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PAD4抑制剂GSK484通过抑制H3Cit表达减轻小鼠脓毒症肺损伤后内皮功能障碍的发生
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作者 苏晓飞 李霖 +3 位作者 戴靖榕 肖宝 金子琦 刘斌 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2396-2403,共8页
目的探讨PAD4抑制剂(GSK484)对脓毒症后H3Cit表达的抑制作用,并探究其对脓毒症引起的内皮功能障碍的改善效果。方法C57BL/6小鼠18只通过盲肠结扎穿孔术(CLP)构建小鼠脓毒症模型,实验分为假手术组,模型组和GSK484治疗组,6只/组,治疗组在... 目的探讨PAD4抑制剂(GSK484)对脓毒症后H3Cit表达的抑制作用,并探究其对脓毒症引起的内皮功能障碍的改善效果。方法C57BL/6小鼠18只通过盲肠结扎穿孔术(CLP)构建小鼠脓毒症模型,实验分为假手术组,模型组和GSK484治疗组,6只/组,治疗组在术后第2天腹腔注射给予GSK484(4 mg/kg)。ELISA检测小鼠血清VEGF、ESM-1、IL-6、IL-1β水平,HE染色观察肺组织病理学变化,免疫荧光和Western blotting检测各组小鼠肺组织中F-actin、VE-cadherin、ZO-1蛋白表达,Western blotting检测肺组织VE-Cadherin和H3Cit蛋白表达情况。肺组织原代分离培养肺微血管内皮细胞,使用脂多糖(LPS,10μg/mL)干预24 h构建脓毒症模型。检测细胞成管能力,CCK-8检测细胞增殖,流式检测细胞凋亡,ELISA检测细胞上清中VEGF、ESM-1、IL-6、IL-1β水平。结果与假手术组相比,脓毒症小鼠肺组织肺脏血管充血、肺泡断裂、肺泡腔及肺间质水肿、肺泡隔增厚、中性粒细胞浸润等,血清中炎症因子IL-6、IL-1β和内皮细胞因子VEGF、ESM-1含量均升高(P<0.05),肺组织中胞间连接蛋白F-actin、VE-cadherin、ZO-1表达降低,H3Cit蛋白表达升高(P<0.05),GSK484治疗可以有效改善这些变化。LPS诱导肺微血管内皮细胞上清中炎症因子表达量升高、内皮细胞因子VEGF、ESM-1含量均升高(P<0.05),细胞成管能力降低;2.5μmol/L浓度GSK484处理可降低炎症因子和内皮细胞因子表达(P<0.05)。结论GSK484的使用可有效抑制脓毒症后H3Cit表达,进一步改善脓毒症后内皮功能障碍的发生。 展开更多
关键词 脓毒症 肺损伤 PAD4抑制剂 小鼠肺微血管内皮细胞 内皮功能障碍 gsk484
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GSK484对小鼠呼吸机相关性肺损伤及中性粒细胞胞外诱捕网的影响
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作者 李忠林 蔚海霞 +4 位作者 马源 王雪婷 秦伟伟 马福国 孙立新 《中华麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期868-872,共5页
目的评价GSK484对小鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)及中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的影响。方法SPF级健康雄性C57BL/6小鼠48只,5~6周龄,体质量15~20 g,采用随机数字表法将小鼠分为4组(n=12):自主呼吸组(S组)、自主呼吸+GSK484干预组(SG组)、... 目的评价GSK484对小鼠呼吸机相关性肺损伤(VILI)及中性粒细胞胞外诱捕网(NETs)的影响。方法SPF级健康雄性C57BL/6小鼠48只,5~6周龄,体质量15~20 g,采用随机数字表法将小鼠分为4组(n=12):自主呼吸组(S组)、自主呼吸+GSK484干预组(SG组)、VILI组(V组)、VILI+GSK484干预组(VG组)。S组及SG组气管插管后自主呼吸4 h;V组及VG组机械通气4 h(潮气量30 ml/kg、呼吸频率75次/min、吸呼比1∶2、呼吸末正压0 mmHg、吸入氧气浓度21%)。于VILI建模前3 d,SG组及VG组腹腔注射GSK4844 mg/kg,1次/d,S组及V组每天以等容量生理盐水代替。小鼠自主呼吸或机械通气4 h时,采集腹主动脉血样,行血气分析,记录PaO_(2);随后处死小鼠,收集支气管肺泡灌洗液(BALF)及肺组织。确定肺组织湿重/干重比值(W/D);肺组织HE染色后,光镜下观察病理学结果并行损伤评分;采用ELISA法检测BALF IL-1β、IL-6、TNF-α及髓过氧化物酶(MPO)浓度;采用Western blot法检测肺组织肽酰基精氨酸脱亚氨酶4(PAD4)、中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)及瓜氨酸化组蛋白3(Cit-H3)表达水平。结果与S组和SG组比较,V组和VG组肺损伤评分和W/D比值升高,PaO_(2)降低,BALF IL-1β、IL-6、TNF-α和MPO浓度升高,肺组织PAD4、NE、HMGB1和Cit-H3表达上调(P<0.05);与V组比较,VG组肺损伤评分和W/D比值降低,PaO_(2)升高,BALF IL-1β、IL-6、TNF-α和MPO浓度降低,肺组织PAD4、NE、HMGB1和Cit-H3表达下调(P<0.05)。结论GSK484可减轻小鼠VILI,机制与抑制PAD4表达,减少NETs产生,减轻肺组织炎症反应有关。 展开更多
关键词 呼吸机相关性肺损伤 中性白细胞 胞外诱捕网 gsk484
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