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Akkermansia muciniphila改善gp120转基因小鼠的肠-脑相互作用障碍 被引量：1
1
作者 罗嘉纯 Batzaya Sodnomjamts +4 位作者 高雪锋 陈晶宇 余政颖 熊莎莎 曹虹 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第3期554-565,共12页
目的探究Akkermansia muciniphila(A.muciniphila)灌胃对HIV-1的包膜病毒蛋白gp120诱导HIV相关神经认知功能障碍(HAND)动物模型中肠道菌群紊乱及肠-脑相互作用障碍(DGBIs)的改善作用。方法用16S rRNA基因测序技术检测6、9、12月龄野生型... 目的探究Akkermansia muciniphila(A.muciniphila)灌胃对HIV-1的包膜病毒蛋白gp120诱导HIV相关神经认知功能障碍(HAND)动物模型中肠道菌群紊乱及肠-脑相互作用障碍(DGBIs)的改善作用。方法用16S rRNA基因测序技术检测6、9、12月龄野生型(WT型)小鼠与gp120转基因(gp120tg)小鼠肠道微生物组。将12月龄小鼠分为WT+PBS组、WT+A.muciniphila组、gp120+PBS组、gp120+A.muciniphila组,持续6周用A.mucinophila(2×10^(8) CFU/小鼠)灌胃WT+A.muciniphila组及gp120+A.muciniphila组小鼠,1次/d。使用电子天平称量小鼠体质量。免疫组化法观察各组小鼠结肠内糖基化黏蛋白表达水平、嗜酸性粒细胞浸润情况、嗜酸性粒细胞激活标志物主要碱性蛋白(MBP)表达水平。ELISA法检测12月龄小鼠血清内脂多糖表达情况及结肠内IL-1β表达水平。qPCR法检测各组小鼠结肠内Occludin、ZO-1、IL-10、TNF-α、INF-γ表达水平。通过Morris水迷宫试验探究各组小鼠学习及空间记忆能力,通过免疫荧光法观察各组小鼠脑神经元损伤情况。结果与WT型小鼠相比,gp120tg小鼠肠道菌群辛普森多样性降低(P<0.001),其中12月龄gp120tg小鼠Akkermansia属丰富度下降(P<0.05);与12月龄WT型小鼠相比,12月龄gp120tg小鼠血清内脂多糖含量明显升高(P<0.01),小鼠结肠内糖基化黏蛋白表达明显下调(P<0.01),灌胃减小结肠内糖基化黏蛋白的差异且灌胃前后各组小鼠体质量差异无统计学意义(P>0.05);12月龄gp120tg小鼠结肠内紧密连接蛋白Occludin、ZO-1表达水平降低(P<0.001),并于灌胃后增加(P<0.001);12月龄gp120tg小鼠结肠内嗜酸性粒细胞存在明显的浸润激活及促炎细胞因子TNF-α(P<0.001)、INF-y(P<0.001)、IL-1β(P<0.05)表达水平的上调,而抑炎细胞因子IL-10表达水平降低(P<0.001),灌胃可减小其差异;12月龄gp120tg小鼠存在明显的认知损伤且海马及皮层中神经元数量减少(P<0.05),灌胃后小鼠认知损伤得到明显改善且海马及皮层中神经元数量增加(P<0.05)。结论gp120tg小鼠菌群丰富度及多样性显著低于WT型小鼠,12月龄gp120tg小鼠Akkermansia属丰度明显低于WT型小鼠,二者DGBIs相关指标表达情况存在明显差异。A.muciniphila灌胃显著减少12月龄gp120tg小鼠肠屏障损伤、降低结肠炎症反应及嗜酸性粒细胞激活水平、减少小鼠认知损伤及脑神经元损伤。 展开更多
关键词 gp120 肠道菌群 肠-脑相互作用障碍 嗜酸性粒细胞 神经认知功能损伤 Akkermansia muciniphila
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槲皮素促进应激颗粒G3BP1解聚改善HIV-1 gp120诱导的星形胶质细胞神经毒性
2
作者 黄鹏伟 陈洁 +2 位作者 邹金虎 高雪锋 曹虹 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第2期304-312,共9页
目的探究槲皮素(QC)在HIV-1 gp120诱导的星形胶质细胞神经毒性中的抑制作用及机制。方法分离原代星形胶质细胞作为细胞模型,将细胞分为对照组、QC组、HIV-1 gp120组和梯度剂量QC治疗组。免疫荧光法观察应激颗粒(SGs)形成。氧化应激标志... 目的探究槲皮素(QC)在HIV-1 gp120诱导的星形胶质细胞神经毒性中的抑制作用及机制。方法分离原代星形胶质细胞作为细胞模型,将细胞分为对照组、QC组、HIV-1 gp120组和梯度剂量QC治疗组。免疫荧光法观察应激颗粒(SGs)形成。氧化应激标志物水平和相关蛋白表达水平分别使用特异性试剂盒和Western blotting测定。HIV-1 gp120转基因小鼠(Gp120 tgm)灌胃50 mg/kg QC治疗4周。随后进行行为学评价实验,取血清进行氧化应激指标检测,取脑组织进行免疫组化染色与Western blotting分析。结果体外实验中,QC减少星形胶质细胞中的SGs(P<0.05),提高抗氧化指标水平(P<0.05),同时降低氧化物质水平(P<0.001),并且上调与SGs解聚相关的蛋白水平(P<0.05)。在体内,QC改善了Gp120 tgm的认知功能障碍表现,缓解氧化应激(P<0.05),促进SGs解聚相关蛋白表达(P<0.05)。结论QC通过抑制氧化应激,促进SGs解聚蛋白表达和SGs解聚,减轻HIV-1 gp120诱导的星形胶质细胞毒性和改善认知功能。提示QC具备作为HIV-1相关神经认知障碍的治疗药物的潜力。 展开更多
