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LTE网络GTPv2协议监测技术的设计与实现 被引量:2
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作者 程方 杨力 +1 位作者 黄建 蒲伟 《电信科学》 北大核心 2012年第6期86-91,共6页
根据LTE测试仪的功能需求,提出并设计了LTE网络测试仪软件平台设计方案。结合对GTPv2协议的深入分析,采用模块化思想以及IE列表遍历方法进行消息解码,使用以关键字段为索引的散列结构进行GTPv2消息合成,采用了一种将消息标识、偏移量结... 根据LTE测试仪的功能需求,提出并设计了LTE网络测试仪软件平台设计方案。结合对GTPv2协议的深入分析,采用模块化思想以及IE列表遍历方法进行消息解码,使用以关键字段为索引的散列结构进行GTPv2消息合成,采用了一种将消息标识、偏移量结合起来标识某个上层信息分组的数学模型,有效地解决了解码模块传递信息难、模块耦合以及CDR合成效率低等关键难题。实际商用测试表明,该设计具有良好的效果。 展开更多
关键词 LTE gtpv2 消息解码 散列函数
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基于LTE网络GTPV2协议的CDR合成方案研究与实现 被引量:2
2
作者 冉滴 张治中 《计算机光盘软件与应用》 2014年第23期291-292,共2页
根据LTE测试仪的功能需求,对LTE网络S5/S8/S4/S11口信令信息及业务流程进行研究,结合对GTPv2协议的深入分析,本文提出了一种解决GTPV2协议栈CDR合成效率低的哈希增强型动态合成算法,分析了该CDR合成的原理及相关算法。该方案目前已经应... 根据LTE测试仪的功能需求,对LTE网络S5/S8/S4/S11口信令信息及业务流程进行研究,结合对GTPv2协议的深入分析,本文提出了一种解决GTPV2协议栈CDR合成效率低的哈希增强型动态合成算法,分析了该CDR合成的原理及相关算法。该方案目前已经应用到LTE网络的监测系统中,经过现网数据测试,效果良好。 展开更多
关键词 LTE gtpv2 CDR 哈希索引
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女黄扶正提取液体外抗羊痘病毒活性及对小鼠免疫功能的影响
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作者 牟豪 周建方 +4 位作者 余远迪 朱买勋 许国洋 闫志强 伍涛 《甘肃农业大学学报》 北大核心 2025年第1期19-26,共8页
【目的】研究女黄扶正提取液体外对羊痘病毒(goat pox virus,GTPV)的抑制作用及其机制,以及调节小鼠免疫功能的作用。【方法】测定女黄扶正提取液对羊肾细胞的毒性、确定最佳的用药浓度,分别测定病毒感染12、24、36、48 h后病毒拷贝数和... 【目的】研究女黄扶正提取液体外对羊痘病毒(goat pox virus,GTPV)的抑制作用及其机制,以及调节小鼠免疫功能的作用。【方法】测定女黄扶正提取液对羊肾细胞的毒性、确定最佳的用药浓度,分别测定病毒感染12、24、36、48 h后病毒拷贝数和TCID50。通过qPCR分析药物处理组、对照组、空白组的细胞炎性因子IL-1β、TNF-α、IFN-β表达量。检测给药后免疫抑制小鼠血清中免疫指标及脾T淋巴细胞转化能力。【结果】女黄扶正提取液对羊肾细胞存在一定细胞毒性,在添加量为1 mg/mL时对细胞毒性最小,感染羊痘病毒12、24、36、48 h后,病毒拷贝数低于对照组,在48 h呈现显著性差异(P<0.05);病毒TCID50低于对照组,在24、48 h呈现显著性差异(P<0.05、P<0.01)。感染病毒后的药物处理组与对照组的细胞炎性因子IL-1β、TNF-α、IFN-β的表达量无显著性差异。给药后,女黄扶正提取液中剂量组小鼠脾T淋巴细胞转化能力明显升高,与模型组相比,差异极显著(P<0.01);免疫抑制小鼠血清中IFN-γ、IL-2升高,与模型组相比,差异极显著(P<0.01)。【结论】女黄扶正提取液可以体外抑制羊肾细胞中GTPV的增殖,提高小鼠IFN-γ、IL-2水平,调节机体免疫功能,为提高机体免疫及未来抗病毒药物的研发提供参考。 展开更多
关键词 女黄扶正提取液 gtpv 抗病毒活性 免疫调节
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TK基因重组缺陷山羊痘病毒构建及其生物学特性鉴定 被引量:5
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作者 郑敏 梁晟 +5 位作者 郑彦梓 兰彬 韦显凯 苏娇秀 郑列丰 李常挺 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1552-1557,共6页
