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MAPKs在anti-β_2 GPI/β_2 GPI刺激THP-1细胞表达TF过程中的作用探讨 被引量:2
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作者 陈东东 周红 +4 位作者 解鸿翔 张先梅 夏龙飞 王婷 王海波 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期99-103,共5页
目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)在anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的活化及其作用。方法:利用荧光定量PCR(Real-time PCR)、TF活性试剂盒等分别检测anti-β2 ... 目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(Mitogen-activated protein kinases,MAPKs)在anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导单核细胞株THP-1表达组织因子(TF)中的活化及其作用。方法:利用荧光定量PCR(Real-time PCR)、TF活性试剂盒等分别检测anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF mRNA及TF活性,Western blot检测细胞表达p38、磷酸化-p38(p-p38)、ERK1/2、磷酸化-ERK1/2(p-ERK1/2)、JNK、磷酸化-JNK(p-JNK)的情况。进一步采用p38、ERK1/2、JNK抑制剂(SB203580、U0126、SP600125)观察是否能阻断anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF。结果:Anti-β2 GPI/β2 GPI复合物(100μg/ml)能够显著增强THP-1细胞表达TF,并使p-p38、p-ERK1/2、p-JNK水平显著升高(P<0.05 vs control);其引发的MAPKs磷酸化具有时间效应性,均在刺激30分钟时达到高峰;对应的特异抑制剂SB203580(10μmol/L)、U0126(5μmol/L)、SP600125(90 nmol/L)单独或合并处理THP-1细胞后,anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导细胞TF mRNA表达及TF活性的效应明显被阻断(P<0.01 vs control)。结论:Anti-β2 GPI/β2 GPI复合物诱导THP-1细胞表达TF过程中,MAPKs被激活进而发挥重要作用。 展开更多
关键词 抗磷脂综合征 Anti-β2 gpi/β2 gpi 丝裂原活化蛋白激酶 组织因子
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EGCG干预抗β_2GPI/β_2GPI复合物对THP-1细胞的诱导活化作用 被引量:2
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作者 王婷 周红 +2 位作者 解鸿翔 夏龙飞 穆原 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期430-433,共4页
目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1细胞)活化的作用。方法用一定剂量的EGCG、脂多糖(LPS)、抗β2GPI/β2GPI复合物等不同刺激物处理THP-1细胞,实时荧光定量PCR检... 目的探讨表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导人急性单核细胞白血病细胞系(THP-1细胞)活化的作用。方法用一定剂量的EGCG、脂多糖(LPS)、抗β2GPI/β2GPI复合物等不同刺激物处理THP-1细胞,实时荧光定量PCR检测细胞组织因子(TF)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达;发色底物法检测TF活性;ELISA测定TNF-α蛋白的表达。结果 50 mg/L EGCG能抑制抗β2GPI/β2GPI复合物刺激的THP-1细胞TF mRNA和活性的表达(t值为6.97、3.89,P均<0.05),同时下调该复合物诱导的THP-1细胞TNF-αmRNA和蛋白质的表达水平(t值为3.23、4.65,P均<0.05)。结论 EGCG可干预抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞TF及TNF-α的表达,抑制THP-1细胞活化。 展开更多
关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 抗β2gpi β2gpi复合物 组织因子 人急性单核细胞白血病细胞系 肿瘤坏死因子-Α
