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大口黑鲈GHRH-LP和GHRH基因序列同源性、基因结构和时序表达研究 被引量：8
1
作者 韩林强 白俊杰 李胜杰 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期473-481,共9页
促生长激素释放激素(Growth hormone releasing hormone,GHRH)是生长激素释放调控的重要因子。过去人们一直将鱼类的促生长激素释放激素样多肽(Growth hormone releasing hormone like peptide,GHRH-LP)误认为是GHRH,直到最近才分离出G... 促生长激素释放激素(Growth hormone releasing hormone,GHRH)是生长激素释放调控的重要因子。过去人们一直将鱼类的促生长激素释放激素样多肽(Growth hormone releasing hormone like peptide,GHRH-LP)误认为是GHRH,直到最近才分离出GHRH基因。为了了解GHRH和GHRH-LP基因的结构特征及表达差异,研究克隆了大口黑鲈(Micropterus salmoides)GHRH和GHRH-LP基因,同时应用实时定量PCR技术研究了这两个基因的组织表达及发育时序表达情况。结果显示,大口黑鲈GHRH的成熟肽由27个氨基酸残基组成,GHRH-LP的成熟肽由44个氨基酸残基组成。两个基因均由5个外显子和4个内含子组成,但两者成熟肽编码区在外显子上的分布有明显不同。与其他脊椎动物比较,GHRH同源性为74%—100%,而GHRH-LP同源性为41%—96%,两者间具有一定的相似性(37%—63%)。GHRH基因仅在前脑和延脑中表达,而GHRH-LP基因在中枢神经系统及外周组织中均有表达;在胚胎发育过程中GHRH在神经胚后期检测到表达,其表达水平在仔鱼出膜1d后显著提高,而GHRH-LP在囊胚期及后续发育过程中均检测到表达。基因结构、序列同源性及表达谱研究均表明,GHRH和GHRH-LP存在显著差异,应为具有不同功能的两个基因。 展开更多
关键词 大口黑鲈 ghrh ghrh-LP 基因结构 时空表达
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斑点叉尾GHRH基因3个SNPs位点及其单倍型组合与生长性状的关联分析 被引量：13
2
作者 张世勇 钟立强 +4 位作者 秦钦 王明华 潘建林 陈校辉 边文冀 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期886-893,共8页
研究旨在探讨生长激素释放激素基因(Growth hormone-releasing hormone,GHRH)对斑点叉尾(Ictalurus punctatus)生长性状的影响。采用DNA混池测序法筛选GHRH基因的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点,使用SNa P... 研究旨在探讨生长激素释放激素基因(Growth hormone-releasing hormone,GHRH)对斑点叉尾(Ictalurus punctatus)生长性状的影响。采用DNA混池测序法筛选GHRH基因的单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点,使用SNa Pshot法将筛选到的SNPs多态性位点进行分型,并对这些位点进行连锁不平衡和单倍型分析。结果表明,在GHRH基因内含子区域共检测到4个SNPs位点,并成功地对3个位点进行了分型,3个位点间均不存在强连锁不平衡;3个SNPs位点在176尾斑点叉尾中形成了6种有效单倍型。关联分析表明SNP位点g.6301 G>A的AA基因型的体质量显著性地高于AG和GG型(P<0.05),比群体的平均体质量高14%。单倍型组合H1/H4和H1/H5个体的体质量和体长极显著性地高于其他单倍型组合(P<0.01),体质量比群体平均体质量分别高30%和15%,体长比群体平均体长分别高7%和6%。研究为斑点叉尾生长性状分子标记辅助选育和QTL定位提供了参考依据。 展开更多