关键词 槲皮素 星形胶质细胞 应激颗粒 氧化应激 HIV-1 gp120
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HIV-1病毒蛋白gp120、tat和炎症因子参与艾滋病患者围手术期神经认知功能障碍发展的临床研究
3
作者 熊绍军 杜云飞 付苏红 《首都食品与医药》 2025年第14期25-28,共4页
目的研究HIV-1病毒蛋白gp120、tat和炎症因子在艾滋病患者围手术期神经认知功能障碍发展过程中的作用机制。方法选取我院2022年1月-2023年12月期间收治的行手术治疗的艾滋病患者61例作为参研组,同期进行体检的健康人群61例作为对照组,... 目的研究HIV-1病毒蛋白gp120、tat和炎症因子在艾滋病患者围手术期神经认知功能障碍发展过程中的作用机制。方法选取我院2022年1月-2023年12月期间收治的行手术治疗的艾滋病患者61例作为参研组,同期进行体检的健康人群61例作为对照组,采用蒙特利尔认知评估量表(Montreal cognitive assessment,MoCA)对参研组患者术后认知情况进行检测,根据是否发生围术期神经认知障碍(Perioperative neurocognitive disorders,PND)分为PND组(MoCA<26分)(n=24)与非PND组(MoCA≥26分)(n=37),检测并对比炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IFN-γ)以及病毒表面糖蛋白(gp120)、转录反式激活因子(trans-activator of transcription,tat)水平。结果参研组手术治疗前的炎症因子各数据均高于对照组,水平存在显著差异(P<0.05);与非PND组相比,PND组的病毒蛋白gp120、tat以及炎症因子水平显著更高,且MoCA得分更低(P<0.05);通过Spearman法分析显示,艾滋病患者病毒蛋白gp120、tat、炎症因子(TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8、IFN-γ)均与MoCA呈负相关(r=-0.642、-0.663、-0.483、-0.463、-0.439、-0.460、-0.446,P<0.001)。结论艾滋病患者发生PND时,机体内HIV-1病毒蛋白gp120呈现表达上调的趋势,tat蛋白表达亦显著增加,并且炎症因子水平存在明显的异常升高变化。鉴于此,在艾滋病患者围术期阶段,可借助对gp120、tat以及炎症因子水平的监测与调控,从而实现对其PND发生发展情况的科学管理与合理干预,以改善患者的预后状况,并提升围术期的医疗质量与安全性。 展开更多
关键词 围术期神经认知障碍 艾滋病 gp120 TAT 炎症因子
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异槲皮苷对gp120+ddC诱发神经病理痛的影响
4
作者 石理冉 吴晓琴 +1 位作者 薛璟 王晓蕾 《生物技术》 2025年第4期476-482,426,共8页
[目的]探讨异槲皮苷对背根神经节P2X_(4)受体介导的gp120+ddC诱发神经病理痛的作用。[方法]建立gp120+ddC大鼠模型,测量各组大鼠机械阈值、热敏阈值变化,通过实时荧光定量PCR检测各组大鼠背根神经节中P2X_(4)受体的表达,通过蛋白印迹检... [目的]探讨异槲皮苷对背根神经节P2X_(4)受体介导的gp120+ddC诱发神经病理痛的作用。[方法]建立gp120+ddC大鼠模型,测量各组大鼠机械阈值、热敏阈值变化,通过实时荧光定量PCR检测各组大鼠背根神经节中P2X_(4)受体的表达,通过蛋白印迹检测各组大鼠背根神经节中P2X_(4)受体、TNF-α、IL-1β等蛋白的表达,通过分子对接检测异槲皮苷与P2X_(4)受体的相互作用。[结果]异槲皮苷作用gp120+ddC模型大鼠后,大鼠的机械阈值由第7d的(18.73±4.66)g升至第14 d的(22.69±1.53)g,热敏阈值由第7d的(18.75±3.02)s升至第14 d的(21.23±4.31)s, P2X_(4)受体mRNA、P2X_(4)受体、TNF-α、IL-1β、p-ERK1/2等蛋白的表达均显著降低,各组间均具有显著性差异(F_((5,12))=13.61、F_((5,12))=96.17、F_((3,20))=37.50、F_((3,20))=18.04、F_((3,20))=16.24,P<0.05)。分子对接结果显示P2X_(4)和异槲皮苷的对接结合能为-7.3 kcal/mol,表明异槲皮苷可能与P2X_(4)受体存在相互作用。[结论]异槲皮苷可下调gp120+ddC模型大鼠背根神经节中P2X_(4)受体表达,抑制炎性因子释放和ERK信号通路激活,缓解了模型大鼠的机械痛敏和热痛敏。通过此研究为HIV联合HAART诱发神经病理痛的药物干预提供新的实验依据。 展开更多
