宫颈癌组织中LCoR、GINS2蛋白、LHPP的表达及其临床意义

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作者 焦瑞仙 孙丽莎 +4 位作者 张娟 杨方圆 王虹 张琳 翟梦姣 《实用癌症杂志》 2025年第2期196-199,204,共5页

目的 探讨宫颈癌组织中配体依赖性辅助抑制因子(LCoR)、GINS2蛋白、组氨酸磷酸酶(LHPP)的表达与其临床病理特征及预后的相关性。方法 选择102例宫颈癌患者,术中采集癌组织和癌旁组织,采用免疫组织化学染色法(SP)检测LCoR、LHPP、GINS2蛋... 目的 探讨宫颈癌组织中配体依赖性辅助抑制因子(LCoR)、GINS2蛋白、组氨酸磷酸酶(LHPP)的表达与其临床病理特征及预后的相关性。方法 选择102例宫颈癌患者,术中采集癌组织和癌旁组织,采用免疫组织化学染色法(SP)检测LCoR、LHPP、GINS2蛋白,对比不同组织内三者阳性表达情况,并分析癌组织内LCoR、LHPP、GINS2蛋白阳性表达与患者临床病理特征及预后的关系。结果 癌组织内LCoR、GINS2蛋白阳性表达率高于癌旁组织,LHPP阳性表达率低于癌旁组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。癌组织内LCoR、GINS2蛋白阳性表达率与宫颈癌患者肿瘤最大直径、肿瘤浸润深度、FIGO分期、淋巴结转移均呈正相关(P<0.05);LHPP阳性表达率与宫颈癌患者FIGO分期、肿瘤最大直径、淋巴结转移、肿瘤浸润深度呈负相关(P<0.05)。生存率方面,GINS2蛋白、LCoR阳性表达者较阴性表达者低,LHPP蛋白阳性表达者较阴性表达者高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 宫颈癌组织中GINS2蛋白、LCoR、LHPP均异常表达,三者表达与肿瘤浸润深度、肿瘤最大直径、淋巴结转移、FIGO分期及预后密切相关,可作为宫颈癌病情进展和预后的评估指标。 展开更多

关键词 gins2蛋白 配体依赖性辅助抑制因子 组氨酸磷酸酶 宫颈癌 病理特征 生存率

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GINS2在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义

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作者 罗建波 潘玉卿 +4 位作者 翟丽 陶芃作 朱应芳 冯志启 张曦 《中国生物制品学杂志》 2025年第8期932-938,共7页

目的探讨GINS2在子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)组织中的表达及其与疾病预后之间的相关性。方法利用GEPIA、TIMER及UALCAN数据库分析GINS2基因在EC和正常对照组织样本中的表达差异。收集云南省肿瘤医院妇瘤科2017年5月—2022年12月... 目的探讨GINS2在子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)组织中的表达及其与疾病预后之间的相关性。方法利用GEPIA、TIMER及UALCAN数据库分析GINS2基因在EC和正常对照组织样本中的表达差异。收集云南省肿瘤医院妇瘤科2017年5月—2022年12月治疗和随访完成的115例EC患者(EC组)、30例子宫肌瘤患者(肌瘤组)及26例子宫内膜正常的妇科其他疾病患者(正常对照组)子宫内膜组织,采用qPCR及Western blot法分别检测样本中GINS2 mRNA及蛋白表达水平;免疫组织化学法检测不同样本中GINS2的表达量及其定位情况。此外,分析GINS2表达水平与EC临床病理特征的相关性,并通过Kaplan-Meier生存分析和Cox回归模型评估其对EC预后的潜在影响。结果3个数据库检索结果显示,EC组织中GINS2基因mRNA表达水平均明显高于正常组织(P<0.05);在临床验证队列中,EC组GINS2 mRNA和蛋白表达水平均显著高于肌瘤组和正常对照组(t分别为7.707、8.330,P均<0.01)。GINS2蛋白在EC组织中主要定位于细胞核及部分胞质中,在EC组、肌瘤组、正常对照组子宫内膜组织中的阳性表达率分别为81.74%、46.67%、38.46%。EC组织中GINS2水平与分化程度及淋巴结转移有关(t分别为4.125、3.589,P均<0.05),而与年龄、组织类型、国际妇产科学联合会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期、浸润深度、雌激素受体(estrogen receptor,ER)表达、孕激素受体(progesterone receptor,PR)表达无关(t分别为0.214、0.247、0.125、0.211、0.238、0.314,P均>0.05)。多因素Cox回归分析显示,EC患者GINS2表达增高[危险比(hazard ratio,HR)=2.091,95%置信区间(confidence interval,CI):1.048~3.135,P=0.019]及淋巴结转移(HR=1.106,95%CI:1.064~1.149,P=0.027)是EC患者预后的独立影响因子。结论组织中GINS2的高表达与EC患者的预后不良有关,推测其可能与EC的发生发展相关。 展开更多