关键词 斑点叉尾鲴 ghrh SNP SNAPSHOT 生长性状 单倍型分析 关联分析
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精子介导法制备GHRH转基因猪的研究 被引量：4
3
作者 丁景华 吴珍芳 +7 位作者 习欠云 刘小龙 蔡伟光 孟繁民 束刚 王松波 江青艳 张永亮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期693-697,共5页
以eGFP为报告基因,生长激素释放激素(GHRH)为目的基因,利用精子介导的基因转移方法,将构建慢病毒载体质粒LV-EGFP-GHRH直接和猪精子孵育,再通过体外人工受精建立GHRH转基因猪模型。经PCR检测,52头后代中发现7头阳性个体,转基因效率为7.... 以eGFP为报告基因,生长激素释放激素(GHRH)为目的基因,利用精子介导的基因转移方法,将构建慢病毒载体质粒LV-EGFP-GHRH直接和猪精子孵育,再通过体外人工受精建立GHRH转基因猪模型。经PCR检测,52头后代中发现7头阳性个体,转基因效率为7.42%。本研究探索了应用精子介导的转基因方法将GHRH转移到动物体内,为猪的转基因育种提供了新的依据。 展开更多
关键词 猪 转基因 精子介导 ghrh
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猪下丘脑促生长激素释放激素(GHRH)基因克隆及序列分析 被引量：6
4
作者 汪以真 颜新春 余东游 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CSCD 北大核心 2000年第3期277-279,共3页
从杜长大杂交猪的下丘脑中提取基因组 RNA,根据报道的猪 GHRH c DNA序列设计引物 1和引物 2 ,用反转录 -聚合酶链式反应 (RT- PCR)进行 c DNA扩增 ,获得一条 132 bp的片段 ,克隆于 p GEM-T Easy载体后进行序列分析表明 ,该片段为 GHRH... 从杜长大杂交猪的下丘脑中提取基因组 RNA,根据报道的猪 GHRH c DNA序列设计引物 1和引物 2 ,用反转录 -聚合酶链式反应 (RT- PCR)进行 c DNA扩增 ,获得一条 132 bp的片段 ,克隆于 p GEM-T Easy载体后进行序列分析表明 ,该片段为 GHRH基因的 c DNA,它由 132个核苷酸组成 ,编码 4 4个氨基酸组成的多肽 ,即 GHRH.本研究扩增得到的基因片段与报道的猪 展开更多
关键词 猪 下丘脑 ghrh 基因克隆 序列分析
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鸭发育早期下丘脑GHRH、SS mRNA的表达 被引量：1
5
作者 刘宏祥 姬改革 +4 位作者 宋卫涛 单艳菊 徐文娟 陶志云 李慧芳 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期339-343,共5页
为比较研究不同鸭种胚胎期和出雏早期下丘脑生长激素释放激素(GHRH)和生长抑素(SS)的表达规律及其与体质量和肝质量的相关性,采用qRT-PCR方法研究了鸭13、17、21、25、27胚龄和出雏后7日龄下丘脑GHRH与SS mRNA的表达变化。结果表明,鸭... 为比较研究不同鸭种胚胎期和出雏早期下丘脑生长激素释放激素(GHRH)和生长抑素(SS)的表达规律及其与体质量和肝质量的相关性,采用qRT-PCR方法研究了鸭13、17、21、25、27胚龄和出雏后7日龄下丘脑GHRH与SS mRNA的表达变化。结果表明,鸭下丘脑GHRH与SS在13胚龄已有表达;SS在鸭发育早期维持低表达状态,GHRH呈现极显著的品种和时间特异性差异;品种和日龄的交互作用极显著影响早期发育过程中GHRH的表达。体质量和肝质量的变化也呈现极显著的品种和时间特异性差异,但与GHRH表达量的相关性不明显。 展开更多
关键词 鸭 早期发育 下丘脑 ghrh SS 体质量 肝质量
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山羊GHRH-R基因SNPs的快速筛查及基因频率估算 被引量：3
6
作者 陈志 刘若余 +2 位作者 罗卫星 蔡惠芬 李敬瑞 《贵州农业科学》 CAS 北大核心 2011年第9期144-146,共3页
