Gli2在顺铂诱导的急性肾损伤肾小管病变中的作用机制研究

1

作者 徐苑珊 彭珣 +2 位作者 李福记 罗宇珍 潘玲 《内科》 2025年第2期125-132,共8页

目的探讨Hedgehog通路中的关键转录因子Gli2在顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)肾小管病变中的作用机制。方法(1)动物实验:随机将雄性SD大鼠分为对照组(注射生理盐水)和模型组(单次腹腔注射顺铂,15 mg/kg)。对比两组给药前及给药1、3、5 d后... 目的探讨Hedgehog通路中的关键转录因子Gli2在顺铂诱导的急性肾损伤(AKI)肾小管病变中的作用机制。方法(1)动物实验:随机将雄性SD大鼠分为对照组(注射生理盐水)和模型组(单次腹腔注射顺铂,15 mg/kg)。对比两组给药前及给药1、3、5 d后血肌酐水平,给药5 d后肾组织病理学改变情况,以及给药5 d后肾组织中Gli2、Shh、α-SMA、TGF-β1、NGAL、IL-6、IL-18(Hedgehog通路因子、肾小管损伤及纤维化标志物)、Caspase7(细胞凋亡标志物)的mRNA和蛋白相对表达水平。(2)细胞实验:分析不同浓度顺铂(0μmol/L、12.5μmol/L及25μmol/L)干预24 h对NRK-52E细胞中Gli2 mRNA及Gli2蛋白相对表达水平的影响。根据浓度梯度结果选取浓度建立细胞模型进行后续实验。将大鼠肾小管上皮细胞NRK-52E(12.5μmol/L浓度顺铂,干预24 h)分为沉默空载对照组和沉默Gli2组(shRNA法),比较两组NRK-52E细胞中Gli2、NGAL、Smo、TGF-β1、α-SMA(Hedgehog通路因子、肾小管损伤及纤维化标志物),以及Bax、Caspase 7(细胞凋亡标志物)的mRNA及蛋白表达水平。结果(1)动物实验:模型组大鼠给药1 d后、给药3 d后及给药5 d后的血肌酐水平均高于对照组(均P<0.05),且随时间增加呈逐渐升高趋势;肾组织病理显示典型肾小管病变特征,包括上皮细胞脱落导致的基底膜裸露、间质炎性细胞浸润、空泡变性及纤维化改变。给药5 d后,模型组大鼠肾组织Gli2、Shh、α-SMA、TGF-β1、NGAL、IL-6、IL-18和Caspase7的mRNA及蛋白相对表达水平均高于对照组(均P<0.05)。(2)细胞实验:随着顺铂干预浓度的增加,NRK-52E细胞中Gli2 mRNA及Gli2蛋白相对表达水平均逐渐升高(均P<0.05)。12.5μmol/L浓度顺铂干预24 h后,沉默Gli2组NRK-52E细胞中Gli2、NGAL、Smo、TGF-β1、α-SMA、Bax和Caspase7的mRNA及蛋白表达水平,以及NRK-52E细胞的早期凋亡率、晚期凋亡率及总凋亡率均低于沉默空载对照组(均P<0.05)。结论Hedgehog/Gli2通路在顺铂诱导的AKI中被激活。Gli2通过调控Hedgehog/Gli2通路活性介导AKI肾小管上皮细胞损伤、凋亡及纤维化。Gli2抑制剂有望成为治疗AKI纤维化及阻断其慢性转变的有效药物。 展开更多