关键词 子宫内膜癌 gins2 病理特征 预后

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干扰GINS2表达对HL60细胞增殖和凋亡的影响 被引量：6

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作者 张曦 刘北忠 +5 位作者 高艳军 黎亮 高远梅 胡秀秀 马鹏鹏 钟梁 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期41-46,共6页

目的:探讨靶向抑制GINS2基因表达后对人早幼粒细胞白血病细胞株HL60增殖和凋亡的影响及其机制。方法:RT-PCR分别检测GINS2基因在三株白血病细胞HL60、U937、THP-1的表达。设计与合成针对GINS2基因的干扰序列,稳定转染高表达该基因的HL6... 目的:探讨靶向抑制GINS2基因表达后对人早幼粒细胞白血病细胞株HL60增殖和凋亡的影响及其机制。方法:RT-PCR分别检测GINS2基因在三株白血病细胞HL60、U937、THP-1的表达。设计与合成针对GINS2基因的干扰序列,稳定转染高表达该基因的HL60细胞,荧光显微镜观察绿色荧光蛋白的表达情况;RT-PCR和Western blot分别检测各组细胞转染后mRNA和蛋白质水平;MTT法检细胞的增殖和凋亡情况;流式细胞术分析细胞的凋亡率;Western blot检测凋亡相关蛋白的表达。结果:在三株白血病细胞株中,GINS2的表达量由低到高依次是:THP-1,U937,HL60。干扰质粒转染HL60细胞后,与阴性对照组及未处理组相比,干扰组GINS2的mRNA和蛋白质水平均显著降低,且细胞的增殖能力明显受抑。同时,凋亡相关蛋白Bax表达水平显著增高而Bcl2显著降低。结论:干扰GINS2基因表达后,其mRNA和蛋白质水平均显著降低,可通过上调Bax表达,下调Bcl2表达来抑制HL60细胞增殖并促进其凋亡。 展开更多

关键词 gins2 细胞凋亡 HL60细胞 BAX BCL2

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下调GINS2表达抑制HL60细胞周期调控因子 被引量：6

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作者 张曦 钟梁 +4 位作者 高远梅 胡秀秀 王慧 朱新瑜 刘北忠 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2013年第9期1085-1090,共6页

目的观察下调GINS2的表达后对人白血病细胞系HL60周期调控因子的变化并探讨其机制。方法脂质体介导并稳定转染干扰质粒的细胞为干扰组,转染阴性对照质粒的细胞为阴性对照组,只加入脂质体的细胞为空白对照组,未转染的HL60细胞为未处理组... 目的观察下调GINS2的表达后对人白血病细胞系HL60周期调控因子的变化并探讨其机制。方法脂质体介导并稳定转染干扰质粒的细胞为干扰组,转染阴性对照质粒的细胞为阴性对照组,只加入脂质体的细胞为空白对照组,未转染的HL60细胞为未处理组。集落形成实验测定细胞增殖;流式细胞术分析细胞周期;3H-TdR掺入实验检测细胞DNA合成;Western blot检测CDK1、cyclinB1等蛋白;RT-PCR检测ATM,CHK2,P53等mRNA水平;Western blot检测其蛋白水平。结果和其他3组相比,干扰组细胞G2期细胞数明显增加、DNA合成受阻、增殖减慢。与G2期相关周期调控蛋白CDK1,cyclinB1的表达随时间变化而明显降低。和其他3组相比,干扰组细胞ATM,CHK2,P53转录水平和翻译水平显著上调。结论下调GINS2表达后可抑制HL60细胞DNA复制并影响其G期进程,机制可能与ATM,CHK2,P53等基因相关。 展开更多

关键词 gins2基因 HL60细胞 G2期阻滞 白血病

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GINS2基因siRNA真核表达质粒的构建及其对NB4细胞凋亡的影响 被引量：3

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作者 高艳军 刘北忠 +6 位作者 钟梁 初晨 吴秀娟 黎亮 张曦 高远梅 胡秀秀 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第12期1602-1606,共5页

