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GRK6对多发性骨髓瘤MM1R细胞增殖的作用及其作用机制的初步研究 被引量:1
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作者 张之尧 陈丽丽 +3 位作者 范国琴 闫志凌 徐开林 李振宇 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期1421-1426,共6页
目的:探讨GRK6对多发性骨髓瘤细胞增殖作用的调控及其机制。方法:通过构建干扰人GRK6基因的慢病毒载体GRK6-shRNA,转染筛选获得稳定下调GRK6基因表达的多发性骨髓瘤细胞株MM1R。利用实时定量PCR及Westem blot验证慢病毒载体介导的GRK6... 目的:探讨GRK6对多发性骨髓瘤细胞增殖作用的调控及其机制。方法:通过构建干扰人GRK6基因的慢病毒载体GRK6-shRNA,转染筛选获得稳定下调GRK6基因表达的多发性骨髓瘤细胞株MM1R。利用实时定量PCR及Westem blot验证慢病毒载体介导的GRK6基因表达下调的效果。选取GRK6表达下调最显著的细胞株检测GRK6对细胞增殖的影响。结果:构建干扰人GRK6基因的慢病毒载体GRK6-shRNA,转染多发性骨髓瘤MM1R细胞,筛选并获得稳定下调GRK6基因的多发性骨髓瘤细胞株MM1R。CCK-8试验结果显示,实验组细胞增殖活性明显低于对照组(P<0.05)。流式细胞术检测显示:实验组细胞在G0/G1期被阻滞(P<0.05)。Western Blot检测实验组Cyclin D1和CDK4水平相比较对照组明显降低。结论:成功构建了特异性干扰GRK6表达的慢病毒载体,获得可稳定下调GRK6的MM1R细胞株并且发现下调GRK6表达后,MM1R细胞可能通过抑制Cyclin D1和CDK4水平使MM1R细胞阻滞于G0/G1期,并显著地抑制了多发性骨髓瘤MM1R细胞的增殖。 展开更多
关键词 grk6基因 慢病毒载体 多发性骨髓瘤
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GRK6在胆管癌组织中的表达及对胆管癌细胞增殖和侵袭的影响 被引量:1
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作者 谭敏 薛栋 +2 位作者 武学福 佘军军 孙祺 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2022年第4期659-663,共5页
目的:检测GRK6在胆管癌组织及相应癌旁正常胆管上皮组织内的表达情况,并探究抑制GRK6的表达对胆管癌细胞克隆增殖及侵袭的影响。方法:通过qRT-PCR及免疫组织化学染色检测GRK6在胆管癌及癌旁正常组织中的表达情况,并分析其与不同临床病... 目的:检测GRK6在胆管癌组织及相应癌旁正常胆管上皮组织内的表达情况,并探究抑制GRK6的表达对胆管癌细胞克隆增殖及侵袭的影响。方法:通过qRT-PCR及免疫组织化学染色检测GRK6在胆管癌及癌旁正常组织中的表达情况,并分析其与不同临床病理因素之间的关系。通过RNA干扰技术抑制QBC939细胞中GRK6的表达,检测siRNA在QBC939细胞中对GRK6的抑制效果;采用MTT、平板克隆形成实验检测抑制GRK6表达对胆管癌细胞克隆增殖的影响,Transwell实验检测抑制GRK6表达对细胞侵袭的影响。结果:qRT-PCR和免疫组化结果均提示GRK6在胆管癌组织高表达,GRK6的高表达与肿瘤大小及TNM分期密切相关。si-GRK6可有效沉默QBC939细胞中GRK6的表达;MTT实验及平板克隆形成实验结果表明抑制GRK6表达能够抑制胆管癌细胞QBC939的增殖和克隆形成过程;Transwell实验结果表明抑制GRK6表达后,胆管癌细胞的侵袭能力明显降低。结论:GRK6在胆管癌细胞中高表达,抑制GRK6的表达能够抑制胆管癌细胞的增殖和侵袭能力。 展开更多
关键词 胆管癌 grk6 细胞增殖 细胞侵袭
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miR-138靶向GRK6调控骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的研究 被引量:5
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作者 樊萍 冯秀媛 +4 位作者 胡楠 蒲丹 吕晓虹 孙怡宁 何岚 《河北医药》 CAS 2021年第1期10-15,共6页
