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gp10基因的原核表达及其联合异烟肼的体外抗结核菌活性
被引量:
1
1
作者
彭蔚
黎友伦
+1 位作者
冯燕梅
彭丽
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期548-552,F0003,共6页
目的:原核表达分枝杆菌噬菌体D29内溶素gp10蛋白,检测其单用及与异烟肼联合对体外结核菌的抗菌活性。方法:采用PCR法从分枝杆菌噬菌体D29基因组中扩增gp10基因,克隆至原核表达载体pET32a(+),经双酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化至大...
目的:原核表达分枝杆菌噬菌体D29内溶素gp10蛋白,检测其单用及与异烟肼联合对体外结核菌的抗菌活性。方法:采用PCR法从分枝杆菌噬菌体D29基因组中扩增gp10基因,克隆至原核表达载体pET32a(+),经双酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中表达目的蛋白。采用微量刃天青显色法测定gp10蛋白对结核分枝杆菌(MTB)标准株H37Rv和临床分离耐多药株的最低抑菌浓度(MIC),同时观察其与异烟肼联用对H37Rv的部分抑菌浓度指数(FICI)。结果:PCR扩增获得长1 479bp的gp10基因,重组质粒pET32a(+)-gp10经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切获得长约5 900和1 479bp的条带,gp10基因测序结果与GenBank中基因序列一致,并表达相对分子质量约75 200的目的蛋白。重组蛋白gp10对MTB H37Rv和临床分离耐多药株的MIC为256mg·L-1,其与异烟肼联用对H37Rv的FICI为0.5。结论:成功表达重组蛋白gp10,gp10对体外MTB H37Rv和临床耐多药株均表现出良好抗菌活性,其与异烟肼联用对体外H37Rv表现出协同效应。
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关键词
gp10
蛋白
异烟肼
结核杆菌
抗菌活性
暂未订购
GP10—C3系列高频感应式加热设备的故障及维修
2
作者
郭锦唐
《电世界》
2002年第2期28-28,共1页
关键词
高频感应式加热设备
故障
维修
gp10
-C3系列
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职称材料
大肠杆菌噬菌体Bp4尾部蛋白在宿主识别中的作用研究
被引量:
3
3
作者
李兴健
孙蓉蓉
+3 位作者
张灿
刘文华
邹玲
任慧英
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第4期377-381,410,共6页
为了研究大肠杆菌噬菌体Bp4尾部蛋白中的假定蛋白gp10、尾丝蛋白gp11和尾刺蛋白gp13在噬菌体吸附宿主菌中的作用,本研究经PCR扩增gp10、gp11和gp13基因,克隆至原核表达质粒pcoldTF中,构建重组质粒pcoldTF-gp10、pcoldTF-gp11、pcoldTF-g...
为了研究大肠杆菌噬菌体Bp4尾部蛋白中的假定蛋白gp10、尾丝蛋白gp11和尾刺蛋白gp13在噬菌体吸附宿主菌中的作用,本研究经PCR扩增gp10、gp11和gp13基因,克隆至原核表达质粒pcoldTF中,构建重组质粒pcoldTF-gp10、pcoldTF-gp11、pcoldTF-gp13,并分别在E.coli BL21(DE3)中经IPTG诱导后经SDS-PAGE鉴定,结果显示各重组蛋白均获得了表达。将获得的各尾部蛋白纯化后分别4次免疫家兔,获得的各重组蛋白的多克隆抗体(anti-gp10、anti-gp11、anti-gp13)经琼脂双向扩散试验测定效价,分别为1:4、1:8、1:8。将各尾部蛋白与O;血清型大肠杆菌孵育10 min后,加入噬菌体Bp4增殖液进行竞争吸附试验,5 min后利用双层平板法检测并计数噬菌斑,计算噬菌体对大肠杆菌的相对吸附率;分别将各多克隆抗体与噬菌体孵育5 min以阻断噬菌体对大肠杆菌的吸附,再加入大肠杆菌5 min后采用上述双层平板法检测并计数大肠杆菌的噬菌斑,计算噬菌体对大肠杆菌的相对吸附率。尾部蛋白竞争吸附试验结果显示,gp13组中噬菌体对大肠杆菌的相对吸附率为0,与对照组差异极显著(P<0.01);而gp10组和gp11组中噬菌体对大肠杆菌的相对吸附率均为100%,均与对照组无差异,表明gp13能有效抑制噬菌体Bp4对宿主菌的吸附,而gp10和gp11则无此抑制作用。抗体阻断吸附试验结果显示,anti-gp11和anti-gp13组中噬菌体对大肠杆菌的相对吸附率均为0,与对照组差异均极显著(P<0.05);而antigp10组与对照组中噬菌体对宿主菌的相对吸附率均为100%,表明anti-gp13和anti-gp11均能够完全阻断噬菌体对宿主菌的吸附,而anti-gp10对其的吸附无阻断作用。上述结果首次证实大肠杆菌尾部蛋白gp13是大肠杆菌噬菌体Bp4吸附宿主菌的关键蛋白,本实验为研究噬菌体Bp4的感染机制及拓宽该噬菌体的宿主谱奠定了基础。
