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半夏泻心汤通过调节胃黏膜功能改善难治性幽门螺杆菌感染gyrA基因突变耐药患者的临床观察
1
作者 沈羽嘉 周明霞 王建新 《世界中西医结合杂志》 2025年第12期2466-2471,共6页
目的观察半夏泻心汤通过调节胃黏膜功能治疗难治性幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染gyrA基因突变耐药患者的临床疗效。方法选取2023年11月—2025年5月于苏州市吴江区中医医院消化内科就诊的120例难治性Hp感染gyrA基因突变耐药患... 目的观察半夏泻心汤通过调节胃黏膜功能治疗难治性幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)感染gyrA基因突变耐药患者的临床疗效。方法选取2023年11月—2025年5月于苏州市吴江区中医医院消化内科就诊的120例难治性Hp感染gyrA基因突变耐药患者。采用随机数字表法分为西药治疗组(n=60)与联合治疗组(n=60)。西药治疗组患者接受常规西药治疗,联合治疗组患者接受常规西药联合半夏泻心汤治疗,均治疗14 d。比较两组患者的临床疗效总有效率、不良反应发生情况,以及治疗前与治疗结束2个月后的胃镜评分、病理组织学评分、胃泌素-17(Gastrin-17,G-17)、胃蛋白酶原Ⅰ(Pepsinogen I,PGⅠ)、胃蛋白酶原Ⅱ(Pepsinogen II,PGⅡ)、C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、白细胞介素-8(Interleukin-8,IL-8)水平。结果联合治疗组治疗结束2个月后的临床疗效总有效率93.33%(56/60)高于西药治疗组78.33%(47/60),差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者胃镜评分、病理组织学评分比较,差异无统计学意义(P>0.05),两组患者治疗2个月后胃镜评分、病理组织学评分均较治疗前降低,差异具有统计学意义(P<0.05);且联合治疗组的胃镜评分、病理组织学评分明显低于西药治疗组,差异具有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组患者G-17、PGⅠ、PGⅡ、CRP、IL-8水平比较,差异无统计学意义(P>0.05),治疗后两组患者G-17、PGⅠ、PGⅡ、CRP、IL-8水平均较治疗前降低,差异具有统计学意义(P<0.05);且联合治疗组的G-17、PGⅠ、PGⅡ、CRP、IL-8水平明显低于西药治疗组,差异具有统计学意义(P<0.05)。联合治疗组患者的不良反应总发生率为3.33%(2/60),低于西药治疗组的13.33%(8/60),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论半夏泻心汤治疗可明显提高难治性Hp感染gyrA基因突变耐药患者的临床疗效,改善胃镜和病理组织学评分,调节胃黏膜功能,降低机体炎症水平,为中西医结合治疗Hp耐药提供了新的理论依据和临床方案。 展开更多
关键词 半夏泻心汤 胃黏膜功能 难治性幽门螺杆菌感染 gyra基因突变
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利用16S rDNA结合gyrA和gyrB基因对生防芽孢杆菌R31的快速鉴定 被引量：58
2
作者 喻国辉 牛春艳 +2 位作者 陈远凤 陈燕红 杨紫红 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2010年第2期160-166,共7页
克隆16S rDNA、DNA促旋酶A亚基编码基因gyrA和B亚基编码基因gyrB对分离自石斛兰(Dendrobiumsp.)叶片的广谱抗真菌生防芽孢杆菌R31进行鉴定。首先通过生理生化测定和克隆16S rDNA序列,分析显示其属于芽孢杆菌属(Bacillus),但不能准确鉴... 克隆16S rDNA、DNA促旋酶A亚基编码基因gyrA和B亚基编码基因gyrB对分离自石斛兰(Dendrobiumsp.)叶片的广谱抗真菌生防芽孢杆菌R31进行鉴定。首先通过生理生化测定和克隆16S rDNA序列,分析显示其属于芽孢杆菌属(Bacillus),但不能准确鉴定到种;然后分别利用克隆的gyrA基因和gyrB基因以及其BLAST分析结果构建系统发育树,最终将该菌株确定为枯草芽孢杆菌(B.subtilis)。结果显示利用16S rDNA与gyrA基因组合可以快速鉴定枯草芽孢杆菌,利用16S rDNA与gyrB基因组合可以快速鉴定枯草芽孢杆菌及其近缘种。 展开更多
关键词 芽孢杆菌 16S RDNA gyra基因 gyrB基因 鉴定
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结核分枝杆菌对左氧氟沙星与莫西沙星的交叉耐药性及gyrA和gyrB基因突变分析 被引量：23
3
作者 李国利 陈澎 +3 位作者 孙昌文 张灵霞 李邦印 赵雁林 《中国防痨杂志》 CAS 2010年第10期616-621,共6页
