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重组人GPx7的原核表达、纯化及其抗肿瘤活性检测 被引量:1
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作者 陈欣麟 钱秀萍 +3 位作者 朱建伟 戈梅 陈代杰 毛文伟 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1-9,共9页
研究大肠杆菌表达重组人谷胱甘肽过氧化物酶7(glutathione peroxidase 7,GPx7),并对纯化精制的重组人GPx7进行体内抗肿瘤活性检测。以质粒pCDNA3.1(-)-GPx7为模板,PCR扩增获得N-端去除信号肽的GPx7基因片段,构建的重组质粒pET24A-GPx7在... 研究大肠杆菌表达重组人谷胱甘肽过氧化物酶7(glutathione peroxidase 7,GPx7),并对纯化精制的重组人GPx7进行体内抗肿瘤活性检测。以质粒pCDNA3.1(-)-GPx7为模板,PCR扩增获得N-端去除信号肽的GPx7基因片段,构建的重组质粒pET24A-GPx7在E.coli BL21(DE3)中诱导表达。采用Sulfopropyl强阳离子交换层析和Superdex 75分子排阻层析纯化精制获得原核表达的重组人GPx7蛋白。该蛋白的体外催化活性微弱,但S180荷瘤小鼠连续14d注射GPx7蛋白后,肿瘤生长受到抑制,抑制率为29.26%,与对照组相比具有显著差异。实验结果表明,采用阳离子交换和分子排阻层析两步法可纯化精制原核表达的重组人GPx,重组人GPx7蛋白在荷瘤小鼠模型中表现出体内抗肿瘤活性。 展开更多
关键词 重组人gpx7 纯化 肿瘤增殖抑制
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Brazilin and Caesalpinia sappan L. extract protect epidermal keratinocytes from oxidative stress by inducing the expression of GPX7 被引量:7
2
作者 Hyung Seo Hwang Joong Hyun Shim 《Chinese Journal of Natural Medicines》 SCIE CAS CSCD 2018年第3期203-209,共7页
Caesalpinia sappan L., belonging to the family Leguminosae, is a medicinal plant that is distributed in Southeast Asia. The dried heartwood of this plant is used as a traditional ingredient of food, red dyes, and folk... Caesalpinia sappan L., belonging to the family Leguminosae, is a medicinal plant that is distributed in Southeast Asia. The dried heartwood of this plant is used as a traditional ingredient of food, red dyes, and folk medicines in the treatment of diarrhea, dysentery, tuberculosis, skin infections, and inflammation. Brazilin is the major active compound, which has exhibited various phar- macological effects, including anti-platelet activity, anti-hepatotoxicity, induction of immunological tolerance, and anti-inflammatory and antioxidant activities. The present study aimed to evaluate the antioxidant activity and expression of antioxidant enzymes of C. sappan L. extract and its major compound, brazilin, in human epidermal keratinocytes exposed to UVA irradiation. Our results indi- cated that C. sappan L. extract reduced UVA-induced H202 production via GPX7 activation. Moreover, brazilin exhibited anfioxidant effects that were similar to those of C. sappan L. via glutathione peroxidase 7 (GPX7), suggesting that C. sappan L. extract and its natural compound represent potential treatments for oxidative stress-induced photoaging of skin. 展开更多
关键词 Caesalpinia sappan L. BRAZILIN Ultraviolet gpx7 ANTIOXIDATIVE
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GPX7在人脑胶质瘤中的表达及临床意义 被引量:1
3
作者 王振国 董宁 +1 位作者 蒋京功 衡雪源 《山东医学高等专科学校学报》 2020年第1期11-13,I0003,共4页
目的探讨GPX7在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义。方法选取55例脑胶质瘤及10例正常脑组织标本,应用免疫组化法检测其中GPX7蛋白的表达,并分析其表达与相关指标以及生存预后的关系。结果 GPX7在正常脑组织及胶质瘤组织中的高表达率分别... 目的探讨GPX7在人脑胶质瘤组织中的表达及临床意义。方法选取55例脑胶质瘤及10例正常脑组织标本,应用免疫组化法检测其中GPX7蛋白的表达,并分析其表达与相关指标以及生存预后的关系。结果 GPX7在正常脑组织及胶质瘤组织中的高表达率分别为10%、54.5%,两者间差异具有统计学意义(χ^2=6.73,P=0.009);GPX7的表达与WHO等级有关(χ^2=5.145,P=0.023),与其他因素无关。生信分析结果显示:GPX7的表达在正常组织与胶质瘤组织中存在差异,其表达与患者预后有关。结论高表达的GPX7可作为脑胶质瘤患者预后的独立影响因素和治疗靶点。 展开更多
关键词 胶质瘤 谷胱甘肽过氧化物酶7 氧化应激 预后
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雷公藤甲素调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路对肺成纤维细胞及铁死亡的影响
4
作者 陈宏 宋倩男 +7 位作者 张伟 沙德香 王文增 刘皓宇 金甲一 冯大庆 齐鑫 吴国航 《陕西中医》 2026年第2期166-170,共5页
目的:探究雷公藤甲素(TPL)抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞向肺肌成纤维细胞转化的作用机制,及调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路对铁死亡的影响。方法:C57BL/6小鼠肺成纤维细胞,经细胞培养,饥饿24 h后,给予不同处理。对... 目的:探究雷公藤甲素(TPL)抑制转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肺成纤维细胞向肺肌成纤维细胞转化的作用机制,及调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路对铁死亡的影响。方法:C57BL/6小鼠肺成纤维细胞,经细胞培养,饥饿24 h后,给予不同处理。对照组不添加任何诱导及干预药物,模型组加入浓度为2.5 ng/ml的TGF-β1进行诱导处理,不同剂量TPL组在加入浓度为2.5 ng/ml的TGF-β1诱导的同时,分别加入雷公藤甲素低剂量(0.25 mg/kg)、雷公藤甲素中剂量(0.50 mg/kg)、雷公藤甲素高剂量(1.00 mg/kg)进行干预处理,在指定时间收取细胞。应用流式细胞术检测细胞凋亡率,胶原胶收缩法、细胞免疫荧光法等检测TPL抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞转化指标的变化情况,应用Western blot法测定铁死亡通路相关基因Nrf2、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、GPX4的表达水平。结果:TPL能下调肺成纤维细胞转化过程中α-平滑肌肌动蛋白表达量(P<0.05),同时能够有效抑制细胞肌丝的产生,并减弱肺成纤维细胞对胶原胶的收缩能力。与对照组比较,其余各组细胞凋亡率升高(P<0.05)。与TGF-β1组比较,雷公藤甲素高剂量组、雷公藤甲素中剂量组和雷公藤甲素低剂量组细胞凋亡率降低(P<0.05)。与雷公藤甲素中剂量组和雷公藤甲素低剂量组比较,雷公藤甲素高剂量组细胞凋亡率降低(P<0.05)。TPL显著升高肺组织中Nrf2、GPX4和SLC7A11的表达水平(P<0.05),且与雷公藤甲素中、低剂量组相比,雷公藤甲素高剂量组铁死亡相关指标Nrf2、GPX4、SLC7A11表达量更高(P<0.05)。结论:TPL能抑制肺成纤维细胞转化,抑制TGF-β1诱导的肺成纤维细胞凋亡,TPL通过调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路抑制铁死亡并有效缓解小鼠肺纤维化。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 转化生长因子-Β1 肺成纤维细胞 铁死亡 Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路