关键词 急性肾损伤 gli2 肾小管损伤 纤维化 顺铂 HEDGEHOG通路 大鼠

暂未订购

小鼠间充质干细胞SENP3缺失通过GLI2/COX2信号通路促进破骨细胞形成

2

作者 李甜甜 刘志强 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第6期862-870,共9页

间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)通过分泌核因子受体激活因子-κB配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand, RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(marcrophage CSF,M-CSF)等关键细胞因子来诱导多个单核巨噬细胞融... 间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)通过分泌核因子受体激活因子-κB配体(receptor activator for nuclear factor-κB ligand, RANKL)和巨噬细胞集落刺激因子(marcrophage CSF,M-CSF)等关键细胞因子来诱导多个单核巨噬细胞融合,形成多核巨噬细胞,从而支持破骨细胞生成。SUMO特异性蛋白酶3(SUMO-specific protease 3,SENP3)通过去SUMO化修饰蛋白质,进而影响底物蛋白质的稳定性、定位和活性。在本实验室前期工作基础上,我们发现在MSC中敲除SENP3的小鼠破骨细胞数量增加(P<0.001),进一步探究其机制,利用免疫荧光以及Western印迹检测发现,SENP3敲除激活刺猬因子(Hedgehog, Hh)信号通路提高了转录因子Gli家族锌指2(glioma-associated oncogene homolog 2,Gli2)的表达。CHIP-qPCR结果显示,Gli2通过结合环氧化酶2(cyclooxygenase-2,COX-2)启动子区域-1 235~-1 249和-1 158~-1 172促进COX2转录(P<0.05);同时通过ELISA法检测COX2主要分泌产物前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)的水平,发现敲除SENP3的MSC的培养基上清中PGE2的含量增加(P<0.001)。已知PGE2通过前列腺素E受体2(E-type prostanoid receptor 2,EP2)和前列腺素E受体4(E-type prostanoid receptor 4,EP4)介导细胞迁移和破骨细胞生成,在研究中发现,EP4受体在分化的破骨细胞中表达升高(P<0.01)。使用EP4受体的抑制剂能够显著降低活化T细胞核因子(nuclear factor-activated T cell 1, NFATc1)、组织蛋白酶K(cathepsin K, CTSK)和抗酒石酸酸性磷酸酶(tartrate resistant acid phosphatase, TRAP)基因的表达,减少破骨细胞生成(P<0.001),结果表明,EP4受体在PGE2介导的破骨细胞分化中发挥关键作用。总之,小鼠间充质干细胞SENP3缺失通过激活Hh信号通路促进COX2转录和PGE2分泌,从而促进破骨细胞形成。 展开更多

关键词 间充质干细胞 破骨细胞 SUMO特异性蛋白酶3 环氧化酶2 Gli家族锌指2 前列腺素E受体4

原文传递

Gli2调控Hedgehog通路活化对Tca8113细胞增殖、转移和上皮间充质转化的影响 被引量：1

3

作者 刘茂林 王晓堂 +3 位作者 宋晓娜 马云辉 常潇琪 宋国华 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2024年第3期1-9,共9页

目的 本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分... 目的 本研究通过在细胞水平检测Gli2对口腔癌细胞Tca8113增殖、生长、迁移和侵袭的影响,明确Gli2调控口腔癌细胞迁移和侵袭的分子机制。方法 本研究利用siRNA抑制Tca8113细胞中Gli2的表达,通过CCK-8、平板克隆以及transwell小室实验分别检测Gli2对Tca8113细胞增殖、生长、迁移与侵袭的影响。进一步利用qRT-PCR与Western blot实验探究Gli2调控Tca8113细胞恶性增殖和转移机制。结果 口腔癌细胞Tca8113中Gli2的mRNA和蛋白表达升高。干扰Gli2表达可抑制Tca8113细胞增殖、生长、迁移及侵袭。进一步研究发现干扰Gli2表达可抑制Hedgehog(Hh)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。此外,干扰Gli2表达可显著影响上皮间充质转化(epithelial mesenchymal transformation, EMT)通路关键因子的mRNA与蛋白表达。结论 口腔癌病变过程中Gli2被异常激活,干扰Gli2表达显著抑制口腔癌细胞的增殖、生长、迁移和侵袭。Gli2通过调控Hh通路与EMT通路,进而影响口腔癌细胞的迁移和侵袭。本研究为阐明口腔癌的发病机制提供新思路,并为口腔癌的临床治疗提供新视角。 展开更多

关键词 TCA8113细胞 口腔癌 gli2 细胞迁移 细胞侵袭 HEDGEHOG通路 上皮间充质转化

暂未订购

Gli2在原发性肝细胞癌中的表达及与Cyclin D1、p21的关系 被引量：6

4

作者 成薇婷 田德英 许凯 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期435-438,共4页

目的探讨原发性肝细胞癌(HCC)中Gli2、Cyclin D1和p21的表达及其意义。方法采用组织芯片和免疫组织化学方法以及RT-PCR检测了44对HCC和相应癌旁肝组织中Gli2蛋白和mRNA的表达情况,应用Western blot检测了Cyclin D1、p21蛋白在两种组织... 目的探讨原发性肝细胞癌(HCC)中Gli2、Cyclin D1和p21的表达及其意义。方法采用组织芯片和免疫组织化学方法以及RT-PCR检测了44对HCC和相应癌旁肝组织中Gli2蛋白和mRNA的表达情况,应用Western blot检测了Cyclin D1、p21蛋白在两种组织中的表达差异。结果免疫组化染色与RT-PCR示Gli2在HCC组织中的阳性表达率为68.2%,而癌旁肝组织为38.6%,两者差异具有极显著性意义(P<0.01),且Gli2与HCC的组织分化和门静脉转移相关。Cyclin D1蛋白在HCC中的表达显著高于癌旁肝组织(P<0.05),且与Gli2的表达呈正相关;而p21蛋白在癌旁肝组织中的表达显著高于HCC,但与Gli2无明显相关性。结论Gli2过度激活可能通过上调Cyclin D1的表达而使肝癌细胞异常增殖,参与HCC的发生和发展。 展开更多

