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黄芪多糖上调γH2AX的表达提高宫颈癌细胞放疗敏感性的分析 被引量：2
1
作者 刘雅雯 章玲玲 +1 位作者 涂海燕 李凌 《实用癌症杂志》 2024年第6期871-873,877,共4页
目的研究黄芪多糖(APS)对宫颈癌Siha细胞增殖能力的影响,观察放疗后磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)的表达情况。方法体外培养Siha细胞,将其分为两组即放疗组和APS联合放疗组。应用CCK8法检测不同浓度APS对Siha细胞增殖活性的影响;Western blo... 目的研究黄芪多糖(APS)对宫颈癌Siha细胞增殖能力的影响,观察放疗后磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)的表达情况。方法体外培养Siha细胞,将其分为两组即放疗组和APS联合放疗组。应用CCK8法检测不同浓度APS对Siha细胞增殖活性的影响;Western blotting检测放疗4 h后两组γH2AX蛋白的表达水平。结果APS浓度越高,细胞的增殖活力越弱;APS作用时间越长,细胞增殖能力越弱(P<0.01);放疗后,APS联合放疗组γH2AX表达水平高于放疗组(P=0.031)。结论APS可以抑制Siha细胞增殖,促进γH2AX表达,从而提高放疗的敏感性。 展开更多
关键词 黄芪多糖 SIHA细胞 DNA损伤 γH2ax 放疗敏感性
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猪圆环病毒2型病毒样颗粒三倍轴区域嵌合猪细小病毒抗原表位的展示策略及免疫原性
2
作者 蔡云凤 李宏 +8 位作者 黄小铭 何庆 丁振宇 余婉婷 罗施乐 陈方志 王乃东 杨毅 湛洋 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第1期307-318,共12页
为了探索猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)病毒样颗粒三倍轴区域展示外源抗原表位的潜力,本研究借助结构模拟和蛋白质的三维结构展示,分析了PCV2核衣壳表面氨基酸残基突变后的结构差异。通过分析不同cap基因突变质粒在... 为了探索猪圆环病毒2型(porcine circovirus type 2, PCV2)病毒样颗粒三倍轴区域展示外源抗原表位的潜力,本研究借助结构模拟和蛋白质的三维结构展示,分析了PCV2核衣壳表面氨基酸残基突变后的结构差异。通过分析不同cap基因突变质粒在大肠杆菌表达系统中所表达的突变体蛋白的可溶性和纯化难易程度,确定合适的外源表位嵌合区。将嵌合PPV抗原表位的Cap蛋白经体外组装获得重组的病毒样颗粒,将此病毒样颗粒免疫小鼠,通过抗体检测来评价其免疫原性。结果显示,PCV2核衣壳表面三倍轴区域存在两个适合用于展示外源表位的氨基酸区域(分别命名为Motif A和Motif B),相同表达条件下,Motif A区域的突变蛋白均以可溶性表达为主,且能一步纯化获得目的蛋白,而Motif B区域的突变蛋白多以包涵体形式存在;Motif A区域嵌合PPV表位后,纯化的重组蛋白能在体外组装成cVLPs,并通过间接免疫荧光试验证明其保留有野生型VLPs内化PK15细胞的能力;形成的cVLPs能刺激小鼠机体产生分别针对PCV2 VLPs、B5-E1表位和PPV VP2蛋白的抗体。综上表明,PCV2 Cap蛋白Loop GH区域Motif A能够将外源表位展示在病毒样颗粒外表面,并且能够被机体免疫细胞识别产生特异性抗体。 展开更多
关键词 猪圆环病毒2型 病毒样颗粒 三倍轴区域 外源表位
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采用基于γ-H2AX焦点分析的流式细胞术检测纳米金颗粒的遗传毒性
3
作者 姜睿琪 邓思思 +9 位作者 王平 陈润桦 陈嘉琪 郑霖 冼静雯 黄泽愉 巩鑫超 刘楚珩 王晓炜 秦美蓉 《癌变·畸变·突变》 CAS 2024年第5期405-411,共7页