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The increasing expression of GPX7 related to the malignant clinical features leading to poor prognosis of glioma patients 被引量:2
5
作者 Jiawei Yao Xin Chen +7 位作者 Zhendong Liu Ruotian Zhang Cheng Zhang Quan Yang Penglei Yao Qiuyi Jiang Jianing Wu Shiguang Zhao 《Chinese Neurosurgical Journal》 CSCD 2021年第2期107-115,共9页
Background:Glioma is the most common malignant brain tumor in adults.The standard treatment scheme of glioma is surgical resection combined alternative radio-and chemotherapy.However,the outcome of glioma patients was... Background:Glioma is the most common malignant brain tumor in adults.The standard treatment scheme of glioma is surgical resection combined alternative radio-and chemotherapy.However,the outcome of glioma patients was unsatisfied.Here,we aimed to explore the molecular and biological function characteristics of GPX7 in glioma.Methods:The multidimensional data of glioma samples were downloaded from Chinese Glioma Genome Atlas(CGGA).RT-qPCR method was used to identify the expression status of GPX7.Kaplan–Meier curves and Cox regression analysis were used to explore the prognostic value of GPX7.Gene Set Enrichment Analysis(GSEA)was applied to investigate the GPX7-related functions in glioma.Results:The results indicated that the expression of GPX7 in glioma was higher compared to that in normal brain tissue.Univariate and multivariate Cox regression analyses confirmed that the expression value of GPX7 was an independent prognostic factor in glioma.The GSEA analysis showed that GPX7 was significantly enriched in the cell cycle pathway,ECM pathway,focal adhesion pathway,and toll-like receptor pathway.Conclusions:The GPX7 was recommended as an independent risk factor for patients diagnosed with glioma for the first time and GPX7 could be potentially used as the therapy target in future.Furthermore,we attempted to explore a potential biomarker for improving the diagnosis and prognosis of patients with glioma. 展开更多
关键词 gpx7 GLIOMA BIOMARKER SURVIVAL
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三七皂苷R_(1)通过激活SLC7A11/GPX4通路抑制铁死亡改善小鼠心肌缺血再灌注损伤后心脏重塑
6
作者 常猛 陈漪漪 +5 位作者 范亚红 廖佳佳 刘海朵 许滔 沈祥春 刘兴德 《中草药》 北大核心 2026年第1期175-184,共10页
目的探讨三七皂苷R_(1)(notoginsenoside R_(1),NGR_(1))对小鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)后心脏重塑的影响及其机制。方法通过结扎小鼠冠状动脉前降支并再灌注构建MIRI后心脏重塑模型,给予NGR_... 目的探讨三七皂苷R_(1)(notoginsenoside R_(1),NGR_(1))对小鼠心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemia-reperfusion injury,MIRI)后心脏重塑的影响及其机制。方法通过结扎小鼠冠状动脉前降支并再灌注构建MIRI后心脏重塑模型,给予NGR_(1)干预3周。测定小鼠心脏指数、心胫比;采用小动物超声仪检测左室舒张末期容积(left ventricular end-diastolic volume,LVEDV)、左室收缩末期容积(left ventricular end-systolic volume,LVESV)、左室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,LVFS);通过小麦胚芽凝集素(wheat germ agglutinin,WGA)荧光染色检测心肌细胞横截面积;Masson染色计算心脏胶原体积分数(collagen volume fraction,CVF);Western blotting检测心肌组织collagen I、collagen III、心房利钠肽(atrial natriuretic peptide,ANP)、脑钠肽(brain natriuretic peptide,BNP)、转铁蛋白受体1(transferrin receptor 1,TFR_(1))、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(acyl-CoA synthetase long-chain family member 4,ACSL4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase4,GPX4)的蛋白表达;通过网络药理学初步探讨NGR_(1)抑制MIRI后心脏重塑的可能机制;采用试剂盒检测心肌组织亚铁离子(Fe2+)、脂质过氧化物(lipid peroxide,LPO)含量;通过透射电镜观察心肌线粒体损伤情况。结果与假手术组比较,模型组小鼠心脏指数、心胫比、LVEDV、LVESV、CVF显著升高(P<0.05、0.01),心肌组织collagenI、collagenIII、ANP、BNP、TFR_(1)和ACSL4蛋白表达水平显著升高(P<0.01),Fe2+、LPO含量显著升高(P<0.05、0.01),线粒体膜密度增加及嵴减少,SLC7A11、GPX4蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。与模型组比较,NGR_(1)给药组小鼠心脏指数、心胫比、LVEDV、LVESV、CVF显著降低(P<0.05、0.01),心肌组织collagenI、collagenIII、ANP、BNP、TFR_(1)和ACSL4蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01),Fe2+、LPO含量显著降低(P<0.05、0.01),线粒体损伤改善,SLC7A11、GPX4蛋白表达水平显著升高(P<0.05、0.01)。结论NGR_(1)可显著改善小鼠MIRI后心脏重塑,其机制可能与激活SLC7A11/GPX4通路以抑制心肌细胞铁死亡有关。 展开更多
