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EM-3通过Stat3通路诱导鼻咽癌细胞凋亡和G_2/M期阻滞并降低SP细胞比例 被引量:6
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作者 李振华 李翠平 +5 位作者 张相强 代立婷 唐梦思 王国才 蒋建伟 曹明溶 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期1-10,共10页
目的:研究白花地胆草(Elephantopus mollis H.B.K)的乙醇提取物EM-3抗肿瘤作用分子机制。方法:MTT、克隆形成抑制和细胞划痕实验检测EM-3对鼻咽癌细胞增殖、迁移能力的影响;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;PI单染检测细胞周期;超... 目的:研究白花地胆草(Elephantopus mollis H.B.K)的乙醇提取物EM-3抗肿瘤作用分子机制。方法:MTT、克隆形成抑制和细胞划痕实验检测EM-3对鼻咽癌细胞增殖、迁移能力的影响;Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡;PI单染检测细胞周期;超速流式分选细胞仪检测鼻咽癌CNE2-S18肿瘤干细胞样SP细胞(side population cell)比例;Western blotting检测细胞凋亡、周期、侵袭迁移及肿瘤干细胞相关蛋白表达变化。结果:MTT、克隆形成抑制和细胞划痕实验结果表明,EM-3可以显著抑制鼻咽癌细胞的增殖,随着药物浓度的增大,细胞克隆数逐渐减少,体积逐渐变小,而且能够显著抑制鼻咽癌细胞的迁移;流式细胞术结果表明随着药物浓度的增加,凋亡率逐渐增加,并且G_2/M期细胞比例逐渐增加;超速流式分选细胞仪结果表明,EM-3可以显著降低CNE2-S18肿瘤干细胞样SP细胞的比例;Western blotting结果表明,随着药物浓度的增加,x IAP、Bcl-2、Cyclin D1、MMP2(药物高浓度)、MMP9、p-Met、Oct4(药物高浓度)及Sox2蛋白表达减少,而Cyclin B1、Bax蛋白表达增多,并伴随Caspase-9、Caspase-3活化及多聚ADP核糖聚合酶PARP酶切失活。结论:EM-3通过抑制Stat3通路诱导鼻咽癌细胞发生凋亡,并诱导G_2/M期阻滞。此外,EM-3经MMPs途径抑制鼻咽癌细胞迁移,同时可以有效降低CNE2-S18肿瘤干细胞样SP细胞干性。 展开更多
关键词 白花地胆草 鼻咽癌 凋亡 g_2/M期阻滞 STAT3
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葫芦素B诱导G_2/M期阻滞抑制人前列腺癌DU145细胞增殖并诱导细胞凋亡研究 被引量:5
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作者 张萌 边志刚 +3 位作者 张毅 王佳贺 阚亮 何平 《中国医刊》 CAS 2016年第2期63-67,共5页
目的探讨葫芦素B对人前列腺癌DU145细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养DU145细胞,MTT法检测不同浓度葫芦素B对DU145细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期;Hoechst 33258核染色观察细胞核的形态变化;采用流式细胞术检测细胞凋亡率... 目的探讨葫芦素B对人前列腺癌DU145细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养DU145细胞,MTT法检测不同浓度葫芦素B对DU145细胞的增殖抑制作用;流式细胞仪检测细胞周期;Hoechst 33258核染色观察细胞核的形态变化;采用流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测葫芦素B对DU145细胞周期调节蛋白Cyclin B1表达的影响。结果葫芦素B对DU145细胞的增殖有抑制作用,且呈剂量、时间依赖性;葫芦素B使DU145细胞发生G_2/M期阻滞;可见细胞核染色质浓缩、核固缩、核碎裂等典型的凋亡改变;流式细胞仪检测结果显示,葫芦素B诱导DU145细胞凋亡,呈剂量依赖性;葫芦素B使DU145细胞Cyclin B1蛋白表达降低。结论葫芦素B通过诱导G_2/M期阻滞抑制人前列腺癌DU145细胞增殖并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 葫芦素B 前列腺癌 g_2/M期阻滞 凋亡
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G_2/M期阻滞与细胞放射敏感性关系的研究进展 被引量:2
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作者 范源 沈海祥 +1 位作者 王志平 贺振华 《广东医学》 CAS 北大核心 2016年第3期457-459,共3页