目的构建GINS2基因siRNA真核表达质粒,并检测其对NB4细胞凋亡的影响。方法人工合成针对GINS2基因的4组siRNA干扰序列和1组无同源性的序列,测序鉴定后转染低传代人早幼粒细胞系NB4细胞,经G418筛选后,通过QRT-PCR、Western blot检测重组... 目的构建GINS2基因siRNA真核表达质粒,并检测其对NB4细胞凋亡的影响。方法人工合成针对GINS2基因的4组siRNA干扰序列和1组无同源性的序列,测序鉴定后转染低传代人早幼粒细胞系NB4细胞,经G418筛选后,通过QRT-PCR、Western blot检测重组质粒对NB4细胞中GINS2基因mRNA转录水平和蛋白表达水平的影响;流式细胞术检测NB4细胞的凋亡情况。结果 5组重组质粒经测序证明构建正确,4组干扰质粒转染NB4细胞后,细胞中GINS2基因mRNA的转录水平和蛋白的表达水平均有所降低,其中干扰组1基因干扰率达50%,蛋白相对表达量为56%;干扰组1细胞凋亡率为32.54%,较正常对照组和NC组明显上升(P<0.01)。结论成功构建了GINS2基因siRNA真核表达质粒,抑制GINS2基因的表达可促进NB4细胞的凋亡,为进一步研究GINS2基因在白血病中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 gins2基因 RNA干扰 NB4细胞 细胞凋亡

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人GINS2基因重组腺病毒表达质粒的构建及鉴定 被引量：1

6

作者 张曦 刘北忠 +5 位作者 钟梁 高远梅 胡秀秀 王慧 马鹏鹏 朱新瑜 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第5期626-629,633,共5页

目的利用AdEasy系统构建携带人GINS2基因的重组腺病毒表达质粒,并进行鉴定。方法以pcDNA3.1-GINS2质粒为模板,PCR扩增GINS2基因,克隆至穿梭质粒pAdTrace-TO4中,构建重组腺病毒穿梭质粒pAdT-GINS2,经双酶切及测序鉴定正确的阳性质粒与骨... 目的利用AdEasy系统构建携带人GINS2基因的重组腺病毒表达质粒,并进行鉴定。方法以pcDNA3.1-GINS2质粒为模板,PCR扩增GINS2基因,克隆至穿梭质粒pAdTrace-TO4中,构建重组腺病毒穿梭质粒pAdT-GINS2,经双酶切及测序鉴定正确的阳性质粒与骨架质粒pAdEasy-1同时转化感受态大肠杆菌BJ5183,经同源重组获得重组腺病毒质粒pAdE-GINS2,转染HEK293细胞,包装出重组腺病毒Ad-GINS2,大量扩增后,测定病毒滴度,进行PCR鉴定。Western blot法检测重组腺病毒感染的人HL60细胞中GINS2蛋白的表达,MTT法检测重组腺病毒感染对HL60细胞增殖的影响。结果重组腺病毒穿梭质粒pAdT-GINS2经双酶切及测序证明构建正确;经酶切鉴定证明重组腺病毒质粒pAdE-GINS2构建正确;经PCR鉴定证明重组腺病毒Ad-GINS2包装成功,经3轮扩增后病毒滴度可达1.35×1012IU/ml;与空载体感染及未感染的HL60细胞相比,重组腺病毒感染的HL60细胞内GINS2蛋白的表达及细胞增殖水平均明显升高(P<0.05)。结论已成功构建携带人GINS2基因的重组腺病毒表达质粒,感染人HL60细胞后可促进其增殖,为进一步研究该基因在急性髓细胞白血病发生发展中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 gins2基因 腺病毒 HL60细胞 基因表达

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GINS2蛋白在宫颈癌组织中的表达情况及其与患者临床特征和预后的关系 被引量：3

7

作者 王媛 惠双 +3 位作者 张成辉 郭宏强 贺海发 杨如玉 《癌症进展》 2019年第8期965-967,985,共4页

目的分析宫颈癌组织中GINS2蛋白的表达情况及其与患者临床特征和预后的关系。方法选取98例宫颈癌患者和同期24例健康体检者分别作为观察组和对照组,采用酶联免疫吸附法和免疫组织化学染色法检测GINS2蛋白的表达情况,比较不同临床特征宫... 目的分析宫颈癌组织中GINS2蛋白的表达情况及其与患者临床特征和预后的关系。方法选取98例宫颈癌患者和同期24例健康体检者分别作为观察组和对照组,采用酶联免疫吸附法和免疫组织化学染色法检测GINS2蛋白的表达情况,比较不同临床特征宫颈癌患者宫颈癌组织中GINS2蛋白的阳性表达情况,并探讨GINS2蛋白表达与患者预后的关系。结果宫颈癌组织中GINS2蛋白的相对表达量和阳性表达率均明显高于正常宫颈组织(P<0.01)。不同年龄宫颈癌患者宫颈癌组织中GINS2蛋白的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同病理类型、组织分化程度、TMN分期、浸润深度、淋巴血管间隙浸润情况、淋巴结转移情况比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。GINS2蛋白阴性表达患者的3年生存率高于GINS2蛋白阳性表达患者(P<0.05),生存期长于GINS2蛋白阳性患者(P<0.05)。结论 GINS2蛋白在宫颈癌组织中的相对表达量和阳性表达率较高,其在宫颈癌的发生、发展过程中起促进作用,并且其表达与宫颈癌患者的病理类型、组织分化程度、TMN分期、浸润深度、淋巴血管间隙浸润情况、淋巴结转移情况及患者的预后均有一定的关系。 展开更多