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Glycosylphosphatidylinositol(GPI)anchoring controls cell wall integrity,immune evasion and surface localization of ChFEM1 for infection of Cochlibolus heterostrophus
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作者 Hong Hu Tiangu Liu +5 位作者 Xinyun Xie Fuyan Li Caiyun Liu Jintao Jiang Zhigang Li Xiaolin Chen 《Journal of Integrative Agriculture》 2025年第11期4310-4323,共14页
Glycosylphosphatidylinositol(GPI)anchoring represents a fundamental post-translational modification in eukaryotic cells.In fungi,this modification facilitates diverse biological functions through protein targeting to ... Glycosylphosphatidylinositol(GPI)anchoring represents a fundamental post-translational modification in eukaryotic cells.In fungi,this modification facilitates diverse biological functions through protein targeting to the cell wall,yet research on its roles in plant pathogenic fungi remains limited.This study elucidates the function of GPI anchoring in the maize fungal pathogen Cochlibolus heterostrophus.The research demonstrates widespread accumulation of GPI-anchored proteins in hyphae,appressorium and infection hyphae of C.heterostrophus.Deletion of ChGPI7,encoding a crucial enzyme in GPI anchor biosynthesis,substantially reduced vegetative growth,conidiation,and virulence through impaired appressorium formation and invasive growth.The ΔChgpi7 mutants exhibited marked deficiencies in cell wall integrity,leading to decreased stress resistance.Both ChGPI7 deletion and hydro fluoric acid(HF)pyridine treatment eliminated cell wall GPI-anchored proteins and exposed chitin,indicating that GPI-anchored proteins shield chitin from host immune recognition.Analysis identified 124 predicted GPI-anchored proteins in C.heterostrophus,including the putative cell wall glycoprotein ChFEM1.The deletion of ChFEM1 similarly reduced virulence and compromised infection structures and cell wall integrity.Additionally,ChGPI7 influenced both the cell wall localization and protein abundance of ChFEM1.These findings demonstrate that GPI anchoring mediates cell wall integrity and immune evasion during C.heterostrophus infection. 展开更多
关键词 Cochlibolus heterostrophus gpi anchor immune evasion cell wall integrity cell wall protein fungal infection
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GPI锚——一种复杂的蛋白质翻译后修饰 被引量:1
4
作者 李庆伟 宋涛 +2 位作者 勾萌 滕洪明 卢佳丽 《辽宁师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2019年第2期215-222,共8页
糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol-anchored proteins,GPI-APs)是一种在真核生物细胞膜表面普遍存在的蛋白质,最大特点是没有跨膜结构域和胞质尾区,通过翻译后修饰产生的GPI结构锚定在细胞膜上.GPI锚结构复杂,由磷... 糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白(glycosylphosphatidylinositol-anchored proteins,GPI-APs)是一种在真核生物细胞膜表面普遍存在的蛋白质,最大特点是没有跨膜结构域和胞质尾区,通过翻译后修饰产生的GPI结构锚定在细胞膜上.GPI锚结构复杂,由磷酸氨基乙醇联结部、核心糖链和磷酸肌醇尾组成.核心糖链中的甘露糖、葡萄糖胺、磷酸肌醇残基可不同程度地被磷酸氨基乙醇和其他糖类修饰.尽管被精确解析出的GPI锚结构还较少,但已在分子水平上证明GPI锚具有非常多样的生物学功能,如信号传导、细胞黏附、蛋白质转运和免疫反应等等.近年来,由于实验技术的进步,GPI锚的相关研究也在逐步深入.对GPI锚独特的翻译后修饰及其功能的最新研究进行分析归纳. 展开更多
关键词 糖基磷脂酰肌醇锚定蛋白 gpi锚结构 gpi锚功能 信号传导
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在CVI环境下开发基于GPIB总线的自动测试系统示例 被引量:5
5
作者 程刚 谢弛 《电测与仪表》 北大核心 2003年第2期28-30,共3页
介绍了系统的组成,论述了在windows环境下采用LabWindows/CVI平台开发基于GPIB总线的自动测试系统实例。
关键词 gpiB总线 LabWindows/CV gpiB接口
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GPI锚定蛋白与白血病 被引量:1
6
作者 杨智英 唐建华 《实用预防医学》 CAS 2009年第4期1325-1328,共4页
羧基末端结合有糖基化磷脂酰肌醇(GPI)结构的膜蛋白,称为GPI锚定蛋白(glycosylphosphatidy-linositol-anchored protein);它们功能广泛,涉及细胞识别、生长、分化和程序性死亡等重要生命过程,与许多疾病有着一定的联系。人体内水解GPI... 羧基末端结合有糖基化磷脂酰肌醇(GPI)结构的膜蛋白,称为GPI锚定蛋白(glycosylphosphatidy-linositol-anchored protein);它们功能广泛,涉及细胞识别、生长、分化和程序性死亡等重要生命过程,与许多疾病有着一定的联系。人体内水解GPI锚定蛋白中的肌醇磷酸酯键的只有糖基化磷脂酰肌醇特异性磷脂酶D(glycosylphosphatidy-linositol spe-cific phospholipaseD GPI-PLD)。本文概述了近年来有关GPI锚定蛋白的研究状况,包括它的结构、组成、功能和水解酶GPI-PLD,GPI锚定蛋白与白血病的发生、发展及治疗等的相关性研究。 展开更多
关键词 gpi锚定蛋白 自血病 gpi—PLD
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From flatness, GPI observers, GPI control and flat filters to observer-based ADRC 被引量:8
7
作者 Hebertt SIRA-RAMIREZ 《Control Theory and Technology》 EI CSCD 2018年第4期249-260,共12页
In this article, we establish the route taken by the author, and his research group, to bring differential flatness to the realm of active disturbance rejection control (ADRC). This avenue entitled: 1) generalized... In this article, we establish the route taken by the author, and his research group, to bring differential flatness to the realm of active disturbance rejection control (ADRC). This avenue entitled: 1) generalized proportional integral observers (GPIO), as natural state and disturbance observers for fiat systems, 2) generalized proportional integral (GPI) control, provided with extra integrations, to produce a modular controller known as flat filters (FF's) and, finally, 3) the establishing of an