【目的】利用同源重组技术构建TK基因缺陷的山羊痘病毒(GTPV)毒株,为研制出更安全、高效的GTPV弱毒疫苗和病毒载体提供备选毒株。【方法】采用PCR克隆GTPV AV41株TK基因(ORF56)及其侧翼基因组片段,在TK基因内部插入报告基因EGFP和抗性基... 【目的】利用同源重组技术构建TK基因缺陷的山羊痘病毒(GTPV)毒株,为研制出更安全、高效的GTPV弱毒疫苗和病毒载体提供备选毒株。【方法】采用PCR克隆GTPV AV41株TK基因(ORF56)及其侧翼基因组片段,在TK基因内部插入报告基因EGFP和抗性基因gpt表达盒,构建GTPV重组转移载体pTK-Eg。将重组转移载体pTK-Eg与GTPV AV41株共转染Vero细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,鉴定其生长特性和遗传稳定性,并接种山羊评价其安全性和免疫原性。【结果】成功构建获得一株TK基因缺陷的重组病毒vTK-Eg。与亲本毒株GTPV AV41相比,vTK-Eg的生长特性及其形成的细胞病变均未发生显著改变,只是毒价略微下降100.5个数量级;在原代牛睾丸(BT)细胞上连续传代,至少在10代内保持遗传性状和病毒滴度稳定。接种vTK-Eg的山羊精神和食欲均正常,接种后体温升高和局部反应的严重程度均较接种亲本毒株GTPV AV41的山羊有所降低;vTK-Eg与GTPV AV41株诱导山羊产生的GTPV中和抗体水平无明显差异(P>0.05)。【结论】构建的TK基因重组缺陷病毒vTK-Eg具有良好的遗传稳定性和免疫原性,较亲本毒株其安全性也有所提高,可作为研制GTPV基因工程弱毒疫苗和活载体疫苗的备选毒株。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 TK基因 重组病毒 基因缺陷 生物学特性
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小反刍兽疫病毒及山羊痘病毒N-ITR基因二联实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:14
5
作者 赵文华 杨仕标 +1 位作者 高华峰 王金萍 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2014年第3期65-71,共7页
为实现山羊2种疫病病原体——小反刍兽疫病毒(PPRV)和山羊痘病毒(GTPV)的同步快速检测,基于PPRV的N基因及GTPV的ITR基因,分别设计合成2套特异性引物及探针;探针分别用5′FAM-TAMRA3′及5′JOE-Eclipse3′标记物进行标记以实现同步检测... 为实现山羊2种疫病病原体——小反刍兽疫病毒(PPRV)和山羊痘病毒(GTPV)的同步快速检测,基于PPRV的N基因及GTPV的ITR基因,分别设计合成2套特异性引物及探针;探针分别用5′FAM-TAMRA3′及5′JOE-Eclipse3′标记物进行标记以实现同步检测。试验结果显示,所建立的N-ITR二联探针实时荧光定量RT-PCR方法可同步检测PPRV和GTPV,产生特异性荧光信号,而对禽痘病毒(FPV)、犬瘟热病毒(CDV)等相关病毒无荧光信号检出。以PPRV-N和GTPVITR的pMD18-T载体质粒为标准品,构建了二联标准曲线,N-ITR探针对PPRV和GTPV的检测敏感度可分别达102和103拷贝/μL。本研究初步建立了可同步快速特异性检测PPRV和GTPV的二联实时荧光定量RT-PCR方法。 展开更多
关键词 小反刍兽疫病毒 山羊痘病毒 二联实时荧光定量RT—PCR 探针
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山羊痘病毒ORF8~ORF18缺失重组毒株的构建和鉴定 被引量:2
6
作者 郑敏 刘棋 +6 位作者 金宁一 施开创 梁媛 莫胜兰 屈素洁 陆文俊 胡博 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期65-70,共6页
本研究旨在通过敲除山羊痘病毒(GTPV)大段基因组片段尝试构建安全性更好的基因工程减毒株和病毒表达载体。采用PCR方法,克隆了GTPV AV41株基因组ORF7-ORF8间1 242 bp的基因片段,以及ORF18~ORF19间1 355 bp的片段。接着分别以上述2片... 本研究旨在通过敲除山羊痘病毒(GTPV)大段基因组片段尝试构建安全性更好的基因工程减毒株和病毒表达载体。采用PCR方法,克隆了GTPV AV41株基因组ORF7-ORF8间1 242 bp的基因片段,以及ORF18~ORF19间1 355 bp的片段。接着分别以上述2片段作为左、右侧同源重组臂,构建了包含报道基因EGFP和抗性基因gpt的GTPV重组转移载体pCF-Eg。然后采用脂质体介导法,将重组转移载体pCF-Eg与GTPV AV41株共转染原代羊睾丸细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,并鉴定重组病毒的遗传稳定性和生长特性。结果成功获得1株敲除掉ORF8~ORF18间9个ORF、长达7 kb基因组片段的重组病毒vCF-Eg。该重组病毒能稳定表达绿色荧光蛋白至少10代,并且其增殖滴度与亲本毒株基本相同。表明上述区域是GTPV的复制非必需区。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 重组病毒 基因缺失 病毒载体