目的:建立基于磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)生物标志物的流式细胞术遗传毒性检测方法,为纳米金颗粒的遗传毒性评价提供参考。方法:在加与不加体外代谢活化系统(S9)的条件下,分别设+S9短时处理组,选择终浓度为7.5、3.75和1.875μg/mL的环... 目的:建立基于磷酸化组蛋白H2AX(γ-H2AX)生物标志物的流式细胞术遗传毒性检测方法,为纳米金颗粒的遗传毒性评价提供参考。方法:在加与不加体外代谢活化系统(S9)的条件下,分别设+S9短时处理组,选择终浓度为7.5、3.75和1.875μg/mL的环磷酰胺(CP)处理4 h;-S9长时处理组,选择终浓度为6.4、1.6和0.4μg/mL的依托泊苷(ETO)连续接触24 h,建立γ-H2AX生物标志物的流式细胞术检测方法。选择两种纳米金颗粒(样品1为溴化十六烷基三甲基溴化铵修饰,样品2为聚乙二醇修饰)作为实验材料,根据细胞毒性试验结果样品1和2分别选取3个不同浓度处理人成淋巴TK6细胞,分为+S9短时4 h组和-S9长时24 h组处理后收获细胞,采用γ-H2AX荧光抗体进行标记,流式细胞术分析γ-H2AX阳性细胞比例。同时设CP或ETO阳性对照和相应溶剂对照组。结果:与溶剂对照组相比,在有或无S9条件下,阳性对照组诱导产生的γ-H2AX阳性细胞比例显著增加(P<0.05),并存在剂量反应关系(CP:R2=0.837,P=0.01;ETO:R2=0.903,P<0.01),说明方法成功建立。在加与不加S9的条件下,两种纳米金样品各剂量组的γ-H2AX阳性细胞比例较溶剂对照组差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论:本实验建立了基于γ-H2AX焦点分析的流式细胞术遗传毒性检测方法,可用于纳米金颗粒的遗传毒性评价。 展开更多
关键词 Γ-H2ax 纳米金 流式细胞术 TK6细胞
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γ-H2AX免疫荧光分析技术评估CT辐射损伤的临床研究 被引量：13
4
作者 朱静芬 滕跃 +3 位作者 王畅 姚飞荣 李勇刚 张妤 《放射学实践》 北大核心 2018年第8期876-880,共5页
目的:比较双源CT前瞻性心电门控大螺距扫描方式与回顾性心电门控小螺距扫描方式的辐射剂量及其电离辐射对人外周血淋巴细胞内DNA的损伤情况,并探索γ-H2AX作为低剂量X线电离辐射损伤生物剂量计的可行性及应用前景。方法:将40例拟行冠状... 目的:比较双源CT前瞻性心电门控大螺距扫描方式与回顾性心电门控小螺距扫描方式的辐射剂量及其电离辐射对人外周血淋巴细胞内DNA的损伤情况,并探索γ-H2AX作为低剂量X线电离辐射损伤生物剂量计的可行性及应用前景。方法:将40例拟行冠状动脉CTA的患者按扫描前的心率分为两组:大螺距组18例,心率<70次/分,螺距3.4,FLASH序列,前瞻性心电门控;小螺距组22例,心率≥70次/分,螺距0.20~0.33,回顾性心电门控。两组均采用智能CARE-kV结合CARE Dose4D调节技术自动选取最优管电压及管电流。于CT检查前及检查后30min每例患者抽取静脉血4mL,采用γ-H2AX免疫荧光分析法检测淋巴细胞DNA双链断裂(DSBs)情况(γ-H2AX荧光点与淋巴细胞计数的比值,记为R_(焦点/细胞))。采用两组独立样本t检验比较两组间BMI及CT检查前后R_(焦点/细胞)的差异,采用Mann-Whitney U检验比较两组间检查前后R_(焦点/细胞)差值(△R)和辐射剂量指标(CTDIvol、DLP、ED)的差异,采用Spearman等级相关法分析DLP与△R的相关性。结果:两组患者的年龄、性别构成比及体质指数(BMI)的差异无统计学意义(P>0.05)。