目的研究结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）对左氧氟沙星（1evofloxacin，LVF）与莫西沙星（moxifloxacin，MXF）的交叉耐药性，分析gyrA和gyrB基因突变位点分布及突变位点与耐药水平的关系。方法采用改良罗氏培养基检测... 目的研究结核分枝杆菌（Mycobacterium tuberculosis，MTB）对左氧氟沙星（1evofloxacin，LVF）与莫西沙星（moxifloxacin，MXF）的交叉耐药性，分析gyrA和gyrB基因突变位点分布及突变位点与耐药水平的关系。方法采用改良罗氏培养基检测MTB标准菌株H。，Rv、66株LVF耐药和55株LVF敏感的MTB临床分离菌株LVF和MXF的最低抑菌浓度（minimal inhibition concentration，MIC）。通过PCR直接测序法测定gyrA和gyrB耐药基因片段。结果MXF的MIC比LVF低2～4倍，MXF抗MTB菌株的活性是LVF的2～4倍。MTB标准菌株H37Rv未见gyrA和gyrB基因突变。66株LVF耐药和55株LVF敏感菌株均存在gyrAAGc95ACC（Ser→Thr）突变；55株LVF敏感菌株gyrA和gyrB基因未见其他突变。66株LVF耐药菌株中，40株（60．6％）gyrA GAC94（AAC或GGC或GCC或CAC或TAC）（Asp→Asn或Gly或Ala或His或Tyr）突变；19株（28．8％）gyrAGCG90GTG（Ala→Val）和1株（1．59／6）gyrA GCG90AAG（Ala→Lys）（未见报导）双碱基突变；3株（4．6％）gyrA TCG91CCG（Ser→Pro）突变；1株（1．5％）gyrBGAC500AAC（Asp→Asn）突变；2株（3．0％）呈gyrA GAC94（AAC或GCC）（Asp→Asn或Ala）与gyrB GGG551AGG（Gly→Arg）（未见报导）双位点突变。gyrA GAC94（AAC或GGC）（Asp→Asn或Gly）突变引起FOs药物较高水平耐药；GAC94GCC（Asp→Ala）和GCG90GTG（A1a→Val）突变引起FQs药物较低水平耐药。结论LVF与MXF之间存在交叉耐药，MXFMIC随LVFMIC增高而增高，但耐药水平不同。GyrA基因突变位点可能与耐药水平有关，有可能根据基因突变的位点分析耐药水平。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 抗药性 细菌 氧氟沙星 莫西沙星 gyra GYRB
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肺炎克雷伯菌gyrA基因与parC基因的突变研究 被引量：9
4
作者 徐艳 付英梅 +3 位作者 张文莉 郭丽双 刘爱平 张凤民 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2008年第4期350-352,共3页
目的探讨肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的药物敏感性,及对喹诺酮敏感和耐药菌株中gyrA与parC基因的突变情况。方法收集肺炎克雷伯菌临床分离株231株,采用K-B纸片法测定肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的敏感性,随机选取对环... 目的探讨肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的药物敏感性,及对喹诺酮敏感和耐药菌株中gyrA与parC基因的突变情况。方法收集肺炎克雷伯菌临床分离株231株,采用K-B纸片法测定肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的敏感性,随机选取对环丙沙星和左氧氟沙星均耐药菌株4株和均敏感的菌株3株,分别PCR扩增gyrA基因和parC基因的耐药决定区,扩增片段长度分别为625、319bp,PCR扩增产物经纯化后测序并做序列分析。结果肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率分别为51.1%(118/231)和45.9%(106/231);gyrA和parC基因经序列分析显示,耐药株均有gyrA基因的突变,其中1株出现第83、87和27位氨基酸的改变,2株出现第83位氨基酸的改变,1株出现第47位点的改变;环丙沙星敏感株中未出现gyrA基因的突变。4株耐药株均有parC基因的突变,引起相应氨基酸Ser80→Arg的改变,2株环丙沙星敏感株也发生了同样的改变。结论哈尔滨地区肺炎克雷伯菌对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药性显著,在喹诺酮耐药株中有gyrA和parC基因的同时突变,在敏感株中也发现了parC基因的突变。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 喹诺酮 gyra基因 PARC基因
