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pcDNA3.1-GCNF真核表达载体构建及其对HeLa细胞凋亡的影响 被引量:4
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作者 陈芳 王菊 +1 位作者 宋勇 周宗瑶 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2011年第2期193-197,共5页
构建人pcDNA3.1-GCNF真核表达载体,并瞬时转染宫颈癌HeLa细胞,观察GCNF基因对HeLa细胞凋亡的影响。采用PCR的方法从pMD18-T-GCNF载体中扩增全长GCNF cDNA,将扩增产物克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),测序鉴定后,重组质粒pcDNA3.1-GCNF转... 构建人pcDNA3.1-GCNF真核表达载体,并瞬时转染宫颈癌HeLa细胞,观察GCNF基因对HeLa细胞凋亡的影响。采用PCR的方法从pMD18-T-GCNF载体中扩增全长GCNF cDNA,将扩增产物克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-),测序鉴定后,重组质粒pcDNA3.1-GCNF转染HeLa细胞,RT-PCR以及间接免疫荧光鉴定转染结果,并用Annexin V-PI双染流式细胞术分析细胞凋亡情况。结果显示,克隆的重组真核表达载体经序列测定分析后,证实pcDNA3.1-GCNF重组真核表达质粒构建成功,并获得瞬时转染pcDNA3.1-GCNF的HeLa细胞。流式细胞术检测:转染重组质粒组的细胞凋亡率(6.72%)低于转染空质粒组(9.78%)以及未转染组(9.34%),P<0.00313,转染重组质粒后细胞凋亡率降低。由此可知,pcDNA3.1-GCNF重组质粒瞬时转染子宫颈癌HeLa细胞后,GCNF基因可以抑制HeLa细胞凋亡。 展开更多
关键词 gcnf 真核表达载体 HELA细胞 转染
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过表达GCNF对HeLa细胞生物学行为的影响
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作者 王菊 陈芳 +1 位作者 王苗 周宗瑶 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2013年第17期2777-2781,共5页
目的:将成功构建的人pcDNA3.1-GCNF真核表达载体瞬时转染宫颈癌HeLa细胞,观察GCNF基因对HeLa细胞生物学功能的影响。方法:将重组质粒pcDNA3.1-GCNF转染HeLa细胞,通过MTT比色法、基质胶黏附实验和Transwell侵袭试验对转染后HeLa细胞增殖... 目的:将成功构建的人pcDNA3.1-GCNF真核表达载体瞬时转染宫颈癌HeLa细胞,观察GCNF基因对HeLa细胞生物学功能的影响。方法:将重组质粒pcDNA3.1-GCNF转染HeLa细胞,通过MTT比色法、基质胶黏附实验和Transwell侵袭试验对转染后HeLa细胞增殖、黏附和侵袭力进行分析。结果:成功获得瞬时转染的pcDNA3.1-GCNF HeLa细胞,转染目的基因组(0.239±0.014)与转染空质粒组(0.198±0.020)及未转染组(0.204±0.012)相比,细胞增殖最快(P<0.05)。转染目的基因后细胞粘附、侵袭力未见明显改变。结论:GCNF基因促进了体外培养的宫颈癌HeLa细胞增殖,但对HeLa细胞粘附、侵袭力没有明显的影响。 展开更多
关键词 gcnf 宫颈癌 转染 粘附 增殖 侵袭
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GCNF在牦牛睾丸不同发育阶段中的表达与定位 被引量:2
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作者 闫翠霞 王强龙 +5 位作者 张同享 何翃闳 潘阳阳 余四九 徐庚全 秦玉洁 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期388-394,共7页