equivalence of observer based ADRC with FF's. The context is that of pure integration systems. The obtained controllers depend only on the order of the flat system and they are to be directly used on the basis of the available flat output signal in a universal, modular, fashion. The map is complemented with the relevant references where the intermediate techniques were illustrated and developed, over the years, in connection with laboratory experimental implementations. 展开更多
关键词 FLATNESS gpi observers gpi control reduced order gpi observers fiat filters
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氟伐他汀抑制抗β_2GPI/β_2GPI复合物诱导的THP-1细胞活化
8
作者 王婷 周红 +2 位作者 解鸿翔 夏龙飞 穆原 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1550-1556,共7页
为了探讨氟伐他汀对抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞活化的干预作用及机制,采用脂多糖(LPS,500μg·L-1)、抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg·L-1)等活化单核细胞株THP-1并用氟伐他汀(0、1、5、10及50 mg·L-1)对细胞进行... 为了探讨氟伐他汀对抗β2GPI/β2GPI复合物诱导THP-1细胞活化的干预作用及机制,采用脂多糖(LPS,500μg·L-1)、抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg·L-1)等活化单核细胞株THP-1并用氟伐他汀(0、1、5、10及50 mg·L-1)对细胞进行预处理。采用实时定量PCR(RT-qPCR)检测细胞组织因子(TF)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA表达,发色底物法检测TF活性,ELISA方法测定TNF-α蛋白的表达,蛋白印迹检测细胞NF-κB抑制蛋白(IκB-α)和磷酸化NF-κB p65的蛋白水平变化。结果显示,抗β2GPI/β2GPI复合物(100 mg·L-1)能诱导THP-1细胞活化以及TF和TNF-α表达上调。氟伐他汀(50 mg·L-1)能抑制复合物诱导的THP-1细胞TF(mRNA和活性)及TNF-α(mRNA和蛋白)的表达(P<0.05),上调IκB-α表达及抑制NF-κB p65磷酸化。结果表明,氟伐他汀通过干预信号分子IκB-α和磷酸化NF-κB p65的表达,抑制抗β2GPI/β2GPI复合物诱导的细胞TF及TNF-α的表达,抑制THP-1细胞活化。 展开更多
关键词 氟伐他汀 抗β2gpi Β2gpi 组织因子 肿瘤坏死因子-Α
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GPI锚的结构、功能及GPI锚定B7分子在肿瘤免疫治疗中的应用 被引量:7
9
作者 熊茂林 《国外医学(免疫学分册)》 2003年第5期230-233,共4页
GPI锚定蛋白是一种通过GPI结构锚定于细胞膜表面而不跨越其磷脂膜双层的蛋白。利用GPI结构能将目的蛋白B7(CD80 )分子直接整合到肿瘤细胞表面 ,因为不需要自身合成B7,克服了传统基因转导法诸如基因转染效率低又耗时 ,以及转染后可能不... GPI锚定蛋白是一种通过GPI结构锚定于细胞膜表面而不跨越其磷脂膜双层的蛋白。利用GPI结构能将目的蛋白B7(CD80 )分子直接整合到肿瘤细胞表面 ,因为不需要自身合成B7,克服了传统基因转导法诸如基因转染效率低又耗时 ,以及转染后可能不表达等缺点 ,肿瘤细胞提供了共刺激信号激发免疫系统 ,诱导抗肿瘤免疫 ,在临床应用上有广阔的前景。 展开更多
关键词 gpi gpi锚定蛋白 B7 肿瘤 免疫治疗
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基于GPI算法力矩反馈的采摘机器人抓取力柔顺控制方法
10
作者 姚江云 王宽田 +1 位作者 覃溪 梁世华 《机电工程》 北大核心 2025年第7期1301-1308,共8页
