随机分为正常组、模型组、玉米须总皂苷低剂量和玉米须总皂苷高剂量组... 目的观察玉米须总皂苷对高脂饮食诱导的肥胖大鼠脂肪组织中G0/G1期开关基因(G0S2)和脂肪甘油三酯脂酶(ATGL)表达的影响。方法将40只适应性喂养7 d后雄性清洁级SD大鼠随机分为正常组、模型组、玉米须总皂苷低剂量和玉米须总皂苷高剂量组,每组10只。除正常组外,其余3组均给予高脂高糖饮食12周建立肥胖大鼠模型。造模成功后均给予普通饲料喂养,同时玉米须总皂苷低剂量组和高剂量组分别给予玉米须总皂苷100 mg/(kg·d)和200 mg/(kg·d)灌胃,正常组和模型组给予生理盐水1m L/(kg·d)灌胃,均1次/d,连续12周。12周后腹主动脉取血,检测各组大鼠空腹血糖(FPG)和血脂指标[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]、血清ATGL以及空腹胰岛素(FINS)水平,计算大鼠体脂比,HE染色观察脂肪组织病理学变化,RT-PCR法和Western Blot法检测脂肪细胞中G0S2和ATGL mRNA及蛋白表达水平。结果模型组大鼠体质量、内脏脂肪湿质量、体脂比及FPG、TG、TC、LDL-C、FINS水平均明显高于正常组(P均<0. 05),而玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组均明显低于模型组(P均<0. 05);模型组大鼠HDL-C、ATGL水平均明显低于正常组(P均<0. 05),而玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组均明显高于模型组(P均<0. 05)。HE染色显示玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组脂肪细胞体积明显减小,数量明显增多。模型组大鼠脂肪组织中G0S2mRNA和G0S2蛋白表达水平均明显高于正常组(P均<0. 05),ATGL mRNA和ATGL蛋白表达水平均明显低于正常组(P均<0. 05);玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组G0S2 mRNA和G0S2蛋白表达水平均明显低于模型组(P均<0. 05),而ATGL mRNA和ATGL蛋白表达水平均明显高于模型组(P均<0. 05),玉米须总皂苷低剂量组和玉米须总皂苷高剂量组组间比较差异均无统计学意义(P均> 0. 05)。结论玉米须总皂苷能够明显下调脂肪组织中G0S2 mRNA和蛋白表达、上调ATGL mRNA和蛋白表达,进而促进肥胖大鼠脂肪分解,降低大鼠体质量。 展开更多
关键词 肥胖大鼠 玉米须总皂苷 脂肪细胞 G0/G1期开关基因2 脂肪甘油三酯脂酶
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ATM基因rs227060位点单核苷酸多态性与肺癌易感性的相关性 被引量:5
13
作者 彭华 董巍檑 +2 位作者 龚咏晴 周晶 郭紫芬 《临床与病理杂志》 2017年第2期227-232,共6页
目的:探讨共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia telangiectasia mutated,ATM)rs227060位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与肺癌易感性之间的相关性。方法:采用聚合酶链反应–SNP敏感性分子开关方法,检测225... 目的:探讨共济失调毛细血管扩张症突变基因(ataxia telangiectasia mutated,ATM)rs227060位点单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与肺癌易感性之间的相关性。方法:采用聚合酶链反应–SNP敏感性分子开关方法,检测225例肺癌患者和128例健康体检者ATM基因rs227060多态位点等位基因以及基因型频率分布特点;并应用非条件Logistic回归法统计分析rs227060单核苷酸多态性与肺癌的相关性。结果:rs227060多态位点共检测出CC,CT,TT三种基因型和C,T两种等位基因,其在肺癌组与对照组的基因型分布频率为:CC基因型17.3%与29.7%、CT基因型61.4%与59.3%、TT基因型21.3%与11%,两组间基因型频率和等位基因频率分布差异均有统计学意义(P<0.05)。在对ATM rs227060基因型的多态性分析过程中发现:吸烟史在肺癌组与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05),而年龄、性别、肿瘤家族史在肺癌组与对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);且以CC基因型作为对照,携带TT基因型的个体患肺癌的风险是携带CT基因型个体的3.49倍(OR=1.829;95%CI:1.045~3.199)。结论:ATM基因rs227060位点单核苷酸多态性与肺癌易感性存在相关性,且携带TT基因型可增加肺癌的发病风险。 展开更多