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郑州地区耐多药结核分枝杆菌gyrA和gyrB基因突变特征及对氟喹诺酮类药物耐药研究 被引量：9
5
作者 梁丽丽 苑星 +2 位作者 刘新 崔秀琴 高谦 《新乡医学院学报》 CAS 2018年第10期874-878,共5页
目的分析郑州地区耐多药(MDR)结核分枝杆菌(MTB)临床分离株中gyrA和gyrB基因突变特征及其对氟喹诺酮类(FQs)药物耐药的特点。方法收集2015年5月至2016年12月河南省胸科医院收治的256例肺结核患者的痰标本,进行MTB固体罗氏培养、液体分... 目的分析郑州地区耐多药(MDR)结核分枝杆菌(MTB)临床分离株中gyrA和gyrB基因突变特征及其对氟喹诺酮类(FQs)药物耐药的特点。方法收集2015年5月至2016年12月河南省胸科医院收治的256例肺结核患者的痰标本,进行MTB固体罗氏培养、液体分枝杆菌培养,MTB培养阳性者行比例法药物敏感性试验,采用聚合酶链式反应扩增MDR MTB的gyrA和gyrB基因,对扩增产物进行测序和序列比对分析。应用耐药基因判断MDR MTB对FQs药物耐药的敏感性和特异性。结果 256例患者中MTB培养阳性215例,其中非MDR肺结核患者137例,MDR肺结核患者78例。78株MDR MTB临床分离株对氧氟沙星(Ofx)、0.5 mg·L^(-1)莫西沙星(Mfx 0.5)及2.0 mg·L^(-1)莫西沙星(Mfx 2.0)的耐药率分别为55.1%(43/78)、55.1%(43/78)、32.1%(25/78);137株非MDR MTB临床分离株对Ofx、Mfx 0.5及Mfx 2.0的耐药率分别为7.3%(10/137)、5.8%(8/137)、0.7%(1/137);非MDR MTB临床分离株对Ofx、Mfx0.5、Mfx2.0的耐药率显著低于MDR MTB临床分离株(χ~2=61.21、66.73、45.87,P<0.001)。gyrA基因、gyrB基因在Ofx耐药株中的突变率分别为90.7%(39/43)、11.6%(5/45);gyrA基因、gyrB基因在Mfx 0.5耐药株中的突变率分别为88.4%(38/43)、11.6%(5/43);gyrA基因、gyrB基因在Mfx 2.0耐药株中的突变率分别为100.0%(25/25)、12.0%(3/25)。以FQs药物敏感性试验结果为金标准,gyrA基因突变判断MDR MTB对Ofx、Mfx 0.5、Mfx 2.0耐药的敏感性分别为90.7%、88.4%、58.1%,特异性分别为88.6%、85.7%、100.0%,gyrB基因突变判断MDR MTB对Ofx、Mfx 0.5、Mfx 2.0耐药的敏感性分别为62.5%、62.5%、37.5%,特异性分别为45.7%、45.7%、68.6%,检测gyrA基因突变判断MDR MTB对FQs药物耐药的特异性高于gyrB基因突变(χ~2=17.86、15.44、13.92,P<0.001),检测gyrA基因突变判断MDR MTB对Ofx耐药的敏感性高于gyrB基因突变(χ~2=4.53,P<0.05)。结论郑州地区MDR MTB对FQs耐药率较高,耐药的主要原因是gyrA基因突变,最常见的gyrA基因突变位于94位点。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 氟喹诺酮类 氧氟沙星 莫西沙星 基因型 耐多药 突变 gyra基因 gyrB基因
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gyrA、parC及mdfA基因测序鉴定肺炎克雷伯菌 被引量：6
6
作者 黄支密 糜家睿 +5 位作者 单浩 盛以泉 夏守慧 沈娟 杨伟平 邹玉秀 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第18期4348-4350,共3页
目的探讨gyrA、parC和mdfA基因测序鉴定临床分离的泛耐药肺炎克雷伯菌的必要性。方法采用gyrA、parC和mdfA基因测序方法对经法国生物梅里埃公司API 20E系统(API LAB plus)和MicroScan WalkAway96Plus全自动细菌鉴定系统鉴定为克雷伯菌... 目的探讨gyrA、parC和mdfA基因测序鉴定临床分离的泛耐药肺炎克雷伯菌的必要性。方法采用gyrA、parC和mdfA基因测序方法对经法国生物梅里埃公司API 20E系统(API LAB plus)和MicroScan WalkAway96Plus全自动细菌鉴定系统鉴定为克雷伯菌属或产气肠杆菌的19株临床分离株进行分子鉴定。结果 19株菌gyrA、parC、mdfA基因PCR扩增均阳性,基因序列经GenBank中的BLASTn程序进行同源性比较分析,表明与2株完成全基因组测序的肺炎克雷伯菌肺炎亚种NTUH-K2044(Accession:AP006725.1)和MGH 78578(Accession:CP000647.1)最为接近,均为99.0%同源,证实19株均为肺炎克雷伯菌。结论采用gyrA、parC和mdfA基因测序鉴定肺炎克雷伯菌结果准确。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 gyra基因 PARC基因 mdfA基因 分子鉴定