大螺距组的CTDIvol、DLP和ED值分别为(12.29±1.68)mGy、(100.28±30.60)mGy·cm和(1.41±0.43)mSv,3个指标的均值明显低于小螺距组[分别为(39.11±10.75)mGy、(537.27±152.74)mGy·cm和(7.52±2.14)mSv],组间差异均有统计学意义(P<0.05)]。40例患者CT检查前、后的R_(焦点/细胞)分别为(0.137±0.036)和(0.244±0.072),CT检查后检查者淋巴细胞内DSBs数量明显增多(t=10.294,P=0.000)。大螺距组和小螺距组的△R分别为(0.058±0.034)和(0.148±0.058),小螺距组高于大螺距组(U=27.50,P=0.000)。仅小螺距组的DLP与△R之间存在等级线性相关关系(r=0.781,P=0.000)。结论:前瞻性心电门控大螺距FLASH扫描方式的辐射剂量及电离辐射引起的DSBs明显低于回顾性心电门控小螺距扫描方式,而两组图像质量均能满足诊断要求;γ-H2AX监测可较准确地反映低剂量X线辐射损伤,应用前景广。 展开更多
关键词 冠状动脉 血管造影术 体层摄影术 X线计算机 辐射量 DNA损伤 Γ-H2ax
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三元层状材料M_2AX的研究进展 被引量：12
5
作者 田无边 王佩玲 +2 位作者 张国军 阚艳梅 李永祥 《无机材料学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2007年第5期783-790,共8页
三元层状陶瓷材料(M_(n+1)AX_n)因其具有独特的力学、热学和电学性能而备受关注.本文综述其中的一个分支-M_2AX相在计算材料学方面的最新结果,并归纳块材的力学性能和抗氧化性能的研究结果,文中还简述了该材料的热学和电学性能,并展望了... 三元层状陶瓷材料(M_(n+1)AX_n)因其具有独特的力学、热学和电学性能而备受关注.本文综述其中的一个分支-M_2AX相在计算材料学方面的最新结果,并归纳块材的力学性能和抗氧化性能的研究结果,文中还简述了该材料的热学和电学性能,并展望了M_2AX系列材料的应用前景. 展开更多
关键词 M2ax 电子结构 制备 性能
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2-乙酰氨基芴诱导γH2AX焦点的形成 被引量：7
6
作者 刁汇玲 周春仙 +1 位作者 余艳柯 杨军 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期131-137,共7页
目的探讨DNA损伤剂2-乙酰氨基芴(2-AAF)是否可诱导γH2AX焦点的形成及γH2AX作为检测DNA损伤的一个新的特异指标的可能性。方法用2-AAF处理中国仓鼠CHL细胞,应用免疫荧光方法检测γH2AX焦点的形成,并通过中性彗星实验验证DNA损伤的程度... 目的探讨DNA损伤剂2-乙酰氨基芴(2-AAF)是否可诱导γH2AX焦点的形成及γH2AX作为检测DNA损伤的一个新的特异指标的可能性。方法用2-AAF处理中国仓鼠CHL细胞,应用免疫荧光方法检测γH2AX焦点的形成,并通过中性彗星实验验证DNA损伤的程度。结果0.1,1,5和20mg·L-1的2-AAF都可使细胞核内γH2AX焦点数量及有γH2AX焦点生成的细胞数量增加,但只有20mg·L-12-AAF处理的细胞才出现明显的彗尾增长及有彗尾的细胞数量增加。另外,磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)家族抑制物渥曼青霉素可抑制2-AAF诱导的γH2AX焦点形成。结论2-AAF可通过激活PI3K家族成员使H2AX磷酸化,进而诱导γH2AX焦点的形成。γH2AX检测DNA损伤的敏感性优于彗星实验,因此,γH2AX有可能成为衡量DNA损伤程度的良好指标。 展开更多
关键词 γH2ax 2-乙酰氨基芴 DNA损伤
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与细胞周期G_2/M期进程相关的H2AX磷酸化 被引量：7
7