关键词 异槲皮苷 gp120+ddC P2X_4受体 背根神经节 神经病理痛 MAPK(丝裂原活化蛋白激酶) 炎性因子 分子对接
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IFN-γ与HIV-1gp120融合蛋白的表达及其免疫调节作用 被引量：2
5
作者 赵刚 吴南屏 姚航平 《浙江大学学报（医学版）》 CAS CSCD 2006年第6期610-614,共5页
目的:研究gamm a干扰素(IFN-γ)对人类免疫缺陷病毒(H IV-1)gp120蛋白免疫小鼠后效果的调节作用。方法:利用分子生物学技术,构建表达中国流行株H IV-1gp 120 N端片段基因的原核质粒p et44b-gp 120,及共表达H IV-1gp 120 N端片段基因与I... 目的:研究gamm a干扰素(IFN-γ)对人类免疫缺陷病毒(H IV-1)gp120蛋白免疫小鼠后效果的调节作用。方法:利用分子生物学技术,构建表达中国流行株H IV-1gp 120 N端片段基因的原核质粒p et44b-gp 120,及共表达H IV-1gp 120 N端片段基因与IFN-γ基因的原核质粒p et44b-gp 120/IFN-γ,在E.coli BL 21(DE 3)细胞中进行低温诱导蛋白表达,然后经纯化后免疫BALB/c小鼠。实验设皮下注射gp120/IFN-γ组、gp120组和PBS三组,以检测H IV-1gp120诱导的T细胞增殖能力,CTL杀伤作用以及Th1型细胞因子(IL-2,IFN-γ)和Th2型细胞因子(IL-4,IL-10)的表达情况。结果:通过PAGE和W estern b lot检测,证实上述两种蛋白在DE 3细胞中得到表达。免疫学实验表明,针对H IV-1 gp120的特异性T淋巴细胞增殖作用、特异性CTL杀伤作用,以及Th1型细胞因子IL-2和IFN-γ表达在三组之间均有显著性差异(P<0.05),gp120/IFN-γ组高于gp120组,gp120组高于PBS组(P<0.05)。反映体液免疫反应的Th2型细胞因子IL-4和IL-10的表达在三组之间没有显著性差异(P>0.05)。结论:协同应用IFN-γ基因可明显加强H IV-1gp 120基因的细胞免疫反应。 展开更多
关键词 干扰素Ⅱ型 HIV包膜蛋白质gp120/代谢 佐剂 免疫 HIV gp120 IFN-Γ 融合表达
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姜黄素对gp120所致大鼠学习记忆障碍的作用及机制研究 被引量：8
6
作者 董军 陆大祥 +1 位作者 潘锐 唐红梅 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期328-331,共4页
目的:探讨姜黄素改善HIV-1包膜糖蛋白gp120所致大鼠学习记忆障碍的作用及机制。方法:用gp120侧脑室灌注制备拟艾滋痴呆症动物模型,并用水迷宫实验观察侧脑室灌注gp120造成的大鼠认知功能的障碍。SD大鼠随机分为6组:对照组、假手术组、... 目的:探讨姜黄素改善HIV-1包膜糖蛋白gp120所致大鼠学习记忆障碍的作用及机制。方法:用gp120侧脑室灌注制备拟艾滋痴呆症动物模型,并用水迷宫实验观察侧脑室灌注gp120造成的大鼠认知功能的障碍。SD大鼠随机分为6组:对照组、假手术组、模型组、姜黄素低、中和高剂量治疗组。除对照组、假手术组外其余4组侧脑室缓慢注射5μL的gp120,连续3d。第4天开始,姜黄素低、中、高剂量治疗组分别给予50mg/(kg·d)、100mg/(kg·d)、200mg/(kg·d)的姜黄素灌胃,对照组、假手术组和模型组大鼠用双蒸水灌胃,连续灌胃14d。然后各组大鼠进行水迷宫测试,并分组进行NMDA2B受体免疫组化染色。结果:50ng/d的gp120侧脑室灌注3d,可制备拟艾滋痴呆症动物模型。Morris水迷宫可见模型组大鼠逃避潜伏期与对照组相比明显延长(P<0.05),姜黄素低、中、高剂量治疗组大鼠的逃避潜伏期与模型组相比缩短,其中姜黄素低剂量组效果更好(P<0.05)。免疫组化结果显示模型组大鼠海马内N-甲基天冬氨酸受体(NMDA2B)的表达与对照组相比有所降低(P<0.01),姜黄素各剂量治疗组NMDA2B受体的表达与模型组相比有所上调。结论:gp120侧脑室灌注可制备拟艾滋痴呆症动物模型,姜黄素具有改善侧脑室灌注gp120所致大鼠学习记忆障碍的作用,其机制可能与对抗NMDA2B受体表达下调有关。 展开更多
关键词 艾滋痴呆症 gp120 姜黄素 N-甲基天冬氨酸受体
原文传递
HIV-1 GP120主要抗原性片段的制备及其在HIV诊断中的应用 被引量：6
7
作者 郝彦玲 张梦华 +6 位作者 黄云坚 袁国亮 陈佩 朱旭辉 傅晶晶 刘勇 邵一鸣 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2006年第1期64-67,共4页