采摘机器人抓取空间轨迹复杂,导致了抓取力柔顺控制及轨迹规划具有很大的非线性特征。针对这一问题,提出了一种基于广义策略迭代(GPI)算法力矩反馈下的采摘机器人抓取力柔顺控制方法。首先,考虑了采摘机器人动力学模型的动态补偿惯性力... 采摘机器人抓取空间轨迹复杂,导致了抓取力柔顺控制及轨迹规划具有很大的非线性特征。针对这一问题,提出了一种基于广义策略迭代(GPI)算法力矩反馈下的采摘机器人抓取力柔顺控制方法。首先,考虑了采摘机器人动力学模型的动态补偿惯性力、重力、抓取力的联合作用,建立了机器人力学模型;其次,采用反馈控制器、内环力控制器联合控制方法设计了力矩反馈算法,采用GPI算法对机器人柔性力矩反馈控制过程进行了寻优计算;然后,采用逆运动学解析和运动任务规划的方法,建立了力矩反馈下抓取力柔顺控制规划补偿算法,采用模型前馈补偿提高了力矩柔性控制能力;最后,搭建了实验平台,对力矩反馈及轨迹跟踪性能进行了测试,并对实验结果进行了分析。研究结果表明:相比于其他方法,GPI力矩反馈方法在3个支链上的力矩误差平均减小了9.51%、6.82%和4.46%,在采摘自由空间运动位置的跟踪精度分别提升了24.12%和42.86%,提高了机器人抓取力的柔顺控制和轨迹跟踪精度。 展开更多
关键词 机械臂 广义策略迭代 力矩反馈控制模型 抓取力 柔顺控制补偿算法
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β2GPI及其抗体与血栓形成的相关性研究 被引量:2
11
作者 张耀中 王晓微 +2 位作者 许丽辉 韩梅 贺文 《生命的化学》 CAS CSCD 2016年第2期158-164,共7页
血栓形成是临床疾病中常见的一种病理过程,以血栓形成为基本病理特征的心、脑血管疾病已超过恶性肿瘤,成为威胁人类生命的第一杀手。如何有效防治血栓,也是临床治疗中比较棘手的一个问题。目前对血栓形成的机理还有待进一步阐明。β2糖... 血栓形成是临床疾病中常见的一种病理过程,以血栓形成为基本病理特征的心、脑血管疾病已超过恶性肿瘤,成为威胁人类生命的第一杀手。如何有效防治血栓,也是临床治疗中比较棘手的一个问题。目前对血栓形成的机理还有待进一步阐明。β2糖蛋白I(β2GPI)及其抗体是血栓形成发生发展的重要因素之一,可影响内皮细胞、单核细胞、血小板和纤溶系统,促进血液凝固,导致血栓发生。如果能对β2GPI及其抗体进行有效控制,将有助于防治血栓性疾病。本文就近年来β2GPI及其抗体与血栓形成的相关性研究予以综述,希望能为寻找一种安全有效防治血栓性疾病的新途径提供可能。 展开更多
关键词 Β2gpi 抗β2gpi抗体 血栓形成 相关性
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中草药添加剂饲喂猪肉中CPK,GPI活性和肉质关系的研究 被引量:18
12
作者 韩剑众 董文明 +2 位作者 葛长荣 高士争 黄启超 《云南农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第1期91-93,共3页
对添加中草药和常规抗生素试验猪的背最长肌进行相关酶测定 ,发现磷酸肌酸激酶 (CPK) ,磷酸葡萄糖异构酶 (GPI)的活性 ,试验组明显高于对照组 ,分别提高了 30 5 4 %和 2 0 0 4 % (P <0 0 5 ) .屠宰及肉质试验表明 ,试验组的瘦肉... 对添加中草药和常规抗生素试验猪的背最长肌进行相关酶测定 ,发现磷酸肌酸激酶 (CPK) ,磷酸葡萄糖异构酶 (GPI)的活性 ,试验组明显高于对照组 ,分别提高了 30 5 4 %和 2 0 0 4 % (P <0 0 5 ) .屠宰及肉质试验表明 ,试验组的瘦肉率及眼肌面积分别比对照组提高 5 79%和 8 4 8% (P <0 0 5 ) ,而脂肪率、膘厚、失水率和贮存损失则分别下降 31 4 0 % ,2 8 2 1% ,5 0 0 3%和 2 0 35 % (P <0 0 5 ) . 展开更多
关键词 肉质 中草药添加剂 肥育 胴体品质 磷酸肌酸激酶 CPK 磷酸葡萄糖异构酶 gpi
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β_(2)GPI/抗β_(2)GPI抗体复合物激活THP-1细胞内TRIF途径 被引量:5
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作者 解鸿翔 周红 +5 位作者 王海波 陈东东 王婷 张先梅 夏龙飞 穆原 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1280-1283,1287,共5页
目的:观察β_(2)GPI/抗β_(2)GPI抗体复合物能否激活单核细胞株THP-1的TRIF途径,以探讨TRIF依赖途径在抗磷脂综合征(APS)发病机制中的作用。方法:采用一定剂量β_(2)GPI/抗β_(2)GPI抗体复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总... 目的:观察β_(2)GPI/抗β_(2)GPI抗体复合物能否激活单核细胞株THP-1的TRIF途径,以探讨TRIF依赖途径在抗磷脂综合征(APS)发病机制中的作用。方法:采用一定剂量β_(2)GPI/抗β_(2)GPI抗体复合物刺激THP-1细胞一定时间,收集细胞总RNA及总蛋白,荧光定量PCR(RT-PCR)检测细胞TRIF mRNA水平,Western blot检测细胞TRIF蛋白表达情况;进一步观察TLR4途径抑制剂-TAK-242是否干预β_(2)GPI/抗β_(2)GPI抗体复合物对TRIF的诱导表达以及相关细胞因子IL-6、IL-8、TNF-α的表达。结果:β_(2)GPI/抗β_(2)GPI抗体复合物(100 mg/L)能够诱导THP-1细胞表达TRIF(mRNA及蛋白),并显示时间效应,分别于刺激1 h和2 h时TRIF mRNA及蛋白表达至高峰。TAK-242(5μmol/L)能够明显抑制β_(2)GPI/抗β_(2)GPI抗体复合物对THP-1细胞TRIF的诱导表达,同时抑制IL-6、IL-8、TNF-α等炎症因子的表达。结论:TRIF依赖的TLR4途径参与了β_(2)GPI/抗β_(2)GPI抗体复合物对THP-1细胞的激活,提示其在抗磷脂综合征的病理机制中发挥一定作用。 展开更多