关键词 癌 肝细胞 gli2蛋白 CYCLIND1蛋白 P21蛋白

暂未订购

附子-白术药对对乳腺癌骨转移裸鼠TGF-β/Smads/Gli2/PTHrP信号通路的影响 被引量：9

5

作者 程旭锋 张新峰 +2 位作者 刘琦 乔翠霞 赵慧朵 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第24期128-132,共5页

目的:研究附子-白术药对对乳腺癌骨转移裸鼠的保护作用及其作用机制。方法:裸鼠随机分为正常组、模型组、唑来膦酸组、附子-白术药对组,采用左心室注射乳腺癌细胞MDA-MB-231BO法建立骨转移模型,并进行相应干预。观察裸鼠骨转移程度,微... 目的:研究附子-白术药对对乳腺癌骨转移裸鼠的保护作用及其作用机制。方法:裸鼠随机分为正常组、模型组、唑来膦酸组、附子-白术药对组,采用左心室注射乳腺癌细胞MDA-MB-231BO法建立骨转移模型,并进行相应干预。观察裸鼠骨转移程度,微计算机断层扫描(Micro-CT)检测裸鼠胫骨矿物质密度(BMD),骨体积(BV),选取感兴趣区域(ROI)体积(TV),计算骨体积分数BV/TV,抗酒石酸酸性磷酸酶染色法(TRAP)观察骨转移灶中破骨细胞表达,蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测转化生长因子-β_1(TGF-β1),Smad3,Smad4,胶质瘤相关癌基因同源蛋白2(Gli2)和甲状旁腺激素相关蛋白(PTHr P)的表达。结果:与模型组比较,附子-白术药对组骨转移程度显著降低(P<0.01),裸鼠胫骨BMD,BV/TV显著升高(P<0.01),TRAP(+)细胞数量显著减少(P<0.01),骨转移灶中TGF-β_1,Smad3,Gli2和PHTr P表达均显著降低(P<0.01),Smad4表达均明显升高(P<0.05)。结论:附子-白术药对可减轻乳腺癌骨转移裸鼠溶骨性损伤,其机制可能与其上调Smad4蛋白表达,下调TGF-β1,Smad3,Gli2和PTHr P蛋白表达,调控TGF-β1/Smads/Gli2/PTHr P信号通路有关。 展开更多

关键词 乳腺癌骨转移 附子-白术药对 转化生长因子-β/Smads/胶质瘤相关癌基因同源蛋白2/甲状旁腺激素相关蛋白(TGF-β/Smads/gli2/PTHrP)信号通路 温肾健脾

原文传递

乙烯硫脲致畸胎鼠直肠末端Gli2基因的表达 被引量：3

6

作者 靳曙光 赵玉元 +2 位作者 高明太 姚南 赵成基 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期180-182,共3页

目的　探讨乙烯硫脲致畸胎鼠直肠末端sonichedgehog(Shh)基因转录因子Gli2基因表达水平。方法　妊娠Wistar大鼠 2 4只随机分成 2组 ,实验组 (n =12 )在孕 11、13d分别给予 1%乙烯硫脲 (12 5mg/kg)胃管注入 ,对照组 (n =12 )予等量蒸馏... 目的　探讨乙烯硫脲致畸胎鼠直肠末端sonichedgehog(Shh)基因转录因子Gli2基因表达水平。方法　妊娠Wistar大鼠 2 4只随机分成 2组 ,实验组 (n =12 )在孕 11、13d分别给予 1%乙烯硫脲 (12 5mg/kg)胃管注入 ,对照组 (n =12 )予等量蒸馏水。孕 16d处死母鼠 ,实验组每只母鼠取 4只体质量相似的无肛畸形胎鼠 ,对照组取 4只体质量相似正常胎鼠 ,各取其直肠末端 1cm提取RNA ,采用RT PCR法检测Gli2基因表达 ,比较两组之间Gli2基因表达水平。结果　先天性无肛胎鼠直肠末端Gli2基因表达水平明显低于正常胎鼠直肠末端 (P =0 .0 0 4)。结论　Gli2基因表达水平减低与先天性无肛畸形的发生密切相关 ,乙烯硫脲致畸机制之一是影响Shh信号转导系统。 展开更多

关键词 肛门直肠畸形 先天性 基因 gli2 乙烯硫脲

暂未订购

早期高分化浆液性囊腺卵巢癌中Ptch及Gli2表达情况 被引量：5

7

作者 师海英 尤琪 +4 位作者 李杉 武金玉 袁海涛 李云秀 程丛丛 《医学研究杂志》 2018年第10期72-74,共3页

目的研究hedgehog(Hh)信号通路中Ptch及Gli2蛋白在卵巢癌中的表达及其临床意义。方法 60例早期高分化浆液性囊腺卵巢癌组织标本为实验组,30例正常卵巢组织标本为对照组,应用免疫组化法检测Ptch及Gli2在实验组及对照组中的表达。结果 Ptc... 目的研究hedgehog(Hh)信号通路中Ptch及Gli2蛋白在卵巢癌中的表达及其临床意义。方法 60例早期高分化浆液性囊腺卵巢癌组织标本为实验组,30例正常卵巢组织标本为对照组,应用免疫组化法检测Ptch及Gli2在实验组及对照组中的表达。结果 Ptch及Gli2在实验组的表达均高于对照组(P <0. 05)。结论 Hh信号通路在卵巢癌组织中异常激活,且该信号通路可能参与卵巢癌的发生、发展过程,进而提示Hh是卵巢癌侵袭转移的一个重要信号通路,为进一步深化卵巢癌的机制研究和靶向治疗提供了一个新的思路。 展开更多