目的研制HIV中国流行株RL42GP120主要抗原性片段,以便进一步开发HIV抗体检测试剂。方法克隆RL42毒株GP120蛋白C-端250个氨基酸的编码序列,克隆入大肠杆菌表达载体pBV220进行表达。通过包涵体处理和离子交换层析纯化目的蛋白。将纯化后... 目的研制HIV中国流行株RL42GP120主要抗原性片段,以便进一步开发HIV抗体检测试剂。方法克隆RL42毒株GP120蛋白C-端250个氨基酸的编码序列,克隆入大肠杆菌表达载体pBV220进行表达。通过包涵体处理和离子交换层析纯化目的蛋白。将纯化后的蛋白用狭缝电转技术转印硝酸纤维素膜,利用HIV参考品血清检测其灵敏度和特异性。结果目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的10%左右。纯化后其纯度高于95%,HIV参考品血清检测显示出良好的灵敏度和特异性,检测8份阳性临床标本无一漏检,而7份阴性临床标本无交叉反应。结论已研制出具有良好灵敏度和特异性的HIV-1GP120主要抗原性片段。为开发HIV抗体检测试剂创造了条件。 展开更多
关键词 HIV-1 gp120 主要抗原性片段 诊断
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HIV-1B亚型gp120基因密码子优化前后免疫原性的比较 被引量：8
8
作者 余双庆 冯霞 +3 位作者 陈国敏 龚非 周玲 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期214-217,共4页
对HIV 1B亚型gp120基因按照哺乳动物优势密码子的使用原则进行优化,以Westernblot方法比较其体外表达量。将优化前的野生型gp120基因和改造后的modgp120基因插入重组腺伴随病毒载体,构建了重组病毒rAAV wtgp120和rAAV modgp120,比较两... 对HIV 1B亚型gp120基因按照哺乳动物优势密码子的使用原则进行优化,以Westernblot方法比较其体外表达量。将优化前的野生型gp120基因和改造后的modgp120基因插入重组腺伴随病毒载体,构建了重组病毒rAAV wtgp120和rAAV modgp120,比较两者免疫Balb/C小鼠后的抗体和CTL应答。Westernblot检测结果显示:优化后基因的体外表达量明显高于野生型基因,rAAV modgp120与rAAV wtgp120相比可更好地诱导Balb/C小鼠的CTL应答,但检测不到明显的抗体反应。由此得出结论,优化后gp120基因的体外表达量明显高于野生型基因,并且可以诱导更强的特异性CTL应答,但检测不到gp120抗体。 展开更多
关键词 人免疫缺陷病毒I型 HIV-1 gp120 基因 密码子 免疫原性 重组腺伴随病毒
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朝鲜淫羊藿多糖对HIV-1包膜蛋白质gp120的免疫佐剂活性 被引量：4
9
作者 张贵强 董娜 +7 位作者 王玉霞 李倩 贾培媛 武军华 麻浩 李海霞 单俊杰 王海南 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期959-965,共7页
目的评价淫羊藿总多糖(EKP)中组分B(EKP-B)和均一多糖B-1(EKP-B-1)对人类免疫缺陷病毒HIV-1 gp120蛋白的免疫佐剂活性。方法 EKP-B(150μg)、EKP-B-1(150μg)、铝佐剂(200μg)和生理盐水分别与HIV-1gp120(20μg)配伍肌内注射免疫小鼠1... 目的评价淫羊藿总多糖(EKP)中组分B(EKP-B)和均一多糖B-1(EKP-B-1)对人类免疫缺陷病毒HIV-1 gp120蛋白的免疫佐剂活性。方法 EKP-B(150μg)、EKP-B-1(150μg)、铝佐剂(200μg)和生理盐水分别与HIV-1gp120(20μg)配伍肌内注射免疫小鼠1次。免疫后2和4周收集小鼠血清,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体滴度。4周后处死小鼠,MTT法测定小鼠脾T淋巴细胞和B淋巴细胞增殖反应,ELISA法检测免疫小鼠血清干扰素γ(IFN-γ)和白介素4(IL-4)含量,流式细胞术测定脾细胞中CD4+/CD8+和CD3+/CD19+T细胞亚群百分比。结果免疫后2周,与HIV-1gp120单独免疫组相比,EKP-B-1与HIV-1gp120配伍可提高小鼠血清特异性抗体滴度(P<0.05),EKP-B无明显作用。免疫后4周,EKP-B和EKP-B-1与HIV-1gp120配伍均能明显提高小鼠血清特异性抗体滴度(P<0.05),还能明显促进B细胞增殖反应和IFN-γ的分泌(P<0.01),对小鼠脾T淋巴细胞增殖以及胸腺IL-4的分泌无明显影响,同时EKP-B还能提高脾细胞CD3+/CD19+细胞百分率(P<0.01),EKP-B-1提高脾细胞CD4+/CD8+细胞百分率(P<0.05)。结论 EKP-B和EKP-B-1(每只鼠150μg)对HIV-1gp120抗原显示良好的佐剂活性,能明显提高HIV-1gp120免疫小鼠的体液免疫和细胞免疫功能,提示EKP-B和EKP-B-1有可能作为艾滋病疫苗的佐剂。 展开更多
关键词 朝鲜淫羊藿 多糖 人类免疫缺陷病毒 HIV包膜蛋白质gp120 佐剂
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CREB在姜黄素改善gp120所致大鼠学习记忆障碍中的作用 被引量：5
