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水稻GOS2基因高活性启动子的分离及其在叶片中的特性鉴定 被引量:2
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作者 张利东 朱骞 +9 位作者 董陈文华 张树林 伍腾飞 熊海波 张小玲 吕永刚 吴超 李伟 陈丽娟 李东宣 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期32-38,共7页
高活性启动子在基因时空表达调控方面有着重要的作用,利用高效率启动子调控抗性目的基因特异性表达,不仅可以提高作物抗胁迫能力,而且对改良品种方面具有重要的意义。迄今为止,有关水稻翻译起始因子GOS2基因(eukaryotic translation ini... 高活性启动子在基因时空表达调控方面有着重要的作用,利用高效率启动子调控抗性目的基因特异性表达,不仅可以提高作物抗胁迫能力,而且对改良品种方面具有重要的意义。迄今为止,有关水稻翻译起始因子GOS2基因(eukaryotic translation initiation factor 1b)启动子p GOS2启动效率鉴定的报道还很有限,尤其是与Ca MV35S双拷贝启动子的启动效率评估的研究还未见报道。本研究旨在利用PCR和生物信息学等技术,分离及解析水稻GOS2启动子特性,构建p GOS2::GUS双元表达载体,使用农杆菌介导法转化水稻胚性愈伤组织并获得转基因水稻植株,并通过PCR检测与GUS组织化学分析,评估p GOS2在转基因水稻叶片组织中的效率。生物信息学分析结果表明:所克隆的GOS2启动子,序列全长为3 155 bp,具有真核生物典型的一些顺式元件,如TATA-box、AGA-motif、CAAT-box以及GCGC-repeat等;GOS2启动子核心序列位于-43 bp^+4 bp区,得分是0.97。GUS组织化学分析结果显示:阴性对照组未发现GUS信号,而转基因实验组则表现为不同程度的GUS活性,p GOS2启动效率远远高于单双拷贝的Ca MV35S启动子。本研究结果证实了GOS2启动子在水稻叶片组织中的活性远远地高于加强型Ca MV35S启动子,为今后水稻分子育种及相关启动子的开发与筛选提供了一种可行的方法和新的视野。 展开更多
关键词 水稻(Oryza SATIVA L.) gos2 启动子 克隆 GUS组织化学分析
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网格中间件GOS2及一种网格作业流的实现
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作者 王庆官 陈静姝 迟学斌 《计算机应用研究》 CSCD 北大核心 2007年第9期243-245,共3页
介绍了GOS2的特点和社区、网程与网程容器、安全机制、网格文件系统、网格批作业系统以及网格记账系统几个主要模块。给出了一种基于GOS2系统架构,在此基础上实现了一种网格作业流形式的作业提交、结果查看以及作业取消和删除。实现包... 介绍了GOS2的特点和社区、网程与网程容器、安全机制、网格文件系统、网格批作业系统以及网格记账系统几个主要模块。给出了一种基于GOS2系统架构,在此基础上实现了一种网格作业流形式的作业提交、结果查看以及作业取消和删除。实现包括页面部分和后台作业运行脚本部分,并给出了主要实现代码。 展开更多
关键词 网格操作系统 作业流 网程 深腾6800 门户
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维生素D和G0S2基因表达与大鼠结肠癌关系的研究
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作者 王薇雅 李升 +2 位作者 刘民丹 熊继永 徐志刚 《医学检验与临床》 2018年第3期44-47,共4页
目的:通过构建大鼠结肠癌模型,研究维生素D(vitamin,VD)与GOS2基因表达在大鼠结肠癌组织中的关系,从而探讨其在肿瘤发生发展中的作用,为临床研究提供理论基础。方法:选用wistar大鼠60只,进行适应性喂养后随机分为实验组20只、... 目的:通过构建大鼠结肠癌模型,研究维生素D(vitamin,VD)与GOS2基因表达在大鼠结肠癌组织中的关系,从而探讨其在肿瘤发生发展中的作用,为临床研究提供理论基础。方法:选用wistar大鼠60只,进行适应性喂养后随机分为实验组20只、对照A组20只、对照B组20只。对实验组、对照A组大鼠腹腔注射经细胞培养后处于对数生长期的人结肠癌细胞株HCT116(每只大鼠细舱接种量为≥1×106/mL的细胞悬液0.2mL),使大鼠成为患有结肠癌的大鼠。