关键词 卵巢癌 HEDGEHOG信号通路 PTCH gli2

暂未订购

Gli2基因在胎鼠后肠发育后期的表达 被引量：1

8

作者 靳曙光 赵玉元 +2 位作者 姚南 高明太 赵成基 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期477-480,共4页

目的探讨胎鼠后肠发育与sonichedgehog(Shh)基因转录因子Gli2基因表达水平的关系。方法48只妊娠Wistar大鼠随机分成2组,实验组(n=24)在孕11d按125mg/kg胃管注入1%乙烯硫脲(ethylenethiourea,ETU),对照组(n=24)给予等量蒸馏水。两组分别... 目的探讨胎鼠后肠发育与sonichedgehog(Shh)基因转录因子Gli2基因表达水平的关系。方法48只妊娠Wistar大鼠随机分成2组,实验组(n=24)在孕11d按125mg/kg胃管注入1%乙烯硫脲(ethylenethiourea,ETU),对照组(n=24)给予等量蒸馏水。两组分别于孕12d、14d和16d各处死8只母鼠,每只母鼠取4只体重相似的胎鼠,取其直肠1cm提取RNA,采用半定量RT_PCR法检测Gli2基因表达。结果实验组胎鼠直肠Gli2基因表达水平明显低于对照组(P<0.05),实验组Gli2基因表达呈一低水平线,而对照组随妊娠时间呈一下降的曲线。结论Gli2基因表达水平在胎鼠后肠发育中具有重要的作用。 展开更多

关键词 肛门直肠畸形 基因 gli2 乙烯硫脲 大鼠

暂未订购

肿瘤坏死因子-α联合转化生长因子-β1作用于原代白血病细胞对Gli2表达的影响 被引量：2

9

作者 李哲 孙圆圆 潘静 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第22期3678-3681,共4页

目的：证明肿瘤坏死因子-α（TNF-α）可以促进转化生长因子-β（TGF-β）降低原代白血病细胞Gli2的表达。方法 ：（1）Western blot检测白血病细胞Gli2蛋白的表达。（2）不同浓度TGF-β1和TNF-α分别作用于原代白血病细胞后,检测Gli2... 目的：证明肿瘤坏死因子-α（TNF-α）可以促进转化生长因子-β（TGF-β）降低原代白血病细胞Gli2的表达。方法 ：（1）Western blot检测白血病细胞Gli2蛋白的表达。（2）不同浓度TGF-β1和TNF-α分别作用于原代白血病细胞后,检测Gli2基因或蛋白以及TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ蛋白的表达。（3）TGF-β1、TNF-α及SIS3作用于原代白血病细胞24 h后,检测Gli2蛋白的表达。结果：（1）3株原代白血病细胞均有Gli2蛋白的表达。（2）1~10 ng/m L TGF-β1作用于原代白血病细胞12~24 h,与对照组相比Gli2基因m RNA表达降低明显;5 ng/m L TNF-α则没有显著变化。（3）5 ng/m L TNF-α作用于原代白血病细胞24 h后,与对照组相比TGF-βRⅠ和TGF-βRⅡ蛋白表达均有增高。（4）单独应用TGF-β以及联合应用TNF-α和TGF-β作用24 h后,与对照组相比Gli2基因的表达均降低明显,而且TNF-α＋TGF-β组Gli2基因的表达较TGF-β组降低更明显。结论：联合应用TNF-α和TGF-β比单独应用TGF-β能进一步减少原代白血病细胞Gli2基因的表达。 展开更多

关键词 原代白血病细胞 TGF-Β1 TNF-Α gli2

暂未订购

癌基因Gli2促进肾癌细胞的体外侵袭能力 被引量：1

10

作者 畅雅学 周建成 +2 位作者 孙羿 杜双宽 程永毅 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第24期3905-3909,共5页