在肿瘤的临床治疗中,放射治疗的适应证宽泛,选择性大,故其在肿瘤治疗中的作用和地位日益突出。电离辐射可以引起肿瘤细胞的DNA损伤,之后通过多种机制杀灭肿瘤细胞。其中,影响肿瘤细胞的周期调控,即通过降低肿瘤细胞的G_2/M期阻滞,从而... 在肿瘤的临床治疗中,放射治疗的适应证宽泛,选择性大,故其在肿瘤治疗中的作用和地位日益突出。电离辐射可以引起肿瘤细胞的DNA损伤,之后通过多种机制杀灭肿瘤细胞。其中,影响肿瘤细胞的周期调控,即通过降低肿瘤细胞的G_2/M期阻滞,从而影响肿瘤细胞受损DNA的修复,引起肿瘤细胞死亡就是其治疗肿瘤的主要机制之一。 展开更多
关键词 放射敏感性 g_2/M期 电离辐射 增殖周期 DNA 基因表达 信号转导蛋白 放射增敏作用 双链断裂 放疗增敏
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DADS对Chk1/2基因高表达人胃癌MGC803细胞G_2/M期的影响 被引量:6
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作者 夏红 向姝霖 +5 位作者 曾颖 陆丽峰 刘芳 凌晖 苏波 苏琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期199-204,共6页
目的在建立Chk1/2基因高表达人胃癌MGC803细胞基础上,探讨DADS对Chk1/2高表达MGC803细胞G_2/M期的作用。方法分别采用集落形成实验、流式细胞术、RTPCR、Western blot等方法,检测DADS对Chk1/2高表达MGC803细胞增殖、细胞周期分布、Chk1... 目的在建立Chk1/2基因高表达人胃癌MGC803细胞基础上,探讨DADS对Chk1/2高表达MGC803细胞G_2/M期的作用。方法分别采用集落形成实验、流式细胞术、RTPCR、Western blot等方法,检测DADS对Chk1/2高表达MGC803细胞增殖、细胞周期分布、Chk1与Chk2 mRNA与蛋白、p-Chk1与p-Chk2及CDC25C与cyclinB1的表达。结果软琼脂集落形成实验显示,30 mg·L^(-1)DADS作用Chk1与Chk2高表达MGC803细胞组集落形成率均明显低于对照组与空载体组(P<0.05)。流式细胞术显示,30 mg·L^(-1)DADS作用12、24、36、48 h后,Chk1/MGC803细胞G_2/M期分别为41.3%、57.4%、68.9%、42.9%,较MGC803细胞与Chk2/MGC803细胞明显增加(P<0.05)。而Chk2/MGC803细胞与MGC803细胞差异没有显著性(P>0.05)。RT-PCR显示,Chk1/MGC803与Chk2/MGC803细胞Chk1与Chk2mRNA水平较对照组无明显变化;并且,Western blot显示,Chk1与Chk2总蛋白及p-Chk2的表达无明显改变,但pChk1呈时间依赖性上调,CDC25C与cyclinB1呈时间依赖性下调(P<0.05)。结论 DADS可阻滞Chk1/MGC803细胞于G_2/M期,与上调磷酸化Chk1和下调CDC25C与cyclinB1有关。 展开更多
关键词 二烯丙基二硫 人胃癌细胞 G2/M期 Chk1/Chk2激酶 CDC25C CYCLINB1
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汉滩病毒G_2重组腺病毒的表达及其基因免疫的研究 被引量:3
5
作者 吴兴安 于澜 +4 位作者 胡刚 张芳琳 白文涛 史梦远 徐志凯 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期415-417,共3页
目的:在VeroE6细胞中表达汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白G2重组腺病毒(AdenoG2),并探讨其诱导免疫应答特性。方法:以HTNVAdenoG2病毒原种(滴度约1×1013pfu/L)感染VeroE6细胞,用IFA法检测其表达产物。以表达产物免疫BALB/c小鼠后,用ELIS... 目的:在VeroE6细胞中表达汉滩病毒(HTNV)囊膜糖蛋白G2重组腺病毒(AdenoG2),并探讨其诱导免疫应答特性。方法:以HTNVAdenoG2病毒原种(滴度约1×1013pfu/L)感染VeroE6细胞,用IFA法检测其表达产物。以表达产物免疫BALB/c小鼠后,用ELISA、微量细胞培养中和试验及淋巴细胞增殖试验检测体液及细胞免疫应答。结果:用HTNVAdenoG2感染VeroE6细胞后,可检测到HTNV糖蛋白G2的表达。用HTNVAdenoG2免疫小鼠后,可诱导产生抗HTNV糖蛋白G2的特异性抗体,抗体效价为1∶40。微量细胞培养中和试验的结果表明,HTNVAdenoG2还可刺激小鼠产生低水平的中和抗体;但淋巴细胞的增殖反应不明显。结论:在VeroE6细胞中成功地表达了HTNV糖蛋白G2。以HTNVAdenoG2免疫小鼠后,主要刺激小鼠产生特异性的抗HTNV体液免疫应答,而特异性的细胞免疫应答不明显。本研究结果为HTNV基因工程疫苗的研制提供了实验依据。 展开更多
关键词 汉滩病毒 糖蛋白G2 重组腺病毒 免疫
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γ射线诱导HL-60和K562细胞凋亡和G_2期阻滞的关系 被引量:7