关键词 抗磷脂综合征 β_(2)gpi/抗β_(2)gpi抗体 TLR4 TRIF 炎症因子
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B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗安全性及抗肿瘤效应研究 被引量:4
14
作者 何向锋 王净 +6 位作者 余方流 赵枫姝 蔡凯 张洪义 陈峻崧 陈登宇 窦骏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期779-782,共4页
目的:评估B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗用于C57BL/6小鼠的安全性及其诱导的抗肿瘤免疫效应。方法:应用免疫荧光、FCM检测瘤苗细胞ESAT-6-GPI的表达情况;以Western blot方法检测瘤苗细胞IL-21的表达情况;动物实验检测瘤苗体内应用的安全... 目的:评估B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗用于C57BL/6小鼠的安全性及其诱导的抗肿瘤免疫效应。方法:应用免疫荧光、FCM检测瘤苗细胞ESAT-6-GPI的表达情况;以Western blot方法检测瘤苗细胞IL-21的表达情况;动物实验检测瘤苗体内应用的安全性;制备荷瘤鼠术后免疫模型,评价瘤苗免疫效果。结果:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞表面有靶抗原ESAT-6-GPI表达,并分泌IL-21。于C57BL/6小鼠皮下接种2×105个B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗细胞,60天内未见致瘤,但能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应。结论:B16F10/ESAT-6-GPI-IL-21瘤苗致瘤性明显下降,低剂量应用具有安全性,能够诱导小鼠产生有效的抗肿瘤免疫效应。 展开更多
关键词 B16F10细胞 IL-21 ESAT-6 gpi 肿瘤疫苗
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GPI锚定蛋白介导嵌合新城疫病毒样颗粒的组装 被引量:6
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作者 李金斗 钱晶 +7 位作者 丁佳欣 徐小洪 秦岭松 黄蕾 武淑婷 丁伟 尹仁福 丁壮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期969-975,共7页
当前嵌合病毒样颗粒(chimeric VLPs,cVLPs)策略主要基于融合序列的基因转染水平,但该方法存在多基因表达操控困难、锚定蛋白无法定量等问题。糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)是一种蛋白与细胞膜结合的方式,改造的GPI... 当前嵌合病毒样颗粒(chimeric VLPs,cVLPs)策略主要基于融合序列的基因转染水平,但该方法存在多基因表达操控困难、锚定蛋白无法定量等问题。糖基磷脂酰肌醇(glycosylphosphatidylinositol,GPI)是一种蛋白与细胞膜结合的方式,改造的GPI锚定蛋白可以被定量嵌合至真核细胞膜表面。因此,本研究以可溶性蛋白、Ⅰ型跨膜蛋白、Ⅱ型跨膜蛋白为嵌合对象,以GPI锚定方式将外源蛋白嵌合至新城疫病毒样颗粒(NDV VLPs)表面。流式细胞术检测可见GPI锚定蛋白可锚定至各真核细胞表面,并且与孵育时间呈正相关性;各组装GPI-cVLPs在电镜观察下具有完整的病毒粒子结构,与野生型NDV相似;经Western blot检测分析各GPI-cVLPs与NDV阳性血清和His单抗发生反应。综上,该GPI锚定策略能有效将外源蛋白嵌合至NDV VLPs,可为NDV VLP载体平台的应用奠定基础。 展开更多
关键词 gpi锚定蛋白 嵌合 新城疫病毒样颗粒 组装
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IL-21 gpi和sGM-CSF共同修饰的瘤苗构建及其抗肿瘤效应 被引量:4
16
作者 赵枫姝 胡卫华 +5 位作者 窦骏 褚莉莉 何向锋 余方流 吴昀 刘春生 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期508-512,共5页