目的:研究Gli2与肾癌细胞侵袭之间的关系。方法:采用免疫组织化学染色的方法对41例肾癌临床标本中Gli2的表达情况进行检测,并分析Gli2在局部侵袭性肾癌和非局部侵袭性肾癌中的表达差异。运用肾癌细胞模型,通过过表达Gli2质粒或添加Gli2... 目的:研究Gli2与肾癌细胞侵袭之间的关系。方法:采用免疫组织化学染色的方法对41例肾癌临床标本中Gli2的表达情况进行检测,并分析Gli2在局部侵袭性肾癌和非局部侵袭性肾癌中的表达差异。运用肾癌细胞模型,通过过表达Gli2质粒或添加Gli2特异性抑制剂干预细胞,采用体外侵袭实验分析Gli2在肾癌细胞侵袭能力中的作用,RT-PCR检测Gli2对细胞侵袭相关基因的调控作用。结果:Gli2蛋白在T_(3-4)期肾癌中的表达水平明显高于T_(1-2)期(P<0.05),Gli2过表达能明显促进肾癌细胞的体外侵袭能力,反之,Gli2特异性的抑制剂Gant61则显著减弱肾癌细胞的体外侵袭能力。Gli2抑制肾癌细胞上皮标记物E-Cadherin的表达,上调间质标记物N-Cadherin,Vimentin,MMP-2及MMP-9的表达;Gli2抑制剂的作用则相反。结论:Gli2通过调控侵袭相关基因的表达促进肾癌细胞的侵袭。 展开更多

关键词 gli2 肾癌 侵袭转移 癌基因

暂未订购

沉默Gli2基因对人肝癌细胞系SMMC-7721体外血管生成的影响

11

作者 李建水 吴斌 +2 位作者 严舒 邓大炜 曾丽娟 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第7期995-999,共5页

目的探讨胶质瘤相关癌基因2(Gli2)对肝癌细胞SMMC-7721体外血管生成作用及机制。方法设干扰组、对照组和空白组;构建靶向Gli2的shRNA重组慢病毒和阴性对照慢病毒,转染到SMMC-7721细胞,RT-q PCR和Western blot检测沉默效率;用体外血管生... 目的探讨胶质瘤相关癌基因2(Gli2)对肝癌细胞SMMC-7721体外血管生成作用及机制。方法设干扰组、对照组和空白组;构建靶向Gli2的shRNA重组慢病毒和阴性对照慢病毒,转染到SMMC-7721细胞,RT-q PCR和Western blot检测沉默效率;用体外血管生成实验检测血管生成能力;用ELISA检测SMMC-7721细胞上清液中VEGF-A、MMP-2分泌水平;用RT-q PCR、Western blot检测细胞内VEGF-A、MMP-2的表达差异。结果 shRNA慢病毒转染率为90%左右,干扰组与对照组和空白组相比Gli2表达降低(P<0.05);血管生成能力减弱(P<0.05);上清液中VEGF-A含量下降(P<0.05);细胞中VEGF-A、MMP-2表达明显降低(P<0.05)。结论沉默Gli2的表达能够抑制肝癌细胞SMMC-7721血管生成,其机制可能与VEGF-A、MMP-2的下调有关。 展开更多

关键词 gli2 肝癌 血管生成 侵袭

暂未订购

内源性转化生长因子-β对白血病细胞株Gli2基因表达的影响

12

作者 李哲 李斌 潘静 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期3799-3800,共2页

目的探讨转化生长因子(TGF)-β信号通路对白血病KG-1细胞株Gli基因的调控作用。方法(1)ELISA法检测KG-1细胞培养上清液TGF-β1水平;(2)5μmol/L SIS3作用于KG-1细胞,时间分别为6、12、24 h。处理结束后收集细胞,提取mRNA,检测Gli2的表... 目的探讨转化生长因子(TGF)-β信号通路对白血病KG-1细胞株Gli基因的调控作用。方法(1)ELISA法检测KG-1细胞培养上清液TGF-β1水平;(2)5μmol/L SIS3作用于KG-1细胞,时间分别为6、12、24 h。处理结束后收集细胞,提取mRNA,检测Gli2的表达。结果 (1)KG-1细胞的培养上清TGF-β1水平明显低于正常人组;(2)5μmol/L SIS3加入KG-1细胞分别作用6、12、24 h,与对照组(仅加入2甲基亚砜为SIS3的溶剂)相比较,其Gli2的mRNA表达明显升高;并且随着作用时间的延长,差异更加显著。结论 KG-1细胞有低水平的TGF-β1产生,TGF-β抑制KG-1细胞Gli2的表达是通过TGF-β/Smad3途径介导的。 展开更多