目的探讨微小RNA-138(miR-138)靶向G蛋白偶联受体激酶6(GRK6)对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法分离培养人原代OA软骨细胞及对应正常软骨细胞,采用qRT-PCR与Western blot检测miR-138、GRK6 mRNA及蛋白在软骨细胞中的表达。O... 目的探讨微小RNA-138(miR-138)靶向G蛋白偶联受体激酶6(GRK6)对骨关节炎(OA)软骨细胞增殖和凋亡的影响。方法分离培养人原代OA软骨细胞及对应正常软骨细胞,采用qRT-PCR与Western blot检测miR-138、GRK6 mRNA及蛋白在软骨细胞中的表达。OA软骨细胞分别转染miR-138 mimics、si-GRK6,通过MTT法、流式细胞术评估OA软骨细胞的增殖与凋亡情况。Western blot检测软骨细胞中Bcl-2、Bax蛋白表达。采用双荧光素酶与Western blot验证miR-138与GRK6之间的靶向关系。GRK6过表达验证miR-138对OA软骨细胞增殖与凋亡的作用机制。结果miR-138在OA软骨细胞中呈低表达(P<0.05),而GRK6呈高表达(P<0.05);双荧光素酶与Western blot证实miR-138与GRK6之间存在靶向关系;miR-138过表达与沉默GRK6表达的OA软骨细胞中,细胞活力明显增强(P<0.05),细胞凋亡率降低(P<0.05),Bcl-2的表达水平上调(P<0.05),Bax的表达水平下调(P<0.05);GRK6过表达可逆转miR-138过表达对人OA软骨细胞增殖及凋亡的作用。结论miR-138可通过抑制GRK6的表达而增强OA软骨细胞增殖,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 骨关节炎 软骨细胞 微小RNA-138 G蛋白偶联受体激酶6 凋亡
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GRK6 expression in patients with hepatocellular carcinoma 被引量:4
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作者 Ya-Ping Li 《Asian Pacific Journal of Tropical Medicine》 SCIE CAS 2013年第3期220-223,共4页
Objective:To investigate the expression and potential roles of G protein—coupled receptor kinase 6[GRK6]in hepatocellular carcinoma(HCC) patients.Methods:Immunohistochemistry and Western blot was performed to determi... Objective:To investigate the expression and potential roles of G protein—coupled receptor kinase 6[GRK6]in hepatocellular carcinoma(HCC) patients.Methods:Immunohistochemistry and Western blot was performed to determine GRK6 expression in 73 HCC samples.And the correlation with clinieopathological features was also analyzed.Results:GKK6 expression was significantly higher in HCC than that in normal hepatic tissue.GRK6 was positively correlated with proliferation marker Ki-67,clinical stage,metastasis and survival time.Conclusions: Our results suggested that GUK.6 overexpression plays an important role in HCC.Monitoring the expression of GRK6 maybe helpful in early diagnosis and prognosis of HCC. 展开更多
关键词 HEPATOCELLULAR CARCINOMA grk6 KI-67
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甲状腺乳头状癌组织SMYD2、GRK6表达与临床病理特征、增殖基因和预后的关系分析 被引量:5
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作者 董校良 王象征 +2 位作者 王捷 方炜 宫扣飞 《现代生物医学进展》 CAS 2021年第24期4699-4704,共6页