目的:构建膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF(sGM-CSF)双表达瘤苗,并对其抗肿瘤效应及其机制作初步探讨。方法:用分子生物学方法构建双表达IL-21 gpi和sGM-CSF重组质粒,将鉴定过的重组质粒以脂质体转染B16F10细胞制成瘤苗,用流式细胞仪检测转... 目的:构建膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF(sGM-CSF)双表达瘤苗,并对其抗肿瘤效应及其机制作初步探讨。方法:用分子生物学方法构建双表达IL-21 gpi和sGM-CSF重组质粒,将鉴定过的重组质粒以脂质体转染B16F10细胞制成瘤苗,用流式细胞仪检测转染瘤苗IL-21 gpi和sGM-CSF的表达。以瘤苗治疗荷瘤鼠,经观察小鼠肿瘤体积、生存率来分析瘤苗的抗瘤性,并检测了瘤苗治疗鼠的细胞免疫活性。结果:正确构建了pRSC/IL-21 gpi-sGM-CSF重组质粒,转染细胞可很好地表达膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF,制备的瘤苗能有效地发挥抗肿瘤效应,其机制与瘤苗治疗鼠的脾细胞增殖活性、NK细胞及CD8+细胞细胞毒活性增强有关。结论:成功构建了具有抗肿瘤活性的膜锚定IL-21和分泌性GM-CSF双表达瘤苗,为进一步抗肿瘤免疫治疗研究奠定了基础。 展开更多
关键词 瘤苗 IL-21 gpi GM-CSF
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表达ESAT-6-gpi和IL-21的B16F10瘤苗的构建及其活性鉴定 被引量:4
17
作者 何向锋 王净 +4 位作者 余方流 赵枫姝 张洪义 曹文虎 窦骏 《现代免疫学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期358-362,共5页
为构建膜表达糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定的结核杆菌早期分泌靶抗原6 kD(ESAT-6)和分泌IL-21的B16F10瘤苗并鉴定其活性,利用重叠PCR法构建pIRES-ESAT-6-gpi/IL-21重组质粒,以脂质体转染重组质粒到B16F10细胞,G418筛选出阳性克隆,用RT-PC... 为构建膜表达糖基化磷脂酰肌醇(GPI)锚定的结核杆菌早期分泌靶抗原6 kD(ESAT-6)和分泌IL-21的B16F10瘤苗并鉴定其活性,利用重叠PCR法构建pIRES-ESAT-6-gpi/IL-21重组质粒,以脂质体转染重组质粒到B16F10细胞,G418筛选出阳性克隆,用RT-PCR、免疫荧光、FCM和Western blot检测瘤苗细胞靶抗原表达,用瘤苗细胞培养上清刺激小鼠CD8+T细胞,检测瘤苗所分泌IL-21的生物学活性。结果表明,pIRES-ESAT-6-gpi/IL-21重组质粒DNA测序正确,B16F10-ESAT-6-gpi/IL-21瘤苗细胞目的基因ESAT-6表达于瘤苗细胞表面,增殖能力未受外源基因导入影响,分泌的IL-21具有生物学活性,为研究膜表达ESAT-6和分泌表达IL-21瘤苗的抗瘤效应奠定了基础。 展开更多
关键词 B16F10 IL-21 ESAT-6 gpi 肿瘤疫苗
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抗β2GPI抗体促进载脂蛋白E缺陷小鼠血管炎症及血栓相关分子的表达 被引量:10
18
作者 朱晓洁 周红 +5 位作者 王晓燕 蔡谦谦 何超 夏龙飞 张贵婷 欧阳航 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期295-299,共5页
目的探讨抗β2糖蛋白I(β2GPI)抗体在载脂蛋白E缺陷(ApoE^(-/-))小鼠表达动脉粥样硬化相关炎症因子和血栓相关分子过程中的作用。方法将ApoE^(-/-)小鼠实施颈动脉套环手术后,随机分为生理盐水组、100μg抗β2GPI抗体组、100μg同源对照... 目的探讨抗β2糖蛋白I(β2GPI)抗体在载脂蛋白E缺陷(ApoE^(-/-))小鼠表达动脉粥样硬化相关炎症因子和血栓相关分子过程中的作用。方法将ApoE^(-/-)小鼠实施颈动脉套环手术后,随机分为生理盐水组、100μg抗β2GPI抗体组、100μg同源对照抗体(兔IgG)组以及100μgβ2GPI/抗β2GPI抗体复合物组。各组均给以高脂饮食,且每7 d腹腔注射1次相应刺激剂,6周后处死小鼠。采用HE染色观察套环侧颈动脉阻塞情况,并以免疫组织化学染色检测套环侧颈动脉TLR4、组织因子(TF)和冯·维勒布兰德因子(vWF)的表达。采用实时荧光定量PCR检测主动脉的白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的mRNA水平。结果 HE染色结果显示抗体组阻塞最为明显,免疫组织化学染色结果显示抗体组套环侧颈动脉TLR4、TF和vWF表达上调,抗体组主动脉IL-1β和TNF-α的mRNA水平明显高于其他3组。结论抗β2GPI抗体通过上调小鼠动脉血管表达炎症因子IL-1β和TNF-α,血栓相关分子TF和vWF以及TLR4的表达,促进动脉粥样斑块形成。 展开更多
关键词 动脉粥样硬化 抗β2gpi抗体 炎症 组织因子 冯·维勒布兰德因子
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抗β_2GPI/β_2GPI复合物激活THP-1细胞表达炎性相关因子 被引量:5
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作者 王海波 周红 +4 位作者 解鸿翔 王婷 穆原 陈东东 夏龙飞 《临床检验杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期347-350,共4页