关键词 三七皂苷R_(1) SLC7A11/GPX4通路 铁死亡 心肌缺血再灌注损伤 心脏重塑
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丹葛解酲汤调控P53/SLC7A11/GPX4信号通路对乙醇诱导的大鼠BRL-3A肝细胞铁死亡的影响
7
作者 郭苏军 周波 马丽 《时珍国医国药》 北大核心 2026年第2期218-225,共8页
目的探讨丹葛解酲汤对乙醇诱导的BRL-3A细胞铁死亡影响及潜在作用机制。方法选用40只雄性SD大鼠制备含药血清。以不同浓度(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、5.0%)乙醇对BRL-3A细胞进行处理,通过CCK-8法选出细胞IC50的浓度以及时间... 目的探讨丹葛解酲汤对乙醇诱导的BRL-3A细胞铁死亡影响及潜在作用机制。方法选用40只雄性SD大鼠制备含药血清。以不同浓度(0.5%、1.0%、1.5%、2.0%、2.5%、3.0%、5.0%)乙醇对BRL-3A细胞进行处理,通过CCK-8法选出细胞IC50的浓度以及时间。不同浓度丹葛解酲汤含药血清(1.25%、2.5%、5%、10%)进行干预,CCK-8法选出细胞活力最佳的给药浓度。随后将细胞重新分组为空白组、模型组、丹葛解酲汤组、Fer-1组。比色卡法与分光法检测Fe^(2+)、GSH、MDA的含量;荧光探针检测ROS;免疫荧光法检测P53、FTH1、SLC7A11平均荧光强度;蛋白免疫印迹法和PCR法分别检测细胞中P53、SLC7A11、GPX4、NOX1、PTGS2、FTH1蛋白和mRNA的表达水平。统计分析采用单因素方差分析。结果与空白组相比,模型组的ROS、MDA含量和Fe^(2+)的水平升高(P<0.01);GSH水平下降(P<0.01);FTH1、SLC7A11平均荧光强度减弱(P<0.01),P53平均荧光强度增强(P<0.01);P53、NOX1、PTGS2 mRNA以及蛋白表达量增加(P<0.01),SLC7A11、FTH1、GPX4mRNA以及蛋白表达量减少(P<0.01)。与模型组相比,丹葛解酲汤含药血清组和Fer-1组的MDA、ROS含量和Fe^(2+)的水平降低(P<0.05,P<0.01);GSH水平升高(P<0.05,P<0.01);P53的平均荧光强度减弱(P<0.01),FTH1和SLC7A11平均荧光强度增强(P<0.01);P53、NOX1、PTGS2mRNA以及蛋白水平的表达减少,SLC7A11、GPX4、FTH1mRNA以及蛋白水平的表达增加(P<0.05,P<0.01)。结论丹葛解酲汤通过下调P53的表达,促进其下游SLC7A11蛋白的表达,促进GSH合成,GPX4表达增加,减少脂质过氧化反应,抑制铁死亡达到保护肝细胞的功效。 展开更多
关键词 酒精性肝病 丹葛解酲汤 铁死亡 P53/SLC7A11/GPX4信号通路 含药血清 BRL-3A细胞 乙醇
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艾灸对克罗恩病小鼠肠道铁死亡脂质过氧化及p53的影响
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作者 杨翟璨 刘密 +4 位作者 陆鹏徽 周竞颖 徐璇 王璐瑶 刘琼 《中国针灸》 北大核心 2026年第1期66-74,共9页
目的:观察艾灸“天枢”对克罗恩病(CD)小鼠肠道炎症损伤的影响,探讨肿瘤抑制因子p53调控溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽(GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)轴对CD小鼠肠道铁死亡脂质过氧化的影响。方法:将50只SPF级C57BL/6野生型... 目的:观察艾灸“天枢”对克罗恩病(CD)小鼠肠道炎症损伤的影响,探讨肿瘤抑制因子p53调控溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽(GSH)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)轴对CD小鼠肠道铁死亡脂质过氧化的影响。方法:将50只SPF级C57BL/6野生型小鼠随机分为空白组10只、造模组40只。造模组采用蒸馏水配制成浓度为2%的葡聚糖硫酸钠(DSS)溶液制备CD小鼠模型。空白组随机选1只、造模组随机选4只进行模型比较评价,确认模型制备成功后,造模组分为模型组、艾灸组、激艾组、抑制剂组,每组9只,空白组9只。艾灸组小鼠以细艾条灸双侧“天枢”15 min,每天1次,连续干预14 d;激艾组艾灸干预方法同艾灸组,同时于“天枢”穴周围皮下注射激动剂RITA(10 mg/kg),每天1次,连续注射14 d;抑制剂组于“天枢”穴周围皮下注射抑制剂Pifithrin-α(2.2 mg/kg),每天1次,连续注射14 d。干预前与干预后,观察各组小鼠一般情况、体质量和疾病活动指数(DAI)评分。干预后,HE染色法观察小鼠结肠组织形态;ELISA法检测小鼠血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-17和IL-6含量,以及小鼠结肠组织4-羟基壬烯酸(4-HNE)、丙二醛(MDA)、GSH、超氧化物歧化酶(SOD)和亚铁离子(Fe^(2+))含量;Western blot法检测小鼠结肠组织p53、SLC7A11、GPX4蛋白表达。结果:与空白组比较,模型组小鼠毛发干枯,蜷缩聚集,反应迟钝,摄食量下降,可见笼盒内及小鼠肛周出现黏液脓血,大便疏松呈糊状,粪便隐血试验呈阳性,小鼠体质量降低(P<0.05),DAI评分升高(P<0.05);小鼠结肠组织的结构完整性被破坏,腺体肿胀,排列混乱,可见大量炎性细胞浸润及肠上皮断裂缺失;血清TNF-α、IL-1β、IL-17、IL-6含量升高(P<0.05);结肠组织4-HNE、MDA、Fe^(2+)含量与p53蛋白表达升高(P<0.05),SOD、GSH含量与SLC7A11、GPX4蛋白表达降低(P<0.05)。与模型组比较,艾灸组、抑制剂组和激艾组小鼠疾病症状缓解,体质量升高(P<0.05),DAI评分降低(P<0.05);艾灸组和抑制剂组小鼠结肠组织肠上皮连续性均恢复,肠黏膜呈轻度肿胀,腺体排列较整齐,偶见少量炎性细胞散在分布;激艾组小鼠结肠组织肠黏膜肿胀程度较模型组减轻,但减轻程度不及艾灸组和抑制剂组,肠上皮连续性未恢复;艾灸组和抑制剂组血清TNF-α、IL-1β、IL-17、IL-6含量降低(P<0.05);结肠组织4-HNE、MDA、Fe^(2+)含量与p53的蛋白表达降低(P<0.05),GSH、SOD含量与SLC7A11、GPX4蛋白表达升高(P<0.05);激艾组血清TNF-α、IL-1β、IL-17含量降低(P<0.05),结肠组织MDA、Fe^(2+)含量和p53蛋白表达降低(P<0.05),GSH含量和SLC7A11、GPX4蛋白表达升高(P<0.05)。与艾灸组比较,激艾组和抑制剂组血清TNF-α、IL-1β、IL-17、IL-6含量与结肠组织4-HNE含量、p53蛋白表达均升高(P<0.05),体质量与结肠组织SOD、GSH含量以及SLC7A11、GPX4蛋白表达降低(P<0.05);激艾组结肠组织MDA、Fe^(2+)含量升高(P<0.05)。与抑制剂组比较,激艾组血清IL-6含量、结肠组织4-HNE、MDA含量和p53蛋白表达升高(P<0.05),体质量与结肠组织SOD、GSH含量以及GPX4蛋白表达降低(P<0.05)。结论:艾灸CD小鼠“天枢”能够减轻肠道炎症,可能是通过下调p53蛋白表达,增强SLC7A11/GSH/GPX4通路活性,减少脂质过氧化物的产生,从而维持肠道铁稳态,减轻结肠组织铁死亡。 展开更多
关键词 克罗恩病 艾灸 铁死亡 P53 SLC7A11/GSH/GPX4信号通路
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雷公藤甲素抑制KLF4/SLC7A11/GPX4通路促进铁死亡诱导肾毒性的机制研究
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作者 陈海燕 潘薇 +4 位作者 刘仲豪 周淑菁 阳波 李丹 付成效 《湖南中医药大学学报》 2026年第2期248-258,共11页