作者 涂文志 尚增甫 +5 位作者 李兵 刘晓丹 王豫 徐勤枝 让蔚清 周平坤 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期339-345,共7页
γH2AX焦点(foci)被普遍当做DNA双链断裂(DSB)损伤的分子标志物.为探讨细胞周期进程相关的H2AX磷酸化规律特征,采用胸腺嘧啶双阻滞结合噻氨酯哒唑(nocodazole)的后续处理,将HeLa细胞同步于有丝分裂的前中期.然后,用流式细胞仪检测细胞... γH2AX焦点(foci)被普遍当做DNA双链断裂(DSB)损伤的分子标志物.为探讨细胞周期进程相关的H2AX磷酸化规律特征,采用胸腺嘧啶双阻滞结合噻氨酯哒唑(nocodazole)的后续处理,将HeLa细胞同步于有丝分裂的前中期.然后,用流式细胞仪检测细胞周期、Western印迹和免疫荧光法,观察γH2AX表达和γH2AX焦点的形成.结果显示,细胞进入G2/M期和有丝分裂过程中,γH2AX水平显著增加;在无DNA DSB发生的情况下,部分M期细胞中也存在大量的γH2AX焦点.随着细胞完成有丝分裂从M期退出再进入G1期,γH2AX的表达水平逐渐降低.这种γH2AX表达变化特征与G2/M期密切关联的PLK1和Cyclin B1的表达规律相类似.在4 Gy大剂量照射下,HeLa细胞于照后8到12 h出现明显的G2/M期阻滞.γH2AX焦点数在照后1 h达高峰,随后降低,照后8 h又上升,出现了第2个峰值.与之不同的是,在1 Gy低剂量照射下,细胞的G2/M期阻滞微弱,γH2AX焦点数在照后0.5 h最高,随后下降,且无反弹,符合DNA DSB的修复动力学特征.因此,将γH2AX当做DNA DSB分子标志物时,还需要考虑细胞周期变化的影响.γH2AX适合作为1 Gy以下照射的DNA双链断裂损伤的分子标志. 展开更多
关键词 γH2ax 细胞周期 G2/M阻滞 DNA双链断裂 分子标志物
原文传递
用流式细胞术检测γ射线诱发淋巴细胞γ-H2AX与照射剂量的关系 被引量：7
8
作者 胡海亮 王治东 +3 位作者 张学清 陈茂胜 薛绍礼 陈英 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2012年第2期120-124,共5页
本研究使用流式细胞术检测了外周血淋巴细胞γ-H2AX表达水平,探讨了该方法用于辐射生物剂量估算的可能性。采集健康人外周血,进行体外60Coγ射线照射,利用γ-H2AX特异性抗体对淋巴细胞进行间接免疫荧光标记,采用流式细胞仪分析淋巴细胞... 本研究使用流式细胞术检测了外周血淋巴细胞γ-H2AX表达水平,探讨了该方法用于辐射生物剂量估算的可能性。采集健康人外周血,进行体外60Coγ射线照射,利用γ-H2AX特异性抗体对淋巴细胞进行间接免疫荧光标记,采用流式细胞仪分析淋巴细胞中γ-H2AX的几何平均荧光强度值,并计算出相对荧光强度;比较了仪器类型和参数设定对上述两项指标的影响,以上述两项指标分别建立照射后30 min的剂量-效应曲线并进行对比。结果显示:参数设定和仪器类型均明显影响60Coγ射线照射后γ-H2AX几何平均荧光强度,而对相对荧光强度无显著影响。因此,用流式细胞仪分析γ-H2AX的相对荧光强度,较好地解决了实验的稳定性和重复性问题,有望成为一种估算辐射生物剂量的新方法。 展开更多
关键词 流式细胞术 Γ射线 Γ-H2ax 剂量效应关系
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电离辐射对Jurkat细胞γ-H2AX蛋白表达的影响 被引量：4
9
作者 倪冠英 何淑梅 +1 位作者 董娟聪 金顺子 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期895-899,共5页
