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题名钩吻GeSTR基因克隆及表达模式分析
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作者
王静
兰金旭
杨宁辉
章瑶
唐其
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机构
河南医学高等专科学校药学系
河南中医药大学药学院
湖南农业大学园艺学院
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出处
《南方农业学报》
北大核心
2025年第3期694-705,共12页
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基金
湖南省自然科学基金项目(2022JJ30305)
河南省中药材产业技术体系项目(豫财科[2023]7号)
+1 种基金
湖南省教育厅重点项目(21A0138)
湖南省研究生科研创新项目(CX20220689)。
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文摘
[目的]克隆钩吻(Gelsemium elegans Benth)异胡豆苷合成酶基因(GeSTR),并分析其表达模式,为探究该基因在钩吻素己生物合成的调控机制提供理论参考。[方法]经液相色谱—质谱联用仪(LC-MS)测定钩吻不同组织中钩吻素己的相对含量,采用“基因组+表达谱+代谢组”的共表达关联分析方法,筛选得到合成钩吻素己的相关酶基因GeSTR,通过PCR克隆GeSTR基因的编码区序列(CDS),并结合生物信息学软件进行序列分析。利用实时荧光定量PCR检测GeSTR基因在不同组织中的表达模式。[结果]不同组织中钩吻素己相对含量排序:根>花>茎>叶,结合候选14个STR基因的表达谱信息,筛选得到与钩吻素己关联性最强的基因GeSTR。GeSTR基因的开放阅读框(ORF)大小为1026 bp,共编码341个氨基酸残基,相对分子量为38.31269 kD,理论等电点(pI)为5.69,脂溶系数和不稳定指数II分别为85.95和30.19,总平均亲/疏水性指数(GRAVY)为-0.158,推测GeSTR蛋白为稳定的亲水蛋白。GeSTR蛋白主要定位于细胞外基质和叶绿体2种亚细胞结构上,其N端含信号肽和跨膜结构域,可能为分泌型蛋白,具有32个潜在的磷酸化位点及1个N-糖基位点。GeSTR蛋白二级结构由无规则卷曲(41.64%)、延伸链(32.85%)、α-螺旋(15.54%)和β-折叠(9.97%)组成,不仅含有STR典型结构域,还含有YvrE结构域,与11个其他植物的STR氨基酸序列具有相似性,与金钩吻(Gelsemium sempervirens)的STR蛋白相似性最高(达93.84%),亲缘关系最近。实时荧光定量PCR结果显示,GeSTR基因仅在钩吻根和花中表达,且在花中的相对表达量极显著高于根部(P<0.01),是根部的4.25倍,说明GeSTR基因在钩吻中的表达具有组织特异性。[结论]钩吻根和花中的钩吻素己相对含量高于茎和叶中,且GeSTR基因仅在根和花中表达,故推测GeSTR基因正向调控钩吻素己合成,具有催化耦合反应产生异胡豆苷的作用及其他潜在的多种功能,为后续研究钩吻素己及其他MIAs合成的途径及机制提供线索。
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关键词
钩吻
gestr
克隆
生物信息学分析
表达分析
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Keywords
Hunan Natural Science Foundation(2022JJ30305)
Gelsemium elegans Benth
gestr
cloning
bioin-formatics analysis
expression analysis
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分类号
S567.19
[农业科学—中草药栽培]
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题名腹腔镜手术联合孕三烯酮治疗卵巢巧克力囊肿疗效分析
被引量：16
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作者
夏敬梅
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机构
江苏省淮安市洪泽区中医院妇产科
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出处
《实用临床医药杂志》
CAS
2018年第16期86-88,共3页
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文摘
目的探讨卵巢巧克力囊肿给予腹腔镜手术联合孕三烯酮治疗的疗效。方法选取本院收治的50例卵巢巧克力囊肿患者,随机分为观察组和对照组各25例。对照组单纯进行腹腔镜手术治疗,观察组进行腹腔镜手术治疗后连续3~6个月服用孕三烯酮,术后随访干预8~24个月,分析2组的性激素水平改善情况、临床治疗效果及复发情况。结果观察组的卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)、雌二醇水平(E2)均低于对照组(P<0.05);观察组的临床总有效率(92.00%)高于对照组(60.00%),其复发率(4.00%)低于对照组(12.00%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论给予卵巢巧克力囊肿患者腹腔镜手术联合孕三烯酮治疗,可有效促使患者FSH、LH、E2性激素水平下降,提高治疗效果,降低复发率,值得临床借鉴和推广。
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关键词
卵巢巧克力囊肿
腹腔镜手术
孕三烯酮
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Keywords
ovarian chocola tecyst
laparoscopic surgery
gestr inone
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分类号
R473.71
[医药卫生—护理学]
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