10
作者 黄涛 董军 +3 位作者 陆大祥 唐红梅 潘锐 付咏梅 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期362-366,共5页
目的:探讨cAMP反应元件结合蛋白(CREB)在姜黄素改善gp120所致大鼠学习记忆障碍中的作用。方法:SD大鼠随机分为6组:对照组、假手术组、模型组、姜黄素低、中和高剂量治疗组;除对照组、假手术组外其余4组侧脑室缓慢注射5μL的gp120,连续3 ... 目的:探讨cAMP反应元件结合蛋白(CREB)在姜黄素改善gp120所致大鼠学习记忆障碍中的作用。方法:SD大鼠随机分为6组:对照组、假手术组、模型组、姜黄素低、中和高剂量治疗组;除对照组、假手术组外其余4组侧脑室缓慢注射5μL的gp120,连续3 d。第4天开始,低、中、高剂量治疗组分别每天给予50、100、200 mg/kg的姜黄素灌胃,对照组、假手术组和模型组大鼠用双蒸水灌胃,连续灌胃14 d。各组大鼠进行水迷宫测试,并分组进行海马磷酸化的CREB(pCREB)免疫组化染色。结果:①Morris水迷宫空间探索实验显示模型组大鼠反应迟钝,寻找目标象限所需的时间较长,在目标象限停留的时间及穿越次数明显短于对照组(P<0.05);姜黄素低、中、高剂量治疗组大鼠寻找目标象限所需时间缩短,在目标象限停留的时间及穿越次数明显长于模型组(P<0.05),其中姜黄素低剂量组效果更好(P<0.05)。②免疫组化结果显示模型组大鼠海马内pCREB的表达与对照组相比有所降低(P<0.01),姜黄素各剂量治疗组pCREB的表达有所上调。结论:姜黄素具有改善gp120所致大鼠学习记忆障碍的作用,其机制可能与增加海马CREB的磷酸化水平有关。 展开更多
关键词 艾滋痴呆症 gp120 姜黄素 CAMP反应元件结合蛋白
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表现神经症状的SIVmac251感染猴大脑基底节病毒gp120序列变异分析 被引量：5
11
作者 刘克剑 丛喆 +4 位作者 金光 王卫 陈霆 蒋虹 魏强 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2012年第2期37-42,I0002,共7页
目的研究猴免疫缺陷病毒SIVmac251在中国恒河猴感染传代过程中产生的可能的神经侵袭性和神经嗜性及其分子机制。方法从静脉感染SIVmac251-155p6N的8只实验猴中出现严重神经症状的1只猴中,监测病毒及免疫指标变化,观察临床症状、猴脑组... 目的研究猴免疫缺陷病毒SIVmac251在中国恒河猴感染传代过程中产生的可能的神经侵袭性和神经嗜性及其分子机制。方法从静脉感染SIVmac251-155p6N的8只实验猴中出现严重神经症状的1只猴中,监测病毒及免疫指标变化,观察临床症状、猴脑组织病变,单拷贝PCR扩增病毒gp120序列并分析变异及糖基化位点变化情况。结果感染猴晚期出现明显艾滋病脑病症状,病理切片显示脑组织出现多核巨细胞及神经元变性、坏死。脑基底节分离出单一序列病毒,其氨基酸序列与血浆病毒及感染毒株SIVmac251-155p6序列差异主要位于Gp120的V1和V4区,并且在C1区66位出现一个糖基化位点缺失。结论 SIVmac251在猴体长期传代过程中表现出神经嗜性毒株的特征,对AIDS脑病研究具有重要意义。 展开更多
关键词 艾滋病脑病 SIVmac251 gp120 变异 神经嗜性 神经侵袭性 糖基化位点
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蛇床子素减轻HIV gp120诱发的周围神经病理痛 被引量：9
12
作者 易智华 周聪发 +3 位作者 雷琼琼 胡夏菊 李玲艳 梁尚栋 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期680-685,共6页
目的探讨蛇床子素(osthole,Ost)对背根神经节(dorsal root ganglia, DRG)P2X_3受体(P2X_3R)介导人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)包膜糖蛋白gp120诱发周围神经病理痛的作用及机制。方法建立HIV gp120诱发周围神经病... 目的探讨蛇床子素(osthole,Ost)对背根神经节(dorsal root ganglia, DRG)P2X_3受体(P2X_3R)介导人类免疫缺陷病毒(human immunodeficiency virus,HIV)包膜糖蛋白gp120诱发周围神经病理痛的作用及机制。方法建立HIV gp120诱发周围神经病理痛大鼠模型,其中Ost给药组大鼠于建模术前7 d至术后14 d灌胃给药(40 mg·kg^(-1)·d^(-1))。检测各组大鼠机械痛缩足反射阈值(PWT)与热痛缩足反射潜伏期(PWL);实时定量PCR、蛋白印迹、免疫组化等方法检测DRG中神经元P2X_3R、炎性因子及ERK、p-ERK等的表达;全细胞膜片钳检测HEK293细胞三磷酸腺苷(ATP)激活电流及Ost对电流的影响。结果 gp120组大鼠PWT、PWL较假手术组(sham)减小,大鼠DRG中P2X_3R、TNF-αR及p-ERK表达均较sham组明显升高;gp120+Ost组大鼠PWT、PWL较gp120组增大,大鼠DRG中P2X_3R、TNF-αR及p-ERK表达均较gp120组降低;Ost抑制了转染人P2X_3R的HEK293细胞ATP激动电流。结论 Ost下调DRG神经元中P2X_3R,抑制相关信号通路与炎性反应,减轻gp120诱发的周围神经病理痛。 展开更多