关键词 KG-1细胞 转化生长因子-Β SIS3 gli2

暂未订购

Y-box结合蛋白1通过Gli2调控肝祖细胞增殖

13

作者 李飞 李兵航 +6 位作者 郭悦承 沈波 顾天翊 曲颖 张启迪 蔡晓波 陆伦根 《肝脏》 2021年第5期557-562,共6页

目的探索Y-box结合蛋白1(YB-1)对肝祖细胞(HPC)增殖的影响及机制。方法慢病毒载体系统下调YB-1的表达,细胞增殖实验和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期;RNA测序分析YB-1对HPC表达谱的影响;染色质免疫共沉淀结合高通量测序(ChIP-sequen... 目的探索Y-box结合蛋白1(YB-1)对肝祖细胞(HPC)增殖的影响及机制。方法慢病毒载体系统下调YB-1的表达,细胞增殖实验和流式细胞术检测细胞增殖和细胞周期;RNA测序分析YB-1对HPC表达谱的影响;染色质免疫共沉淀结合高通量测序(ChIP-sequence)检测YB-1在HPC中的靶基因;实时PCR和蛋白质印迹检测相关基因表达;ChIP-PCR验证YB-1与Gli2启动子结合;荧光素酶报告基因实验分析YB-1调控Gli2的转录;Gli1/Gli2阻滞剂与HPC共培养并检测细胞增殖。结果YB-1 mRNA下调67%和75%后HPC增殖率分别下降58%和70%;RNA-sequence显示YB-1能调控Hedgehog信号通路、Wnt信号通路以及MAPK信号通路;ChIP-sequence显示YB-1在HPC中的靶基因参与细胞粘附、Wnt信号通路、Hedgehog信号通路,且YB-1能结合于Gli2启动子区;ChIP-PCR和荧光素酶报告基因实验表明YB-1能与Gli2结合并正调控其转录;实时PCR和蛋白质印迹证实YB-1可以调控Hedgehog信号通路上多种信号分子的表达;与对照组相比,Gli1/Gli2阻滞剂处理后处于有丝分裂期的HPC细胞数下降60%以上。结论YB-1能与Gli2启动子区结合并正向调控其转录,进而调控HPC增殖。 展开更多

关键词 YB-1 gli2 肝祖细胞 增殖

暂未订购

氧化苦参碱通过促进胰腺星状细胞株中Gli2表达发挥抗胰腺纤维化作用 被引量：11

14

作者 李嫚华 陈凯 +3 位作者 张青 向晓辉 许威 夏时海 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第13期3069-3073,共5页

目的研究氧化苦参碱(OM)对接受TGF-β1刺激的永生化的大鼠胰腺星状细胞(LTC-14)细胞和胰腺导管癌细胞(PANC-1)中Gli2表达的影响。方法取LTC-14细胞和PANC-1细胞,分别分为对照组、TGF-β1处理组、TGF-β1+OM处理组、OM对照组,作用12 h后... 目的研究氧化苦参碱(OM)对接受TGF-β1刺激的永生化的大鼠胰腺星状细胞(LTC-14)细胞和胰腺导管癌细胞(PANC-1)中Gli2表达的影响。方法取LTC-14细胞和PANC-1细胞,分别分为对照组、TGF-β1处理组、TGF-β1+OM处理组、OM对照组,作用12 h后提取蛋白,通过Western blotting法检测相关蛋白表达。结果与对照组相比,LTC-14细胞接受TGF-β1刺激后Gli2表达显著降低,但是α-SMA、FN和Co L-I的蛋白表达显著上升;与TGF-β1处理组比较,OM预处理后使接受TGF-β1刺激的LTC-14细胞Gli2表达显著升高。与对照组相比,PANC-1细胞接受TGF-β1刺激后Gli2表达显著升高,α-SMA、FN和Co L-I的蛋白表达也显著上升;与TGF-β1处理组比较,OM预处理后使接受TGF-β1刺激的PANC-1细胞Gli2表达显著下降。结论 OM可能通过促进LTC-14细胞中Gli2表达而发挥抗胰腺纤维化作用。 展开更多

关键词 氧化苦参碱 胰腺纤维化 LTC-14细胞 PANC-1细胞 gli2转录因子 TGF-β1

原文传递

端粒酶逆转录酶和Gli1、Gli2在胃癌中的表达及意义 被引量：8

15

作者 魏青林 张丹 杨仕明 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期902-906,共5页

目的探讨端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,h TERT)和Gli1、Gli2在胃癌组织中的表达及意义。方法利用免疫组化S-P两步法检测72例胃癌及其癌旁组织中h TERT、Gli1、Gli2的表达情况,并结合患者的临床病理资料进行... 目的探讨端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,h TERT)和Gli1、Gli2在胃癌组织中的表达及意义。方法利用免疫组化S-P两步法检测72例胃癌及其癌旁组织中h TERT、Gli1、Gli2的表达情况,并结合患者的临床病理资料进行分析。结果 h TERT、Gli1、Gli2在胃癌中的表达明显高于癌旁组织中的表达(P<0.05),h TERT与Gli1、h TERT与Gli2的表达均呈正相关(r分别为0.502 2、0.624 6,P<0.05)。h TERT、Gli1、Gli2的表达均与淋巴结转移有关(P<0.05)。h TERT、Gli1均高表达组以及h TERT、Gli2均高表达组生存时间较短,三者均高表达组生存时间最短(P<0.05)。结论 h TERT与Gli1、Gli2在胃癌中均高表达,三者联合检测对预测胃癌转移、预后有一定指导意义。 展开更多