目的基于体内和体外实验,探讨雷公藤甲素通过诱导铁死亡介导肾毒性的作用,并阐明其分子机制。方法随机将18只小鼠分为对照组(CON组)、雷公藤甲素低剂量组(LTP组)和雷公藤甲素高剂量组(HTP组),每组6只。CON组、LTP组和HTP组分别腹腔注射... 目的基于体内和体外实验,探讨雷公藤甲素通过诱导铁死亡介导肾毒性的作用,并阐明其分子机制。方法随机将18只小鼠分为对照组(CON组)、雷公藤甲素低剂量组(LTP组)和雷公藤甲素高剂量组(HTP组),每组6只。CON组、LTP组和HTP组分别腹腔注射含1‰DMSO的生理盐水、0.2 mg·kg^(-1)雷公藤甲素和0.4 mg·kg^(-1)雷公藤甲素,持续14 d。体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),予以雷公藤甲素、Fer-1和APTO-253干预,将其分为雷公藤甲素0 nmol/L组(TP 0 nmol/L组,无药物处理)、雷公藤甲素40 nmol/L组(TP 40 nmol/L组,40 nmol/L雷公藤甲素处理24 h)、雷公藤甲素80 nmol/L组(TP 80 nmol/L组,80 nmol/L雷公藤甲素处理24 h)和雷公藤甲素160 nmol/L组(TP 160 nmol/L组,160 nmol/L雷公藤甲素处理24 h)、对照组(CON组,无药物处理)、雷公藤甲素组(TP组,80 nmol/L雷公藤甲素处理24 h)、Fer-1组(2μmol/L Fer-1处理24 h)、Fer-1+雷公藤甲素组(Fer-1+TP组,2μmol/L Fer-1处理2 h后再加入80 nmol/L雷公藤甲素处理24 h)、APTO-253组(1μmol/L APTO-253处理24 h)、APTO-253+雷公藤甲素组(APTO-253+TP组,1μmol/L APTO-253处理24 h后再加入80 nmol/L雷公藤甲素处理24 h)。第14天雷公藤甲素处理后,所有动物称量体质量;采用MTT法检测HK-2细胞活力;生化试剂盒检测小鼠血清中尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量及肾组织中谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、Fe^(2+)水平;HE染色观察小鼠肾组织病理变化;透射电镜观察小鼠肾组织线粒体变化;DCFH-DA探针检测HK-2细胞ROS水平;Western blot检测小鼠肾组织中中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白(NGAL)、Krüppel样因子4(KLF4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白的表达水平。结果与CON组相比,LTP组和HTP组小鼠体质量、肾组织GSH水平、肾组织KLF4、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平均降低(P<0.05,P<0.01),血清BUN和Cr含量、肾组织NGAL蛋白表达水平、肾组织ROS、MDA和Fe^(2+)水平均升高(P<0.05,P<0.01)。与LTP组相比,HTP组小鼠体质量、肾组织KLF4、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平均降低(P<0.05),血清Cr含量、肾组织NGAL蛋白表达水平、肾组织ROS、MDA和Fe^(2+)水平均升高(P<0.05,P<0.01)。与TP 0 nmol/L组相比,TP 40、80、160 nmol/L组ROS荧光强度增强,GSH水平降低(P<0.05,P<0.01),MDA水平升高(P<0.05,P<0.01);TP 80、160 nmol/L组Fe^(2+)水平升高(P<0.05,P<0.01),KLF4、SLC7A11、GPX4蛋白表达水平均降低(P<0.05,P<0.01);TP 40 nmol/L组KLF4蛋白表达水平降低(P<0.05)。与TP 40 nmol/L组相比,TP 80、160 nmol/L组ROS荧光强度增强,GSH水平降低(P<0.05),Fe^(2+)水平升高(P<0.05,P<0.01);TP 160 nmol/L组MDA水平增加(P<0.01),KLF4、SLC7A11、GPX4蛋白表达水平均降低(P<0.05);TP 80 nmol/L组、SLC7A11GPX4蛋白表达水平均降低(P<0.05)。与TP 80 nmol/L组相比,TP 160 nmol/L组ROS荧光强度增强,GSH水平降低(P<0.05),MDA水平和Fe^(2+)水平均升高(P<0.05),KLF4、SLC7A11、GPX4蛋白表达水平均降低(P<0.05)。与CON组相比,TP组细胞活力、GSH水平、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平均降低(P<0.01),ROS荧光强度增强,MDA和Fe^(2+)水平均升高(P<0.01);与TP组相比,Fer-1+TP组和APTO-253+TP组细胞活力、GSH水平、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平均升高(P<0.05),ROS荧光强度减弱,MDA水平降低(P<0.05);Fer-1+TP组Fe^(2+)水平降低(P<0.05)。结论雷公藤甲素通过下调KLF4抑制下游SLC7A11与GPX4的表达,进而诱导肾小管上皮细胞发生铁死亡,这是其引发肾毒性的关键分子机制。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 肾毒性 铁死亡 Krüppel样因子4 SLC7A11/GPX4信号通路
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健脾化瘀方含药血清调控SREBP1/SLC7A11/GPX4轴促进铁死亡抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖、侵袭的机制
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作者 陈鑫球 朱小玉 +6 位作者 黄翰林 方崇锴 姚瑞伟 罗锐 刘抒伟 钟崇 赵希琳 《中药新药与临床药理》 北大核心 2026年第1期1-11,共11页
目的 基于调控固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)轴促进铁死亡,探讨健脾化瘀方含药血清抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖、侵袭的机制。方法 将20只SD大鼠随机分为给药组、对照组(每组10... 目的 基于调控固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)/溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)轴促进铁死亡,探讨健脾化瘀方含药血清抑制胰腺癌PANC-1细胞增殖、侵袭的机制。方法 将20只SD大鼠随机分为给药组、对照组(每组10只),分别灌胃健脾化瘀方药液(26.8 g·kg^(-1)·d^(-1))及生理盐水(每日1次,连续7 d),制备健脾化瘀方含药血清及空白血清。体外培养PANC-1细胞,采用CCK-8法检测不同浓度(0%、0.5%、2.5%、5%、10%、15%、20%)健脾化瘀方含药血清干预24 h后的细胞存活率,并选择合适的药物浓度进行后续实验。采用克隆形成实验检测细胞增殖能力;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力;荧光探针法检测细胞内中性脂质、活性氧(ROS)及脂质过氧化水平;微量法检测细胞亚铁离子(Fe^(2+))、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平;RT-qPCR及Western Blot法检测细胞SREBP1、SLC7A11、GPX4、N-cadherin、E-cadherin、Vimentin mRNA及蛋白表达水平。结果 (1)与空白对照组比较,2.5%、5%、10%、15%、20%健脾化瘀方含药血清可显著抑制PANC-1细胞存活率(P<0.05,P<0.01),且呈浓度依赖性;健脾化瘀方含药血清的IC50值为15.40%,选取5%、10%、15%含药血清浓度作为健脾化瘀方低、中、高剂量进行后续实验。(2)与空白对照组比较,健脾化瘀方低、中、高剂量组及吉西他滨(5μmol·L^(-1))组PANC-1细胞的相对克隆形成数、24 h细胞迁移率及侵袭细胞数均显著降低(P<0.05,P<0.01)。与空白对照组比较,健脾化瘀方低、中、高剂量组PANC-1细胞中ROS、Fe^(2+)、MDA水平显著升高(P<0.05,P<0.01),GSH水平显著降低(P<0.01),细胞内脂质过氧化水平显著升高(P<0.05,P<0.01),中性脂质积累显著减少(P<0.05,P<0.01),SREBP1、GPX4、SLC7A11、N-cadherin、Vimentin mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05,P<0.01),E-cadherin mRNA及蛋白表达水平显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论 健脾化瘀方含药血清可以有效地抑制胰腺癌PANC-1细胞的增殖、迁移及侵袭,其作用机制可能与抑制SREBP1表达,减少细胞内脂质累积,诱导胰腺癌细胞铁死亡有关。 展开更多
关键词 健脾化瘀方含药血清 胰腺癌 PANC-1细胞 增殖 侵袭 SREBP1/SLC7A11/GPX4轴 铁死亡 大鼠