生殖细胞核因子(GCNF)是核受体超家族的一员。相关研究发现,GCNF在睾丸和卵巢中高表达,可能在配子减数分裂中发挥作用。为探究GCNF在牦牛睾丸中的表达与定位,采集牦牛不同发育阶段(幼年、成年、老年)的睾丸组织,采用实时荧光定量PCR(qRT... 生殖细胞核因子(GCNF)是核受体超家族的一员。相关研究发现,GCNF在睾丸和卵巢中高表达,可能在配子减数分裂中发挥作用。为探究GCNF在牦牛睾丸中的表达与定位,采集牦牛不同发育阶段(幼年、成年、老年)的睾丸组织,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测GCNF基因在组织中的相对表达量;采用Western-blot(WB)检测GCNF蛋白在不同年龄阶段睾丸中的表达水平;免疫组织化学方法分析GCNF在牦牛睾丸分布特征。qRT-PCR和WB检测结果显示,GCNF在牦牛睾丸不同年龄阶段均有表达,且表达存在差异性。幼年期GCNF在基因水平和蛋白水平表达量最高且显著高于成年期和老年期;老年期显著高于成年期,成年期表达量最低。免疫组织化学结果显示:在睾丸不同发育阶段GCNF的表达定位无明显差异,主要在生精细胞和圆形精子细胞中表达,间质细胞和支持细胞中也有少量表达。上述研究结果表明,GCNF可能参与精子的发生及分化变形,这为牦牛生殖生育研究提供了理论基础和新的依据。 展开更多
关键词 生殖细胞核因子 睾丸 生殖 牦牛:圆形精子 表达 定位
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Medaka gcnf is a component of chromatoid body during spermiogenesis
4
作者 Zinan Xie Peng Song +3 位作者 Ying Zhong Jing Guo Lang Gui Mingyou Li 《Aquaculture and Fisheries》 2021年第6期574-582,共9页
Germ cells of many organisms exhibit a unique perinuclear cytoplasmic cloud-like structure called the chromatoid body(CB).Specific components of the CB,such as vasa,are crucial for germline development.Herein we ident... Germ cells of many organisms exhibit a unique perinuclear cytoplasmic cloud-like structure called the chromatoid body(CB).Specific components of the CB,such as vasa,are crucial for germline development.Herein we identify another component of the CB,the Oryzias latipes gcnf homolog(Olgcnf).By reverse transcription polymerase chain reaction(RT-PCR),Olgcnf transcript was restricted to gonads in the adult tissues and was maternally provided and persisted throughout embryogenesis.By in situ hybridization on gonadal sections,Olgcnf transcript was restricted to germ cells.In the ovary,Olgcnf was predominantly expressed in the early stages of oocytes.In the testis,Olgcnf showed dynamic expression in round spermatids and sperm,accumulated in the CB during spermatid morphogenesis and concentrated in elongated spermatids of acrosome cap region and flagellar manchette.Moreover,Olgcnf was colocalized with vasa,which is the best-characterized component of the CB.Therefore,Olgcnf is specific to germ cells of both sexes and is a component of the CB during spermiogenesis. 展开更多