目的探讨抗β2糖蛋白I(抗β2GPI)自身抗体与β2糖蛋白I(β2GPI)复合物刺激单核细胞株THP-1表达炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α及可能机制。方法用荧光定量PCR法检测抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞不同时间(0.5、1、1.5、2、6 h)后IL-6... 目的探讨抗β2糖蛋白I(抗β2GPI)自身抗体与β2糖蛋白I(β2GPI)复合物刺激单核细胞株THP-1表达炎性因子IL-6、IL-8、TNF-α及可能机制。方法用荧光定量PCR法检测抗β2GPI/β2GPI复合物刺激THP-1细胞不同时间(0.5、1、1.5、2、6 h)后IL-6、IL-8、TNF-αmRNA表达,用免疫荧光染色法及western blot观察THP-1细胞表达IL-6、IL-8、TNF-α蛋白的情况。荧光定量PCR及western blot观察Toll样受体4(TLR4)途径抑制物(TAK-242)干预抗β2GPI/β2GPI复合物对THP-1细胞的刺激作用。结果抗β2GPI/β2GPI复合物(100μg/mL)刺激THP-1细胞不同时间,可使细胞表达IL-6、IL-8及TNF-αmRNA水平逐渐上升,于刺激2 h时IL-6、IL-8及TNF-α达到峰值(P<0.01),免疫荧光染色及western blot证实细胞表达IL-6、IL-8及TNF-α蛋白水平也明显增加。TAK-242(5μmol/L)可显著抑制抗β2GPI/β2GPI复合物诱导的细胞IL-6、IL-8及TNF-α表达。结论抗β2GPI/β2GPI复合物通过TLR4途径,激活THP-1细胞表达炎性细胞因子IL-6、IL-8及TNF-α,参与抗磷脂综合征的病理机制。 展开更多
关键词 抗磷脂综合征 抗β2gpi/β2gpi复合物 TOLL样受体4 炎性因子 THP-1细胞
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oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物促进人脐静脉内皮细胞黏附分子表达的机制 被引量:7
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作者 张贵婷 周红 +4 位作者 何超 陈芋丹 欧阳航 张鹏 王韧 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第11期1472-1478,共7页
目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达黏附分子的影响,以及Toll样受体4(TLR4)信号通路在其中发挥的作用。方法用单纯培养基、oxLDL、oxLDL/β2GPI... 目的探讨氧化型低密度脂蛋白/β2糖蛋白I/抗β2糖蛋白I抗体(oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体)复合物对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)表达黏附分子的影响,以及Toll样受体4(TLR4)信号通路在其中发挥的作用。方法用单纯培养基、oxLDL、oxLDL/β2GPI复合物、oxLDL/抗β2GPI抗体复合物、oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物、LPS分组刺激HUVEC,收集总RNA和蛋白,利用实时定量PCR和Western blot法检测细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管黏附分子1(VCAM-1)和冯·维勒布兰德因子(v WF)的mRNA和蛋白水平;采用TLR4阻断剂TAK-242(5μmol/L)或p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)阻断剂SB203580(10μmol/L)预处理的方式,探索阻断TLR4通路后,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附分子表达的影响,通过THP-1细胞黏附实验检测oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物对HUVEC黏附能力的影响。结果与培养基对照组相比,oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够显著提高HUVEC的ICAM-1、VCAM-1和v WF表达,并且能够增强HUVEC对THP-1细胞的黏附,TAK-242或SB203580处理能够抑制该过程。结论 oxLDL/β2GPI/抗β2GPI抗体复合物能够增强HUVEC的黏附分子表达和对THP-1细胞的黏附,TLR4和p38MAPK与该过程密切相关。 展开更多
关键词 oxLDL/β2gpi/抗β2gpi抗体复合物 Toll样受体4(TLR4) 人脐静脉内皮细胞(HUVEC) 黏附分子
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