关键词 蛇床子素 神经病理痛 P2X 3受体 背根神经节 人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白gp120 三磷酸腺苷
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IL-18和HIV-1gag-gp120嵌合基因DNA疫苗联合免疫小鼠的免疫应答 被引量：7
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作者 江文正 金宁一 +3 位作者 李子健 张立树 王宏 金洪涛 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期433-435,共3页
目的 :探讨IL 18和HIV 1gag gp12 0嵌合基因的DNA疫苗联合免疫小鼠的免疫应答。方法 :构建含IL 18的真核表达质粒pVAXIL18,将他与表达HIV 1gag gp12 0嵌合基因的核酸疫苗质粒pVAXGE共同肌注免疫BALB/c小鼠 ,检测免疫小鼠脾特异性CTL杀... 目的 :探讨IL 18和HIV 1gag gp12 0嵌合基因的DNA疫苗联合免疫小鼠的免疫应答。方法 :构建含IL 18的真核表达质粒pVAXIL18,将他与表达HIV 1gag gp12 0嵌合基因的核酸疫苗质粒pVAXGE共同肌注免疫BALB/c小鼠 ,检测免疫小鼠脾特异性CTL杀伤活性和血清抗体滴度。结果 :联合免疫组小鼠脾特异性CTL杀伤活性和血清抗体水平均显著高于单独免疫组 (P <0 .0 5 ) ,空白质粒对照组 (P <0 .0 1)和PBS对照组 (P <0 .0 1)。结论 :IL 18和HIV 1gag gp12 0嵌合基因的DNA疫苗联合免疫可诱导小鼠产生特异性细胞和体液免疫 ,且IL 18发挥了免疫佐剂的作用。 展开更多
关键词 HIV-1 gag-gp120 IL-18 DNA疫苗
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共表达HIV-1中国流行株gp120与IL-18重组鸡痘病毒的构建及其免疫原性观察 被引量：2
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作者 江文正 金宁一 +2 位作者 李子健 张立树 韩文瑜 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期337-341,共5页
为筛选我国的HIV_1疫苗候选株 ,以鸡痘病毒 2 82E4中国疫苗株为载体 ,构建了共表达中国流行株HIV_1外膜蛋白gp12 0和IL_18的重组鸡痘病毒 ,并将该重组鸡痘病毒免疫BALB c小鼠 ,检测免疫小鼠脾特异性CTL杀伤活性和血清抗体水平。结果显示... 为筛选我国的HIV_1疫苗候选株 ,以鸡痘病毒 2 82E4中国疫苗株为载体 ,构建了共表达中国流行株HIV_1外膜蛋白gp12 0和IL_18的重组鸡痘病毒 ,并将该重组鸡痘病毒免疫BALB c小鼠 ,检测免疫小鼠脾特异性CTL杀伤活性和血清抗体水平。结果显示 ,HIV_1外膜蛋白gp12 0和IL_18不但可在重组鸡痘病毒感染的鸡胚成纤维细胞中表达 ,而且可在重组鸡痘病毒感染的哺乳动物细胞中表达。重组病毒具有良好的免疫原性 ,可诱导小鼠产生特异性抗体和脾特异性CTL反应 ,且IL_18发挥了免疫佐剂的作用。本研究结果为制备安全、有效的HIV_1基因工程活载体疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 HIV-1 gp120 白细胞介素18 鸡痘病毒 抗体 细胞毒T淋巴细胞
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gp120转基因小鼠制备及初步鉴定 被引量：3
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作者 张洪海 孙玉 +3 位作者 柳雅立 张彤 吴昊 陈德喜 《首都医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第6期695-700,共6页
目的构建HIV-1B’亚型gp120转基因载体,制备gp120转基因小鼠。方法扩增gp120全长序列,根据读码框架定向连接到pSEAP2-control外分泌性真核表达载体上,插入GFAP启动子,回收含启动子-gp120-增强子的功能片段制备转基因小鼠,PCR和RT-PCR验... 目的构建HIV-1B’亚型gp120转基因载体,制备gp120转基因小鼠。方法扩增gp120全长序列,根据读码框架定向连接到pSEAP2-control外分泌性真核表达载体上,插入GFAP启动子,回收含启动子-gp120-增强子的功能片段制备转基因小鼠,PCR和RT-PCR验证基因整合与mRNA转录。结果酶切鉴定与测序验证均证明构建了受GFAP启动子调控的gp120转基因载体,蛋白印迹分析显示其分泌性和组织特异性都很高;RT-PCR证实转基因小鼠存在gp120mRNA转录。结论成功构建了gp120转基因载体,并生产了founder小鼠。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 gp120 痴呆 动物模型