关键词 宫颈癌 gins2 预后 临床特征

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GINS2基因过表达对K562细胞增殖的影响 被引量：1

8

作者 高艳军 王世博 +3 位作者 邢志伟 邸红芹 张建武 孙红梅 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期587-590,共4页

目的检测GINS2基因过表达对K562细胞增殖的影响。方法将Ad-GINS2感染K562细胞,扩增腺病毒,同时设空载体转染的空载组和未感染病毒的未处理组,PCR及Western blot法检测细胞中GINS2的转录及表达水平,MTT法检测细胞增殖水平。结果与空载组... 目的检测GINS2基因过表达对K562细胞增殖的影响。方法将Ad-GINS2感染K562细胞,扩增腺病毒,同时设空载体转染的空载组和未感染病毒的未处理组,PCR及Western blot法检测细胞中GINS2的转录及表达水平,MTT法检测细胞增殖水平。结果与空载组和未处理组相比,Ad-GINS2感染组细胞GINS2基因转录水平及蛋白表达水平显著升高(P<0.05),Ad-GINS2能明显促进细胞增殖(P<0.05)。结论 GINS2基因的重组腺病毒载体成功感染K562细胞并可促进K562细胞增殖,为进一步明确GINS2基因在白血病中的作用奠定了基础。 展开更多

关键词 Ad-gins2 K562细胞 过表达 细胞增殖

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GINS2的生物学特性及与肿瘤关系的研究进展 被引量：1

9

作者 张坤 刘侠 +2 位作者 康淑霞 刘可微 郝玉琴 《医学综述》 2018年第4期687-692,共6页

GINS复合物是一个环状核酸复制因子,其本质是一种复制解螺旋酶。近年来国内外研究发现GINS复合物在乳腺癌、黑色素瘤、肝癌等多种肿瘤中高表达,并促进肿瘤细胞的发生和发展。GINS2基因(又称PSF2基因)是GINS复合体的家族成员之一,在DNA... GINS复合物是一个环状核酸复制因子,其本质是一种复制解螺旋酶。近年来国内外研究发现GINS复合物在乳腺癌、黑色素瘤、肝癌等多种肿瘤中高表达,并促进肿瘤细胞的发生和发展。GINS2基因(又称PSF2基因)是GINS复合体的家族成员之一,在DNA复制和交叉链修复、维持染色体缩合及胚胎组织中特异性表达等生物学事件中发挥重要作用。GINS2基因在癌细胞中高表达,且与肿瘤的严重程度相关,越来越多的研究者将GINS2基因作为肿瘤基因治疗的理想靶点。 展开更多

关键词 gins2基因 肿瘤 基因表达

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GINS2过表达对NB4细胞和K562细胞凋亡的影响 被引量：1

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作者 高艳军 邢志伟 +3 位作者 刘相 李刚 张建武 王世博 《河北医学》 CAS 2018年第9期1413-1416,共4页

目的:利用Ad-GINS2感染白血病细胞NB4细胞和K562细胞,观察其对白血病细胞凋亡的影响。方法:通过Ad-GINS2感染NB4细胞和K562细胞,荧光显微镜观察荧光表达情况,流式细胞术检测K562细胞和NB4细胞的凋亡和细胞周期分布情况,利用Western blot... 目的:利用Ad-GINS2感染白血病细胞NB4细胞和K562细胞,观察其对白血病细胞凋亡的影响。方法:通过Ad-GINS2感染NB4细胞和K562细胞,荧光显微镜观察荧光表达情况,流式细胞术检测K562细胞和NB4细胞的凋亡和细胞周期分布情况,利用Western blotting技术检测凋亡蛋白bax和抗凋亡蛋白bcl-2的表达水平。结果:Ad-GINS2感染NB4细胞和K562细胞,72h后观察荧光表达情况;流式细胞术检测NB4细胞和K562细胞的凋亡率下降,与空载组和未处理组相比,差别有统计学意义(P<0.05);细胞周期分布结果显示,NB4细胞S期比例升高,G1细胞比例下降,与未处理组及空载组相比,差别有统计学意义(P<0.05);K562细胞S期和G2期细胞比例升高,G1细胞比例下降,与未处理组及空载组相比,差别有统计学意义(P<0.05);Western blotting技术检测凋亡蛋白bax下降,抗凋亡蛋白bcl-2表达升高。结论:GINS2基因的重组腺病毒载体成功感染NB4细胞和K562细胞并且抑制细胞凋亡,进而发现细胞凋亡可能与细胞周期进程相关,为进一步明确GINS2基因在白血病中的作用奠定了一定基础。 展开更多