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山羊痘病毒糖蛋白基因ORF122的克隆及其原核表达 被引量:2
7
作者 李春艳 郑敏 +5 位作者 黎宗强 莫胜兰 屈素洁 梁媛 李向涛 秦保亮 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期807-810,共4页
以山羊痘弱毒疫苗毒株AV41的细胞培养物中提取的总DNA为模板,通过PCR扩增获得山羊痘病毒(GTPV)ORF122基因片段。另设计1对引物,经PCR扩增获得缺失跨膜功能区的ORF122基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-32a中,构建了重组表达质粒pET-OR... 以山羊痘弱毒疫苗毒株AV41的细胞培养物中提取的总DNA为模板,通过PCR扩增获得山羊痘病毒(GTPV)ORF122基因片段。另设计1对引物,经PCR扩增获得缺失跨膜功能区的ORF122基因片段,将其克隆入原核表达载体pET-32a中,构建了重组表达质粒pET-ORF122,将其转化大肠杆菌BL21感受态细胞,经IPTG诱导,成功表达出分子质量为32ku的融合蛋白。免疫印迹试验证实,表达的融合蛋白可以被GTPV阳性血清识别。经对该重组蛋白进行纯化,结果其纯度达到90%以上,产量达5.5mg/L。上述结果为GTPV重组诊断抗原的筛选和新型疫苗的研制奠定了基础。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 ORF122基因 克隆 原核表达
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山羊痘病毒SERPIN蛋白抑制宿主细胞凋亡活性的鉴定 被引量:2
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作者 郑敏 梁媛 +6 位作者 韦显凯 刘棋 莫胜兰 施开创 李春艳 郑列丰 李军 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期15-21,共7页
采用PCR扩增长为1 041bp的山羊痘病毒(GTPV)serpin基因,构建真核表达质粒pcDNA-Ser-pin;将其转染HeLa细胞,经G418筛选,克隆纯化、鉴定,获得1株稳定表达GTPV SERPIN蛋白的HeLa细胞株;然后通过检测凋亡诱导剂TNF-α和放线菌酮作用后的细... 采用PCR扩增长为1 041bp的山羊痘病毒(GTPV)serpin基因,构建真核表达质粒pcDNA-Ser-pin;将其转染HeLa细胞,经G418筛选,克隆纯化、鉴定,获得1株稳定表达GTPV SERPIN蛋白的HeLa细胞株;然后通过检测凋亡诱导剂TNF-α和放线菌酮作用后的细胞形态学变化、细胞活力和caspase活性,对GTPV SERPIN蛋白抑制宿主细胞凋亡的活性进行了鉴定。序列分析结果表明,GTPV SERPIN与正痘病毒SPI-1和SPI-2的氨基酸序列同源性为36%~38%;与痘苗病毒SPI-2空间构型相近,VADC基序和P1氨基酸(天门冬氨酸)相同。细胞试验结果显示,GTPV SERPIN蛋白能抑制由TNF-α和放线菌酮诱导的细胞凋亡,抑制率达70%左右,且这种抑制作用与其下调细胞caspase-8活性有关。证实GTPV SERPIN能抑制宿主细胞凋亡,可能是GTPV的致病因子之一。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 SERPIN蛋白 细胞凋亡
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山羊痘病毒及口疮病毒ITR-059基因双重PCR检测方法的建立 被引量:2
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作者 赵文华 杨仕标 +1 位作者 姚俊 李富祥 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期569-576,共8页