6
作者 赵卫红 陈家佩 +1 位作者 从玉文 郑胡镛 《基础医学与临床》 CSCD 2000年第2期71-73,共3页
应用形态学、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪等方法观察r射线诱导辐射敏感细胞HL-60和辐射耐受细胞K562 细胞凋亡和细胞周期改变的关系。结果:HL-60细胞受照后出现G2期阻滞,12h达高峰,凋亡细胞比例随作用时间和 照... 应用形态学、琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪等方法观察r射线诱导辐射敏感细胞HL-60和辐射耐受细胞K562 细胞凋亡和细胞周期改变的关系。结果:HL-60细胞受照后出现G2期阻滞,12h达高峰,凋亡细胞比例随作用时间和 照射剂量的增加而增加,凋亡特有的梯状图谱分别在 1、5、10Gy照后 72、24、12h出现。 K562细胞受照后也出现 G2期阻滞,5、10、20Gy组分别在 24、48、72h达高峰,未观察到细胞凋亡的发生。表明:细胞的辐射敏感性与致 凋亡的敏感性一致,辐射敏感细胞的凋亡与从G2期阻滞的退出有关。 展开更多
关键词 细胞凋亡 G2期阻滞 辐射敏感性
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咖啡因对辐射诱导细胞凋亡和G_2/M期阻滞的影响 被引量:3
7
作者 赵卫红 陈家佩 +1 位作者 吴岚军 从玉文 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1998年第3期232-235,共4页
用形态学,DNA电泳和流式细胞仪等方法观察γ射线诱发BAF3细胞G_2/M期阻滞和凋亡的作用,以及咖啡因对其的影响。结果显示,5Gyγ射线照射后6小时引起细胞G_2/M期阻滞,G_2/M期比例为49.10%,12小时升至52.00%,无细胞凋亡发生。照前分别加... 用形态学,DNA电泳和流式细胞仪等方法观察γ射线诱发BAF3细胞G_2/M期阻滞和凋亡的作用,以及咖啡因对其的影响。结果显示,5Gyγ射线照射后6小时引起细胞G_2/M期阻滞,G_2/M期比例为49.10%,12小时升至52.00%,无细胞凋亡发生。照前分别加入1mmol/L及5mmol/L咖啡因,照后12小时G_2/M阻滞程度降低,比例降至39.42%和15.49%,形态学检测细胞凋亡比例为8.33±1.53%和18.33±1.76%,流式细胞仪检测细胞凋亡比例为18.78%和43.81%,DNA电泳可见细胞凋亡特有的梯状图谱。结论提示,G_2/M期阻滞抑制能促进辐射诱导的细胞凋亡。 展开更多
关键词 咖啡因 细胞凋亡 辐射 G2/M期阻滞
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HPLC法测定小儿扶脾颗粒中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2含量 被引量:10
8
作者 黄晓燕 方磊 +2 位作者 李荣玮 丁野 李文莉 《中国药师》 CAS 2018年第2期334-336,共3页
目的:建立高效液相色谱法测定小儿扶脾颗粒中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的含量,并通过对31批样品检测结果的分析初步研究小儿扶脾颗粒在黄曲霉毒素污染方面的安全性,以提示企业选择安全的原料药材投料。方法:采用柱后光化学衍生HPLC... 目的:建立高效液相色谱法测定小儿扶脾颗粒中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2的含量,并通过对31批样品检测结果的分析初步研究小儿扶脾颗粒在黄曲霉毒素污染方面的安全性,以提示企业选择安全的原料药材投料。方法:采用柱后光化学衍生HPLC法测定小儿扶脾颗粒中黄曲霉毒素的含量。采用Ecosil C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-乙腈-水(30∶10∶60),荧光检测器,激发波长为360 nm,发射波长为450 nm,流速为0.8 ml·min^(-1),柱温为30℃进样量为20μl。结果:黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2分别在9.65~48.25 pg(r=0.999 1)、2.45~12.25 pg(r=0.999 8)、10.5~52.5 pg(r=0.995 6)、2.55~12.75 pg(r=0.996 6)范围内线性关系良好;加样回收率在83.3%~95.6%之间。有14批样品检出黄曲霉毒素,其总含量为0.21×10^(-3)~0.54×10^(-3)μg·g^(-1)。结论:该方法操作简便,结果稳定可靠,可用于小儿扶脾颗粒的质量控制。 展开更多
关键词 小儿扶脾颗粒 黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、g_2 含量测定 高效液相色谱法
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特征2域上的李代数G_2的导子代数 被引量:4
9