关键词 HTERT GLI1 gli2 胃癌

原文传递

Gli2在髓母细胞瘤中的表达及其靶向抑制剂的作用与意义 被引量：5

16

作者 林中啸 蔡铭 +5 位作者 虞晓明 张一平 杨涛 盛汉松 陈成春 张弩 《医学研究杂志》 2015年第4期66-70,共5页

目的探讨SHH(sonic hedgehog signaling pathway)信号通路下游转录因子Gli2在髓母细胞瘤(medulloblastoma,MB)中的表达及其靶向抑制剂对MB细胞增殖抑制的作用。方法使用不同浓度的Gli2特异性抑制剂GANT61作用Doay细胞,观察细胞形态的变... 目的探讨SHH(sonic hedgehog signaling pathway)信号通路下游转录因子Gli2在髓母细胞瘤(medulloblastoma,MB)中的表达及其靶向抑制剂对MB细胞增殖抑制的作用。方法使用不同浓度的Gli2特异性抑制剂GANT61作用Doay细胞,观察细胞形态的变化,采用CCK-8法检测细胞的增殖抑制作用,RT-PCR法和Western blot法分别检测Doay细胞中Gli2mRNA的表达量及Gli2蛋白表达水平的差异。结果使用GANT61作用细胞后,可见细胞形态出现明显改变,细胞异常突起增多;CCK-8法检测显示,与对照组相比,GANT61能够抑制Doay细胞的增殖(P<0.05),且细胞增殖的抑制率呈明显的剂量-效应关系;RT-PCR法显示Gli2特异性抑制剂GANT61组较对照组Gli2 mRNA的表达明显下降(P<0.05);Western blot法检测结果示GANT61抑制剂组较对照组Gli2蛋白表达水平明显下降(P<0.05)。结论 GANT61主要通过抑制Gli2 mRNA的表达,下调Gli2蛋白表达水平而抑制MB的增殖生长。因此,Gli2可能是治疗MB的重要生物学标志物和生物治疗的潜在靶点。 展开更多

关键词 髓母细胞瘤 SHH信号通路 gli2转录因子 GANT61

暂未订购

Gli2基因在涎腺多形性腺瘤中的表达及其意义 被引量：4

17

作者 肖翠翠 汪廷乐 +2 位作者 宋萌 徐立群 陈万涛 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2010年第6期384-388,共5页

目的:探讨Gli2基因在涎腺多形性腺瘤和正常涎腺组织中的表达水平及其在多形性腺瘤发生发展中的作用。方法:收集20例腮腺多形性腺瘤组织和20例相对应的瘤旁正常腮腺组织,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR... 目的:探讨Gli2基因在涎腺多形性腺瘤和正常涎腺组织中的表达水平及其在多形性腺瘤发生发展中的作用。方法:收集20例腮腺多形性腺瘤组织和20例相对应的瘤旁正常腮腺组织,应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)方法检测Gli2基因mRNA的表达水平,分析其表达变化,并探讨Gli2基因在涎腺多形性腺瘤发生发展中的作用及其临床应用价值。结果:与正常腮腺组织相比,多形性腺瘤组织中Gli2基因mRNA的表达水平升高。结论:多形性腺瘤中Gli2 mRNA的高表达可诱导肿瘤细胞持续增殖,提示Gli2基因可能在涎腺多形性腺瘤的发生发展中具有重要作用。 展开更多

关键词 多形性腺瘤 gli2基因 HEDGEHOG信号通路 逆转录聚合酶链反应

暂未订购

Gli2对高糖条件下肾小管上皮细胞凋亡及ROS水平影响 被引量：7

18

作者 张灵灵 郭利芹 徐可 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期830-834,839,共6页

目的:探讨胶质瘤相关癌基因2(Gli2)对高糖条件下的肾小管上皮细胞凋亡及活性氧(ROS)水平影响。方法:用肾小管上皮细胞NRK-52E为研究对象,分别转染Gli2过表达载体和对照载体,同时用不转染的细胞作为对照,RT-PCR和Western blot检测Gli2水... 目的:探讨胶质瘤相关癌基因2(Gli2)对高糖条件下的肾小管上皮细胞凋亡及活性氧(ROS)水平影响。方法:用肾小管上皮细胞NRK-52E为研究对象,分别转染Gli2过表达载体和对照载体,同时用不转染的细胞作为对照,RT-PCR和Western blot检测Gli2水平,用高糖和低糖细胞培养液培养不转染的对照细胞,同时以高糖培养液培养转染Gli2过表达载体的细胞,流式细胞术检测细胞凋亡,二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)探针法检测ROS含量,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)含量,Western blot检测Bcl-2相关X蛋白(Bax)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3(Cleaved Caspase-3)、Ptch相关跨膜蛋白Smoothened(Smo)水平。结果:NRK-52E细胞转染Gli2过表达载体后的Gli2 mRNA和蛋白水平均明显高于对照细胞(P<0.01),而转染对照载体后的NRK-52E细胞中Gli2 mRNA和蛋白水平与对照细胞相比没有差异(P>0.05)。高糖培养后的不做转染的NRK-52E细胞凋亡率升高,ROS含量升高,SOD含量下降,细胞中Bax、Cleaved Caspase-3水平升高,Smo水平下降,与对照细胞相比差异具有统计学意义(P<0.01)。而过表达Gli2后的NRK-52E细胞经高糖培养后,细胞凋亡率下降,ROS含量降低,SOD含量升高,细胞中Bax、Cleaved Caspase-3水平下降,Smo水平升高,与单纯高糖培养的NRK-52E细胞相比,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:高糖诱导肾小管上皮细胞凋亡和氧化损伤,Gli2可以降低高糖诱导的肾小管上皮细胞凋亡,减轻氧化损伤。 展开更多