为进一步开展山羊GHRH-R基因的表达调控、分子标记辅助育种及比较基因组学等的研究,采用构建DNA池并用直接测序的方法,研究了黔北麻羊、内蒙古绒山羊和关东奶山羊3个山羊品种GH-RH-R基因的多态性,并估算其等位基因频率。结果表明:在黔... 为进一步开展山羊GHRH-R基因的表达调控、分子标记辅助育种及比较基因组学等的研究,采用构建DNA池并用直接测序的方法,研究了黔北麻羊、内蒙古绒山羊和关东奶山羊3个山羊品种GH-RH-R基因的多态性,并估算其等位基因频率。结果表明:在黔北麻羊GHRH-R基因中发现2个SNPs(T-640-C,G-811-T),第8内含子640bp、811bp处分别发生了T→C、C→T碱基转换;等位基因频率T-640为0.500,C-640为0.500,C-811为0.387,T-811为0.613;关中奶山羊和内蒙古白绒山羊在640bp、811bp处没有发生碱基突变。 展开更多
关键词 ghrh-R基因 SNPS 基因频率
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信阳水牛GHRH基因第二外显子的SNPs检测 被引量：2
7
作者 徐永杰 吴海港 +3 位作者 姚瑾 刘英 梁小娟 马云 《中国牛业科学》 2012年第4期1-5,共5页
[目的]检测信阳水牛群体GHRH基因的SNP多态性。[方法]以56头信阳水牛为材料,采集血样,提取基因组DNA,以GenBank公布的牛GHRH基因(gi:194719389)序列作为参照序列,设计PCR引物,采用PCR-SSCP和DNA测序方法对该基因第二外显子的进行突变检... [目的]检测信阳水牛群体GHRH基因的SNP多态性。[方法]以56头信阳水牛为材料,采集血样,提取基因组DNA,以GenBank公布的牛GHRH基因(gi:194719389)序列作为参照序列,设计PCR引物,采用PCR-SSCP和DNA测序方法对该基因第二外显子的进行突变检测。[结果]经SSCP分析发现,这些个体总共出现六种不同的带型。测序结果表明:位于GHRH基因的4 461bp、4 529bp、4 845bp、5 053bp和5 058bp处分别存在C→T、T→G、G→A、G→A和G→T五个单核苷酸突变。[结论]表明该基因在信阳水牛群体中单核苷酸多态较为丰富。 展开更多
关键词 信阳水牛 ghrh基因 SNPS PCR-SSCP
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SS／GHRH－GH－IGF－Ⅰ轴与糖尿病 被引量：15
8
作者 廖二元 许樟荣 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 1996年第2期110-113,共4页
ＳＳ／ＧＨＲＨ－ＧＨ－ＩＧＦ－Ⅰ轴与糖尿病廖二元，许樟荣胰岛素样生长因子（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓ，ＩＧＦｓ）为一组分子量约７５００Ｄａ的蛋白质激素，分ＩＧＦ－Ⅰ和ＩＧＦ－Ⅱ两种，现已查明，... ＳＳ／ＧＨＲＨ－ＧＨ－ＩＧＦ－Ⅰ轴与糖尿病廖二元，许樟荣胰岛素样生长因子（ｉｎｓｕｌｉｎ－ｌｉｋｅｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒｓ，ＩＧＦｓ）为一组分子量约７５００Ｄａ的蛋白质激素，分ＩＧＦ－Ⅰ和ＩＧＦ－Ⅱ两种，现已查明，ＩＧＦ－Ⅰ即生长介素Ｃ。垂体分泌的... 展开更多
关键词 糖尿病 下丘脑生长抑素 ghrh 生长激素 IGF-I
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大白猪及巴马香猪GHRH基因的SNPs筛选及其与体尺的相关性分析 被引量：3
9
作者 李常红 孙安琪 +1 位作者 刘号义 程云云 《吉林农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第3期346-351,共6页