为实现山羊痘病毒(GTPV)和口疮病毒(ORFV)的同步快速检测,基于GTPV的ITR基因及ORFV的059基因,分别设计用于普通双重PCR的引物2对、用于二联实时荧光定量PCR的特异性引物及探针2套;探针分别用5′JOE-Eclipse3′及5′FAM-TAMRA3′荧光染... 为实现山羊痘病毒(GTPV)和口疮病毒(ORFV)的同步快速检测,基于GTPV的ITR基因及ORFV的059基因,分别设计用于普通双重PCR的引物2对、用于二联实时荧光定量PCR的特异性引物及探针2套;探针分别用5′JOE-Eclipse3′及5′FAM-TAMRA3′荧光染料标记物进行标记。结果显示,所建立的GTPV-ITR-L-ORFV-059双重普通PCR方法,可实现对GTPV与ORFV的特异性双重检测,检测敏感度可达10~4copies/μL DNA;所建立的ITR-059二联探针实时荧光定量PCR方法可同时特异性检测ORFV和GTPV产生特异性荧光信号,二联探针的检测敏感度可分别达10^(2.87)和10^(2.52) copies/μL DNA。本研究初步建立了可同步特异性检测GTPV和ORFV的双重普通PCR及二联探针实时荧光定量PCR检测方法。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 口疮病毒 二联 普通PCR 实时PCR 探针
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羊口疮病毒及山羊痘病毒双重PCR检测方法的建立 被引量:2
10
作者 赵文华 杨仕标 +1 位作者 姚俊 李富祥 《现代畜牧兽医》 2017年第1期1-8,共8页
为实现山羊两种疫病病原体——羊口疮病毒(ORFV)和山羊痘病毒(GTPV)的同步快速检测,基于ORFV的025基因及GTPV的ITR基因,分别设计用于普通双重PCR的引物两对、用于双重实时荧光定量PCR的特异性引物及探针两套。试验结果显示,所建立的ORFV... 为实现山羊两种疫病病原体——羊口疮病毒(ORFV)和山羊痘病毒(GTPV)的同步快速检测,基于ORFV的025基因及GTPV的ITR基因,分别设计用于普通双重PCR的引物两对、用于双重实时荧光定量PCR的特异性引物及探针两套。试验结果显示,所建立的ORFV-025/GTPV-ITR-S双重普通PCR方法,可实现对GTPV与ORFV的特异性双重检测,检测敏感度可达104拷贝/μL DNA;所建立的025-ITR二联探针实时荧光定量PCR方法亦可同时特异性检测ORFV和GTPV产生特异性荧光信号,二联探针的检测敏感度可分别达102.71拷贝/μL和102.88拷贝/μL DNA。本研究初步建立了可同步快速特异性检测ORFV和GTPV的双重普通PCR及二联实时荧光定量PCR检测方法。 展开更多
关键词 羊口疮病毒 山羊痘病毒 二联 普通PCR 实时荧光定量PCR 探针
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山羊痘病毒serpin基因缺失重组毒株的构建和鉴定
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作者 郑敏 李春艳 +4 位作者 韦显凯 梁晟 苏娇秀 郑列丰 李军 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期372-376,共5页
通过敲除与山羊痘病毒(GTPV)毒力相关的serpin基因以构建安全性更好的基因工程减毒株和病毒表达载体。采用PCR方法克隆了包含GTPV AV41株serpin基因(ORF149)及其侧翼长为1 745bp的片段,并在serpin基因片段内部分别插入报道基因EGFP和抗... 通过敲除与山羊痘病毒(GTPV)毒力相关的serpin基因以构建安全性更好的基因工程减毒株和病毒表达载体。采用PCR方法克隆了包含GTPV AV41株serpin基因(ORF149)及其侧翼长为1 745bp的片段,并在serpin基因片段内部分别插入报道基因EGFP和抗性基因gpt表达盒,构建GTPV重组转移载体pSp-Eg。然后将重组转移载体pSp-Eg与GTPV AV41株共转染BHK-21细胞,通过空斑纯化筛选阳性重组病毒,并鉴定其遗传稳定性和生长特性。结果,成功获得一株敲除serpin基因的重组病毒vSp-Eg。该重组病毒在至少10代能稳定表达绿色荧光蛋白,在培养细胞中的生长特性与亲本毒株基本一致,但病毒效价降低1个数量级。结果表明,serpin基因是GTPV的复制非必需基因。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 重组病毒 serpin基因 病毒载体
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山羊痘病毒G14-STV44-55疫苗株表达载体的构建
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作者 李有文 魏风 +4 位作者 陈创夫 王远志 张辉 任艳 郭志儒 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1270-1275,共6页