关键词 肾小管上皮细胞 gli2 高糖 凋亡 氧化损伤

暂未订购

丹参含药血清抑制瘦素及Hh信号通路激活诱导的大鼠肝星状细胞中EVC2和Gli2表达上调 被引量：5

19

作者 韩仕庆 曹文富 冯藜枥 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2016年第2期118-124,共7页

目的观察丹参含药血清是否可以通过抑制瘦素诱导的刺猬(Hedgehog,Hh)信号通路中纤毛蛋白(Ellis-van creveld syndrome protein 2,EVC2)和锌指转录因子2(GLI family zinc fingerprotein 2,Gli2)的表达从而抑制大鼠肝星状细胞(hepatic ste... 目的观察丹参含药血清是否可以通过抑制瘦素诱导的刺猬(Hedgehog,Hh)信号通路中纤毛蛋白(Ellis-van creveld syndrome protein 2,EVC2)和锌指转录因子2(GLI family zinc fingerprotein 2,Gli2)的表达从而抑制大鼠肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)的增殖。方法丹参水煎剂、生理盐水灌胃大鼠10天后收集各组血清。应用高效液相色谱仪检测丹参含药血清中有效成分(丹参素、丹参酮IIA)的含量。将处于对数生长期的HSCs传代于6孔板,分为6组(空白对照组、瘦素组、瘦素+抑制剂组、瘦素+丹参组、瘦素+激动剂组、瘦素+激动剂+丹参组),每组分别培养在相应含药血清中,24h后收集细胞。采用MTT检测细胞增殖情况,免疫荧光检测EVC2在各组HSCs中的表达,Western blot测定EVC2和Gli2蛋白水平,RT-PCR法检测EVC2和Gli2 mRNA水平。结果瘦素能刺激HSCs的活化增殖,使EVC2和Gli2表达量显著升高;Hh通路抑制剂和丹参能抑制瘦素对HSCs增殖的活化作用和对EVC2、Gli2表达的上调作用;丹参对Hh通路激动剂与瘦素共同作用所致的HSCs增殖极强活化和EVC2、Gli2表达极强上调也具有明显抑制作用。结论丹参可以通过抑制Hh信号通路中EVC2、Gli2的表达,从而对活化的HSCs产生抑制作用。 展开更多

关键词 Hh信号通路 肝星状细胞 EVC2 gli2 肝纤维化

暂未订购

外源表达持续活化型Gli2对小鼠星形胶质细胞生物学特性的影响

20

作者 吴文涛 葛瑞民 +3 位作者 董林 刘秀秀 张小燕 沈丽 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期98-101,共4页

目的探讨外源表达持续活化型Gli2对小鼠星形胶质细胞生物学特性的影响。方法构建可表达持续活化型Gli2的慢病毒载体,包装慢病毒颗粒,继而感染小鼠星形胶质细胞,对其生物学特性的改变进行鉴定。结果研究发现,含有外源表达的持续活化型Gli... 目的探讨外源表达持续活化型Gli2对小鼠星形胶质细胞生物学特性的影响。方法构建可表达持续活化型Gli2的慢病毒载体,包装慢病毒颗粒,继而感染小鼠星形胶质细胞,对其生物学特性的改变进行鉴定。结果研究发现,含有外源表达的持续活化型Gli2的小鼠星形胶质细胞在神经干细胞培养基中连续培养13 d后可获得形成细胞球的能力,且形成的细胞球与正常的小鼠神经球在形态上相近;对所形成的细胞球做免疫荧光染色,结果显示神经干细胞的特异性标志物Nestin呈阳性。结论在小鼠星形胶质细胞中外源表达持续活化型Gli2后可使其获得形成神经球样细胞球的能力。 展开更多

关键词 神经干细胞 中枢神经系统损伤 持续活化型 gli2 神经球 慢病毒转染法 星形胶质细胞 NESTIN

暂未订购