为了解影响猪生长和体尺的重要候选基因(GHRH基因)多态性与猪体尺的相关性,选取大白猪为大型猪的代表,巴马香猪为小型猪的代表,利用测序法筛查了两猪种间GHRH基因上存在的SNPs,统计了各个SNP在2个猪种的基因型频率及等位基因频率,然后... 为了解影响猪生长和体尺的重要候选基因(GHRH基因)多态性与猪体尺的相关性,选取大白猪为大型猪的代表,巴马香猪为小型猪的代表,利用测序法筛查了两猪种间GHRH基因上存在的SNPs,统计了各个SNP在2个猪种的基因型频率及等位基因频率,然后基于基因型频率对每个SNP与猪体型的相关性进行分析,并将筛选到的与猪体型相关的SNPs进行连锁不平衡及单倍型分析。结果表明:共有7个SNPs存在于两猪种间,分别为g.1874A>C、g.2276A>G、g.4165C>-、g.4238T>C、g.8079I>-(GTGCTGGCGTGAG缺失)、g.8114A>G及g.8178A>G,且这些SNPs均与猪体尺性状显著相关,其中g.2276A>G和g.4165C>-存在连锁效应,并且大白猪形成的优势单倍型为AC,而巴马香猪为G-型,单倍型频率在两猪种间存在极显著差异(P<0.001);位于基因内含子4的3个位点(g.8079I>-、g.8114A>G及g.8178A>G)在大白猪中形成的单倍型为-GA,而巴马香猪为IAG,单倍型频率在两猪种间存在极显著差异(P<0.001)。这说明猪GHRH基因上存在的SNPs与猪体尺相关,可作为猪种遗传性状及育种的筛选标记,将为提高养猪经济效益及猪育种提供理论依据。 展开更多
关键词 ghrh基因 猪 体尺 单核苷酸多态性 连锁不平衡
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重组生长激素释放激素GHRH的纯化及活性测定 被引量：2
10
作者 王晓华 张娜 +1 位作者 张娟辉 邓虹珠 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第3期321-324,共4页
目的用基因工程的方法在大肠杆菌中诱导表达重组生长激素释放激素(GHRH),检测其生物学活性。方法将重组表达质粒pET-28a /L-ansB-GHRH,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导融合蛋白表达。经裂解细胞、洗涤、乙醇沉淀、酸水解、SP-Sephadex C... 目的用基因工程的方法在大肠杆菌中诱导表达重组生长激素释放激素(GHRH),检测其生物学活性。方法将重组表达质粒pET-28a /L-ansB-GHRH,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导融合蛋白表达。经裂解细胞、洗涤、乙醇沉淀、酸水解、SP-Sephadex C-25和Sephadex G25柱层析等方法纯化GHRH。用人生长激素放免试剂盒检测GHRH多肽的活性。结果SDS-PAGE分析显示重组表达质粒在大肠杆菌中成功地表达了融合蛋白,它以不溶性的包涵体形式存在,占菌体总蛋白的30%左右。经抽提、酸水解、层析等方法表明纯化倍数达147倍,多肽收率为0.68%。通过电喷雾质谱测得多肽的相对分子质量为5235.25,与理论计算值相吻合。多肽的纯度经SDS-PAGE测定为单一峰。GHRH三组刺激实验组与空白对照组相比之间差异显著(P<0.01),且随着剂量增加,差异明显增加。结论体外重组GHRH多肽具有较高的生物学活性。 展开更多
关键词 重组生长激素释放激素 ghrh 纯化 活性测定 融合蛋白 包涵体
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长江刀鲚GHRH基因克隆及序列分析 被引量：1
11
作者 邓平平 施永海 +3 位作者 张之文 严银龙 谢永德 刘永士 《水产科技情报》 2015年第6期297-299,304,共4页
通过克隆长江刀鲚的GHRH基因片段并进行序列分析,旨在为长江刀鲚分子生物育种方面的进一步研究奠定基础。提取长江刀鲚组织中的总RNA,根据已知鱼类GHRH基因保守片段设计兼并引物,使用RT-PCR方法克隆长江刀鲚GHRH基因片段,对所得序列进... 通过克隆长江刀鲚的GHRH基因片段并进行序列分析,旨在为长江刀鲚分子生物育种方面的进一步研究奠定基础。提取长江刀鲚组织中的总RNA,根据已知鱼类GHRH基因保守片段设计兼并引物,使用RT-PCR方法克隆长江刀鲚GHRH基因片段,对所得序列进行生物信息学分析。试验结果:克隆得到的基因片段长度为492 bp,推导出氨基酸残基为164个,其氨基酸序列与大西洋鲱鱼、斑马鱼和大西洋鳕的相似度分别为92%、79%和77%。系统进化树分析进一步表明,长江刀鲚与大西洋鲱的亲缘关系最近。 展开更多