PCR扩增山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55的TK(Thymidine kinase)基因作为侧翼序列;用XhoⅠ/NotⅠ消化含有报告基因的质粒pLSEG得到痘苗病毒(Vaccinia virus,VV)p7.5启动子调控大肠杆菌黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(E.coli.gpt)作为报告... PCR扩增山羊痘病毒疫苗株G14-STV44-55的TK(Thymidine kinase)基因作为侧翼序列;用XhoⅠ/NotⅠ消化含有报告基因的质粒pLSEG得到痘苗病毒(Vaccinia virus,VV)p7.5启动子调控大肠杆菌黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖基转移酶(E.coli.gpt)作为报告基因;人工合成VV I1L启动子用于调控表达外源基因,用Overlap PCR的方法将VV I1L启动子和VV p7.5启动子调控的gpt连接但使两启动子转录方向相背,并在VV I1L启动子下游引入XhoⅠ位点作为外源基因的插入位点,构建成表达载体元件I1L-P7.5-GPT。将I1L-P7.5-GPT插入TK基因的Acc65Ⅰ位点,构建成表达载体。将构建的载体转染山羊痘病毒G14-STV44-55株感染的羔羊睾丸细胞,用含有霉酚酸(Mycophenolic acid,MPA)等筛选试剂的培养基筛选重组山羊痘病毒(rGTPV)。结果显示,构建成以TK基因为侧翼、以VV I1L启动子调控目的基因,以gpt为报告基因的表达载体pGEM-TK-I1L-GPT,成功筛选到表达gpt的rGTPV,rGTPV至少可稳定传代15代。结果表明,构建了我国山羊痘病毒G14-STV44-55疫苗株的表达载体;TK基因是GTPV G14-STV44-55疫苗株的复制非必需区,以TK基因为插入位点获得的重组病毒可稳定传代15代以上。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 载体构建 启动子 报告基因
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Review of sheep and goat pox disease: current updates on epidemiology, diagnosis, prevention and control measures in Ethiopia 被引量:7
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作者 Girma Zewdie Getaw Derese +2 位作者 Belayneh Getachew Hassen Belay Mirtneh Akalu 《Animal Diseases》 2021年第4期239-248,共10页
Sheep pox, goat pox, and lumpy skin diseases are economically significant and contagious viral diseases of sheep, goats and cattle, respectively, caused by the genus Capripoxvirus (CaPV) of the family Poxviridae. Curr... Sheep pox, goat pox, and lumpy skin diseases are economically significant and contagious viral diseases of sheep, goats and cattle, respectively, caused by the genus Capripoxvirus (CaPV) of the family Poxviridae. Currently, CaPV infection of small ruminants (sheep and goats) has been distributed widely and are prevalent in Central Africa, the Middle East, Europe and Asia. This disease poses challenges to food production and distribution, affecting rural livelihoods in most African countries, including Ethiopia. Transmission occurs mainly by direct or indirect contact with infected animals. They cause high morbidity (75-100% in endemic areas) and mortality (10-85%). Additionally, the mortality rate can approach 100% in susceptible animals. Diagnosis largely relies on clinical