关键词 Ad-gins2 NB4细胞 K562细胞 过表达 凋亡

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人GINS2基因RNA干扰慢病毒载体的构建及其在上皮性卵巢癌中的表达

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作者 严婷 叶艾竹 +1 位作者 江恩利 王玉娟 《贵州医药》 CAS 2019年第5期679-682,I0001,共5页

目的构建人GINS2基因RNA干扰慢病毒表达载体,并建立稳定干扰GINS2基因表达的上皮性卵巢癌细胞系,为研究GINS2蛋白在上皮性卵巢癌发生发展中的作用奠定基础。方法针对GINS2基因序列,按照RNAi序列的设计原则,设计、合成GINS2基因特异性小... 目的构建人GINS2基因RNA干扰慢病毒表达载体,并建立稳定干扰GINS2基因表达的上皮性卵巢癌细胞系,为研究GINS2蛋白在上皮性卵巢癌发生发展中的作用奠定基础。方法针对GINS2基因序列,按照RNAi序列的设计原则,设计、合成GINS2基因特异性小分子干扰siRNA(small interference RNA,siRNA)靶点,与慢病毒构建重组形成shRNA表达载体,利用PCR和测序鉴定获取正确克隆。将筛选出的最有效重组载体与慢病毒包装质粒共转染293T细胞并测定病毒滴度。随后将其感染上皮性卵巢癌SKOV3细胞株细胞,采用Real-time PCR 检测靶基因的沉默效率。结果慢病毒RNA干扰载体经酶切和测序鉴定证实准确连接测序正确,且包装出来的病毒纯化后滴度达5×10^8TU/mL。RT-qPCR、Western blot结果显示感染后GINS2 mRNA及蛋白水平显著下降。结论成功构建了人GINS2基因特异性的慢病毒干扰载体,并获得了GINS2基因稳定干扰的上皮性卵巢癌SKOV3细胞系。 展开更多

关键词 上皮性卵巢癌 gins2 RNA干扰 慢病毒

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过表达GINS2基因对NB4细胞增殖的影响

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作者 高艳军 邢志伟 +3 位作者 杜月菊 徐美丽 李刚 王世博 《中国实验诊断学》 2018年第11期1935-1938,共4页

目的利用腺病毒载体Ad-GINS2感染NB4细胞,观察其对NB4细胞增殖的影响。方法通过AdGINS2感染NB4细胞,利用荧光显微镜观察NB4细胞的感染情况,利用PCR和Western blotting技术检测GINS2基因的转录和翻译水平;MTT方法检测NB4细胞增殖情况。结... 目的利用腺病毒载体Ad-GINS2感染NB4细胞,观察其对NB4细胞增殖的影响。方法通过AdGINS2感染NB4细胞,利用荧光显微镜观察NB4细胞的感染情况,利用PCR和Western blotting技术检测GINS2基因的转录和翻译水平;MTT方法检测NB4细胞增殖情况。结果 PCR检测结果显示,与空载组和未处理组相比,GINS2的表达水平明显增加(P<0.05);Western blotting技术检测结果显示,与空载组和未处理组相比,GINS2的表达水平明显增加(P<0.05);MTT结果显示,与未处理组和空载组相比,重组腺病毒Ad-GINS2能明显促进NB4细胞的增殖(P<0.05)。结论 Ad-GINS2成功感染NB4细胞并且促进NB4细胞增殖,为明确该基因在髓细胞白血病中的作用奠定了一定基础。 展开更多

关键词 Ad-gins2 NB4细胞 过表达 增殖

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GINS2蛋白对三阴性乳腺癌细胞的作用及机制分析 被引量：2

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作者 王淦平 方平 +3 位作者 令狐锐霞 张勇 王英哲 彭亮 《解放军医学院学报》 CAS 2019年第3期260-265,F0003,共7页