关键词 长江刀鲚 ghrh基因 基因克隆 序列分析
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GHRH预充试验在判断生长激素缺乏症病因定位中的价值:附9例报告
12
作者 叶军 沈永年 +3 位作者 黄晓东 周建德 乌玉丽 陈瑞冠 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 1993年第5期296-298,共3页
9例生长激素缺乏症(GHD)患儿其垂体对单次生长激素释放激素(GHRH)刺激呈阴性反应(即GH峰值<10ng/ml),当给予GHRH(1—29)-NH_2每日15μg/kg皮下注射连续预充8个月后,除1例GH仍呈阴性反应被诊断为垂体性GHD外,其余8例(89%)在GHRH预充1... 9例生长激素缺乏症(GHD)患儿其垂体对单次生长激素释放激素(GHRH)刺激呈阴性反应(即GH峰值<10ng/ml),当给予GHRH(1—29)-NH_2每日15μg/kg皮下注射连续预充8个月后,除1例GH仍呈阴性反应被诊断为垂体性GHD外,其余8例(89%)在GHRH预充1周至1个月时出现了阳性反应(即GH峰值>10ng/ml),证实了这些患儿病因在于下丘脑。此外其中8例患儿经磁共振影像检查(MRI)其垂体容量在GHRH预充后没有变化。本文结果提示大多数GHD患儿其病变部位在下丘脑,而不在垂体;GHRH预充试验在判断GHD患儿病变部位中有一定的实用价值。 展开更多
关键词 生长激素缺乏 病因 ghrh
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日粮铜源和水平对生长猪下丘脑SS、GHRH表达水平的影响
13
作者 杨文艳 杨连玉 王哲 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第9期28-30,共3页
试验选择"军牧1号"断乳仔猪75头随机分成5个组,每组15头(设置5个重复),对照组饲喂基础日粮,硫酸铜的添加量为5 mg/kg,其余2组分别饲喂在基础日粮基础上添加125 mg/kg硫酸铜和125 mg/kg蛋氨酸铜的试验日粮。结果表明:与添加5 m... 试验选择"军牧1号"断乳仔猪75头随机分成5个组,每组15头(设置5个重复),对照组饲喂基础日粮,硫酸铜的添加量为5 mg/kg,其余2组分别饲喂在基础日粮基础上添加125 mg/kg硫酸铜和125 mg/kg蛋氨酸铜的试验日粮。结果表明:与添加5 mg/kg硫酸铜相比,日粮中125 mg/kg硫酸铜、125 mg/kg蛋氨酸铜可以使猪下丘脑SS mRNA丰度显著降低(P<0.05),而GHRH mRNA丰度显著提高(P<0.05);SS mRNA丰度与GHRH mRNA丰度呈显著负相关关系(P<0.05)。结果说明铜抑制了下丘脑SS mRNA的表达,而提高了GHRH mRNA的表达。 展开更多
关键词 下丘脑 SS MRNA ghrh MRNA 表达
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GHRH可以提高猪抗肺炎霉形体感染能力 被引量：1
14
作者 李凯年 逯德山（编译） 《农村养殖技术（新兽医）》 2006年第7期45-47,共3页
目前．动物的呼吸道疾病仍然是一个严重的问题．特别是由肺炎霉形体（Mhyo）引起的肺炎占有较大的比例。Mhyo是地方性肺炎的病原体．可以引起慢性肺炎以及其他细菌感染。此外．存在猪繁殖与呼吸道综合征（PRRS）病毒还可以显著降低Mhyo... 目前．动物的呼吸道疾病仍然是一个严重的问题．特别是由肺炎霉形体（Mhyo）引起的肺炎占有较大的比例。Mhyo是地方性肺炎的病原体．可以引起慢性肺炎以及其他细菌感染。此外．存在猪繁殖与呼吸道综合征（PRRS）病毒还可以显著降低Mhyo菌苗接种的效果。Mhyo感染不仅给养猪业造成很大的经济损失．而且带来严重的动物福利问题。最近研究证实．生长激素释放激素（GHRH）和生长激素（GH）具有免疫调节功能。 展开更多