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rpoD和gyrA基因对气单胞菌鉴定的比较分析 被引量：12
7
作者 李欣悦 李凤娟 +2 位作者 杜鹏程 王瑞白 王多春 《疾病监测》 CAS 2016年第3期200-204,共5页
目的使用rpo D和gyr A基因对气单胞菌进行种水平的鉴定,比较两者分类结果的差异,同时对本研究中187株气单胞菌进行较为准确的种水平的分类。方法对生化鉴定的187株气单胞菌进行rpo D和gyr A基因聚合酶链反应扩增并测序,将序列与种特异... 目的使用rpo D和gyr A基因对气单胞菌进行种水平的鉴定,比较两者分类结果的差异,同时对本研究中187株气单胞菌进行较为准确的种水平的分类。方法对生化鉴定的187株气单胞菌进行rpo D和gyr A基因聚合酶链反应扩增并测序,将序列与种特异的参考序列一起构建系统发育树。结果 187株菌经rpo D基因鉴定为7个种,经gyr A基因鉴定为9个种,还有一个未定种。两者鉴定最多的3个种一致,即维氏气单胞菌温和生物变种、豚鼠气单胞菌和水族馆气单胞菌。gyr A基因鉴定增加的2个种是异嗜糖气单胞菌和简氏气单胞菌。rpo D和gyr A基因对气单胞菌鉴定一致的有174株(93%),但有13株菌(7%)两者鉴定不一致。结论 rpo D和gyr A基因能够对大部分气单胞菌进行准确一致的分类,对于两者鉴定不一致的菌株,应增加管家基因进行分析。 展开更多
关键词 气单胞菌 rpoD基因 gyra基因 鉴定
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呼吸道感染患者肺炎克雷伯菌gyrA基因和parC基因突变情况及其耐药机制分析 被引量：13
8
作者 张明华 杨钢 李晶 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2015年第1期65-68,共4页
目的通过药敏试验探究肺炎克雷伯菌的耐药情况,分析其gyrA基因和parC基因突变与其耐药性的相关性,进而为呼吸道感染肺炎克雷伯菌的临床治疗提供指导。方法从呼吸道感染患者体内分离肺炎克雷伯菌并进行鉴定,然后测定其对各种抗生素的耐... 目的通过药敏试验探究肺炎克雷伯菌的耐药情况,分析其gyrA基因和parC基因突变与其耐药性的相关性,进而为呼吸道感染肺炎克雷伯菌的临床治疗提供指导。方法从呼吸道感染患者体内分离肺炎克雷伯菌并进行鉴定,然后测定其对各种抗生素的耐药情况,并通过基因测序研究gyrA基因和parC基因的突变情况与其耐药性关系。结果药敏试验结果显示,肺炎克雷伯菌对诺氟沙星、氧氟沙星、左氧氟沙星、环丙沙星、加雷沙星、加替沙星和莫西沙星的耐药率分别为45.65%、39.13%、30.43%、27.17%、13.30%、14.13%和10.87%。通过PCR方法成功地对gyrA和parC基因进行了扩增,并从电泳图得出gyrA基因分子量大小为449bp、parC基因分子量大小为319bp。通过基因测序比对发现,gyrA基因的83位、87位和parC基因的80位、91位都有不同类型的突变,这些突变与肺炎克雷伯菌的耐药性密切相关。结论 gyrA基因和parC基因突变与肺炎克雷伯菌的耐药性密切相关,但是若要彻底解决其耐药性问题,应从源头上控制抗生素的合理选用,从而更好地指导呼吸道感染的临床治疗。 展开更多
关键词 呼吸道感染 肺炎克雷伯菌 gyra基因 PARC基因 耐药率
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结核分枝杆菌氟喹诺酮耐药与gyrA基因突变的关系 被引量：8
9
作者 杨辉 张国良 +3 位作者 张明霞 吴爱武 陈建波 陈心春 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第20期3457-3459,共3页
目的:了解结核分枝杆菌临床分离株氟喹诺酮类药物耐药与gyrA基因突变的关系。方法:选取经过全自动快速分枝杆菌培养鉴定药敏系统(BACTEC-MGIT960)检测的氟喹诺酮类药物敏感株30株,耐药株30株,针对其gyrA基因的氟喹诺酮类药物耐药决定区(... 目的:了解结核分枝杆菌临床分离株氟喹诺酮类药物耐药与gyrA基因突变的关系。方法:选取经过全自动快速分枝杆菌培养鉴定药敏系统(BACTEC-MGIT960)检测的氟喹诺酮类药物敏感株30株,耐药株30株,针对其gyrA基因的氟喹诺酮类药物耐药决定区(QRDR)进行扩增,并将扩增产物进行T-A克隆后进行测序。结果:在这60株结核分枝杆菌临床分离株中,30株敏感株均未在QRDR检出有义突变,30株耐药株中有19株QRDR存在有义突变,主要突变位点为90、91和94。gyrA基因突变占结核分枝杆菌氟喹诺酮类药物耐药菌株的63.3%(19/30)。结论:gyrA基因突变与结核分枝杆菌氟喹诺酮类药物耐药密切相关。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 氟喹诺酮类 耐药 gyra 基因突变