目的分析GINS2蛋白对三阴性乳腺癌细胞及肿瘤干细胞的作用,并初步探索其作用机制。方法选取三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞系MDA-MB-436和MDA-MB-157细胞,构建正常对照组及GINS2敲低组。通过集落形成和细胞增殖... 目的分析GINS2蛋白对三阴性乳腺癌细胞及肿瘤干细胞的作用,并初步探索其作用机制。方法选取三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞系MDA-MB-436和MDA-MB-157细胞,构建正常对照组及GINS2敲低组。通过集落形成和细胞增殖测定比较细胞生长能力,细胞侵袭试验比较侵袭能力,Aldhhi细胞分选及成球分析比较两组细胞"干性"的差异,流式细胞仪分析细胞周期变化。通过蛋白质印迹法和免疫共沉淀实验研究GINS2在乳腺癌细胞中相互作用的蛋白。结果 TNBC细胞中转染siRNA后,GINS2降低导致TNBC细胞的生长能力、侵袭能力、肿瘤干细胞"干性"均明显下降,GINS2下降导致细胞在G2期持续积累,在G1期数量减少。另外,GINS2与JUN蛋白在细胞内相互结合。结论敲低GINS2可抑制TNBC生长和转移,是未来的特异性治疗靶点。 展开更多

关键词 三阴性乳腺癌 gins2蛋白 肿瘤干细胞

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GINS2基因对鼻咽癌细胞5-8F生物学行为的影响 被引量：2

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作者 钱露茜 尹丽 +5 位作者 顾佳佳 张楠 吴婧 卢志伟 杜鸣宇 何侠 《肿瘤学杂志》 CAS 2018年第6期536-541,共6页

[目的]探讨GINS2基因对鼻咽癌5-8F细胞生物学行为的影响。[方法]将靶向GINS2基因的sh RNA慢病毒载体感染5-8F细胞,利用荧光显微镜观察感染效率。实时荧光定量PCR检测GINS2 m RNA表达的改变;Western blot检测GINS2蛋白表达的改变;Celigo... [目的]探讨GINS2基因对鼻咽癌5-8F细胞生物学行为的影响。[方法]将靶向GINS2基因的sh RNA慢病毒载体感染5-8F细胞,利用荧光显微镜观察感染效率。实时荧光定量PCR检测GINS2 m RNA表达的改变;Western blot检测GINS2蛋白表达的改变;Celigo细胞成像分析、噻唑盐（MTT）法、平板克隆形成实验检测细胞的生长增殖能力;流式细胞术分析细胞凋亡率。[结果]GINS2-sh RNA慢病毒载体成功感染5-8F细胞,sh GINS2组细胞中GINS2 m RNA和蛋白表达水平明显降低;Celigo细胞计数结果显示,sh GINS2组细胞生长受抑制;MTT结果显示,sh GINS2组细胞增殖受抑制;平板克隆形成实验显示,sh GINS2组细胞克隆形成数减少;流式细胞术结果显示,sh GINS2组细胞凋亡率增高。[结论]下调5-8F细胞GINS2的水平可抑制细胞生长增殖,诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 gins2基因 生长 增殖 凋亡

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shRNA干扰GINS2基因对甲状腺癌细胞增殖的影响 被引量：2

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作者 朴民采 何赛飞 +2 位作者 宋雅楠 张苗 赵滨 《肿瘤药学》 CAS 2019年第1期45-50,共6页

目的探讨GINS2在甲状腺癌中的表达及其对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法通过基因干扰技术抑制甲状腺癌K1和SW579细胞中的GINS2的表达。采用Real-time PCR、Western blot检测细胞中GINS2 mRNA和蛋白的表达水平。采用MTT法和流式细... 目的探讨GINS2在甲状腺癌中的表达及其对甲状腺癌细胞增殖和凋亡的影响。方法通过基因干扰技术抑制甲状腺癌K1和SW579细胞中的GINS2的表达。采用Real-time PCR、Western blot检测细胞中GINS2 mRNA和蛋白的表达水平。采用MTT法和流式细胞仪检测细胞增殖、凋亡及细胞周期。结果干扰GINS2后,K1和SW579细胞GINS2mRNA和蛋白表达水平均显著低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);实验组K1和SW579细胞的增殖受到显著抑制(P<0.01),凋亡率显著升高(P<0.01)。K1细胞的细胞周期发生显著改变,但SW579细胞的细胞周期未发生显著改变。结论 GINS2在甲状腺癌细胞中高表达,下调GINS2表达可抑制甲状腺癌细胞增殖并促进其凋亡。GINS2可能是甲状腺癌诊断或预后的潜在生物标志物及治疗靶点。 展开更多

关键词 甲状腺癌 gins2 RNA干扰 SHRNA

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人GINS2基因酵母双杂交诱饵质粒的构建及自激活检测 被引量：1