作者 林磊 《华东师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期8-11,共4页
本文利用把特征2域上的典型李代数G2嵌入Cartan型李代数K(5)的结果,确定了G2的导子代数以及外导子代数。
关键词 导子代数 特征2 李代数 外导子代数
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特征2李代数G_2的Z_(2×2)阶化结构 被引量:2
10
作者 李可峰 《聊城大学学报(自然科学版)》 2004年第1期16-17,共2页
决定了特征2李代数G_2及其导子代数Z_(2×2)的阶化结构。
关键词 特征2 李代数G2 Z2×2阶化结构 导子代数
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CLINICAL SIGNIFICANCE OF DETECTING SERUM ANTIBODIES TO NUCLEOPROTEIN AND GLYCOPROTEIN G_2 OF HANTAAN VIRUS IN PATIENTS WITH HEMORRHAGIC FEVER WITH RENAL SYNDROME
11
作者 刘正稳 张成文 +1 位作者 刘水腾 杭长寿 《Journal of Pharmaceutical Analysis》 CAS 1998年第1期39-43,共5页
Antibody blocking enzyme linked immunosorbent assays, respectively detecting antibodies to Hantaan virus nucleoprotein (NPAb) and glycoprotein GZ (G,Ab), were developed using monoclonal antibody L133, L13r3, LV48A and... Antibody blocking enzyme linked immunosorbent assays, respectively detecting antibodies to Hantaan virus nucleoprotein (NPAb) and glycoprotein GZ (G,Ab), were developed using monoclonal antibody L133, L13r3, LV48A and LVZB28B NPAb and GZAb in 291 serum samples from 65 patientswith kemorrkagic fever with renal syudrome (HFRS) were detfrmlned by these methods. The positive rates or NPAb were 90N on day 2-3 and 100 % on day 8-9 arter onset of disease, respectively.NPAb titers Increased during fever period and reached Peak levels during kypotensive and oliguric periods of HFRS. It was suggested that NPAb might be an important component Involved in the immunopathogenlc lin'alrmeut of HFRS and the detection of NPAb might be useful for the early diagnosis or HFRS. The I,osltlve rates and titers of GZAh were very low during the rirst three periods,namely rever, hypoteuslve and ollgurlc periods, and reached high levels during the convalescent period. GRAb titers were negatively related to the I,rotelnurla levels during the course of HFRS. It wasIndicated that GZAb might be the main component or neutralizing autlhodles to Hantaan virus Infection and the efrlclent production or GZAb was a good marker ror predicting the recovery and betterprognosis of HFRS. 展开更多
关键词 hemorrhagic fever with renal syndrome antibody to nucleoprotein or Hantaan virus:stibody to glycoprotein g_2 of Hantaan virus
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虎杖苷通过调节G0S2和ATGL表达改善非酒精性脂肪肝病的研究