关键词 肺炎霉形体 感染能力 猪繁殖 ghrh 生长激素释放激素 呼吸道综合征 免疫调节功能 呼吸道疾病 地方性肺炎 细菌感染
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猪GHRH(1~44)表达质粒对小鼠生长以及妊娠母猪生产性能的影响
15
作者 韦宇凯 汪云 +6 位作者 王宇轩 习欠云 孙加节 陈婷 罗君谊 史合群 张永亮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期2063-2071,共9页
采用肌肉注射pVAX1-SP-GHRH(1~44)表达质粒后电刺激处理,确定其对小鼠生长、妊娠母猪生产性能影响。将150只4周龄C57 BL/6雌性小鼠随机分成6组,每组5个重复。肌肉单次注射后电刺激处理,对照组注射空质粒(80μg/kg),处理组分别注射20、40... 采用肌肉注射pVAX1-SP-GHRH(1~44)表达质粒后电刺激处理,确定其对小鼠生长、妊娠母猪生产性能影响。将150只4周龄C57 BL/6雌性小鼠随机分成6组,每组5个重复。肌肉单次注射后电刺激处理,对照组注射空质粒(80μg/kg),处理组分别注射20、40、80、120、160μg/kg pVAX1-SP-GHRH(1~44)质粒。再选取20头健康的妊娠母猪随机分成2组,每组10头母猪。对妊娠后期的母猪半膜肌进行单次注射后电刺激处理。对照组注射生理盐水,质粒组注射2 mg pVAX1-SP-GHRH(1~44)表达质粒。分别在注射后0、7、14、21、28 d测定小鼠体质量、采食量,采眼球血、分离血清测定血清GHRH、IGF-1水平。妊娠母猪分别在注射后0、14、28、42 d进行尾静脉采血,分离血清,测定血清GHRH、IGF-1水平,在第14天,记录仔猪初生质量、胎盘质量、产子数、健仔数、弱仔数、畸形仔数、死胎数和木乃伊数。小鼠试验结果表明,肌肉注射pVAX1-SP-GHRH(1~44)质粒并电刺激后,能够促进小鼠的采食和提高增重(P<0.05),能够显著提高小鼠血清GHRH、IGF-1水平(P<0.05),且作用能够从注射后维持到21 d。妊娠母猪试验结果表明,质粒组妊娠母猪的仔猪平均初生质量极显著升高(P<0.01)、胎盘质量显著升高(P<0.05),质粒组母猪GHRH、IGF-1浓度极显著上升(P<0.01)。本研究结果表明,肌肉注射pVAX1-SP-GHRH(1~44)表达质粒并电刺激处理后能够促进小鼠的采食和提高增重,同时还能显著提高妊娠母猪仔猪初生质量、胎盘质量。 展开更多
关键词 ghrh表达质粒 小鼠 妊娠母猪 ghrh
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固相合成促性腺激素释放激素GhRH及其类似物
16
作者 彭金华 宋之刚 《甘肃教育学院学报（自然科学版）》 2002年第1期47-50,共4页
采用Merrifield多肽固相合成法 ,合成了促性腺激素释放激素GhRH ,即PGlu·His·Try·Ser·Tyr·Gly·Leu·Arg·Pro·Gly·NH2 以及类似物 [D -Ala6][去Gly·NH102 ]GhRH乙基酰胺 ,即PGlu&... 采用Merrifield多肽固相合成法 ,合成了促性腺激素释放激素GhRH ,即PGlu·His·Try·Ser·Tyr·Gly·Leu·Arg·Pro·Gly·NH2 以及类似物 [D -Ala6][去Gly·NH102 ]GhRH乙基酰胺 ,即PGlu·His·Try·Ser·Tyr·D -Ala·Leu·Arg·Pro·NH C2 H5和 [Arg2 ]GhRH ,即PGlu·Arg·Try·Ser·Tyr·Gly·Leu·Arg·Pro·Gly·NH2 。 展开更多
关键词 固相合成 促性腺激素释放激素 类似物 ghrh 分泌能力 十肽 氨基酸残基
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梭鲈ghrh基因序列特征及其在大小个体间差异表达分析 被引量：3
17
作者 周佳 孙志鹏 +5 位作者 吉宇丹 吕伟华 曹顶臣 鲁翠云 刘天奇 郑先虎 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2023年第5期68-76,共9页