关键词 gcnf MEDAKA OVARY TESTIS
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生殖细胞核因子及其相关因子在恶性生殖细胞肿瘤中的表达 被引量:8
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作者 高启云 王菊 +1 位作者 尹亚西 周宗瑶 《石河子大学学报(自然科学版)》 CAS 2009年第5期616-621,共6页
为研究生殖细胞核因子(GCNF)及Oct-4在恶性生殖细胞肿瘤中的表达,揭示GCNF及Oct-4在恶性生殖细胞肿瘤中关系。运用免疫组化SP法分别检测41例男女生殖系统恶性肿瘤及8例无瘤变卵巢组织及10例无瘤变睾丸组织中GCNF及Oct-4的表达。结果显示... 为研究生殖细胞核因子(GCNF)及Oct-4在恶性生殖细胞肿瘤中的表达,揭示GCNF及Oct-4在恶性生殖细胞肿瘤中关系。运用免疫组化SP法分别检测41例男女生殖系统恶性肿瘤及8例无瘤变卵巢组织及10例无瘤变睾丸组织中GCNF及Oct-4的表达。结果显示GCNF在所有的恶性生殖细胞肿瘤及无瘤变的睾丸组织均呈阳性表达,定位于肿瘤细胞的细胞核,Oct-4在未成熟畸胎瘤,无性细胞瘤及精原细胞瘤呈阳性表达,定位于肿瘤细胞的细胞核,在其他类别的恶性生殖细胞肿瘤及无瘤变卵巢组织及睾丸组织中不表达。由此可知,GCNF和Oct-4在恶性生殖细胞肿瘤中的表达呈负相关,二者的表达强度可能与肿瘤细胞的分化状态有关。 展开更多
关键词 生殖细胞肿瘤 生殖细胞核因子 OCT-4 免疫组织化学
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生殖细胞核因子的研究进展
6
作者 王菊 周宗瑶 姜开军 《农垦医学》 2007年第2期142-144,共3页
生殖细胞核因子(GCNF)是核受体超家族成员之一,由于其配体未知,因而又称孤儿核受体。GCNF主要功能是抑制基因表达,它可以促进Oct-4基因的甲基化,使0ct-4发生基因沉默。GCNF基因高度表达在发育中的神经系统、胎盘、发育中的生殖细胞。GCN... 生殖细胞核因子(GCNF)是核受体超家族成员之一,由于其配体未知,因而又称孤儿核受体。GCNF主要功能是抑制基因表达,它可以促进Oct-4基因的甲基化,使0ct-4发生基因沉默。GCNF基因高度表达在发育中的神经系统、胎盘、发育中的生殖细胞。GCNF基因表达具有的时空特性,提示GCNF在胚胎发生以及配子形成过程中发挥着重要作用。 展开更多
关键词 生殖细胞核因子 OCT-4 胚胎干细胞 精原干细胞
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胚胎干细胞增殖分化相关基因 被引量:2
7
作者 姜开军 王菊 周宗瑶 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2008年第3期294-296,共3页
胚胎干细胞是从早期胚胎内细胞团中分离得到的,可以长久维持对称性自我更新的未分化状态,也可以分化成机体几乎所有类型的细胞。多种基因参与了胚胎干细胞增殖分化的调节。现对胚胎干细胞增殖分化相关基因进行综述。
关键词 胚胎干细胞 OCT4 SOX2 NANOG 生殖细胞核因子
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哺乳动物精子发生过程中的调节信号
8
作者 黄海燕 吴燕婉 李伟雄 《国外医学(计划生育分册)》 2002年第3期169-172,共4页
哺乳动物精子发生依赖于特定的微环境。雄激素以及Sertoli细胞分泌的多种生长/分化因子参与微环境的局部调节,并在总体上接受神经-内分泌因素的宏观调控。多种细胞内信号传导途径在精子发生过程中发挥重要作用。
关键词 哺乳动物 精子发生 调节信号 原癌基因产物 CREM gcnf 热休克蛋白
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生殖细胞核因子在骨髓间充质干细胞增殖分化中的表达 被引量:3
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作者 姜开军 王菊 +2 位作者 符毓豪 高启云 周宗瑶 《农垦医学》 2008年第4期257-260,共4页