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作者 盛鲁光 刘丹丹 +4 位作者 刘维斌 雷涛 陈清光 陆灏 徐碧林 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第10期1847-1856,共10页
目的本研究旨在探讨虎杖苷(PD)对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠模型及人肝癌细胞系G2(HepG2)细胞模型的影响,揭示其潜在分子机制。方法30只6周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠,随机分为正常饮食组和高脂饮食组,后者建立NAFLD小... 目的本研究旨在探讨虎杖苷(PD)对高脂饮食诱导的非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)小鼠模型及人肝癌细胞系G2(HepG2)细胞模型的影响,揭示其潜在分子机制。方法30只6周龄雄性SPF级C57BL/6J小鼠,随机分为正常饮食组和高脂饮食组,后者建立NAFLD小鼠模型后进一步分为高脂饮食(HFD)组和虎杖苷治疗(PD)组。PD组灌胃给药PD 250 mg/(kg·d),为期10周,期间监测体质量并进行口服葡萄糖和胰岛素耐量测试。实验结束时,通过一系列实验评估PD对小鼠肝重、血脂、肝脏脂质积累及肝损伤标志物的影响。通过qRT-PCR和Western blot法检测G_(0)/G_(1)开关基因2(G0S2)和脂肪三酰甘油脂肪酶(ATGL)的表达,并通过免疫组织化学染色再次验证基因表达。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)法评估PD对HepG2细胞活性的影响,油红O染色观察脂质积累,通过qRT-PCR和Western blot法检测G0S2和ATGL的表达,并验证了G0S2被敲低后脂质积累和基因表达的改变。结果PD降低小鼠体质量、肝重及血清和肝组织中的天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)水平(P<0.05),减轻肝组织病理损伤,降低G0S2表达(P<0.05),增加ATGL表达(P<0.05)。在细胞层面,PD减少脂滴累积,改善脂质代谢,降低G0S2表达(P<0.05),增加ATGL表达(P<0.05)。即使在G0S2被敲低的细胞中,PD仍能促进脂肪分解(P<0.01)。结论PD通过调节G0S2和ATGL表达促进肝脂肪分解,减轻高脂饮食诱导的小鼠NAFLD模型的代谢紊乱和肝脏损伤,为NAFLD治疗提供新策略。 展开更多
关键词 虎杖苷 非酒精性脂肪肝病 C57BL/6J小鼠 HEPG2细胞 脂肪分解 G_(0)/G_(1)开关基因2 脂肪三酰甘油脂肪酶
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RSL1D1新靶分子PEG10通过促进G_(2)/M转换加速HepG2肝细胞癌细胞增殖的机制研究
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作者 丁笠 郑伊婧 +3 位作者 倪伟 张吟 张智萍 张新跃 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 北大核心 2025年第4期65-73,共9页
为探究核仁蛋白(ribosomal L1-domain-containing protein 1,RSL1D1)对印迹基因(paternally expressed 10,PEG10)及下游通路的调控机制,以HepG2肝细胞癌细胞和HCT116结直肠癌细胞为研究对象,通过转录组测序、蛋白质免疫印迹、实时荧光定... 为探究核仁蛋白(ribosomal L1-domain-containing protein 1,RSL1D1)对印迹基因(paternally expressed 10,PEG10)及下游通路的调控机制,以HepG2肝细胞癌细胞和HCT116结直肠癌细胞为研究对象,通过转录组测序、蛋白质免疫印迹、实时荧光定量PCR、cell counting kit-8法、碘化丙啶染色等方法,考察RSL1D1、PEG10敲低或过表达后,RSL1D1、PEG10、MYC原癌基因(MYC proto-oncogene,c-Myc)、细胞周期调节基因Cyclin B1表达水平的变化及其对细胞周期和细胞增殖的影响。结果表明:RSL1D1通过上调c-Myc激活靶基因PEG10转录。在HepG2细胞(RSL1D1和PEG10高表达)中,PEG10敲低通过下调Cyclin B1诱导G_(2)/M阻滞,而在RSL1D1和PEG10低表达的HCT116细胞,敲低PEG10难以影响Cyclin B1介导的细胞增殖。综上,PEG10作为本研究新发现的RSL1D1下游靶分子,在RSL1D1-c-Myc-PEG10-Cyclin B1信号轴中介导RSL1D1的促增殖作用,该通路的活化与否取决于RSL1D1和PEG10的表达丰度,提示PEG10是潜在的肿瘤治疗靶点。 展开更多
关键词 PEG10 RSL1D1 Cyclin B1 G_(2)/M转换 肝细胞癌