目的:探讨电离辐射诱导Jurkat细胞γ-H2AX蛋白表达的影响。方法:采用流式细胞术(FCM)分别检测2.0GyX线照射后不同时间点(0、0.5、1.0、4.0、8.0、16.0及24.0h)和0.5、1.0、2.0、4.0及6.0Gy不同剂量X线照射后Jurkat细胞γ-H2AX表达变化,... 目的:探讨电离辐射诱导Jurkat细胞γ-H2AX蛋白表达的影响。方法:采用流式细胞术(FCM)分别检测2.0GyX线照射后不同时间点(0、0.5、1.0、4.0、8.0、16.0及24.0h)和0.5、1.0、2.0、4.0及6.0Gy不同剂量X线照射后Jurkat细胞γ-H2AX表达变化,并于量效实验同时进行Jurkat细胞凋亡率检测。结果:与假照组比较,2.0GyX线照射后Jurkat细胞γ-H2AX表达水平于1.0h内达最大值,1.0h后开始呈时间依赖性下降,16.0h仍高于假照水平(P<0.01),24.0h降至与对照无明显差异;不同剂量X线照射后1.0h,Jurkat细胞γ-H2AX的表达水平在0.5Gy以内没有明显变化,0.5Gy以后呈剂量依赖性升高,4.0Gy时达最高水平(P<0.01),6.0Gy时表达略下降;不同剂量X线照射后8.0h,γ-H2AX表达在0～4.0Gy范围内随剂量增大而逐渐升高,4.0Gy时达到最高水平(P<0.01),6.0Gy时表达有所下降。结论:X射线能诱导Jurkat细胞γ-H2AX表达增高,在一定范围内存在时间和剂量依赖关系。 展开更多
关键词 电离辐射 蛋白表达 Γ-H2ax JURKAT细胞
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冬凌草甲素诱导人胰腺癌SW1900细胞DNA损伤及对H2AX蛋白表达的影响 被引量：4
10
作者 罗兰 侯杰 +2 位作者 邱冰 曹惠君 魏凤香 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期3881-3883,共3页
目的研究冬凌草甲素(ORI)诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤对磷酸化组蛋白(H2AX)表达的影响。方法彗星实验检测ORI诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤的程度。Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后H2AX蛋白的磷酸化。免疫荧光实验检... 目的研究冬凌草甲素(ORI)诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤对磷酸化组蛋白(H2AX)表达的影响。方法彗星实验检测ORI诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤的程度。Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后H2AX蛋白的磷酸化。免疫荧光实验检测Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点。结果彗星实验结果表明不同浓度的ORI(20,40,80μmol/L)处理SW1900细胞48 h后,可发生DNA损伤,并且随浓度增加,DNA损伤加重。Western印迹检测不同浓度ORI作用胰腺癌SW1900细胞后,H2AX蛋白发生磷酸化,γ-H2AX随着浓度增加表达增大。免疫荧光实验发现Phos-S1981ATM和γ-H2AX焦点随着浓度增加表达量增加。结论 ORI可以诱导胰腺癌SW1900细胞DNA损伤;H2AX蛋白发生磷酸化,具体DNA损伤信号通路有待进一步研究。 展开更多
关键词 冬凌草甲素 胰腺癌SW1900 DNA损伤 H2ax蛋白
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r-H2AX在不同食管癌株系中的剂量时间效应特点 被引量：2
11
作者 史鸿云 祝淑钗 +3 位作者 卢付河 王玉祥 苑兰惠 何丽 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期321-326,共6页