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重楼总皂苷通过SLC7A11/GPX4信号通路介导铁死亡抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭
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作者 潘建超 杨湘 张文清 《中国处方药》 2026年第1期20-24,共5页
目的探究重楼总皂苷能否通过溶质运载蛋白7家族成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路介导铁死亡抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭。方法细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测不同浓度重楼总皂苷对细胞活性的影响;将细胞随机分为NC组(阴... 目的探究重楼总皂苷能否通过溶质运载蛋白7家族成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路介导铁死亡抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭。方法细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测不同浓度重楼总皂苷对细胞活性的影响;将细胞随机分为NC组(阴性对照组)、PPS组(重楼总皂苷处理组)、Fer-1组(铁死亡抑制剂对照组)、PPS+Fer-1组(抑制剂预处理+重楼总皂苷共处理组)。CCK-8和Transwell小室法检测细胞增殖和侵袭能力;检测细胞中Fe^(2+)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)水平;2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酯(DCFH-DA)探针检测活性氧(ROS)水平;蛋白质印迹检测细胞中SLC7A11、GPX4蛋白表达。结果和0μmol/L浓度的重楼总皂苷相比,10、20、40、80μmol/L浓度的重楼总皂苷细胞存活率明显降低,且80μmol/L浓度的重楼总皂苷细胞存活率降低最为显著(P<0.05),因此选用80μmol/L浓度的重楼总皂苷进行后续研究。和NC组相比,PPS组细胞存活率和细胞侵袭数目、GSH含量、细胞中SLC7A11、GPX4蛋白表达均显著降低,Fe^(2+)含量、MDA含量和ROS相对荧光强度均明显增加(P<0.05);Fer-1组细胞侵袭数目、GSH含量、细胞中SLC7A11、GPX4蛋白表达明显增加,细胞中Fe^(2+)含量、MDA含量均明显降低(P<0.05);和Fer-1组相比,PPS+Fer-1组细胞存活率和细胞侵袭数目、GSH含量、细胞中SLC7A11、GPX4蛋白表达显著降低,Fe^(2+)含量、MDA含量和ROS相对荧光强度均明显增加(P<0.05)。结论重楼总皂苷可通过调控SLC7A11/GPX4通路诱导铁死亡,从而抑制乳腺癌细胞增殖和侵袭。 展开更多
关键词 重楼总皂苷 SLC7A11/GPX4通路 铁死亡 乳腺癌 增殖 侵袭
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外泌体通过NRF2/SLC7A11/GPX4通路调控铁死亡治疗小鼠缺血性脑卒中
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作者 徐英韬 王蒙蒙 +3 位作者 林平 迟海涛 王怡 白鹰 《实验动物与比较医学》 2026年第1期20-31,共12页
目的通过电凝法阻断小鼠大脑中动脉构建中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,研究人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)来源的外泌体(exosome,EXO)改善缺血性脑卒中及调控神经细胞铁死... 目的通过电凝法阻断小鼠大脑中动脉构建中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion,MCAO)模型,研究人羊膜间充质干细胞(human amniotic mesenchymal stem cells,hAMSCs)来源的外泌体(exosome,EXO)改善缺血性脑卒中及调控神经细胞铁死亡(ferroptosis)损伤的作用机制。方法将32只6~8周龄SPF级雄性C57BL/6J小鼠随机分为假手术组(Sham)、模型组(MCAO)、模型+生理盐水组(MCAO+NaCl)、模型+外泌体组(MCAO+EXO),每组8只。使用电凝法建立小鼠大脑MCAO模型,Sham组暴露大脑中动脉但不实施电凝;在电凝造模24 h前,向MCAO+EXO组小鼠尾静脉注射100µL来自hAMSCs培养上清液的外泌体(9.5×1011个/mL),向MCAO+NaCl组小鼠尾静脉注射同体积生理盐水。造模24 h后,采用Longa神经功能缺损评分法评价各组小鼠的运动神经功能损害程度;通过2,3,5-三苯基氯化四氮唑染色法评估各组小鼠脑梗死体积占比差异;通过HE染色法评估各组小鼠缺血部位脑组织中神经细胞形态学差异。通过微量比色法评估各组小鼠脑梗死区及其周围组织中亚铁离子(Fe2+)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、总谷胱甘肽(total glutathione,total GSH)、氧化型谷胱甘肽(oxidized glutathione,GSSG)和还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)的含量差异。通过实时荧光定量PCR法检测各组小鼠脑梗死区及其周围组织中铁死亡相关因子包括核因子-红细胞系2相关因子2(nuclear factorerythroid 2-related factor 2,NRF2)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)的mRNA表达水平。通过蛋白质印迹法检测各组小鼠脑梗死区及其周围组织中NRF2、SLC7A11和GPX4蛋白表达水平。结果相较于MCAO组,MCAO+EXO组的Longa评分显著降低(P<0.01)。MCAO组小鼠脑组织出现明显梗死灶,MCAO+EXO组相较MCAO组的脑梗死体积占比显著减少(P<0.001)。与Sham组相比,MCAO组出现神经细胞空泡变性,细胞核固缩、碎裂,细胞核结构不清晰,神经细胞排列杂乱。相较于MCAO组,MCAO+EXO组小鼠的神经细胞结构较为完整,细胞核大而规整,位于细胞中央。MCAO组小鼠的脑梗死区及周围组织中Fe2+和MDA含量较Sham组显著增加(P<0.001),MCAO+EXO组的Fe2+和MDA含量较MCAO组显著减少(P<0.01)。相较于Sham组,MCAO模型组小鼠的total GSH、GSSG、GSH含量均显著减少(P<0.01);相较于MCAO组,MCAO+EXO组小鼠的total GSH、GSH含量显著增加(P<0.001),GSSG含量无显著变化(P>0.05)。相较于Sham组,MCAO组小鼠的NRF2、SLC7A11、GPX4 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01,P<0.001);相较于MCAO组,MCAO+EXO组的NRF2、SLC7A11、GPX4 mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。结论在小鼠MCAO模型中,尾静脉注射hAMSCs来源的外泌体可以改善小鼠运动功能,减少梗死面积,保护神经细胞形态,降低神经损伤程度。外泌体可能通过激活NRF2/SLC7A11/GPX4通路,减少MCAO模型小鼠的脑神经细胞铁死亡而发挥保护作用。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 大脑中动脉闭塞 铁死亡 外泌体 NRF2/SLC7A11/GPX4通路 C57BL/6J小鼠
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儿茶素通过调控SLC7A11/GPX4通路对脂多糖诱导小鼠乳房炎性损伤的保护作用研究
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作者 王琳莹 仝江 +8 位作者 张秋云 姚欣惠 王莉 温浩杰 苏庆 李晓 童超 王学兵 王红利 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期1023-1032,共10页