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作者 张曦 杨丽 +3 位作者 李静芳 高艳章 石琼 潘玉卿 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2020年第7期743-747,共5页

目的构建人GINS2基因酵母双杂交诱饵质粒,并进行自激活检测。方法根据GenBank中登录的GINS2基因编码区序列(NM016095)设计引物,以pCDNA3.1-GINS2质粒为模板进行PCR扩增,将PCR产物克隆至诱饵载体pGBKT7上,构建诱饵质粒pGBKT7-GINS2。将... 目的构建人GINS2基因酵母双杂交诱饵质粒,并进行自激活检测。方法根据GenBank中登录的GINS2基因编码区序列(NM016095)设计引物,以pCDNA3.1-GINS2质粒为模板进行PCR扩增,将PCR产物克隆至诱饵载体pGBKT7上,构建诱饵质粒pGBKT7-GINS2。将鉴定正确的诱饵质粒及对照质粒共同转化至酵母细胞AH109中培养,Western blot法检测诱饵蛋白GINS2的表达,随机挑取6个菌落,进行His3、Ade2及LacZ报告基因的自激活效应检测。结果经双酶切及测序鉴定证明诱饵质粒pGBKT7-GINS2构建正确。诱饵蛋白GINS2相对分子质量为21000,可在AH109酵母细胞中稳定表达。诱饵质粒转化的酵母细胞在SD/-Trp/-Leu缺陷平板生长,在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade缺陷平板上不生长,表明报告基因His、Ade2未被激活,报告基因LacZ检测结果与阴性对照相同,表明诱饵蛋白GINS2不存在自激活。结论成功构建了人GINS2基因酵母双杂交诱饵质粒,其表达蛋白对酵母AH109细胞无毒性,也无自激活现象,可用于后续蛋白筛选试验。 展开更多

关键词 gins2基因 诱饵质粒 酵母双杂交系统 酵母菌株AH109 人早幼粒细胞白血病

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人早幼粒细胞cDNA文库中与GINS2发生相互作用靶蛋白的筛选和鉴定 被引量：1

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作者 张曦 潘玉卿 +6 位作者 余鑫 郑亚婷 郭成斌 徐娜 王良晓 何亮 杨丽 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2021年第1期66-72,共7页

目的:采用酵母双杂交系统筛选与人GINS2编码蛋白发生相互作用的靶蛋白,阐明其在急性早幼粒细胞白血病(APL)中的致病信号及相关机制。方法:采用热激法将诱饵质粒pGBKT7-GINS2与人早幼粒细胞cDNA文库质粒共同转化至酵母AH109感受态细胞中... 目的:采用酵母双杂交系统筛选与人GINS2编码蛋白发生相互作用的靶蛋白,阐明其在急性早幼粒细胞白血病(APL)中的致病信号及相关机制。方法:采用热激法将诱饵质粒pGBKT7-GINS2与人早幼粒细胞cDNA文库质粒共同转化至酵母AH109感受态细胞中,筛选与GINS2编码蛋白相互作用的文库蛋白。利用多重报告基因检测和DNA测序对编码互作蛋白的阳性克隆进行生物信息学分析。结果:成功从文库中筛选到15个初始阳性克隆,其中10个能激活腺苷酸琥珀酸合成酶2(ADE2)和组氨醇氨基盐转移酶3(HIS3)报告基因,13个能激活β-半乳糖苷酶(LacZ)报告基因。对10个能在SD/-Trp/-Leu/-His/-Ade培养基中生长的阳性克隆行DNA测序和基本局部比对搜索工具(BLAST)比对分析后,除8和9号测序失败,其余8个阳性克隆分属8种不同的蛋白编码基因,分别是RNA结合基序蛋白39(RBM39)、泛素样修饰因子激活酶1(UBA1)、金属硫蛋白2(MT2A)、线粒体钙离子摄入蛋白1(MICU1)、N-乙基马来酰亚胺敏感性融合蛋白辅因子(NSFL1C)、脂肪酰基辅酶a还原酶1(FAR1)、双特异性磷酸酶1(DUSP1)和细胞表面抗原14(CD14)。结论:成功筛选到与GINS2发生相互作用的8个功能蛋白,推测目的蛋白可能在细胞损伤、转录调控和增殖代谢等方面发挥重要作用。 展开更多

关键词 白血病 人早幼粒细胞cDNA文库 酵母双杂交 gins2

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雷公藤红素通过调控GINS2 表达对瘢痕疙瘩成纤维细胞活力和凋亡的影响 被引量：7

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作者 黄芳 石志军 +1 位作者 雷燕 杨擎宇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第11期2043-2049,共7页