symptoms, confirmed by laboratory testing using real-time PCR, electron microscopy, virus isolation, serology and histology. Control and eradication of sheep pox virus (SPPV), goat pox virus (GTPV), and lumpy skin disease (LSDV) depend on timely recognition of disease eruption, vector control, and movement restriction. To date, attenuated vaccines originating from KSGPV O-180 strains are effective and widely used in Ethiopia to control CaPV throughout the country. This vaccine strain is clinically safe to control CaPV in small ruminants but not in cattle which may be associated with insufficient vaccination coverage and the production of low-quality vaccines. 展开更多
关键词 CaPV Ethiopia gtpv Sheep pox Goat pox SPPV VACCINE
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山羊痘的诊断与防治 被引量:1
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作者 曹洁静 《中国乳业》 2023年第5期47-50,共4页
山羊痘是一种由山羊痘病毒(GTPV)引起的病毒性传染病,传播速度快、致死率高,在现代养殖业较常见,是养殖户的难题。本文结合多年临床经验,从发病情况、临床症状、实验室诊断对山羊痘病毒进行分析,提出在检疫消毒、合理饲养、定期和应急... 山羊痘是一种由山羊痘病毒(GTPV)引起的病毒性传染病,传播速度快、致死率高,在现代养殖业较常见,是养殖户的难题。本文结合多年临床经验,从发病情况、临床症状、实验室诊断对山羊痘病毒进行分析,提出在检疫消毒、合理饲养、定期和应急疫苗接种、疫区管理等方面,切实可行的预防措施,为养殖户提供参考,降低山羊痘带来的不良影响。 展开更多
关键词 山羊痘(gtpv) 临床症状 诊断 预防措施
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羊口疮、小反刍兽疫、羊痘病毒三重TaqMan荧光定量PCR方法的建立及应用
15
作者 朱成 田芯源 +4 位作者 陈易 余燕岐 王宪军 朱江江 向华 《四川畜牧兽医》 2024年第10期33-37,40,共6页
为建立一种羊口疮病毒(ORFV)、山羊痘病毒(GTPV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)三种病原的联合共检方法,以ORFV、GTPV和PPRV基因序列为模板,克隆得ORFV-B2L、GTPV-p32、PPRV-N基因序列,并构建三种病原核酸标准品,设计三对探针,建立ORFV、GTPV和... 为建立一种羊口疮病毒(ORFV)、山羊痘病毒(GTPV)、小反刍兽疫病毒(PPRV)三种病原的联合共检方法,以ORFV、GTPV和PPRV基因序列为模板,克隆得ORFV-B2L、GTPV-p32、PPRV-N基因序列,并构建三种病原核酸标准品,设计三对探针,建立ORFV、GTPV和PPRV三重TaqMan荧光定量PCR方法,然后对方法的检测条件进行优化及质量评价,并作临床初步验证。结果显示:所建立的ORFV、GTPV和PPRV三重TaqMan荧光定量PCR方法的特异性好,ORFV、PPRV和GTPV最低检测限值分别为2.98×101、3.81×101、6.68×10^(1)copies/μL;稳定性好,与商品化检测试剂盒和OIE标准相比具有较高的检测符合率;对279份临床样本作检测,ORFV、PPRV和GTPV的阳性检出率分别为34%、4.3%、2.5%,ORFV和GTPV的混合感染率为2.5%。 展开更多
关键词 羊口疮病毒(ORFV) 小反刍兽疫病毒(PPRV) 羊痘病毒(gtpv) 多重TaqMan荧光定量PCR
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羊口蹄疫病毒·羊口疮病毒和山羊痘病毒多重PCR检测方法的建立及应用 被引量:2
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作者 潘永 杨莉 +7 位作者 李婷 莫本田 李刚 赵滨 唐远江 杨粤黔 孙启跃 徐景峨 《安徽农业科学》 CAS 2023年第21期112-115,共4页