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沙门氏菌gyrA基因的变异对氟喹诺酮类药物敏感性的影响 被引量：4
10
作者 王晓泉 陈祥 +3 位作者 吴双 巢国祥 焦新安 刘秀梵 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期891-894,898,共5页
目的分析125株萘啶酮酸耐药性沙门氏菌gyrA基因QRDR区变异情况及其对氟喹诺酮类药物敏感性的影响。方法用常规血清学方法鉴定沙门氏菌分离株血清型,通过微量稀释法测定其对萘啶酮酸和3种氟喹诺酮的敏感性,用PCR方法扩增沙门氏菌gyrA基因... 目的分析125株萘啶酮酸耐药性沙门氏菌gyrA基因QRDR区变异情况及其对氟喹诺酮类药物敏感性的影响。方法用常规血清学方法鉴定沙门氏菌分离株血清型,通过微量稀释法测定其对萘啶酮酸和3种氟喹诺酮的敏感性,用PCR方法扩增沙门氏菌gyrA基因QRDR的序列并进行序列分析。结果这些分离株涉及18个血清型,最常见的血清型为德尔卑沙门氏菌和肠炎沙门氏菌,它们的分离率分别为22.4%(28/125)和19.2%(24/125)。沙门氏菌分离株对萘啶酮酸的耐药率为39/125。3种氟喹诺酮药物对萘啶酮酸耐药性沙门氏菌的最小抑菌浓度明显比萘啶酮酸敏感株高。萘啶酮酸耐药性沙门氏菌gyrA基因QRDR的序列分析表明,所有萘啶酮酸耐药性沙门氏菌gyrA基因的83或87位点发生了突变,83位点发生点突变的菌株对萘啶酮酸的MIC范围大于或等于1024μg/ml,而87位点突变的菌株的MIC范围为32～512μg/ml。结论沙门氏菌分离株gyrA基因发生点突变的位点与萘啶酮酸耐药水平高低存在关联,且导致对三种氟喹诺酮类药物的敏感性下降。 展开更多
关键词 萘啶酮酸耐药 沙门氏菌 氟喹诺酮敏感性 gyra变异
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结核分枝杆菌gyrA基因突变与氟喹诺酮类药物体外最低抑菌浓度的关系 被引量：6
11
作者 张海晴 陈效友 +6 位作者 周冬青 张雪迪 张礼茂 魏素梅 刘成永 黄海滨 贾彤 《实用临床医药杂志》 CAS 2021年第14期4-8,14,共6页
目的探讨结核分枝杆菌gyrA基因突变与氟喹诺酮类药物体外最低抑菌浓度(MIC)的关系。方法收集640例痰结核分枝杆菌阳性临床分离株,用探针熔解曲线法筛选gyrA基因耐药决定区突变株,对其gyrA基因耐药决定区进行测序,并检测氧氟沙星、左氧... 目的探讨结核分枝杆菌gyrA基因突变与氟喹诺酮类药物体外最低抑菌浓度(MIC)的关系。方法收集640例痰结核分枝杆菌阳性临床分离株,用探针熔解曲线法筛选gyrA基因耐药决定区突变株,对其gyrA基因耐药决定区进行测序,并检测氧氟沙星、左氧氟沙星、莫西沙星及加替沙星对不同突变位点菌株的MIC,分析其差异。结果探针熔解曲线法筛选出gyrA突变株共45株(7.03%),其中90位点突变15株(33.33%)、94位点突变26株(57.78%)、91位点突变4株(8.89%)。90位点突变菌株中,氧氟沙星高水平耐药2株,左氧氟沙星无耐药,莫西沙星低水平耐药3株、高水平耐药2株,加替沙星高水平耐药3株;91位点突变菌株中,氧氟沙星、左氧氟沙星无耐药,莫西沙星高水平耐药2株,加替沙星高水平耐药1株;94位点突变菌株中,氧氟沙星低水平耐药4株、高水平耐药7株,左氧氟沙星低水平耐药7株,莫西沙星低水平耐药2株、高水平耐药13株,加替沙星低水平耐药3株、高水平耐药14株。除左氧氟沙星外,90位点突变菌株对其他3种药物易出现高水平耐药;91位点突变菌株对莫西沙星易出现高水平耐药;94位点突变菌株对莫西沙星、加替沙星多为高水平耐药,其中天冬氨酸(Asp)→天冬酰胺(Asn)和Asp→甘氨酸(Gly)突变类型的菌株更易出现。结论结核分枝杆菌gyrA基因突变类型与氟喹诺酮类药物MIC相关,可为临床用药提供重要参考。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 氟喹诺酮类药物 最低抑菌浓度 基因突变 gyra基因
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多药耐药肺炎克雷伯菌GyrA突变及超广谱β-内酰胺酶基因型研究 被引量：4
12
作者 苏旭 王志锐 +2 位作者 刘广文 井良义 董杰 《中华医院感染学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第16期2365-2367,共3页