关键词 肺癌易感性 单核苷酸多态性 ATM基因 SNP敏感性分子开关
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降钙素基因相关肽抑制动脉损伤后NF-κB表达及其对新生内膜增殖的作用 被引量:2
14
作者 赵然尊 龙仙萍 +3 位作者 刘志江 盛瑾 王冬梅 石蓓 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期1472-1476,共5页
目的通过降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)处理血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)和颈动脉损伤大鼠模型,探讨NF-κB在CGRP调节VSMCs表型改变和动脉损伤后新生内膜增殖中的作用。方法建立颈动... 目的通过降钙素基因相关肽(calcitonin gene related peptide,CGRP)处理血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)和颈动脉损伤大鼠模型,探讨NF-κB在CGRP调节VSMCs表型改变和动脉损伤后新生内膜增殖中的作用。方法建立颈动脉损伤大鼠模型,并分为对照组和CGRP组(n=24),通过HE染色观察新生内膜形成情况,并Western blot检测两组动物损伤动脉中NF-κB p65蛋白表达情况。以组织块贴壁培养法获得VSMCs,并分为对照组、IL-1β组(给予IL-1β处理)、CGRP组(给予IL-1β+CGRP处理)和CGRP8-37组(在IL-1β+CGRP基础上,加CGRP8-37)(n=24),Western blot法检测细胞内NF-κB p65蛋白和细胞表型标志蛋白表达变化,MTT法检测细胞增殖能力。结果①对照组大鼠的颈动脉损伤后7 d时新生内膜明显增加,至28 d时基本稳定,而CGRP组7 d和28 d时新生内膜面积较对照组同时间点显著降低[7d:(2.09±0.26)vs(3.76±0.33);14 d:(3.52±0.41)vs(6.38±0.61),P<0.05];且与对照组比较,CGRP组1周时NF-κB p65蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而28 d时两组NF-κB p65表达水平无差异(P>0.05)。②在体外培养VSMCs中,IL-1β处理显著激活细胞NF-κB p65蛋白表达(P<0.05),伴随着VSMCs收缩表现标志蛋白SMα-actin表达减少和OPN表达增加(P<0.05);同时再给予CGRP处理后,则显著减弱IL-1β诱导的NF-κB p65蛋白表达(P<0.05),且使VSMCs合成表现标志蛋白OPN表达减少。RT-PCR分析获得相一致的结果。同时,CGRP显著抑制IL-1β引起的VSMCs增殖。③CGRP受体阻断剂CGRP8-37可以阻断CGRP减弱IL-1β诱导的NF-κB p65蛋白表达作用,并抑制CGRP对VSMC表达蛋白调节作用。结论 CGRP与受体结合后抑制NF-κB激活,促进VSMCs分化标志基因表达,从而抑制细胞增殖,降低动脉损伤后新生内膜增殖,这对于防治动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄可能具有重要应用价值。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 表型改变 降钙素基因相关肽 核因子-ΚB
原文传递
降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞心肌素表达及细胞表型改变的作用 被引量:2
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作者 龙仙萍 邓文文 +4 位作者 汪松 王冬梅 盛瑾 石蓓 赵然尊 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期1360-1364,共5页