为了探究生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone,ghrh)基因对梭鲈(Sander lucioperca)生长调控的作用,本研究利用RACE技术克隆获得了ghrh cDNA基因全长序列,并利用实时荧光定量PCR技术对其组织表达模式和大小个体间表达模... 为了探究生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone,ghrh)基因对梭鲈(Sander lucioperca)生长调控的作用,本研究利用RACE技术克隆获得了ghrh cDNA基因全长序列,并利用实时荧光定量PCR技术对其组织表达模式和大小个体间表达模式进行了分析。结果显示:ghrh基因cDNA全长为1 100 bp,包含494 bp的5′非编码区、180 bp的3′非编码区和编码141个氨基酸的开放阅读框。氨基酸多重比对发现,梭鲈ghrh与河鲈(Perca fluviatilis)、黄金鲈(P.flavescens)的ghrh氨基酸序列相似性分别为95.04%和94.33%,ghrh基因在鱼类和哺乳动物中都存在一个GLUCA保守结构域(65~91 aa)。ghrh基因在梭鲈各组织均有表达,脑组织中相对表达量最高,垂体次之,与其他组织相比差异显著。ghrh基因表达量与梭鲈体质量呈正相关,脑、肝和肌肉组织中ghrh基因表达量均为体质量极大组高于极小组,其中,脑组织中差异显著。因此,ghrh基因可以作为梭鲈生长候选基因用于分子选择育种。 展开更多
关键词 梭鲈(Sander lucioperca) ghrh 序列特征 生长 表达差异
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布氏鲳鲹GHRH基因克隆、组织和胚胎表达模式 被引量：2
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作者 朱凡 王茜 +5 位作者 李岩强 周智 王海洋 叶恒振 骆剑 陈国华 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2019年第5期1969-1976,共8页
促生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone, GHRH)主要生物学功能是刺激垂体细胞分泌生长激素,已被证实是动物体生长轴的重要调控因子之一,布氏鲳鲹是一种生长快速的海洋鱼类,为了揭示其代谢旺盛的调节机制,本研究从GHRH入... 促生长激素释放激素(growth hormone releasing hormone, GHRH)主要生物学功能是刺激垂体细胞分泌生长激素,已被证实是动物体生长轴的重要调控因子之一,布氏鲳鲹是一种生长快速的海洋鱼类,为了揭示其代谢旺盛的调节机制,本研究从GHRH入手,利用RACE技术和qPCR方法对布氏鲳鲹GHRH基因进行了克隆、组织和胚胎表达模式研究。实验结果显示,布氏鲳鲹GHRH基因cDNA序列全长1019bp,5’UTR、3’UTR长度分别为327 bp和164 bp,开放阅读框528 bp,共编码175个氨基酸;同源性分析结果表明,布氏鲳鲹GHRH基因与其它鲈形目鱼类的同源性在91%以上。布氏鲳鲹GHRH基因的表达区域大多都集中在中枢系统,其中下丘脑表达量最高;GHRH在受精卵期到后续发育过程中均检测到表达,其表达水平在仔鱼期达到最高。序列分析、组织及胚胎表达的结果表明,布氏鲳鲹GHRH的调节模式仍然可能通过下丘脑调节垂体释放GH,GHRH在个体发育的较早阶段即开始发挥作用。本研究掌握了布氏鲳鲹GHRH基因的基本规律,为进一步研究生长轴的调控提供了理论参考。 展开更多
关键词 布氏鲳鲹 ghrh基因 基因克隆 组织表达 胚胎表达
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电穿孔法转移GHRH(1-32)质粒在肌肉中表达对妊娠母猪及其后代仔猪生产性能的影响 被引量：2
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作者 汪飞 习欠云 +6 位作者 蒋勇 赵帅 董涛 朱晓彤 束刚 江青艳 张永亮 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期159-167,195,共10页