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关键词
噬菌体Bp4
假定蛋白
gp10
尾丝蛋白gp11
尾刺蛋白gp13
宿主识别
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职称材料
基于嵌入式智能监控系统的IO直控云台结构
4
作者
巩天宁
潘地林
刘倩
《可编程控制器与工厂自动化(PLC FA)》
2009年第4期76-78,共3页
本文分析了现有数字监控系统中的云台控制法,该方法基于派尔高协议通过串口间接控制云台;提出了基于智能监控系统的嵌入式IO直控云台结构,并结合S3C2440处理器设计了硬件结构、编写了嵌入式Linux操作系统下的驱动程序。
关键词
嵌入式
智能监控
派尔高协议
gp10
S3C2440
LI
RUX驱动程序
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职称材料
摄像机操作控制面板预监功能的实现
5
作者
林凡
《影视制作》
2018年第6期46-50,共5页
本文就JOYSTICK的实现原理和具体实现方式展开了详细描述,并对比了几种实现方式的特点。JOYSTICK功能简单好用,在实际应用中可选择符合系统设计的方案,提供快捷高效的全屏预监体验。
关键词
JOYSTICK
gp10
预监
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职称材料
题名
gp10基因的原核表达及其联合异烟肼的体外抗结核菌活性
被引量:
1
1
作者
彭蔚
黎友伦
冯燕梅
彭丽
机构
重庆医科大学附属第一医院呼吸内科
出处
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第3期548-552,F0003,共6页
基金
重庆市卫计委面上项目资助课题(2012-2-006)
国家卫生与计划生育委员会临床重点专科建设项目资助课题(卫办医政函[2012]649号)
文摘
目的:原核表达分枝杆菌噬菌体D29内溶素gp10蛋白,检测其单用及与异烟肼联合对体外结核菌的抗菌活性。方法:采用PCR法从分枝杆菌噬菌体D29基因组中扩增gp10基因,克隆至原核表达载体pET32a(+),经双酶切和测序鉴定正确的重组质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中表达目的蛋白。采用微量刃天青显色法测定gp10蛋白对结核分枝杆菌(MTB)标准株H37Rv和临床分离耐多药株的最低抑菌浓度(MIC),同时观察其与异烟肼联用对H37Rv的部分抑菌浓度指数(FICI)。结果:PCR扩增获得长1 479bp的gp10基因,重组质粒pET32a(+)-gp10经EcoRⅠ和NotⅠ双酶切获得长约5 900和1 479bp的条带,gp10基因测序结果与GenBank中基因序列一致,并表达相对分子质量约75 200的目的蛋白。重组蛋白gp10对MTB H37Rv和临床分离耐多药株的MIC为256mg·L-1,其与异烟肼联用对H37Rv的FICI为0.5。结论:成功表达重组蛋白gp10,gp10对体外MTB H37Rv和临床耐多药株均表现出良好抗菌活性,其与异烟肼联用对体外H37Rv表现出协同效应。
关键词
gp10
蛋白
异烟肼
结核杆菌
抗菌活性
Keywords
gp10
protein, isoniazid
Mycobacterium tuberculosis
antibacterial activity
分类号
R378 [医药卫生—病原生物学]
R346 [医药卫生—基础医学]
暂未订购
题名
GP10—C3系列高频感应式加热设备的故障及维修
2
作者
郭锦唐
机构
福建省泉州泰门宝金钢石工业公司
出处
《电世界》
2002年第2期28-28,共1页
关键词
高频感应式加热设备
故障
维修
gp10
-C3系列
分类号
TM924.01 [电气工程—电力电子与电力传动]
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职称材料
题名
大肠杆菌噬菌体Bp4尾部蛋白在宿主识别中的作用研究
被引量:
3
3
作者
李兴健
孙蓉蓉
张灿
刘文华
邹玲
任慧英
机构
青岛农业大学动物医学院
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022年第4期377-381,410,共6页
基金
山东省产业技术体系驴产业创新团队经费(SDAIT-27)
山东省重点研发计划项目(2019JZZY010720)。
文摘