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重组HIV-1 gp120 AAV2/1在小鼠和恒河猴体内的免疫原性 被引量：2
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作者 余双庆 冯霞 +3 位作者 刘红梅 杨海儒 李红霞 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期115-120,共6页
本文旨在研究表达HIV-1中国流行株gp120基因的重组腺相关病毒疫苗在小鼠和恒河猴体内的免疫原性。用rAAV2/1-gp120免疫BALB/c小鼠和恒河猴,分别用ELISA和HIV-1假病毒中和试验检测免疫动物血清中HIV-1特异性IgG抗体水平和中和抗体水平,用... 本文旨在研究表达HIV-1中国流行株gp120基因的重组腺相关病毒疫苗在小鼠和恒河猴体内的免疫原性。用rAAV2/1-gp120免疫BALB/c小鼠和恒河猴,分别用ELISA和HIV-1假病毒中和试验检测免疫动物血清中HIV-1特异性IgG抗体水平和中和抗体水平,用ELISPOT方法和体内杀伤实验检测HIV-1特异性细胞免疫应答水平。结果显示在小鼠体内用rAAV2/1-gp120仅免疫一次就能诱导较高水平的IgG抗体,IgG抗体至少能持续21周,但没有检测到中和抗体。rAAV2/1-gp120在小鼠体内诱导微弱水平的HIV-1特异性细胞免疫应答。rAAV2/1-gp120在恒河猴体内诱导的HIV-1特异性细胞和抗体反应均很弱,且检测不到中和抗体。提示rAAV2/1载体在诱导抗体反应方面具有特殊优势,但若希望诱导HIV-1特异性中和抗体,则需要改造env基因以提高其免疫原性。 展开更多
关键词 HIV-1 包膜糖蛋白gp120 重组腺相关病毒 免疫原性
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一例艾滋病痴呆综合征病人HIV-1 gp120基因多样性及生物学活性位点分析 被引量：3
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作者 闫玉芬 赵丽 +10 位作者 赵丽 王志玉 王志玉 Michael S.McGrath 侯霄煜 郑晓民 宋艳艳 姚苹 温红玲 王桂亭 许洪芝 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期166-172,共7页
为探讨人类免疫缺陷病毒1型HIV-1 gp120基因多样性和生物学活性位点与艾滋病痴呆综合征之间的关系,从一例艾滋病痴呆综合征病例尸检标本的淋巴结和中枢神经组织(大脑5个部位:颞叶灰/白质连接处、脑室周围组织、脉络丛、枕叶白质及枕叶灰... 为探讨人类免疫缺陷病毒1型HIV-1 gp120基因多样性和生物学活性位点与艾滋病痴呆综合征之间的关系,从一例艾滋病痴呆综合征病例尸检标本的淋巴结和中枢神经组织(大脑5个部位:颞叶灰/白质连接处、脑室周围组织、脉络丛、枕叶白质及枕叶灰/白质连接处)提取不同组织来源的基因组DNA,经PCR法扩增HIV-1 gp120基因,经克隆后挑选阳性克隆菌株,对插入片段进行测序。用生物学软件处理并绘制系统发生树,分析糖基化位点,计算ds/dn值,分析V3顶端四肽及关键位点的氨基酸。结果显示,该病人感染的病毒是HIV-1B亚型;分离自不同组织的HIV-1 gp120基因存在差异;与标准序列相比,分离自该病人的HIV-1 gp120基因的部分生物学活性位点存在改变,且源自外周淋巴组织与中枢神经组织的HIV-1 gp120基因中部分生物学活性位点也存在差异。结果表明,HIV-1 gp120基因多样性及与脑组织相关的某些生物学活性位点的改变可能与艾滋病痴呆综合征的发病机制存在一定关系。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒1型 HIV-1包膜糖蛋白gp120 艾滋病痴呆综合征 基因多样性 生物学活性
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HIV-1 CRF01_AE重组型gp120 V1/V2结构域单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：4
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作者 楚鹰 宫祥丹 +5 位作者 高建伟 苏艾荣 陈德燕 宋红勇 吴喜林 吴稚伟 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期540-545,共6页