目的研究多药耐药肺炎克雷伯菌GyrA突变及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型。方法对2008年分离的46株肺炎克雷伯菌〔(30株分离自零售食品(凉拌菜),16株分离自医务人员鼻腔拭子)〕采用K-B法进行药敏试验,检测多药耐药菌是否产ESBLs,PCR法... 目的研究多药耐药肺炎克雷伯菌GyrA突变及超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)基因型。方法对2008年分离的46株肺炎克雷伯菌〔(30株分离自零售食品(凉拌菜),16株分离自医务人员鼻腔拭子)〕采用K-B法进行药敏试验,检测多药耐药菌是否产ESBLs,PCR法扩增多药耐药菌环丙沙星耐药相关基因gyrA,ESBLs基因bla-TEM、blaSHV和blaCTX-M,3类整合酶基因(intⅠ1,intⅠ2,intⅠ3)及第1类整合子可变序列;对PCR产物进行测序分析,脉冲场凝胶电泳(PFGE)对多药耐药菌进行分子分型。结果 9株菌为多药耐药菌,3株菌在GyrA的QRDR区83位Ser→Ile,1株菌在GyrA的QRDR区83位Ser→Thr,8株菌产ESBLs,6株菌携带SHV型ESBL,其中3株菌同时携带TEM型ESBL;2株菌携带OKP型ESBLs;未检测到CTX-M型ESBLs,1株菌intⅠ1基因阳性,携带有第1类整合子和耐药基因盒aacA7,PFGE将9株菌分为8个PFGE型,2株菌为同一个PFGE型。结论耐药基因的获得如gyrA基因突变和携带ESBLs基因是肺炎克雷伯菌产生多药耐药的主要机制。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 耐药 gyra 超广谱Β-内酰胺酶 基因
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多重耐药鲍曼不动杆菌gyrA基因高效反义肽核酸序列筛选及其体外抗菌活性观察 被引量：4
13
作者 王慧娟 何云燕 +2 位作者 夏云 王立朋 梁树梅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第14期1442-1446,共5页
目的筛选出能与多重耐药鲍曼不动杆菌gyrA基因的mRNA紧密结合的反义肽核酸序列,评估其体外抗菌活性。方法利用Mfold、RNA Structure 4.6两种计算机软件对多重耐药鲍曼不动杆菌gyrA基因的mRNA进行二级结构分析计算,根据最低自由能原则在... 目的筛选出能与多重耐药鲍曼不动杆菌gyrA基因的mRNA紧密结合的反义肽核酸序列,评估其体外抗菌活性。方法利用Mfold、RNA Structure 4.6两种计算机软件对多重耐药鲍曼不动杆菌gyrA基因的mRNA进行二级结构分析计算,根据最低自由能原则在其mRNA局部杂交松弛区设计反义寡核苷酸,与体外转录的地高辛标记的gyrAmRNA进行斑点杂交,根据杂交信号的强弱筛选出与gyrA mRNA紧密结合的反义寡核苷酸,根据其序列合成肽核酸(pep-tide nucleic acid,PNA),另加设1条与靶序列有6个碱基错配的PNA作为阴性对照,2条PNA分别连接穿膜肽形成肽-肽核酸(peptide-PNA,PPNA)。测定经不同浓度PPNA处理的细菌光密度[D(600)]值并进行平板菌落计数,观察其对细菌生长的抑制作用,采用RT-PCR检测gyrA mRNA的表达水平。结果斑点杂交结果显示,计算机软件设计的10条反义寡核苷酸探针中有5条与gyrA mRNA显示出杂交信号,其中1条信号最强,能够与gyrA mRNA稳定结合,将其以肽-肽核酸的形式合成处理细菌,结果表明其在5μmol/L浓度可完全抑制gyrA mRNA的表达,并抑制鲍曼不动杆菌的生长,在10μmol/L浓度具有杀菌活性,而具有错配碱基的PPNA对细菌生长无明显抑制作用。结论计算机辅助设计联合斑点杂交可在体外模拟体内环境对寡核苷酸与靶基因结合的有效性进行验证,实现在体外高通量筛选高效反义序列。经筛选得到的靶向gyrA基因反义肽-肽核酸可在体外高效抑制多重耐药鲍曼不动杆菌生长。 展开更多
关键词 多重耐药鲍曼不动杆菌 gyra 反义寡核苷酸 斑点杂交 肽核酸
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PCR-RFLP检测猪源致病性沙门氏菌gyrA基因点突变的研究 被引量：7
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作者 谭炳乾 王红宁 +1 位作者 叶如俊 张之文 《湖北农业科学》 北大核心 2003年第5期88-91,共4页
测定了16株猪源致病性沙门氏菌对5种常用氟喹诺酮类药物的最低抑菌浓度(MIC),结果表明,对5种氟喹诺酮类药物的耐药率在31 2%～56 2%。分别以质粒和染色体为模板,应用PCR扩增16株沙门氏菌的gyrA基因,结果表明,所有菌株均获得以染色体为... 测定了16株猪源致病性沙门氏菌对5种常用氟喹诺酮类药物的最低抑菌浓度(MIC),结果表明,对5种氟喹诺酮类药物的耐药率在31 2%～56 2%。分别以质粒和染色体为模板,应用PCR扩增16株沙门氏菌的gyrA基因,结果表明,所有菌株均获得以染色体为模板的扩增产物,并从1株鼠伤寒沙门氏菌获得了以质粒为模板的扩增产物。对PCR扩增产物进行RFLP分析,氟喹诺酮高敏菌株没有检出突变位点,中敏菌株和耐药菌株检测出了gyrA基因的点突变。 展开更多
关键词 PCR—RFLP 检测技术 猪 致病性沙门氏菌 gyra基因点 突变性能 氟喹诺酮类药物