目的:探讨雷公藤红素对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)活力和凋亡的影响及其分子机制。方法:采用低、中、高剂量的雷公藤红素处理KFB。采用CCK-8实验和流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡。RT-qPCR和Western blot检测GINS复合物亚基2(GINS2)的... 目的:探讨雷公藤红素对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)活力和凋亡的影响及其分子机制。方法:采用低、中、高剂量的雷公藤红素处理KFB。采用CCK-8实验和流式细胞术分别检测细胞活力和凋亡。RT-qPCR和Western blot检测GINS复合物亚基2(GINS2)的表达。将KFB分为si-NC组、si-GINS2组、Exp+pcDNA组和Exp+pcDNA-GINS2组,按照上述方法检测细胞活力和凋亡的变化。结果:雷公藤红素处理后KFB活力降低,细胞凋亡率升高,GINS2表达降低,并呈显著的剂量依赖关系(P<0.05)。敲减GINS2表达后,KFB活力降低,细胞凋亡率升高(P<0.05);过表达GINS2可部分逆转雷公藤红素对KFB活力和凋亡的影响(P<0.05)。结论:雷公藤红素通过下调GINS2可抑制KFB活力,促进细胞凋亡。 展开更多

关键词 雷公藤红素 GINS复合物亚基2 瘢痕疙瘩 成纤维细胞 细胞活力 细胞凋亡

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miR-320a-5p靶向GINS2调控甲状腺鳞癌细胞SW579凋亡的机制研究

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作者 袁正泰 倪志强 +2 位作者 刘欢 王永恒 黄湘俊 《生物技术》 CAS 2021年第1期32-37,共6页

[目的]探讨miR-320a-5p调控甲状腺鳞癌细胞SW579凋亡的潜在机制。[方法]使用miR-320a-5p mimics和miR-320a-5p inhibitor甲状腺鳞癌细胞SW579中过表达或敲低miR-320a-5p,检测细胞的凋亡水平。通过miRDB,Human Target Scan,RNAhybrid软... [目的]探讨miR-320a-5p调控甲状腺鳞癌细胞SW579凋亡的潜在机制。[方法]使用miR-320a-5p mimics和miR-320a-5p inhibitor甲状腺鳞癌细胞SW579中过表达或敲低miR-320a-5p,检测细胞的凋亡水平。通过miRDB,Human Target Scan,RNAhybrid软件分析和荧光素酶报告系统分析miR-320a-5p的底物。通过siRNA和质粒分别敲低和过表达底物,检测甲状腺鳞癌细胞SW579的凋亡水平。[结果]过表达miR-320a-5p后,甲状腺鳞癌细胞SW579的凋亡水平上升(P <0.05);敲低miR-320a-5p后,甲状腺鳞癌细胞SW579的凋亡水平下降(P <0.05)。miRDB,Human Target Scan,RNAhybrid软件分析发现miR-320a-5p潜在靶向多个基因。过表达miR-320a-5p后,发现甲状腺鳞癌细胞SW579中GINS2的表达水平下降(P <0.05);敲低miR-320a-5p后,发现甲状腺鳞癌细胞SW579中GINS2的表达水平上升(P <0.05)。miR-320a-5p靶向GINS2的3’端非编码区。敲低GINS2后,发现甲状腺鳞癌细胞SW579的凋亡上升(P <0.05)。过表达GINS2后,甲状腺鳞癌细胞SW579的凋亡下降(P <0.05)。[结论]miR-320a-5p通过靶向GINS2 mRNA的3’端非编码区,抑制了GINS2的翻译,最终抑制了甲状腺鳞癌细胞SW579的凋亡。 展开更多

关键词 miR-320a-5p gins2 甲状腺鳞癌 SW579 凋亡

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GINS2基因在肿瘤中的研究进展

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作者 钱露茜 何侠 尹丽 《中国肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期680-684,共5页

GINS2基因是GINS家族的成员之一,与DNA的复制及损伤发生密切相关,参与细胞周期的调控,并对细胞的增殖和凋亡起到关键作用,因而与肿瘤的发生发展关系十分密切。既往国内外研究表明,GINS2是一种癌基因,在众多恶性肿瘤中高表达,促进肿瘤的... GINS2基因是GINS家族的成员之一,与DNA的复制及损伤发生密切相关,参与细胞周期的调控,并对细胞的增殖和凋亡起到关键作用,因而与肿瘤的发生发展关系十分密切。既往国内外研究表明,GINS2是一种癌基因,在众多恶性肿瘤中高表达,促进肿瘤的发生和发展。文章就GINS2在各种肿瘤中作用的研究进展进行综述。 展开更多

关键词 gins2基因 肿瘤 DNA损伤 DNA复制 细胞周期

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