[目的]建立一种能同时检测羊口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)、羊口疮病毒(Orf virus, ORFV)和山羊痘病毒(Goat pox virus, GTPV)的方法。[方法]从NCBI中下载已报道的FMDV、ORFV和GTPV全基因序列,通过同源比对软件获取... [目的]建立一种能同时检测羊口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus, FMDV)、羊口疮病毒(Orf virus, ORFV)和山羊痘病毒(Goat pox virus, GTPV)的方法。[方法]从NCBI中下载已报道的FMDV、ORFV和GTPV全基因序列,通过同源比对软件获取保守基因序列,并在该基础上设计特异性引物,建立一种多重PCR检测方法。[结果]该法对其他羊常见病原无特异性扩增,具有较好的特异性;对FMDV、ORFV和GTPV的最低检测限分别为10~3、10~4和10~3拷贝/μL,敏感性良好;组内和组间重复性良好;对147份样品进行检测,利用该研究建立的多重PCR方法分别检出5份FMDV、16份ORFV、5份GTPV阳性样品,与常规PCR检出结果一致。[结论]该方法能够同时检测FMDV、ORFV和GTPV,可用于羊病的流行病学调查、鉴别诊断和疫情防控。 展开更多
关键词 羊口蹄疫病毒 羊口疮病毒 山羊痘病毒 多重PCR
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山羊痘病毒在不同日龄山羊睾丸细胞中的生长特性研究 被引量:1
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作者 牟豪 余远迪 +1 位作者 许国洋 杨柳 《云南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2022年第5期799-803,共5页
【目的】明确山羊痘病毒(GTPV)AV41弱毒疫苗株在不同日龄山羊原代睾丸细胞中的增殖效率,为选择病毒或疫苗株的培养细胞提供数据支撑。【方法】通过传统方式对7日龄和60日龄山羊睾丸细胞分离培养,利用长时间动态细胞成像及数据分析系统比... 【目的】明确山羊痘病毒(GTPV)AV41弱毒疫苗株在不同日龄山羊原代睾丸细胞中的增殖效率,为选择病毒或疫苗株的培养细胞提供数据支撑。【方法】通过传统方式对7日龄和60日龄山羊睾丸细胞分离培养,利用长时间动态细胞成像及数据分析系统比较2个日龄细胞的生长效率;接种GTPV,观察2个日龄细胞在感染病毒后的形态特征;通过间接免疫荧光和荧光定量PCR比较GTPV的增殖效率。【结果】7日龄和60日龄山羊睾丸细胞的形态特征和生长速率无明显差异;接种GTPV后,2个日龄的原代山羊睾丸细胞均能产生细胞病变,但是出现细胞病变的时间以及病变特征存在差别。间接免疫荧光和荧光定量PCR结果表明:GPTV在60日龄山羊睾丸细胞中的增殖效率高于7日龄。【结论】GTPV在7日龄和60日龄山羊原代睾丸细胞中均能发生病毒增殖,且2种细胞均能发生明显的细胞病变,但60日龄细胞的增殖效率高于7日龄细胞。研究结果对采用山羊睾丸细胞培养GTPV弱毒株有一定的指导作用。 展开更多
关键词 山羊原代睾丸细胞 山羊痘病毒 细胞病变 增殖效率
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牛结节性皮肤病免疫效果分析及程序优化 被引量:6
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作者 赵晓军 李智 +1 位作者 吴晓亮 魏小军 《中国奶牛》 2022年第6期57-61,共5页
牛结节性皮肤病于2019年传入我国,2020年在我国多地发生,不同品种牛均易感,严重危害牛的健康。借鉴非洲、欧洲等国家成功的防控经验,根据农业农村部的防控技术规范,自2020年起笔者团队在规模化奶牛场应用山羊痘疫苗免疫预防牛结节性皮肤... 牛结节性皮肤病于2019年传入我国,2020年在我国多地发生,不同品种牛均易感,严重危害牛的健康。借鉴非洲、欧洲等国家成功的防控经验,根据农业农村部的防控技术规范,自2020年起笔者团队在规模化奶牛场应用山羊痘疫苗免疫预防牛结节性皮肤病,总结奶牛场在疫苗配比、注射剂量、注射方法及操作细节方面的成功经验,集成了标准化的免疫技术标准。根据部分规模奶牛场的免疫监测数据,采用山羊痘疫苗免疫的奶牛场,免疫副反应小,免疫牛群干物质采食量下降幅度低于2.5%,奶量下降幅度小于2.3%,过敏率最高的奶牛场低于0.4%。综合伊利近30万头奶牛的免疫数据,发现使用山羊痘疫苗免疫的奶牛场,近2年没有出现牛只感染牛结节性皮肤病发病的情况,笔者团队据此总结了具体奶牛场免疫程序及标准免疫操作,以供参考。 展开更多
关键词 奶牛 牛结节性皮肤病 山羊痘疫苗 免疫技术 免疫副反应
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