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金黄色葡萄球菌氟喹诺酮的耐药性与gyrA、gyrB突变的关系研究 被引量：5
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作者 杜锐 韩文瑜 雷连成 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期415-418,共4页
为了探讨金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮耐药性与gyrA、gyrB突变的关系,本研究对氟喹诺酮敏感金黄色葡萄球菌进行耐药诱导,获得一系列不同氟喹诺酮耐药水平的人工诱导耐药菌,应用PCR扩增野生菌和人工诱导菌的gyrA、gyrB基因并测序,经核苷酸... 为了探讨金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮耐药性与gyrA、gyrB突变的关系,本研究对氟喹诺酮敏感金黄色葡萄球菌进行耐药诱导,获得一系列不同氟喹诺酮耐药水平的人工诱导耐药菌,应用PCR扩增野生菌和人工诱导菌的gyrA、gyrB基因并测序,经核苷酸和氨基酸序列分析表明:氟喹诺酮耐药菌的gyrB基因无突变,氟喹诺酮耐药菌的gyrA有Ser85→Leu和Ser84→Pro的突变。实验结果表明:gyrA突变是金黄色葡萄球菌氟喹诺酮耐药水平增高的主要原因。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 氟喹诺酮 耐药性 gyra gFrB 突变
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耐氟喹诺酮类病原菌gyrA基因突变的寡核苷酸芯片检测 被引量：3
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作者 林居纯 曾振灵 +1 位作者 蒋红霞 陈杖榴 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第9期811-814,共4页
根据大肠杆菌、沙门菌、无乳链球菌和鸡毒霉形体的gyrA基因序列,设计了通用引物和11条寡核苷酸探针;利用点样仪将探针点在基片上,制成寡核苷酸芯片;采用PCR荧光标记靶基因,与芯片杂交,用荧光扫描仪检测信号;同时以PCR-测序法进行gyrA基... 根据大肠杆菌、沙门菌、无乳链球菌和鸡毒霉形体的gyrA基因序列,设计了通用引物和11条寡核苷酸探针;利用点样仪将探针点在基片上,制成寡核苷酸芯片;采用PCR荧光标记靶基因,与芯片杂交,用荧光扫描仪检测信号;同时以PCR-测序法进行gyrA基因突变的检测。结果,PCR反应体系能特异性地扩增出靶基因;寡核苷酸芯片能同时检测不同病原菌GyrA第83、87位发生的突变,芯片检测结果与测序结果较为一致。结果表明,使用寡核苷酸芯片技术检测病原菌耐氟喹诺酮类基因突变是可行的;研究结果为基因芯片技术应用于兽医临床耐药性检测提供了基础。 展开更多
关键词 寡核苷酸芯片 病原菌 gyra 突变 检测
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结核分枝杆菌gyrA基因突变与氧氟沙星耐药水平的相关性研究 被引量：6
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作者 刘志广 郭倩 +5 位作者 魏剑浩 赵丽丽 蒋毅 赵秀芹 万康林 李桂莲 《实用预防医学》 CAS 2015年第6期641-644,共4页
目的探讨结核分枝杆菌耐药相关基因gyr A突变与氧氟沙星耐药水平之间的相关性。方法采用微孔板Alamar blue显色法检测经比例法确认的39株氧氟沙星耐药和32株氧氟沙星敏感的结核分枝杆菌临床分离株对氧氟沙星的最小抑菌浓度(minimun inhi... 目的探讨结核分枝杆菌耐药相关基因gyr A突变与氧氟沙星耐药水平之间的相关性。方法采用微孔板Alamar blue显色法检测经比例法确认的39株氧氟沙星耐药和32株氧氟沙星敏感的结核分枝杆菌临床分离株对氧氟沙星的最小抑菌浓度(minimun inhibitory concentration,MIC),基因DNA测序法检测氟喹诺酮耐药相关基因gyr A的突变情况,并用卡方检验检测gyr A基因突变与氧氟沙星耐药水平的相关性。结果 32株氧氟沙星敏感株MIC均<2.000μg/ml且gyr A未发现耐药相关位点突变。氧氟沙星耐药结核分枝杆菌氧氟沙星MIC≥4.000μg/ml的菌株gyr A 94位的突变率(18/24,75%)高于MIC≤2.000μg/ml(6/15,40%)的菌株(P=0.017);5/7的gyr A 91单突变菌株MIC均为2.000μg/ml;两株gyr A94和gyr A90或91位联合突变株氧氟沙星MIC明显高于其它菌株,分别为16.000μg/ml和64.000μg/ml。结论氟喹诺酮耐药菌株gyr A基因94位突变和双位点联合突变与氧氟沙星高水平耐药明显相关,gyr A 91突变与氧氟沙星低水平耐药有关。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 氧氟沙星 最小抑菌浓度 gyra