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洛克米兰醇对肝癌HepG2细胞的抗增殖作用及其机制研究 被引量:4
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作者 王辉 杨蕾 孔令义 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2020年第16期4208-4216,共9页
目的研究传统中药米仔兰Aglaiaodorata中洛克米兰醇对肝癌细胞HepG2增殖的影响及抗肿瘤作用机制。方法 MTT、细胞克隆形成、EdU染色和CFDA染色方法考察洛克米兰醇对HepG2细胞的抗增殖效果;流式细胞仪检测洛克米兰醇对HepG2细胞细胞周期... 目的研究传统中药米仔兰Aglaiaodorata中洛克米兰醇对肝癌细胞HepG2增殖的影响及抗肿瘤作用机制。方法 MTT、细胞克隆形成、EdU染色和CFDA染色方法考察洛克米兰醇对HepG2细胞的抗增殖效果;流式细胞仪检测洛克米兰醇对HepG2细胞细胞周期和细胞凋亡的变化;Western blotting检测洛克米兰醇对细胞周期调控蛋白和丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路相关蛋白表达的影响。结果洛克米兰醇可以时间和浓度依赖性抑制HepG2细胞增殖。同等浓度下洛克米兰醇抗HepG2细胞增殖的效果好于阿霉素,而对正常肝细胞(L02)的毒性弱于阿霉素。流式细胞技术检测发现洛克米兰醇给药48 h能够诱导HepG2细胞G_2/M期细胞周期阻滞,但不诱导细胞凋亡。Western blotting研究发现该化合物抑制调控G_2/M周期相关蛋白cdc25C、cdc2和cyclin B1的表达并且激活细胞外调节蛋白激酶(ERK)和c-Jun氨基末端激酶(JNK)。对其机制深入研究发现,ERK抑制剂(U0126)可以部分逆转洛克米兰醇对HepG2的抗增殖和G_2/M周期阻滞及其抑制蛋白cdc25C和cdc2表达的效果。结论洛克米兰醇在抑制肝癌细胞增殖的效果和对正常肝细胞的选择性方面优于阿霉素。洛克米兰醇能够通过过度活化ERK,从而引起HepG2细胞G_2/M周期阻滞而达到抗增殖效果。 展开更多
关键词 米仔兰 洛克米兰醇 肝癌 g_2/M周期阻滞 cdc25C ERK
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Chk1在K562/A02细胞耐药中的作用机制
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作者 张敏 吴耀辉 +2 位作者 陈智超 游泳 邹萍 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期579-582,共4页
目的研究检测点激酶1(Chk1)对K562/A02细胞周期及凋亡的影响,探讨Chk1在肿瘤细胞耐药中的作用机制。方法以人红白血病细胞系K562及其耐药细胞株K562/A02为研究对象,与阿霉素共同孵育后,RT-PCR检测Chk1mRNA表达水平,Western blot检测其... 目的研究检测点激酶1(Chk1)对K562/A02细胞周期及凋亡的影响,探讨Chk1在肿瘤细胞耐药中的作用机制。方法以人红白血病细胞系K562及其耐药细胞株K562/A02为研究对象,与阿霉素共同孵育后,RT-PCR检测Chk1mRNA表达水平,Western blot检测其蛋白质的表达及磷酸化水平,MTT法检测药物敏感性,流式细胞术检测细胞周期分布和细胞凋亡。结果Chk1 mRNA及蛋白表达水平在两种细胞间无显著差异(均P>0.05);Chk1磷酸化水平在K562/A02细胞为(0.79±0.56),K562细胞为(0.27±1.47),其差异有显著性意义(P<0.05)。阿霉素作用6h后,致K562/A02细胞阻滞在G2/M期的细胞百分率为(54.12±0.57)%,显著高于K562细胞的(36.99±1.28)%(P<0.05),K562/A02细胞凋亡率为(6.25±0.81)%,显著低于K562细胞的(66.47±1.26)%(P<0.05)。阿霉素对K562/A02和K562细胞的IC50值分别为(109.65±0.26)mg/L、(1.08±0.74)mg/L,耐药倍数为102倍。结论由于G2/M期阻滞是导致白血病细胞耐药的机制之一,Chk1磷酸化水平与G2/M期阻滞和细胞凋亡密切相关,提示Chk1的活化状态可能参与K562/A02细胞的耐药机制。 展开更多
关键词 K562/A02细胞 耐药 g_2/M期阻滞 CHK1 细胞凋亡
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汉防己甲素对人鼻咽癌CNE1和CNE2细胞株的放疗增敏作用 被引量:12
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作者 王君 常利红 +6 位作者 李霞 陈贤珍 吴喜福 王志远 黄子真 黄健聪 张革化 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期1611-1618,共8页