目的通过检测不同食管癌株系的r-H2AX时间剂量效应关系,了解r-H2AX的动力学特点。方法将食管癌ECA109和TE13两种细胞株分别给予1、2、4和8Gy的6MV-X线照射,并分别于0.5、1、2、4、8、12、24 h收集细胞提取蛋白,检测r-H2AX时间及剂量效... 目的通过检测不同食管癌株系的r-H2AX时间剂量效应关系,了解r-H2AX的动力学特点。方法将食管癌ECA109和TE13两种细胞株分别给予1、2、4和8Gy的6MV-X线照射,并分别于0.5、1、2、4、8、12、24 h收集细胞提取蛋白,检测r-H2AX时间及剂量效应特点。结果 (1)ECA109细胞和TE13细胞随着放疗剂量的增加,r-H2AX表达量第一次最高点出现的时间逐渐提前。(2)ECA109细胞接受低剂量照射后,r-H2AX在24 h内能够恢复到放疗前的水平,且剂量越低恢复越快;TE13细胞接受1、2、4和8Gy照射后24 h内r-H2AX均不能恢复到放疗前水平。(3)在0.5、1、2 h这3个时间点,随着放疗剂量的增加,r-H2AX的表达量并不都是逐渐增加。结论 TE13细胞较ECA109细胞敏感,照射后r-H2AX更难恢复到正常水平。 展开更多
关键词 食管癌 r-H2ax 时间效应 剂量效应
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应用γH_2AX检测甲醛致DNA损伤的研究 被引量：2
12
作者 刁汇玲 高金祥 +2 位作者 赵冬梅 马中女 巩永凤 《工业卫生与职业病》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期129-132,共4页
目的探讨磷酸化的H2AX(即γH2AX)能否灵敏、快速、简便的检测甲醛致DNA损伤。方法用甲醛处理中国仓鼠肺细胞株(V79)肺细胞,应用免疫荧光实验检测γH2AX焦点的形成,并通过单细胞凝胶实验验证DNA损伤程度。结果20μmol/L甲醛处理V79细胞10... 目的探讨磷酸化的H2AX(即γH2AX)能否灵敏、快速、简便的检测甲醛致DNA损伤。方法用甲醛处理中国仓鼠肺细胞株(V79)肺细胞,应用免疫荧光实验检测γH2AX焦点的形成,并通过单细胞凝胶实验验证DNA损伤程度。结果20μmol/L甲醛处理V79细胞10 min即可诱导γH2AX焦点形成增加,但2 h时才出现彗尾增长。1μmol/L甲醛处理细胞8 h时,γH2AX平均焦点数及焦点细胞率与对照组相比明显增加,差异有统计学意义(P<0.05),但此浓度在所有时间段都不能导致彗尾增长。结论γH2AX可在早期监测甲醛对DNA的损伤,并能检测到低浓度的甲醛致DNA损伤,因此,其敏感性优于单细胞凝胶实验。 展开更多
关键词 γH 2ax 甲醛 DNA损伤
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小麦高分子量谷蛋白亚基1Ax2`的AS-PCR鉴定 被引量：5
13
作者 孙宪印 吴科 +3 位作者 钱兆国 卫宪云 米勇 李斯深 《麦类作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期75-77,共3页
为了从DNA水平上快速鉴定Glu-A1位点编码的1Ax2*优质亚基,建立了稳定的检测1Ax2*优质亚基基因的PCR扩增体系。通过该体系,1Ax2*优质亚基基因扩增出2652bp特异片段,而其他亚基基因则不能扩增出该片段。验证材料的PCR鉴定结果与SDS-PAGE... 为了从DNA水平上快速鉴定Glu-A1位点编码的1Ax2*优质亚基,建立了稳定的检测1Ax2*优质亚基基因的PCR扩增体系。通过该体系,1Ax2*优质亚基基因扩增出2652bp特异片段,而其他亚基基因则不能扩增出该片段。验证材料的PCR鉴定结果与SDS-PAGE电泳结果一致,表明利用该体系鉴定1Ax2*亚基是可行的。利用此体系鉴定了44份外引小麦品种(系)的谷蛋白Glu-A1位点,有24个品种(系)含有1Ax2*亚基,1Ax2*亚基出现频率为54.5%。 展开更多
关键词 小麦 1ax2^＊ 等位基因特异性PCR
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γ-H2AX与DNA双链断裂关系的研究进展 被引量：8