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新疆喀什地区结核分枝杆菌分离株氧氟沙星耐药基因gyrA突变位点分析 被引量：5
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作者 姬祥 郭南 +5 位作者 黄巧玲 杨彩虹 吴江东 袁俐 曹旭东 陈创夫 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2018年第4期390-394,398,共6页
目的了解新疆喀什地区、石河子地区及华东地区结核分枝杆菌临床分离株对氧氟沙星的耐药性,分析耐药相关基因gyrA喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变的位置及类型,以比例法药敏试验为参照,评价DNA测序技术检测氧氟沙星耐药的效率。方法采用比例... 目的了解新疆喀什地区、石河子地区及华东地区结核分枝杆菌临床分离株对氧氟沙星的耐药性,分析耐药相关基因gyrA喹诺酮耐药决定区(QRDR)突变的位置及类型,以比例法药敏试验为参照,评价DNA测序技术检测氧氟沙星耐药的效率。方法采用比例法药敏试验检测191株结核分枝杆菌临床分离株对氧氟沙星药物的耐药性;对喹诺酮类药物耐药相关基因gyrA的QRDR区进行扩增与测序,分析耐药相关突变位点。以药敏试验结果为标准,通过Kappa值评价DNA测序和药敏试验在结核分枝杆菌临床分离株氧氟沙星耐药检测的一致性。结果 191株临床分离株结核分枝杆菌中16株为氧氟沙星耐药株,氧氟沙星总耐药率为8.37%。对gyrA基因QRDR区域扩增后测序,共发现4个位点存在突变;分别是第56、74、90、94位密码子。其中,第56位密码子处由CTC→CTG,为同义突变。74位密码子突变均发生在喀什分离株,由GCC→GTA,氨基酸由Ala突变为Val;90位密码子由GCG→GTG,氨基酸由Ala突变为Val;94位密码子突变占临床分离株耐药位点突变的71%,共发现GAC→TAC、GAC→GCC、GAC→GGC3种突变类型,第94位氨基酸Asp分别突变为Thr、Ala、Gly。与药敏试验结果比较,DNA测序对结核分枝杆菌临床分离株氧氟沙星耐药检测具有高度一致性(Kappa=0.895)。结论 gyrA基因第74、90、94位密码子的突变与结核分枝杆菌对氧氟沙星药耐药有关,喀什分离株存在74位新突变位点。用DNA测序技术分析结核分枝杆菌gyrA基因氧氟沙星耐药相关突变对判断结核分枝杆菌氧氟沙星类药物耐药性具有较高的灵敏度和特异性,可为结核分枝杆菌氟沙星耐药性诊断提供依据。 展开更多
关键词 结核分枝杆菌 gyra基因 突变位点 DNA测序 耐药性
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氟喹诺酮类药物压力下鸡毒支原体gyrA基因突变特征分析 被引量：4
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作者 蒋红霞 陈杖榴 +3 位作者 曾振灵 邓旭明 欧阳红生 梁焕春 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2004年第10期60-62,共3页
按常规方法提取鸡毒支原体参考株 (S6 - 1 0 )、疫苗株 (F1 4- 8)及在氟喹诺酮类药物压力下体外筛选出来的耐药株的基因组DNA,扩增各菌株 DNA旋转酶 gyr A基因片段 ,并克隆、测序 ,利用 DNA SIS分析软件对测序结果进行分析。结果表明 ,S... 按常规方法提取鸡毒支原体参考株 (S6 - 1 0 )、疫苗株 (F1 4- 8)及在氟喹诺酮类药物压力下体外筛选出来的耐药株的基因组DNA,扩增各菌株 DNA旋转酶 gyr A基因片段 ,并克隆、测序 ,利用 DNA SIS分析软件对测序结果进行分析。结果表明 ,S6 - 1 0 和F1 4- 8在恩诺沙星或环丙沙星压力下均筛选出不同程度的耐药菌 ,而且恩诺沙星致鸡毒支原体发生耐药性突变的机率高于环丙沙星 ,S6 - 1 0 株耐药突变频率高于 F1 4- 8。 S6 - 1 0 筛选出来的耐药菌株发生突变的位置在 DNA旋转酶 gyr A亚基的第 83位 (相对于大肠杆菌 gyr A亚基中的位置 ,以下同 )和 87位上 ,取代模式为 Ser83→ Ile、Glu87→ Gln,高水平耐药株 (Se32 M,MIC≥ 12 8)除了在第83位发生突变外 ,在第 82位还增加一突变位点 (Asp→ Gly) ;F1 4- 8筛选出来的高水平耐药菌株 (Fe32 M)在 DNA旋转酶 gyr A亚基的第 83、87位发生了双位点突变 (Ser83→ Ile,Glu87→ Gly) ,而低水平耐药株 (Fe8M、Fc8M)在 gyr 展开更多
关键词 氟喹诺酮类药物 鸡毒支原体 gyra基因 突变特征 耐药性
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