目的:探讨最大非毒性剂量汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放疗增敏机制。方法:分别采用最大非毒性剂量Tet(对CNE1细胞为1.5μmol/L;对CNE2细胞为1.8μmol/L)、4 Gy放疗和最大非毒性剂量Tet联合放疗处理CNE1和C... 目的:探讨最大非毒性剂量汉防己甲素(tetrandrine,Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE1和CNE2的放疗增敏机制。方法:分别采用最大非毒性剂量Tet(对CNE1细胞为1.5μmol/L;对CNE2细胞为1.8μmol/L)、4 Gy放疗和最大非毒性剂量Tet联合放疗处理CNE1和CNE2细胞;流式细胞术检测各组细胞周期分布,Western blot检测各组细胞γ-H2AX、cleaved caspase-3、p-CDC25C、CDK1、p-CDK1、cyclin B1、ERK和p-ERK的蛋白水平。结果:最大非毒性剂量Tet联合放疗后可上调CNE1和CNE2细胞中γ-H2AX的表达。放疗组CNE1和CNE2细胞G_2/M期的比例分别为(18.09±0.42)%和(18.48±1.32)%,联合处理组CNE1和CNE2细胞G_2/M期的比例降为(15.88±1.04)%和(13.80±0.82)%,与放疗组比较差异有统计学意义(P<0.05)。联合处理可增加放疗所致的cleaved caspase-3的蛋白水平(P<0.05)。不同浓度Tet处理CNE1和CNE2细胞后,p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平随Tet浓度增加而升高(P<0.05),CDK1的表达无明显改变;最大非毒性剂量Tet不影响p-CDC25C、p-CDK1和CDK1的蛋白水平。在CNE1和CNE2细胞中,联合处理可明显降低放疗引起的p-CDC25C和p-CDK1的蛋白水平(P<0.05),上调放疗后cyclin B1的表达,而对总CDK1的表达无明显调节作用;联合处理可显著抑制放疗所致的pERK蛋白水平(P<0.05)。结论:最大非毒性剂量Tet可以增加放疗引起的CNE1和CNE2细胞的DNA断裂及细胞凋亡,其放疗增敏的机制可能与Tet调控ERK/CDC25C/CDK1/cyclin B1通路、去除放疗导致的G2/M期阻滞有关。 展开更多
关键词 汉防已甲素 鼻咽癌 G2/M期阻滞 ERK/CDC25C/CDK1/cyclin B1通路
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土壤有机矿质复合体研究 Ⅴ.胶散复合体组成和生成条件的剖析 被引量:24
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作者 徐建民 袁可能 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第1期43-51,共9页
本文采用胶体分散法研究我国自北而南的13个地带性土壤中有机矿质复合体的组成、形成因素及其结合特点等。结果表明:复合体总量(G_0+G_1+G_2)与土壤中粘粒含量呈显著正相关。复合体类型中,G_0组的变化没有明显规律,G_1组在石灰性土壤和... 本文采用胶体分散法研究我国自北而南的13个地带性土壤中有机矿质复合体的组成、形成因素及其结合特点等。结果表明:复合体总量(G_0+G_1+G_2)与土壤中粘粒含量呈显著正相关。复合体类型中,G_0组的变化没有明显规律,G_1组在石灰性土壤和中性土壤中含量较高,自北而南有逐渐减少的趋势,G_2组则在酸性土壤中含量较高,自北而南呈逐渐增加趋势,G_1/G_2比值范围为025—12.35,自北而南呈渐减趋势。各组复合体含量与成土因素、矿质全量、腐殖质组成及土壤基本性质的相关分析结果一致表明,地带性土壤中G_1、G_2组复合体含量也呈现有规律的地带性分布。G_1/G_2比值与纬度呈极显著正相关,而与年均温和年降雨量呈极显著负相关,G_1含量与钙镁全量、钙饱和度、pH、CEC呈显著正相关,而G_2含量则与铁铝全量、游离态及铬合态铁铝呈显著正相关,与钙饱和度、pH等呈显著负相关。G_1/G_2之比还与HA/FA之比呈极显著正相关。可见,胶散复合体的组成和成土条件与土壤性质有关。各组复合体组成及G_1/G_2比值可以作为土壤分类的参考。 展开更多
关键词 胶散复合体 形成因素 土壤
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棕矢车菊素诱导人宫颈癌Hela细胞G_(2)/M期停滞的机制研究 被引量:8
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作者 王海艳 秦海霞 李淑娟 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第18期3264-3269,共6页