目的:研究降钙素基因相关肽(CGRP)对血管平滑肌细胞(VSMCs)心肌素表达的影响及对细胞表型改变的调节作用。方法:取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组(加入AngⅡ处理)、CGRP组(加入AngⅡ和CGR... 目的:研究降钙素基因相关肽(CGRP)对血管平滑肌细胞(VSMCs)心肌素表达的影响及对细胞表型改变的调节作用。方法:取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组(加入AngⅡ处理)、CGRP组(加入AngⅡ和CGRP处理)和CGRP8-37组(在AngⅡ和CGRP基础上加入CGRP8-37)。Western blot法检测VSMCs中心肌素及细胞表型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和骨桥蛋白(OPN)表达情况。结果:在VSMCs培养中,细胞心肌素表达水平随着培养时间延长逐渐降低,细胞培养48 h和72h时心肌素表达水平较基线水平显著降低(P<0.05);而加入CGRP处理后,心肌素表达水平逐渐增加,与基线水平比较,加入CGRP培养后48 h和72 h时细胞心肌素水平显著增加(P<0.05)。同时,在VSMCs培养48 h时,AngⅡ组细胞心肌素水平较对照组下降(P<0.05),且α-SMA表达亦相应下降(P<0.05),而OPN表达水平显著增加(P<0.05);CGRP组VSMCs心肌素水平较AngⅡ组增加,伴随着α-SMA表达水平增加(P<0.05),相反地OPN表达水平下降(P<0.05);CGRP8-37组心肌素和α-SMA表达水平较CGRP+AngⅡ组降低(P<0.05),而OPN表达较CGRP组增加(P<0.05)。结论:CGRP通过促进VSMCs心肌素的表达而抑制细胞表型转换,使细胞维持收缩表型,且这一作用是CGRP通过与其受体结合后实现的。 展开更多
关键词 血管平滑肌细胞 降钙素基因相关肽 心肌素 表型改变
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AFM观察小白鼠心肌和肝核DNA片段的基因移位
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作者 袁明秀 张志宏 李健伟 《科技导报》 CAS CSCD 2006年第4期51-55,共5页
用原子力显微镜(简称AFM)直接观察、体外表达和体外转录等实验技术组合,观察到了心肌和肝的核DNA片段的基因;用磷酸缓冲液稀释,并用开关蛋白质等活性因子使其部分解离,促使核基因在核DNA片段内或核DNA片段间静态或动态移位,得到了对应核... 用原子力显微镜(简称AFM)直接观察、体外表达和体外转录等实验技术组合,观察到了心肌和肝的核DNA片段的基因;用磷酸缓冲液稀释,并用开关蛋白质等活性因子使其部分解离,促使核基因在核DNA片段内或核DNA片段间静态或动态移位,得到了对应核DNA片段中的相关基因,如LDH/DNA体外表达活性变化的LDH同功酶酶谱图。基因静态或动态移位均表达活性降低,且基因移位程度与其对应基因活性降低程度呈正相关性。展示了未来运用AFM和体外表达等实验技术组合研究核DNA片段的基因移位和对应基因突变机制的前景。 展开更多
关键词 垃圾DNA 蛋白质通路 基因 开关蛋白质解离 移位 突变 DNA 链状复合体
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湖南娄底地区汉族人群内皮素基因rs5370G/T多态性研究 被引量:1
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作者 吴孟津 廖端芳 +3 位作者 彭翠英 胡卫民 王春 周翠兰 《实用预防医学》 CAS 2007年第3期620-622,共3页
目的了解湖南省娄底地区汉族人群原发性高血压相关的内皮素(ET-1)基因的rs5370G/T单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分布,并与Genbank多种族人群进行比较。方法收集湖南娄底地区84名无血缘关系的汉族人群的静脉血,其... 目的了解湖南省娄底地区汉族人群原发性高血压相关的内皮素(ET-1)基因的rs5370G/T单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分布,并与Genbank多种族人群进行比较。方法收集湖南娄底地区84名无血缘关系的汉族人群的静脉血,其中健康个体57名,高血压患者27名,提取DNA,应用PCR/SNP敏感性分子开关对ET-1基因rs5370G/T多态性进行分析,并与Genbank中的多种族人群的分布进行比较分析。结果湖南娄底地区汉族人群中ET-1基因rs5370G/T的G、T的频率分别为51.2%和48.8%,且不同性别间高血压人群与正常人群间均未见显著差异,在高血压人群与正常人群中G的频率分别为0.537,0.518(χ2=0.056,P>0.05)。然而在Genbank中,ET-1基因rs5370G/T的G、T基因频率分别为80.4%和19.6%,与湖南娄底地区人群比较有显著性差异(χ2=22.132,P<0.001)。结论湖南娄底地区汉族人群中ET-1基因rs5370G/T多态性与高血压无相关性,与Genbank中的多种族人群比较分布有明显的差异,这种差异可能是导致高血压在不同种族间的表现有所不同的遗传因素之一。 展开更多