采用pcDNA3.0-GHRH(1-32)质粒,对妊娠后期母猪单次肌注后电穿孔法处理,观察母猪及后代仔猪生产性能。用碱变性法提取pcDNA3.0-GHRH质粒并定量。选取胎次一致的妊娠85d的母猪30头,分别注射0.9%NaCl 0,2.0,4.0mg,然后用电穿孔仪电击处理,... 采用pcDNA3.0-GHRH(1-32)质粒,对妊娠后期母猪单次肌注后电穿孔法处理,观察母猪及后代仔猪生产性能。用碱变性法提取pcDNA3.0-GHRH质粒并定量。选取胎次一致的妊娠85d的母猪30头,分别注射0.9%NaCl 0,2.0,4.0mg,然后用电穿孔仪电击处理,统计母猪及仔猪的生产性能。结果显示:与对照组相比,2.0,4.0mg试验组断奶个体质量分别显著增加0.65kg(P<0.05)和0.75kg(P<0.01),初生窝质量分别显著增加1.92kg(P<0.05)和3.01kg(P<0.01),断奶窝质量分别显著增加9.33kg(P<0.05)和13.66kg(P<0.01)等,4.0mg组作用更明显;2个剂量组仔猪167日龄平均体质量分别增加5.3%(P>0.05)和7.5%(P<0.05),32-167日龄平均日增质量分别为30g(P>0.05)和46g(P<0.05),平均日采食量分别提高约70g(P>0.05)和100g(P>0.05),平均料肉比降低0.02(P>0.05)和0.05(P>0.05);2个剂量组仔猪断奶前淘汰率分别降低9.48%和10.02%,断奶后淘汰率分别降低29.18%和41.64%,达到100kg天数分别提前7d(P>0.05)和9d(P<0.05);母猪血清GHRH浓度分别提高29.76%(P<0.05)和41.89%(P<0.01),血清中激素(IGF-I、T3、T4、IL-2、IL-6)和IgG浓度均呈上升趋势等。结果表明:GHRH(1-32)表达质粒注射妊娠后期母猪可以明显的提高母猪及仔猪生产性能。 展开更多
关键词 妊娠母猪 ghrh表达质粒 电穿孔 生产性能
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广西巴马小型猪GHRH成熟肽真核表达质粒对小鼠生长效应的影响 被引量：2
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作者 李芳芳 郭亚芬 +1 位作者 兰干球 潘堂峰 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第12期2264-2269,共6页
【目的】探讨广西巴马小型猪促生长激素释放激素（GHRH）成熟肽真核表达质粒对小鼠生长效应的影响,为进一步研究广西巴马小型猪GHRH成熟肽的促生长作用及GHRH基因疫苗的高效制备与安全使用提供参考依据。【方法】利用基因重组技术将广... 【目的】探讨广西巴马小型猪促生长激素释放激素（GHRH）成熟肽真核表达质粒对小鼠生长效应的影响,为进一步研究广西巴马小型猪GHRH成熟肽的促生长作用及GHRH基因疫苗的高效制备与安全使用提供参考依据。【方法】利用基因重组技术将广西巴马小型猪GHRH成熟肽序列与p EGFP-N1质粒连接构建重组真核表达质粒,然后按0.5μg/g的剂量肌肉注射经25%蔗糖溶液预处理的小鼠,观察记录小鼠体重变化情况,并分别提取重组质粒注射组小鼠的心脏、肝脏、肾脏及注射部位肌肉DNA,再以PCR检测是否存在基因质粒残留。【结果】以构建的p EGFP-GHRH重组质粒注射小鼠后,其外源GHRH成熟肽DNA可在肌肉中获得表达,但并未整合入小鼠基因组中。虽然重组质粒注射组小鼠的末重与空质粒注射组小鼠的差异不显著（P〉0.05）,但在注射后的10-25 d,重组质粒注射组小鼠体重均显著高于空质粒注射组（P〈0.05）。在相对日增重率方面,注射后的前15 d内,重组质粒注射组小鼠的相对日增重率均高于空质粒注射组。【结论】构建的广西巴马小型猪p EGFP-GHRH重组质粒能在一定时间内促进小鼠生长,即GHRH种属差异性小,在动物中有较高的保守性。 展开更多
关键词 广西巴马小型猪 促生长激素释放激素(ghrh)成熟肽序列 小鼠 真核表达质粒 生长效应
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