目的:研究生殖细胞核因子在骨髓间充质干细胞增殖与分化中的表达。方法:取4-6周BALB/c小鼠,采用全骨髓贴壁筛选法体外培养小鼠BMSCs。取第3代小鼠BMSCs,定向诱导BMSCs向成骨细胞分化,通过检测碱性磷酸酶鉴定诱导后的细胞。采用RT-... 目的:研究生殖细胞核因子在骨髓间充质干细胞增殖与分化中的表达。方法:取4-6周BALB/c小鼠,采用全骨髓贴壁筛选法体外培养小鼠BMSCs。取第3代小鼠BMSCs,定向诱导BMSCs向成骨细胞分化,通过检测碱性磷酸酶鉴定诱导后的细胞。采用RT-PCR及间接免疫荧光染色,从mRNA和蛋白水平检测GCNF在小鼠BMSCs诱导分化前后的表达。结果:RT-PCR与间接免疫荧光染色结果同时显示,第3代的小鼠BMSCs和向成骨方向诱导10d后的BMSCs均有GCNF表达。结论:GCNF在BMSCs增殖分化中有表达。 展开更多
关键词 生殖细胞核因子 骨髓间充质干细胞 增殖 分化 免疫荧光
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山羊NR6A1基因多态性与产羔性能的关联分析
10
作者 王唯 江炎庭 +2 位作者 欧阳依娜 储明星 洪琼花 《中国草食动物科学》 CAS 2021年第6期29-32,共4页
旨在分析生殖细胞核因子(NR6A1,GCNF)的多态性与云上黑山羊产羔性能的关联性。利用Sequenom MassARRAY■SNP技术对NR6A1的3个候选位点g.95109274G>A、g.95109385G>A、g.95109400G>T进行分型,探索其在云上黑山羊(n=544)、济宁... 旨在分析生殖细胞核因子(NR6A1,GCNF)的多态性与云上黑山羊产羔性能的关联性。利用Sequenom MassARRAY■SNP技术对NR6A1的3个候选位点g.95109274G>A、g.95109385G>A、g.95109400G>T进行分型,探索其在云上黑山羊(n=544)、济宁青山羊(n=133)和辽宁绒山羊(n=91)3个群体中的遗传学特征,并分析其与云上黑山羊产羔性能(包括产羔数、初生窝重和断奶窝重)的关联性。结果表明,g.95109274G>A、g.95109385G>A两个候选位点在不同繁殖力品种(济宁青山羊和辽宁绒山羊)中的基因型分布无显著差异(P>0.05);g.95109400G>T位点在不同繁殖力品种(济宁青山羊和辽宁绒山羊)中的基因型分布呈现显著差异(P<0.05)。云上黑山羊中的关联分析表明,NR6A1基因这3个位点对产羔数、初生窝重以及断奶窝重无显著影响(P>0.05)。以上提示,NR6A1基因这3个位点不能作为云上黑山羊产羔性能选择的潜在分子标记。 展开更多
关键词 山羊 产羔数 NR6A1基因 生殖细胞核因子
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生殖细胞核因子在不同成长期大鼠附睾中的表达 被引量:4
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作者 张秋养 邱曙东 +1 位作者 杨洁 王志勇 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第13期1126-1129,共4页
目的 探讨生殖细胞核因子 (GCNF)在大鼠附睾中的时空表达与分布。方法 应用免疫组化和蛋白质免疫印迹技术 ,检测GCNF蛋白在出生后 7、14、2 8、4 5、6 0、90天龄和 18月龄大鼠附睾内的表达、定位和发育变化 ,并通过凝胶成像及图像分... 目的 探讨生殖细胞核因子 (GCNF)在大鼠附睾中的时空表达与分布。方法 应用免疫组化和蛋白质免疫印迹技术 ,检测GCNF蛋白在出生后 7、14、2 8、4 5、6 0、90天龄和 18月龄大鼠附睾内的表达、定位和发育变化 ,并通过凝胶成像及图像分析系统对实验结果进行统计学分析。结果 GCNF表达于出生后 14天龄至 18月龄大鼠附睾上皮的细胞核内 ,其表达呈明为的年龄相关性和附睾区段以及细胞特异性。 14天龄附睾上皮内出现散在阳性细胞核 ,2 8天龄时阳性细胞数和阳性强度明显增强 ,4 5天龄时达到高峰。成年后阳性细胞数维持不变而阳性染色强度开始逐渐减弱 ,18月龄时减弱非常明显。附睾管上皮内的各种细胞如主细胞、基细胞、顶细胞、狭窄细胞和亮细胞等均呈GCNF阳性染色 ,从附睾起始段到尾段到尾段均有阳性染色 ,其中以近端头部最强 ;远端尾部主细胞核阳性减弱非常明显甚至呈阴性 ,而亮细胞核则阳性较强。 14d后各年龄组附睾抽提物中均可见 5 50 0 0处有GCNF特异性条带 ,其年龄变化与免疫组化结果一致。结论 GCNF在大鼠附睾上皮内的表达与附睾上皮分化和发育过程明显相关 ,且其分布表现出明显的附睾区段和细胞特异性。 展开更多
关键词 生殖细胞核因子 大鼠 成长期 附睾 基因表达 gcnf 免疫组织化学 蛋白质免疫印迹
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