目的:探讨甲状腺乳头状癌组织中SET和MYND域蛋白2(SMYD2)、G蛋白偶联受体激酶6(GRK6)表达与临床病理特征、增殖基因和预后的关系。方法:选择2015年1月至2017年12月期间我院收治的83例甲状腺乳头状癌患者,取甲状腺乳头状癌患者手术切除... 目的:探讨甲状腺乳头状癌组织中SET和MYND域蛋白2(SMYD2)、G蛋白偶联受体激酶6(GRK6)表达与临床病理特征、增殖基因和预后的关系。方法:选择2015年1月至2017年12月期间我院收治的83例甲状腺乳头状癌患者,取甲状腺乳头状癌患者手术切除的癌组织及癌旁组织(距肿瘤组织边缘≥5 cm)标本,采用qRT-PCR检测SMYD2、GRK6以及增殖基因[叉头盒蛋白A1(FOXA1)、程序性细胞死亡基因4(PDCD4)、Xklp2靶蛋白(TPX2)]表达。分析SMYD2、GRK6表达与临床病理特征、增殖基因和预后的关系。分析甲状腺乳头状癌患者预后的影响因素。结果:癌组织SMYD2、GRK6、FOXA1、PDCD4、TPX2表达高于癌旁组织(P<0.05)。Pearson相关性分析显示:SMYD2、GRK6表达与FOXA1、PDCD4、TPX2表达呈正相关(P<0.05)。肿瘤直径>1 cm、低中度分化、T3~T4a期、N1a~N1b期患者癌组织中SMYD2、GRK6表达高于肿瘤直径≤1 cm、高度分化、T1~T2期、N0期患者(P<0.05)。SMYD2、GRK6高表达组患者3年无进展生存期(PFS)、总生存期(OS)生存率低于SMYD2、GRK6低表达组(P<0.05)。Cox比例风险模型分析结果显示N1a~N1b期、SMYD2≥2.95、GRK6≥3.02是甲状腺乳头状癌患者不良预后的危险因素(P<0.05)。结论:甲状腺乳头状癌组织中SMYD2、GRK6表达增高,SMYD2、GRK6过表达与癌细胞增殖、侵袭和术后预后不良有关。 展开更多
关键词 甲状腺乳头状癌 SMYD2 grk6 临床病理特征 增殖基因 预后
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GRK6在恶性肿瘤中的研究进展
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作者 梁心怡 杜润蕾 《生物化工》 2022年第6期156-161,共6页
G蛋白偶联受体激酶6(GRK6)是一个能够磷酸化介导活化的G蛋白偶联受体(GPCR)发生同源脱敏的丝氨酸/苏氨酸激酶。由于GPCR是细胞接收和传递外界信号的关键受体,GRK6的失调会使部分GPCR信号传递紊乱,严重损害细胞的正常生理反应,导致疾病... G蛋白偶联受体激酶6(GRK6)是一个能够磷酸化介导活化的G蛋白偶联受体(GPCR)发生同源脱敏的丝氨酸/苏氨酸激酶。由于GPCR是细胞接收和传递外界信号的关键受体,GRK6的失调会使部分GPCR信号传递紊乱,严重损害细胞的正常生理反应,导致疾病的发生。近年来,在多种恶性肿瘤中发现了GRK6的表达异常,且明显影响了肿瘤的生长、增殖和迁移能力。本文就GRK6在不同恶性肿瘤中的作用进行了概述,探讨了GRK6与肿瘤发生发展相关的分子机制,为未来进一步揭示GRK6与恶性肿瘤之间的关系提供参考。 展开更多
关键词 grk6 恶性肿瘤 肿瘤迁移
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去棕榈酰化修饰下G蛋白偶联受体激酶6核定位信号鉴定
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作者 黄希仕 李瑞瑞 +3 位作者 黄岚珍 阳晶 吴群英 蒋晓山 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2018年第6期955-961,共7页
G蛋白偶联受体激酶6(G protein-coupled receptor kinase 6,GRK6)依赖去棕榈酰化修饰及特定核定位序列(nuclear localization sequence,NLS)实现胞核定位,但NLS的关键基团及其对激酶活性的影响尚不清楚。该研究首先通过构建一系列缺失... G蛋白偶联受体激酶6(G protein-coupled receptor kinase 6,GRK6)依赖去棕榈酰化修饰及特定核定位序列(nuclear localization sequence,NLS)实现胞核定位,但NLS的关键基团及其对激酶活性的影响尚不清楚。该研究首先通过构建一系列缺失突变子,初筛去棕榈酰化条件下GRK6的NLS结构域;然后采用点突变技术进一步确定NLS结构域中Lys(K)^(389)、Lys(K)^(390)、Lys(K)^(3913)个关键基团;最后通过检测内源性毒蕈碱M3受体介导的细胞内钙流,证实NLS突变子对M3受体介导的细胞内钙流信号的抑制作用无明显影响。该研究为进一步揭示GRK6胞核转运机制及其功能提供了有价值的信息。 展开更多
关键词 grk6 去棕榈酰化 核定位信号 G蛋白偶联受体激酶
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