【目的】探究儿茶素对乳房炎小鼠的保护作用,研究谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)信号通路对铁死亡的调节作用。【方法】选取20只分娩后7~10 d雌... 【目的】探究儿茶素对乳房炎小鼠的保护作用,研究谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)信号通路对铁死亡的调节作用。【方法】选取20只分娩后7~10 d雌性小鼠,采用随机分组法将其分为5组:空白对照组、脂多糖(LPS)造模组、儿茶素低剂量组(40 mg/kg)、儿茶素高剂量组(80 mg/kg)及地塞米松阳性对照组。儿茶素低、高剂量组小鼠按相应剂量浓度灌胃给予儿茶素,其余组小鼠给予同等剂量生理盐水,每只0.3 mL,连续7 d。灌胃完成后,阳性对照组小鼠经腹腔注射100μL 2 mg/mL地塞米松。2 h后,除空白对照组外,其余各组小鼠于第4对乳头左右侧经乳头乳导管各注射50μL 0.2 mg/mL LPS建立乳房炎模型。比较造模后各组小鼠的体重变化,通过HE染色观察各组小鼠乳腺组织病理学变化,采用生化试剂盒检测乳腺组织中丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。利用Western blotting检测小鼠乳腺组织中GPX4、SLC7A11和铁蛋白重链(FTH)蛋白表达量,并采用免疫荧光检测乳腺组织中FTH、GPX4蛋白荧光强度。【结果】与空白对照组相比,LPS组小鼠体重呈下降趋势,而儿茶素处理组小鼠体重表现增加趋势。HE染色结果显示,空白对照组小鼠乳腺腺泡结构完整,未见炎性细胞浸润;LPS组小鼠乳腺腺泡内有大量炎性细胞浸润以及腺泡萎缩;儿茶素高、低剂量组和地塞米松阳性对照组小鼠乳腺损伤明显减轻。与空白对照组相比,LPS组小鼠乳腺组织中MDA含量显著升高、SOD活性显著降低(P<0.05)。与LPS组相比,儿茶素高、低剂量组小鼠乳腺组织中MDA含量显著下降、SOD活性显著升高(P<0.05)。Western blotting结果显示,与空白对照组相比,LPS组小鼠乳腺组织中GPX4、SLC7A11、FTH蛋白表达量均显著下降(P<0.05)。与LPS组相比,儿茶素高、低剂量组小鼠乳腺组织中GPX4、SLC7A11、FTH蛋白表达量显著升高(P<0.05)。免疫荧光检测结果显示,与空白对照组相比,LPS组小鼠乳腺组织中GPX4、FTH蛋白相对荧光强度显著降低(P<0.05)。与LPS组相比,儿茶素高剂量组小鼠乳腺组织中GPX4、FTH蛋白相对荧光强度显著增加(P<0.05)。【结论】儿茶素能显著减轻LPS诱导的小鼠乳房炎损伤,其保护作用与抑制乳房炎小鼠的铁死亡密切相关。儿茶素通过上调SLC7A11表达,增强机体抗氧化能力,进而提高GPX4活性,最终减少MDA积累,从而发挥对铁死亡的抑制作用。 展开更多
关键词 儿茶素 乳房炎 铁死亡 SLC7A11/GPX4信号通路
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基于Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路探究泄浊解毒方通过抑制铁死亡和缓解肠黏膜损伤治疗溃疡性结肠炎的机制
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作者 揣强 翟文静 +8 位作者 贾苏杰 郎晓猛 任杰 康欣 任士杰 刘星池 刘欣 蒋晓红 刘建平 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2026年第1期160-169,共10页
目的:基于核因子E_(2)相关因子2/溶质载体家族7成员/谷胱甘肽过氧化物酶4(Nrf2/SLC7A11/GPX4)信号通路探究泄浊解毒方通过抑制铁死亡和缓解肠黏膜损伤治疗溃疡性结肠炎(UC)的机制研究。方法60只雄性SD大鼠分为正常组,模型组,泄浊解毒方... 目的:基于核因子E_(2)相关因子2/溶质载体家族7成员/谷胱甘肽过氧化物酶4(Nrf2/SLC7A11/GPX4)信号通路探究泄浊解毒方通过抑制铁死亡和缓解肠黏膜损伤治疗溃疡性结肠炎(UC)的机制研究。方法60只雄性SD大鼠分为正常组,模型组,泄浊解毒方高、低剂量组(26.64、13.32 g·kg^(-1)),铁死亡抑制剂组(Ferrostatin-1,0.005 g·kg^(-1)),美沙拉嗪组(0.27 g·kg^(-1)),每组10只,采用三硝基苯磺酸(TNBS)-乙醇灌肠复制UC大鼠模型,正常组、模型组生理盐水灌胃,其余各组按相对药量灌胃,分别灌胃7 d。观察各组一般情况、疾病活动指数(DAI)评分、结肠长度、黏膜损伤指数(CMDI)评分,苏木素-伊红(HE)染色观察各组结肠组织病理改变,透射电镜(TEM)观察各组肠黏膜及线粒体形态、免疫荧光(IF)检测各组肠组织闭合蛋白(Occludin)、紧密连接蛋白-1(Claudin-1)、黏蛋白2(MUC2)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)表达水平,乳酸检测生化试剂盒或ELISA检测各组活性氧(ROS)、亚铁离子(Fe^(2+))、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、4-羟基壬烯醛(4-HNE)、二胺氧化酶(DAO)、D-乳酸(D-LA)表达水平,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测各组Nrf2、SLC7A11、GPX4、Occludin、Claudin-1、MUC2、E-cadherin mRNA表达水平,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组Nrf2、磷酸化(p)-Nrf2、SLC7A11、GPX4蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠精神萎靡,反应迟钝,脓血便,DAI评分、结肠长度、CMDI评分、TNF-α、IL-6、ROS、Fe^(2+)、MDA、4-HNE、DAO、D-LA的表达显著升高(P<0.01),Occludin、Claudin-1、MUC2、E-cadherin免疫荧光值及mRNA、IL-10、GSH、Nrf2、p-Nrf2、SLC7A11、GPX4、mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.01),经治疗后各给药组均有不同程度的改善,其中泄浊解毒方高剂量组改善的最为显著(P<0.01)。结论泄浊解毒方可能通过调控Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路,抑制肠上皮细胞铁死亡从而缓解肠黏膜损伤治疗UC。 展开更多
关键词 泄浊解毒方 铁死亡 核因子E_(2)相关因子2/溶质载体家族7成员/谷胱甘肽过氧化物酶4(Nrf2/SLC7A11/GPX4)信号通路 溃疡性结肠炎
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基于ACSL4/SLC7A11/GPX4通路探讨解毒祛瘀滋阴方抑制铁死亡治疗狼疮性肾炎的作用机制
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作者 陈华玲 金吴萌 +1 位作者 胡长锋 卢璐 《浙江中医药大学学报》 2026年第1期1-15,共15页
[目的]探讨解毒祛瘀滋阴方通过抑制肾脏铁死亡治疗狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)的作用机制。[方法]18只雌性MRL/lpr狼疮小鼠随机分为模型组、激素组(5 mg·kg^(-1))和解毒祛瘀滋阴方组(18.2 g·kg^(-1));6只MRL/MpJ小鼠作为... [目的]探讨解毒祛瘀滋阴方通过抑制肾脏铁死亡治疗狼疮性肾炎(lupus nephritis,LN)的作用机制。[方法]18只雌性MRL/lpr狼疮小鼠随机分为模型组、激素组(5 mg·kg^(-1))和解毒祛瘀滋阴方组(18.2 g·kg^(-1));6只MRL/MpJ小鼠作为正常组,连续干预8周。干预结束后,计算各组小鼠脾脏和淋巴结指数;检测血清BUN、Cr、尿微量白蛋白(urine albumin,U-ALB)以及尿总蛋白(urine total protein,UTP)水平;ELISA法检测抗双链DNA(double-stranded DNA,dsDNA)抗体、抗核抗体(anti-nuclear antibody,ANA)、IL-17A、IL-6、IL-10水平;HE染色、免疫组化和免疫荧光法观察肾脏病理形态学变化;透射电镜观察肾脏皮质和髓质的线粒体超微结构;免疫印迹法和RT-qPCR分别检测小鼠肾脏中长链酰基辅酶A合成酶4(long-chain acyl-CoA synthetase 4,ACSL4)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 members 11,SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)蛋白及mRNA的表达。以肾小管上皮细胞(renal tubular epithelial cells,RTECs)为研究对象,均加入脂质活性氧生成剂叔丁基过氧化氢(tert-butyl hydroperoxide,TBHP),来源于MRL/lpr小鼠的RTECs加入解毒祛瘀滋阴方含药血清和甲泼尼龙悬液进行干预,检测各组细胞内脂质过氧化、活性氧(reactive oxygen species,ROS)和Fe^(2+)水平,免疫印迹法检测皮质RTECs的铁死亡相关蛋白水平。[结果]与模型组比较,各治疗组小鼠脾脏和淋巴结肿大显著缓解(P<0.05,P<0.01);血清BUN、Cr、抗dsDNA抗体、ANA、IL-17A、IL-6、IL-10、U-ALB、UTP水平显著降低(P<0.05,P<0.01);肾脏线粒体损伤明显减轻、炎症细胞浸润减少,补体C3和IgG沉积明显减少(P<0.01)。解毒祛瘀滋阴方治疗后肾脏ACSL4蛋白及mRNA表达均下降,SLC7A11蛋白及mRNA和GPX4 mRNA表达均升高(P<0.05,P<0.01)。体外实验提示,MRL/lpr小鼠肾皮质RTECs的脂质过氧化、ROS水平和Fe^(2+)水平显著高于正常小鼠(P<0.05,P<0.01),TBHP处理后差异更加明显(P<0.05,P<0.01)。解毒祛瘀滋阴方能够降低细胞内脂质过氧化和ROS水平,减少铁积累,抑制ACSL4的表达,增加SLC7A11和GPX4的表达(P<0.05,P<0.01)。[结论]解毒祛瘀滋阴方通过调控ACSL4/SLC7A11/GPX4通路干预铁死亡,减轻肾脏RTECs的氧化损伤,提高抗氧化能力,从而缓解LN的肾脏损害。 展开更多