目的:研究棕矢车菊素对宫颈癌(cervical carcinoma,CC)细胞Hela的增殖抑制和周期阻滞能力,探索棕矢车菊素是否具有宫颈癌治疗药物的潜力。方法:MTT比色法检测细胞活力;羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl ... 目的:研究棕矢车菊素对宫颈癌(cervical carcinoma,CC)细胞Hela的增殖抑制和周期阻滞能力,探索棕矢车菊素是否具有宫颈癌治疗药物的潜力。方法:MTT比色法检测细胞活力;羧基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯(carboxyfluorescein succinimidyl amino ester,CFSE)法检测细胞增殖水平变化;碘化丙啶(propidium,PI)单染检测细胞周期;免疫印迹法(western blot,WB)检测细胞蛋白表达水平。采用裸鼠成瘤检测棕矢车菊素体外抑制肿瘤效果。结果:棕矢车菊素可以显著抑制Hela细胞活力水平,且具有时间和浓度依赖性;棕矢车菊素抑制Hela细胞增殖,且100μmol/L棕矢车菊素可显著诱导细胞发生G_(2)/M周期阻滞。分子机制上,研究证明了棕矢车菊素可以通过促进细胞周期检验点激酶(checkpoint kinase 2,CHK2)激活,抑制细胞分裂周期蛋白25同源蛋白C(cell division cyclin 25 homolog C,CDC25C)活力,从而提高无活性的pCDC2水平。棕矢车菊素同时降低了Cyclin B1表达。因此,棕矢车菊素通过抑制G_(2)/M期调控蛋白Cyclin B1/CDC2复合物活性来诱导细胞发生G_(2)/M期阻滞。同时,体外裸鼠成瘤,棕矢车菊素灌胃4周后,小鼠肿瘤体积显著减小。结论:在Hela细胞上,棕矢车菊素具有抑制细胞增殖和诱导G_(2)/M期阻滞的作用,证明了棕矢车菊素具有抗宫颈癌细胞的治疗潜力。 展开更多
关键词 HELA细胞 细胞增殖 G_(2)/M 细胞周期 棕矢车菊素
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土壤有机矿质复合体研究Ⅵ.胶散复合体的化学组成及其结合特征 被引量:5
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作者 徐建民 袁可能 《土壤学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第1期26-33,共8页
本文研究水热条件渐变的地带性土壤中G_1、G_2组胶散复合体有机、无机物的化学组成及其结合特点。结果表明:G_2组中铁有积累现象,游离态铁、铝氧化物含量为G_2>G_1,但均随土壤类型变化。松结态腐殖质(H_1)为G... 本文研究水热条件渐变的地带性土壤中G_1、G_2组胶散复合体有机、无机物的化学组成及其结合特点。结果表明:G_2组中铁有积累现象,游离态铁、铝氧化物含量为G_2>G_1,但均随土壤类型变化。松结态腐殖质(H_1)为G_1>G_2,紧结态腐殖质(H_3)则为Gi<G:。可提取腐殖质中,松、稳结态腐殖质之比值H_1/H_2和胡敏酸、富里酸之比值HA/FA,除个别上壤之外,都相差不大。G_1、G_@两组复合体中都含有一定数量的络合态铁、铝和钙。初步认为G_2中腐殖质总量及胡敏素量均高于G_1,但不能区分为钙键复合体和铁铝键复合体。 展开更多
关键词 G1 G2 矿物质 腐殖质 土壤 复合体
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HPLC柱后光化学衍生荧光检测法检测3种含土鳖虫中成药的黄曲霉毒素 被引量:7
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作者 刘晶晶 李耀磊 +2 位作者 王晶娟 戴忠 马双成 《中国药事》 CAS 2021年第3期307-314,共8页
目的:考察免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法在中成药中黄曲霉毒素测定的可行性,并对其污染情况进行筛查,为中成药黄曲霉毒素污染监管提供依据。方法:采用免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法对含有土鳖虫的中成药中黄曲... 目的:考察免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法在中成药中黄曲霉毒素测定的可行性,并对其污染情况进行筛查,为中成药黄曲霉毒素污染监管提供依据。方法:采用免疫亲和净化HPLC柱后光化学衍生荧光检测法对含有土鳖虫的中成药中黄曲霉毒素的含量进行测定。样品经有机溶剂提取、免疫亲和柱净化后,利用高效液相色谱-光化学衍生-荧光检测器进行分析测定。对3种含土鳖虫的中成药,考察加样回收率,测定黄曲霉毒素残留量,并对测定结果进行分析。采用高效液相色谱-串联质谱法对部分超出限度批次进行结果确认。结果:3种中成药中黄曲霉毒素B_(1)、B_(2)、G_(1)、G_(2)的回收率均在80%~113%。3种24批中成药中,21批检出黄曲霉毒素,检出率为87.5%,部分批次黄曲霉毒素含量明显偏高。结论:免疫亲和净化HPLC柱后光衍生荧光检测法结果准确,重现性好,可用于中成药中黄曲霉毒素的测定。含土鳖虫药材的中成药,个别品种黄曲霉毒素污染情况较为严重,存在安全隐患,应引起生产企业的重视,保障用药安全。 展开更多
关键词 中成药 免疫亲和柱 黄曲霉毒素B_(1) 黄曲霉毒素B_(2) 黄曲霉毒素G_(1) 黄曲霉毒素G_(2) 风险评估
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