关键词 SNP敏感性分子开关 内皮素基因 单核苷酸多态性 种族差异
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突变敏感性分子开关检测肺炎支原体对大环内酯类抗生素的耐药性研究 被引量:11
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作者 刘艳 刘丹 +3 位作者 朱翠明 黄泽智 蒙松年 唐翠莲 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期479-484,共6页
目的应用突变敏感性分子开关检测肺炎支原体对大环内酯类抗生素的耐药性。方法采用微量稀释法检测5种常用大环内酯类抗生素对40株Mp临床分离株的药物敏感性;建立高保真聚合酶和3′硫化修饰引物的分子开关,用分子开关进行Mp临床分离株的... 目的应用突变敏感性分子开关检测肺炎支原体对大环内酯类抗生素的耐药性。方法采用微量稀释法检测5种常用大环内酯类抗生素对40株Mp临床分离株的药物敏感性;建立高保真聚合酶和3′硫化修饰引物的分子开关,用分子开关进行Mp临床分离株的PCR扩增,检测其是否存在Mp 23SrRNA 2063、2064和2617 3个热点突变,并通过基因测序进一步确定是否存在点突变,分析点突变与大环内酯类抗生素敏感性之间的关系。结果 5种大环内酯类抗生素中,Mp对14元环的红霉素和克拉霉素耐药程度最高,其MIC≥128mg/L;对15元环的大环内酯类抗生素阿奇霉素和交沙霉素相对敏感,其中交沙霉素抗Mp活性最高,其MIC≤4mg/L。用高保真聚合酶和3′硫化修饰引物的分子开关行PCR扩增,检测出35株发生了2063位点基因突变,3株发生2064位点基因突变,未检测出2617位点突变。用基因测序检测到35株Mp发生A2063G的突变,3株发生A2064G的突变,未检测到2617位点突变,与分子开关的检测结果一致,并且2063、2064位点突变Mp株均对大环内酯类药物高度耐药。结论分子开关可识别23SrRNA基因突变,可用于分析Mp对大环内酯类抗生素的敏感性。 展开更多
关键词 分子开关 肺炎支原体 大环内酯类抗生素 耐药基因
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MLL-AF4融合基因阳性急性白血病患者的临床特征及预后分析 被引量:2
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作者 张梅香 王春键 +2 位作者 史琳 李燕 任汉云 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第18期3427-3431,共5页
目的:探讨MLL-AF4融合基因阳性急性白血病(MLL-AF4+AL)患者的临床特征和预后。方法:回顾性分析10例成人MLL-AF4+AL患者的临床资料,复习文献总结患者的临床特征及预后。结果:10例患者中女性6例,中位年龄34.5岁。起病时中位白细胞数114.89... 目的:探讨MLL-AF4融合基因阳性急性白血病(MLL-AF4+AL)患者的临床特征和预后。方法:回顾性分析10例成人MLL-AF4+AL患者的临床资料,复习文献总结患者的临床特征及预后。结果:10例患者中女性6例,中位年龄34.5岁。起病时中位白细胞数114.89×109/L,5例合并弥散性血管内凝血,4例合并髓外侵犯。8例免疫表型符合急性B淋巴细胞白血病(B-ALL),其中6例pro-B-ALL,2例pre-B-ALL;2例混合表型急性白血病(MPAL),B/T淋系及B淋系/未分化型各1例。9例患者染色体具有t(4;11)(q21;q23)。7例B-ALL患者1疗程诱导化疗后6例获完全缓解(CR1),4例行异基因造血干细胞移植(allo-HSCT),2例患者死于移植后感染、脑出血及中枢复发,2例长期生存。2例未移植者于2疗程内复发。2例MPAL患者诱导化疗1例CR。复发的3例患者予Blinatumomab挽救治疗,1例CR2后出现髓外复发,另2例治疗无效。2例B-ALL治疗中发生系别转换。结论:成人MLL-AF4+AL具有独特临床特征,pro-B-ALL多见。起病时白细胞水平较高,髓外浸润和凝血异常多见。常规化疗具有较高缓解率,但易早期复发,可能发生谱系转换。Blinatumomab细胞靶向治疗对该类型白血病有一定疗效,但MRD转阴后allo-HSCT是改善其预后的唯一希望。 展开更多
关键词 急性白血病 基因重排 MLL 预后 谱系转换
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