目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠... 目的真核表达人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)CRF01_AE重组型gp120蛋白的V1/V2结构域,制备其单克隆抗体并鉴定其抗原反应性。方法构建pTriEx-3-V1/V2CNE55真核表达载体,在HEK293F细胞中表达V1/V2-His融合蛋白,纯化后作为抗原免疫BALB/c小鼠,取免疫后的小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选分泌抗V1/V2重组蛋白单克隆抗体的阳性杂交瘤,对单克隆抗体的特异性、型别以及效价进行鉴定。结果制备并获得一株稳定分泌抗HIV-1 AE亚型V1/V2结构域单克隆抗体的杂交瘤细胞株,ELISA测定腹水效价高达1∶81 000,单克隆抗体类型属于IgG1/κ型。Western blot结果表明该单克隆抗体同样能够识别不同亚型的HIV gp120蛋白。结论成功制备出抗HIV-1 AE重组型gp120蛋白V1/V2结构域的单克隆抗体。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1) gp120可变区1/2 单克隆抗体 真核蛋白表达 疫苗
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人类免疫缺陷病毒蛋白HIV gp120对培养的大鼠背根神经节神经元的神经毒性作用(英文) 被引量：2
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作者 刘花香 李振中 +6 位作者 邢毅 黄飞 杜芳 刘真 陈淑妍 王丽红 王怀经 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期603-608,共6页
为探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)gp120对体外培养的大鼠背根神经节(DRG)神经元的神经毒性作用,我们建立了胎鼠DRG分散培养和器官型培养的模型。以上分散培养和器官型培养的DRG,经不同浓度(250pmol/L,1nmol/L)的HIVgp120处理(2次/7d)。分散... 为探讨人类免疫缺陷病毒(HIV)gp120对体外培养的大鼠背根神经节(DRG)神经元的神经毒性作用,我们建立了胎鼠DRG分散培养和器官型培养的模型。以上分散培养和器官型培养的DRG,经不同浓度(250pmol/L,1nmol/L)的HIVgp120处理(2次/7d)。分散培养的DRG细胞行微管相关蛋白2(MAP2)免疫荧光染色,然后利用荧光显微镜观察神经元胞体和突起的变化情况。器官型培养的DRG在电子显微镜下观察其超微结构的改变。经HIVgp120处理的神经元突起的数目和长度的变化,HIVgp120处理组与对照组相比有显著性意义(P<0.001),而神经元的直径则没有变化(P>0.05)。应用以上不同浓度的HIVgp120处理后,神经元的超微结构出现明显改变,线粒体嵴减少或消失,微管和神经丝之间出现了大量的高电子密度颗粒。以上结果表明,HIVgp120对培养的DRG神经元具有直接的神经毒性作用,其中以线粒体的改变较为敏感。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒HIV gp120 神经元背根神经节 大鼠
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HIV-1膜蛋白基因gp120和gp41的合成及在毕赤酵母中的表达 被引量：3
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作者 洪国强 胡波 李朝霞 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期198-200,共3页
目的合成适合酵母表达的HIV-1膜蛋白gp120和gp41基因,在毕赤酵母中高效表达分泌型重组HIV-1 gp120和gp41抗原。方法选用酵母偏爱的同义密码子替换野生型gp120和gp41基因的酵母稀有密码子,采取基因搭桥法及聚合酶链反应(PCR),合成HIV-1 g... 目的合成适合酵母表达的HIV-1膜蛋白gp120和gp41基因,在毕赤酵母中高效表达分泌型重组HIV-1 gp120和gp41抗原。方法选用酵母偏爱的同义密码子替换野生型gp120和gp41基因的酵母稀有密码子,采取基因搭桥法及聚合酶链反应(PCR),合成HIV-1 gp120和gp41基因,构建分泌型重组质粒并转化毕赤酵母菌株GS115,经甲醇诱导表达HIV-1外膜糖蛋白gp120和gp41。结果DNA测序证实合成的HIV-1 gp120和gp41基因正确克隆到表达载体中;聚丙烯酰胺凝胶电泳及免疫印迹显示gp120和gp41在毕赤酵母中高效分泌表达。结论gp120和gp41合成基因在毕赤酵母表达系统高效分泌表达。 展开更多
关键词 HIV-1 gp120 GP41 合成基因 毕赤酵母
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