造模后,实验组给予7IU/只维生素D灌胃2周,对照A组给予等量生理盐水灌胃2周;对照B组大鼠不造模,进行腹腔注射等量生理盐水的对照处理,随后的两周给予同实验组的等量生理盐水灌胃。在造模完成后的1周、2周两个时间点分别对三组大鼠各随机10只进行取样,运用酶联免疫吸附法测血清1,25-(OH)2-VD3,取其肠道肿瘤组织或正常肠道组织研磨行RT-PCR检测GOS2基因的表达。结果:在1W时实验组与对照A组相比,血清1,25-(OH)2-VD3的含量明显升高,p〈0.01差异有显著统计学意义;GOS2的表达升高差异有统计学意义P〈0.05。在2W时实验组与对照A组相比,血清1,25-(OH)2-VD3的含量高于对照A组,GOS2的表达明显升高,两者P〈0.01,差异有显著统计学意义;实验组与对照B组相比,血清1,25-(OH)2-VD3的含量降低,P〈0.05差异有统计学意义。对照B组中G0S2的表达在不同饲养时间后没有明显改变,但是实验组和对照A组大鼠随着饲养时间的延长,G0S2的表达有所降低。结论:结肠癌大鼠血清1,25-(OH)2-VD3含量和GOS2的表达均低于正常大鼠,且随着肿瘤发展,两者的水平可能呈现降低趋势。 展开更多
关键词 维生素D 结肠癌 gos2 RT—PCR MRNA
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含G0S2基因启动子的荧光素酶报告基因载体的构建 被引量:2
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作者 张翠珍 蒋学俊 +2 位作者 钱航 张鹏 杨汉东 《现代生物医学进展》 CAS 2014年第10期1830-1833,共4页
目的:克隆人G0S2基因启动子并构建荧光素酶报告基因载体,为进一步研究G0S2基因转录调控提供质粒。方法:利用PCR技术从人胚肾293A细胞基因组DNA中克隆获得G0S2基因启动子的DNA片段,将其克隆至pGL3-basic表达载体中,并转化人大肠杆菌DH5α... 目的:克隆人G0S2基因启动子并构建荧光素酶报告基因载体,为进一步研究G0S2基因转录调控提供质粒。方法:利用PCR技术从人胚肾293A细胞基因组DNA中克隆获得G0S2基因启动子的DNA片段,将其克隆至pGL3-basic表达载体中,并转化人大肠杆菌DH5α,经限制性内切酶酶切、PCR及测序鉴定得到确认;将重组载体质粒与半乳糖苷酶表达质粒psV-β-Galactosidase共转染至大鼠血管平滑肌细胞(VSMC),检测细胞中荧光素酶的活性。结果:pGL3-G0S2-Promoter重组质粒插入片段和相邻序列正确,克隆的G0S2基因片段有启动子活性(P<0.05)。结论:成功构建了pGL3-G0S2-Promoter报告基因质粒,为进一步研究G0S2基因的表达奠定了基础。 展开更多
关键词 G0S2基因 启动子 荧光素酶 报告基因质粒 G0S2
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G0S2抑制ALV-J在鸡巨噬细胞中增殖
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作者 吴慧显 郭旺 +5 位作者 朱姝桐 王陈君 骆欢 崔恒宓 柴文娴 胡序明 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》 CAS 北大核心 2023年第5期65-70,共6页
G0/G1期开关基因2(G0/G1 switch 2,G0S2)在脂肪稳态、细胞增殖和肿瘤发生等生物学过程中扮演着重要角色,而有关G0S2基因在家禽抗病毒免疫中的研究相对甚少。为探讨G0S2基因在鸡巨噬细胞中的抗病毒作用及其机制,构建G0S2真核表达载体并... G0/G1期开关基因2(G0/G1 switch 2,G0S2)在脂肪稳态、细胞增殖和肿瘤发生等生物学过程中扮演着重要角色,而有关G0S2基因在家禽抗病毒免疫中的研究相对甚少。为探讨G0S2基因在鸡巨噬细胞中的抗病毒作用及其机制,构建G0S2真核表达载体并转染鸡巨噬细胞系HD11细胞,通过荧光定量PCR和Western blot检测G0S2过表达对J亚群禽白血病病毒(ALV-J)复制水平、天然免疫基因TLR3和糖酵解关键调控基因MYC表达的影响。结果表明:G0S2过表达可显著抑制ALV-J在HD11细胞中增殖。G0S2显著上调HD11细胞内双链RNA(dsRNA)识别受体基因TLR3表达,并抑制糖酵解调控基因MYC表达,说明激活TLR3表达和抑制MYC表达可能是G0S2基因抑制ALV-J在巨噬细胞中增殖的重要机制。综上,该研究揭示了鸡G0S2在巨噬细胞中的抗病毒功能及其作用机制,为今后研究G0S2的功能及其宿主遗传抗性提供了参考依据。 展开更多
关键词 G0S2 禽白血病病毒 巨噬细胞
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