14
作者 宾萍 郑玉新 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期520-522,共3页
H2AX是组蛋白的一个种类,普遍存在于整个基因组中。据报道,DNA双链断裂后可诱导位于丝氨酸-139位C-端保守区域内的H2AX磷酸化形成γ-H2AX,在荧光显微镜下形成可见的γ-H2AX焦点。用特异性抗体的免疫荧光法检测γ-H2AX已成为测定DSB的金... H2AX是组蛋白的一个种类,普遍存在于整个基因组中。据报道,DNA双链断裂后可诱导位于丝氨酸-139位C-端保守区域内的H2AX磷酸化形成γ-H2AX,在荧光显微镜下形成可见的γ-H2AX焦点。用特异性抗体的免疫荧光法检测γ-H2AX已成为测定DSB的金标准。目前,多种物理性、化学性和生物性的因素都能诱导形成γ-H2AX焦点。本文综述了不同因素诱导形成γ-H2AX的机制及其与DNA双链断裂之间的关系的研究进展。 展开更多
关键词 DNA损伤 Γ-H2ax DNA双链断裂
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γH2AX磷酸化/去磷酸化的分子机制及检测技术进展 被引量：3
15
作者 张森 刘鲁娟 +2 位作者 陈欢 侯宏卫 胡清源 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1291-1299,共9页
自从γH2AX在1998年首次发现以来,迅速成为多个学科领域的研究热点和研究工具。针对γH2AX建立的多种先进检测方法在生命科学和医学等多个领域内的应用展现了发展潜力。本文从其磷酸化和去磷酸化机制,各种检测分析技术的发展和建立,以... 自从γH2AX在1998年首次发现以来,迅速成为多个学科领域的研究热点和研究工具。针对γH2AX建立的多种先进检测方法在生命科学和医学等多个领域内的应用展现了发展潜力。本文从其磷酸化和去磷酸化机制,各种检测分析技术的发展和建立,以及在相关领域里的应用进展等三个方面进行了综述。 展开更多
关键词 γH2ax 磷酸化 免疫荧光技术 毒理学评价 综述
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γH2AX与男性不育患者精子DNA损伤的关系及意义 被引量：3
16
作者 钟慧芝 吕福通 +2 位作者 谢丹尼 莫毅 林发全 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第8期1044-1047,1051,共5页
目的研究γH2AX在男性不育患者精液中的表达水平,探讨γH2AX用于评价男性不育患者精子DNA双链断裂(DSBs)损伤程度的可行性。方法选取就诊于广西医科大学第一附属医院生殖医学研究中心、男性科门诊并确诊为男性不育患者27例(男性不育组)... 目的研究γH2AX在男性不育患者精液中的表达水平,探讨γH2AX用于评价男性不育患者精子DNA双链断裂(DSBs)损伤程度的可行性。方法选取就诊于广西医科大学第一附属医院生殖医学研究中心、男性科门诊并确诊为男性不育患者27例(男性不育组),另外选取23例确认有生育能力的健康男性的精液样本作为对照组。通过PureSperm密度梯度离心法(DGC)优选精子,运用单向凝胶电泳技术(SCGE)和流式细胞术方法对健康男性、男性不育组患者的精液进行精子双链DNA损伤和γH2AX含量的测定和比较。结果男性不育组患者精子DSBs损伤程度和γH2AX表达含量均高于对照组(P<0.01),而经密度梯度离心法优选精子后,两组男性精子的DSBs损伤程度和γH2AX表达含量均显著下降(P<0.01)。结论γH2AX在男性不育患者精子中的含量明显高于健康男性,可作为检测精子DNA双链断裂损伤程度的一个新的标志物。 展开更多
关键词 男性不育 H2ax磷酸化 DNA双链损伤程度
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^(60)Co γ-射线诱导人膀胱癌EJ细胞中磷酸化组蛋白H2AX焦点形成 被引量：4