关键词 狼疮性肾炎 解毒祛瘀滋阴方 铁死亡 肾小管上皮细胞 线粒体 ACSL4/SLC7A11/GPX4 肾皮质 肾髓质
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黄芩苷调节HIF-1α/SLC7A11/GPX4轴抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞形成 被引量:4
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作者 于宁 宋囡 +2 位作者 隋国媛 曹媛 贾连群 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第5期909-918,共10页
目的:观察黄芩苷(baicalin)调节缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)轴影响ox-LDL诱导的巨噬... 目的:观察黄芩苷(baicalin)调节缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α,HIF-1α)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)轴影响ox-LDL诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞铁死亡的分子机制。方法:用100μg/mL氧化型低密度脂蛋白(oxidized low-density lipoprotein,ox-LDL)作用于RAW264.7巨噬细胞24 h诱导为泡沫细胞,采用黄芩苷和(或)铁死亡抑制剂ferrostatin-1(Fer-1)干预相应时间。油红O染色检测各组脂滴形成情况;透射电镜观察细胞线粒体超微结构;荧光显微镜观察细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)、脂质过氧化物和Fe2+荧光强度;比色法检测细胞丙二醛(malonaldehyde,MDA)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平;Western blot法检测细胞HIF-1α、SLC7A11和GPX4蛋白水平。结果:与空白对照组比较,ox-LDL组泡沫细胞形成,有大量脂滴,线粒体结构明显肿胀,嵴变短或消失,细胞内ROS、脂质过氧化物和Fe2+荧光强度明显增强,细胞内MDA水平明显升高,GSH水平明显降低;细胞内HIF-1α蛋白表达显著升高,SLC7A11及GPX4蛋白表达显著降低(P<0.05)。与ox-LDL组比较,黄芩苷+ox-LDL组和Fer-1+ox-LDL组脂滴明显减少,线粒体结构显著改善,细胞内ROS、脂质过氧化物、Fe2+荧光强度和MDA水平明显降低,GSH水平明显升高;细胞内HIF-1α蛋白表达显著降低,SLC7A11和GPX4蛋白表达显著升高(P<0.05)。与黄芩苷+ox-LDL组比较,黄芩苷+Fer-1+ox-LDL组脂滴显著减少,线粒体结构趋于完整,细胞内ROS、脂质过氧化物和Fe2+荧光强度明显降低,细胞内MDA水平明显降低,GSH水平明显升高;细胞内HIF-1α蛋白表达显著降低;SLC7A11和GPX4蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论:黄芩苷通过调节HIF-1α/SLC7A11/GPX4轴抑制ox-LDL诱导的巨噬细胞源性泡沫细胞铁死亡。 展开更多
关键词 黄芩苷 动脉粥样硬化 泡沫细胞 铁死亡 HIF-1α/SLC7A11/GPX4轴
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基于Nrf2/SLC7A11/GPX4通路探讨葛根芩连汤通过抑制铁死亡改善非酒精性脂肪性肝病作用机制 被引量:7
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作者 骆倩 罗涛 +6 位作者 宋针珍 梁芳 黎俊森 彭淑红 曹岚 赵海平 章常华 《中国比较医学杂志》 北大核心 2025年第2期72-84,共13页
目的基于核转录因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路,通过体内外实验研究葛根芩... 目的基于核转录因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)/溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)信号通路,通过体内外实验研究葛根芩连汤治疗非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的作用机制。方法以高脂饲料长期喂养大鼠24周完成NAFLD的诱导建模,成模大鼠随机分为正常组、模型组、葛根芩连汤高、中、低剂量组和二甲双胍组。自第25周起,按照分组情况灌胃相应药物两周直至取材。生化试剂盒检测各组大鼠肝组织氧化应激水平:丙二醛(malondialdehyde,MDA)和谷胱甘肽(glutathione,GSH)。Fe^(2+)试剂盒检测各组大鼠肝组织Fe^(2+)含量。实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR)法检测各组大鼠肝组织Nrf2、血红素加氧酶1(heme oxygenase-1,HO-1)、SLC7A11、谷胱甘肽合成酶(glutathione synthetase,GSS)、GPX4和酰基辅酶A合成化酶4(acyl coenzyme A synthase,ACSL4)mRNA的表达水平。采用1 mmol/L游离脂肪酸(FFA)诱导肝癌HepG2细胞产生脂质堆积模拟NAFLD构建体外模型,加入不同浓度葛根芩连汤和二甲双胍含药血清进行治疗。油红O染色检测各组细胞脂质堆积情况。试剂盒测定不同组HepG2细胞MDA和GSH含量。细胞专用Fe^(2+)试剂盒检测各组细胞Fe^(2+)含量。qRT-PCR法检测各组细胞中Nrf2、HO-1、SLC7A11、GSS、GPX4和ACSL4 mRNA的表现水平。结果动物实验中,模型组大鼠肝组织MDA和Fe^(2+)含量较正常组显著升高,GSH含量显著降低(P<0.01);葛根芩连汤高、中剂量组和二甲双胍组可大幅度降低MDA和Fe^(2+)含量,升高GSH含量,与模型组比较(P<0.01,P<0.05)。与模型组相比,葛根芩连汤高、中剂量组和二甲双胍组均能增加Nrf2、HO-1、GSS、GPX4 mRNA的表达水平,降低ACSL4 mRNA的水平(P<0.01,P<0.05)。在细胞实验中,HepG2细胞模型组红色脂滴较正常组明显增多,葛根芩连汤和二甲双胍的使用导致脂滴明显减少。试剂盒检测发现,较正常组而言,HepG2细胞模型组MDA和Fe^(2+)含量明显上升,GSH含量显著降低(P<0.01),而与模型组相比,葛根芩连汤各剂量组和二甲双胍组均可显著降低MDA和Fe^(2+)含量(P<0.01),葛根芩连汤高、中、低剂量组和二甲双胍组增加GSH含量(P<0.01,P<0.05)。qRT-PCR实验表明,葛根芩连汤高剂量组中的Nrf2、GSS、GPX4和SLC7A11,中剂量组中的Nrf2、HO-1和SLC7A11,低剂量组中的HO-1、SLC7A11和GSS以及二甲双胍组中的GSS、Nrf2、HO-1、GPX4和SLC7A11 mRNA表达水平较模型组均显著增加(P<0.01,P<0.05)。葛根芩连汤中、低剂量组和二甲双胍组ACSL4 mRNA表达量均显著降低(P<0.01,P<0.05)。结论葛根芩连汤可通过抑制铁死亡来改善非酒精性脂肪肝病,其作用机制可能与调节Nrf2/SLC7A11/GPX4信号通路有关。 展开更多
关键词 葛根芩连汤 非酒精性脂肪性肝病 铁死亡 氧化应激 Nrf2/SLC7A11/GPX4通路
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PM_(2.5)暴露经Nrf2/SLC7A11/GPX4轴调控铁死亡加重博来霉素诱导的小鼠特发性肺纤维化 被引量:3
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作者 丁锦泵 孔德琪 +6 位作者 黄慧敏 谷雨 陈悦冰 赵瑞丽 刘素晓 刘学芳 李亚 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第2期333-339,共7页
