目的三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）指的是雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2（HER2）均为阴性的一类乳腺癌亚型.其靶向治疗已成为当前乳腺癌领域亟待解决的关键问题.本研究在于探讨G蛋白...目的三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）指的是雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2（HER2）均为阴性的一类乳腺癌亚型.其靶向治疗已成为当前乳腺癌领域亟待解决的关键问题.本研究在于探讨G蛋白耦联雌激素受体（G protein coupled estrogen receptor,GPER）作为TNBC潜在治疗靶标的可行性.利用Real-Time、Westernbot检测GPER在TNBC细胞中的表达,并利用流式细胞仪观察GPER活化后周期及凋亡发生情况,并结合划痕试验、Confocal、免疫荧光等手段探讨GPER活化后调控TNBC细胞侵袭转移的相关机制.结果表明GPER在TNBC细胞株中高表达.其特异性激动剂G-1可明显抑制MDA-MB-231和SkBr3细胞增殖,并造成细胞G2/M期阻滞,剂量依赖性下调cyclinB的表达.GPER活化后可上调p53的mRNA及蛋白表达,并促进其入核,降低其泛素化水平并增强其Ser15的磷酸化,从而抑制细胞增殖.进一步研究表明,G-1可持续性活化ERK1/2,并通过GPER/EGFR/ERK1/2下调cy-clinB的表达.且G-1可通过GPER/EGFR/ERK1/2上调p21并磷酸化p53,从而抑制细胞增殖.裸鼠移植瘤实验发现G-1可明显抑制肿瘤生长并提高其生存率,同时瘤内的cyclinB、Bcl-2表达明显下调.从而表明GPER活化可抑制TNBC的体内外生长.进一步研究表明,GPER的活化可以抑制TNBC细胞株MDA-MB-231及BT-549等体外侵袭转移,并阻止其发生上皮间质化（epithelial to mesenchymal transition,EMT）,机制研究发现GPER活化后可诱导PKA、PI3K/Akt、及PKC的活化,并通过磷酸化GSK-3β从而抑制NF-κB的磷酸化、核转位、及转录活性,从而下调纤连蛋白FN（Fibronectin）的表达.以上研究结果表明GPER活化可抑制TNBC细胞的体内外增殖及侵袭转移,从而提示其是TNBC潜在的重要治疗靶点.展开更多
文摘目的三阴性乳腺癌（triple-negative breast cancer,TNBC）指的是雌激素受体（ER）、孕激素受体（PR）和人表皮生长因子受体2（HER2）均为阴性的一类乳腺癌亚型.其靶向治疗已成为当前乳腺癌领域亟待解决的关键问题.本研究在于探讨G蛋白耦联雌激素受体（G protein coupled estrogen receptor,GPER）作为TNBC潜在治疗靶标的可行性.利用Real-Time、Westernbot检测GPER在TNBC细胞中的表达,并利用流式细胞仪观察GPER活化后周期及凋亡发生情况,并结合划痕试验、Confocal、免疫荧光等手段探讨GPER活化后调控TNBC细胞侵袭转移的相关机制.结果表明GPER在TNBC细胞株中高表达.其特异性激动剂G-1可明显抑制MDA-MB-231和SkBr3细胞增殖,并造成细胞G2/M期阻滞,剂量依赖性下调cyclinB的表达.GPER活化后可上调p53的mRNA及蛋白表达,并促进其入核,降低其泛素化水平并增强其Ser15的磷酸化,从而抑制细胞增殖.进一步研究表明,G-1可持续性活化ERK1/2,并通过GPER/EGFR/ERK1/2下调cy-clinB的表达.且G-1可通过GPER/EGFR/ERK1/2上调p21并磷酸化p53,从而抑制细胞增殖.裸鼠移植瘤实验发现G-1可明显抑制肿瘤生长并提高其生存率,同时瘤内的cyclinB、Bcl-2表达明显下调.从而表明GPER活化可抑制TNBC的体内外生长.进一步研究表明,GPER的活化可以抑制TNBC细胞株MDA-MB-231及BT-549等体外侵袭转移,并阻止其发生上皮间质化（epithelial to mesenchymal transition,EMT）,机制研究发现GPER活化后可诱导PKA、PI3K/Akt、及PKC的活化,并通过磷酸化GSK-3β从而抑制NF-κB的磷酸化、核转位、及转录活性,从而下调纤连蛋白FN（Fibronectin）的表达.以上研究结果表明GPER活化可抑制TNBC细胞的体内外增殖及侵袭转移,从而提示其是TNBC潜在的重要治疗靶点.