为了研究大肠杆菌噬菌体Bp4尾部蛋白中的假定蛋白gp10、尾丝蛋白gp11和尾刺蛋白gp13在噬菌体吸附宿主菌中的作用,本研究经PCR扩增gp10、gp11和gp13基因,克隆至原核表达质粒pcoldTF中,构建重组质粒pcoldTF-gp10、pcoldTF-gp11、pcoldTF-gp13,并分别在E.coli BL21(DE3)中经IPTG诱导后经SDS-PAGE鉴定,结果显示各重组蛋白均获得了表达。将获得的各尾部蛋白纯化后分别4次免疫家兔,获得的各重组蛋白的多克隆抗体(anti-gp10、anti-gp11、anti-gp13)经琼脂双向扩散试验测定效价,分别为1:4、1:8、1:8。将各尾部蛋白与O;血清型大肠杆菌孵育10 min后,加入噬菌体Bp4增殖液进行竞争吸附试验,5 min后利用双层平板法检测并计数噬菌斑,计算噬菌体对大肠杆菌的相对吸附率;分别将各多克隆抗体与噬菌体孵育5 min以阻断噬菌体对大肠杆菌的吸附,再加入大肠杆菌5 min后采用上述双层平板法检测并计数大肠杆菌的噬菌斑,计算噬菌体对大肠杆菌的相对吸附率。尾部蛋白竞争吸附试验结果显示,gp13组中噬菌体对大肠杆菌的相对吸附率为0,与对照组差异极显著(P<0.01);而gp10组和gp11组中噬菌体对大肠杆菌的相对吸附率均为100%,均与对照组无差异,表明gp13能有效抑制噬菌体Bp4对宿主菌的吸附,而gp10和gp11则无此抑制作用。抗体阻断吸附试验结果显示,anti-gp11和anti-gp13组中噬菌体对大肠杆菌的相对吸附率均为0,与对照组差异均极显著(P<0.05);而antigp10组与对照组中噬菌体对宿主菌的相对吸附率均为100%,表明anti-gp13和anti-gp11均能够完全阻断噬菌体对宿主菌的吸附,而anti-gp10对其的吸附无阻断作用。上述结果首次证实大肠杆菌尾部蛋白gp13是大肠杆菌噬菌体Bp4吸附宿主菌的关键蛋白,本实验为研究噬菌体Bp4的感染机制及拓宽该噬菌体的宿主谱奠定了基础。
关键词
噬菌体Bp4
假定蛋白
gp10
尾丝蛋白gp11
尾刺蛋白gp13
宿主识别
Keywords
phage Bp4
putative tail protein
gp10
tail fiber protein gp11
tail spike protein gp13
host recognition
分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
基于嵌入式智能监控系统的IO直控云台结构
4
作者
巩天宁
潘地林
刘倩
机构
安徽理工大学计算机科学与工程学院
出处
《可编程控制器与工厂自动化(PLC FA)》
2009年第4期76-78,共3页
文摘
本文分析了现有数字监控系统中的云台控制法,该方法基于派尔高协议通过串口间接控制云台;提出了基于智能监控系统的嵌入式IO直控云台结构,并结合S3C2440处理器设计了硬件结构、编写了嵌入式Linux操作系统下的驱动程序。
关键词
嵌入式
智能监控
派尔高协议
gp10
S3C2440
LI
RUX驱动程序
Keywords
Embedded technology Intelligent supervision PELCO-D protocol GPIO S3C2440 Linux driver
分类号
TP368 [自动化与计算机技术—计算机系统结构]
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职称材料
题名
摄像机操作控制面板预监功能的实现
5
作者
林凡
机构
浙江广播电视集团
出处
《影视制作》
2018年第6期46-50,共5页
文摘
本文就JOYSTICK的实现原理和具体实现方式展开了详细描述,并对比了几种实现方式的特点。JOYSTICK功能简单好用,在实际应用中可选择符合系统设计的方案,提供快捷高效的全屏预监体验。
关键词
JOYSTICK
gp10
预监
分类号
TN948.41 [电子电信—信号与信息处理]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
gp10基因的原核表达及其联合异烟肼的体外抗结核菌活性
彭蔚
黎友伦
冯燕梅
彭丽
《吉林大学学报(医学版)》
CAS
CSCD
北大核心
2015
1
暂未订购
2
GP10—C3系列高频感应式加热设备的故障及维修
郭锦唐
《电世界》
2002
0
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职称材料
3
大肠杆菌噬菌体Bp4尾部蛋白在宿主识别中的作用研究
李兴健
孙蓉蓉
张灿
刘文华
邹玲
任慧英
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2022
3
在线阅读
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职称材料
4
基于嵌入式智能监控系统的IO直控云台结构
巩天宁
潘地林
刘倩
《可编程控制器与工厂自动化(PLC FA)》
2009
0
在线阅读
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职称材料
5
摄像机操作控制面板预监功能的实现
林凡
《影视制作》
2018
0
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职称材料
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