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作者 田梅 潘艳 +1 位作者 阮健磊 苏旭 《中国职业医学》 CAS 北大核心 2008年第3期187-190,共4页
目的探讨60Co γ-射线是否可在人膀胱癌EJ细胞中诱导磷酸化组蛋白H2AX焦点形成以及形成的焦点数量与照射剂量及照射后时间的关系。方法免疫印迹法和流式细胞分析法用于检测不同剂量60Co γ-射线照射后EJ细胞中γH2AX蛋白表达的变化;免... 目的探讨60Co γ-射线是否可在人膀胱癌EJ细胞中诱导磷酸化组蛋白H2AX焦点形成以及形成的焦点数量与照射剂量及照射后时间的关系。方法免疫印迹法和流式细胞分析法用于检测不同剂量60Co γ-射线照射后EJ细胞中γH2AX蛋白表达的变化;免疫荧光法检测不同剂量照射后以及2 Gy照射后不同时间EJ细胞中γH2AX焦点的数量。结果γ-射线照射后γH2AX蛋白表达明显增加,但量效关系不明显;免疫荧光法可检测γH2AX焦点形成的数量和大小,并且存在剂量-效应关系及有时间依赖性,随着照射剂量的增加,γH2AX焦点数目及大小均明显增加,照射的剂量范围从0.1~4.0 Gy均可检测,照射后24 h仍可检测到γH2AX焦点,但焦点数随时间延长而减少、减弱。结论免疫荧光法检测照射后γH2AX焦点数目可敏感、直观地反映DNA损伤及修复情况,有望成为辐射检测及辐射致癌的好的生物指标。 展开更多
关键词 γ-射线照射 γH2ax焦点 EJ细胞 DNA损伤
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应用γH2AX评估丝裂霉素致胃癌细胞DNA损伤 被引量：3
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作者 贾金海 李勇 +1 位作者 张晓琳 何英辉 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第24期16-20,共5页
目的通过检测γH2AX,评估丝裂霉素对体外胃癌细胞DNA的损伤;同时,观察丝裂霉素对体外胃癌细胞增殖的影响。方法体外培养胃癌细胞株SGC-7901细胞,选用丝裂霉素处理,利用免疫荧光和Western-Blotting技术,分别检测γH2AX的焦点形成和蛋白... 目的通过检测γH2AX,评估丝裂霉素对体外胃癌细胞DNA的损伤;同时,观察丝裂霉素对体外胃癌细胞增殖的影响。方法体外培养胃癌细胞株SGC-7901细胞,选用丝裂霉素处理,利用免疫荧光和Western-Blotting技术,分别检测γH2AX的焦点形成和蛋白水平变化;采用MTT法检测SGC-7901细胞的增殖情况。结果与对照组相比,实验组在每个时间点的γH2AX细胞百分数和平均焦点数都呈增加趋势,200μg/mL组和400μg/mL组的增加尤为明显,与对照组的差异有显著性(P<0.01)。用400μg/mL的丝裂霉素孵育SGC-7901细胞,γH2AX蛋白的水平变化呈先升后降趋势,差异有显著性(P<0.05)。MTT结果显示,丝裂霉素对SGC-7901细胞的增殖抑制明显(P<0.05)。结论γH2AX可敏感反应丝裂霉素对胃癌细胞DNA的损伤,潜在的临床应用价值极高;丝裂霉素对体外胃癌细胞增殖抑制明显。 展开更多
关键词 丝裂霉素 胃癌SGC-7901细胞 γH2ax DNA双链断裂 增殖抑制
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γH2AX的检测方法简介 被引量：5
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作者 余艳柯 朱心强 杨军 《毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期408-410,共3页
关键词 γH2ax 免疫荧光 流式细胞技术 免疫印迹
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