目的探讨PM_(2.5)暴露经Nrf2/SLC7A11/GPX4轴调控铁死亡加重博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的小鼠特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)机制。方法40只C57BL/6J小鼠随机分为对照(Control)组、BLM组、PM_(2.5)组、BLM+PM_(2... 目的探讨PM_(2.5)暴露经Nrf2/SLC7A11/GPX4轴调控铁死亡加重博来霉素(bleomycin,BLM)诱导的小鼠特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis,IPF)机制。方法40只C57BL/6J小鼠随机分为对照(Control)组、BLM组、PM_(2.5)组、BLM+PM_(2.5)组、Sulforaphane(SFN,Nrf2激动剂)组,每组8只,以BLM诱导IPF模型,并PM_(2.5)暴露2周。测定小鼠肺功能,检测肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量,观察肺组织病理形态学改变;检测肺组织活性氧(reactive oxygen species,ROS)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)、亚铁离子(Fe^(2+))、谷胱甘肽(glutathione,GSH)等水平;采用qPCR和蛋白免疫印迹法检测肺组织COL-1、α-SMA、Nrf2、SLC7A11、GPX4基因和蛋白表达水平。结果与Control组比较,BLM组、PM_(2.5)组小鼠肺功能明显降低(P<0.01),肺组织出现肺泡壁断裂、增厚,大量炎症细胞浸润和胶原沉积等肺纤维化特征性病理改变,肺组织HYP、Fe^(2+)、ROS、MDA明显升高(P<0.05,P<0.01),GSH水平明显降低(P<0.01),Nrf2、SLC7A11、GPX4基因和蛋白明显降低(P<0.01),COL-1、α-SMA基因和蛋白明显升高(P<0.01);BLM+PM_(2.5)组上述损伤均较BLM组(P<0.05)、PM_(2.5)组有不同程度的加剧(P<0.01);SFN组上述损伤均较BLM+PM_(2.5)组有不同程度改善(P<0.05,P<0.01)。结论PM_(2.5)暴露可加重BLM诱导的小鼠IPF,其机制可能与通过Nrf2/SLC7A11/GPX4轴调控铁死亡有关。 展开更多
关键词 特发性肺纤维化 PM_(2.5) 铁死亡 Nrf2/SLC7A11/GPX4通路 脂质过氧化 活性氧
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复方金果胃康散通过调控SLC7A11/GPX4轴诱导铁死亡改善慢性萎缩性胃炎的细胞与动物实验研究 被引量:1
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作者 孟凯强 齐帆 +3 位作者 宋健 沈舒文 朱金秀 杨娇娇 《中药材》 北大核心 2025年第4期957-964,共8页
目的:探究复方金果胃康散通过干预SLC7A11/GPX4轴促进慢性萎缩性胃炎(CAG)模型细胞铁死亡的作用和治疗CAG大鼠的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为正常对照组10只,造模组50只,采用180μg/mL的1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG)溶液联... 目的:探究复方金果胃康散通过干预SLC7A11/GPX4轴促进慢性萎缩性胃炎(CAG)模型细胞铁死亡的作用和治疗CAG大鼠的作用机制。方法:将60只SD大鼠随机分为正常对照组10只,造模组50只,采用180μg/mL的1-甲基-3-硝基-1-亚硝基胍(MNNG)溶液联合不规律饮食,并以10 mL/kg的剂量给予2%水杨酸钠溶液,诱导建立CAG大鼠模型。成模大鼠随机分为模型组、维酶素组和金果胃康散低、中、高剂量组,连续灌胃6 w后,免疫比浊法测定血清PGⅠ、PGⅡ水平;ELISA检测大鼠血清TNF-α、IL-6水平;HE染色观察胃黏膜组织病理学;Western Blot检测胃黏膜组织铁死亡标志物SLC7A11、GPX4蛋白表达。使用MNNG诱导GES1发生上皮-间充质转化制备CAG细胞模型,CCK-8法检测复方金果胃康散对CAG模型细胞最佳干预浓度和时间。实验设CAG模型组、Fer-1(铁死亡抑制剂)组、RSL3(铁死亡诱导剂)组、RSL3+Fer-1组、复方金果胃康散组、复方金果胃康散+Fer-1组。试剂盒检测SOD、MDA、GSH水平,线粒体膜电位荧光法检测线粒体功能,RT-qPCR检测炎性标志物IL-6 mRNA表达,Western Blot检测铁死亡标志物蛋白表达。结果:体内实验结果显示与正常对照组比较,模型组大鼠胃黏膜上皮细胞不连续,有明显的炎症反应,黏膜下层水肿,黏膜腺体萎缩,血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ水平降低,TNF-α、IL-6水平升高,胃黏膜组织SLC7A11、GPX4蛋白表达差异无统计学意义。与模型组比较,维酶素组和复方金果胃康散组胃黏膜组织学改变明显改善,血清PGⅠ、PGⅡ、PGⅠ/PGⅡ水平升高,TNF-α、IL-6水平降低,胃黏膜组织SLC7A11、GPX4蛋白表达降低。体外实验结果显示复方金果胃康散干预CAG模型细胞最佳浓度为250μg/mL,最佳干预时间为24 h。与模型组比较,复方金果胃康散组SOD、GSH水平降低,MDA水平升高,IL-6 mRNA和GPX4蛋白表达降低,FSP1、DHODH蛋白表达升高,细胞膜电位降低。铁死亡抑制剂Fer-1可逆转复方金果胃康散对GPX4蛋白表达的降低作用。结论:“毒瘀交阻”理论下形成的复方金果胃康散可通过调控SLC7A11/GPX4轴,干预GPX4蛋白表达,诱导萎缩性胃炎细胞发生铁死亡,抑制相关炎症因子的表达,恢复胃蛋白酶原表达,从而治疗CAG。 展开更多
关键词 复方金果胃康散 慢性萎缩性胃炎 大鼠 细胞 铁死亡 SLC7A11/GPX4
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基于SLC7A11/GPX4信号通路探讨“通督调神”针刺对抑郁症模型大鼠海马神经元铁死亡的影响 被引量:3
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作者 钱婷婷 邹玲 +6 位作者 高志 吴宇 赵艳标 李难 刘辉 孙梅香 孙培养 《中国针灸》 北大核心 2025年第8期1120-1127,共8页
目的:观察“通督调神”针刺对抑郁症模型大鼠抑郁样行为及溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路介导的海马神经元铁死亡的影响,探讨其治疗抑郁症的作用机制。方法:从30只SPF级雄性SD大鼠中选取24只,采用随... 目的:观察“通督调神”针刺对抑郁症模型大鼠抑郁样行为及溶质载体家族7成员11(SLC7A11)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)信号通路介导的海马神经元铁死亡的影响,探讨其治疗抑郁症的作用机制。方法:从30只SPF级雄性SD大鼠中选取24只,采用随机数字表法将大鼠分为正常组(8只)、造模组(16只),造模组大鼠进行连续28 d的慢性不可预知性温和应激(CUMS)刺激,建立抑郁症大鼠模型。造模结束后,将造模成功的16只大鼠随机分成模型组、针刺组,各8只。针刺组予“通督调神”针刺,穴取“大椎”“水沟”“百会”“神庭”,每日1次,连续干预6 d,第7天休息,共干预4周。于造模前、造模后、干预后行蔗糖偏好实验及旷场实验对大鼠进行行为学检测;干预后,采用HE及尼氏染色法观察大鼠海马神经元形态,Western blot法检测大鼠海马GPX4、SLC7A11、铁蛋白(Ferritin)、酰基辅酶A合成酶长链家族4(ACSL4)蛋白表达,实时荧光定量PCR法检测大鼠海马GPX4、SLC7A11、Ferritin、ACSL4 mRNA表达,比色法测定大鼠海马铁含量。结果:造模后,模型组、针刺组大鼠蔗糖偏好率及旷场实验运动总距离、直立次数、水平穿越格数低于正常组(P<0.01);干预后,针刺组大鼠蔗糖偏好率及旷场实验运动总距离、直立次数、水平穿越格数高于模型组(P<0.01,P<0.05)。与正常组比较,模型组大鼠海马坏死细胞数量增多、尼氏小体数量减少;与模型组比较,针刺组大鼠海马神经元固缩、坏死数量减少,细胞排列更加整齐,且神经元结构较分明,基质致密,血管数量稍丰富,尼氏小体数量增多。与正常组比较,模型组海马GPX4、SLC7A11蛋白及mRNA相对表达量降低(P<0.01),海马Ferritin、ACSL4蛋白及mRNA相对表达量升高(P<0.01);与模型组比较,针刺组海马GPX4、SLC7A11蛋白及m RNA相对表达量升高(P<0.01,P<0.05),海马Ferritin、ACSL4蛋白及m RNA相对表达量降低(P<0.01)。与正常组比较,模型组大鼠海马铁含量增多(P<0.01);与模型组比较,针刺组大鼠海马铁含量减少(P<0.05)。结论:“通督调神”针刺可改善抑郁症模型大鼠抑郁样行为,其机制可能与调节SLC7A11/GPX4信号通路、抑制海马神经元铁死亡相关。 展开更多
关键词 抑郁症 “通督调神”针刺 SLC7A11/GPX4信号通路 神经元铁死亡 慢性不可预知性温和应激
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