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LncRNA GAS6-AS1调节miR-708-5p/PDK4轴对喉癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响
1
作者 谢洋 麻琳 +2 位作者 要兆旭 刘琳 何冰 《临床肿瘤学杂志》 2025年第8期729-734,共6页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)调节微小RNA-708-5p(miR-708-5p)/丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)轴对喉癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测喉癌组织标本中LncRNA GAS6... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)调节微小RNA-708-5p(miR-708-5p)/丙酮酸脱氢酶激酶4(PDK4)轴对喉癌细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测喉癌组织标本中LncRNA GAS6-AS1、miR-708-5p、PDK4的表达;将喉癌TU686细胞分为:siRNA阴性对照组(si-NC组)、单独抑制GAS6-AS1组(si-GAS6-AS1组)、si-GAS6-AS1与抑制剂阴性对照共转染组(si-GAS6-AS1+anti-NC组)以及si-GAS6-AS1与anti-miR-708-5p共转染组(si-GAS6-AS1+anti-miR-708-5p组);检测各组TU686细胞中LncRNA GAS6-AS1、miR-708-5p及PKD4的表达水平;平板克隆法、流式细胞仪、Transwell实验分别检测TU686细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭能力;Western blotting法检测蛋白表达;双荧光素酶报告基因实验验证基因的靶向关系。结果喉癌组织LncRNA GAS6-AS1、PDK4的表达水平显著升高,而miR-708-5p表达水平显著降低(P<0.05)。si-GAS6-AS1组TU686细胞中LncRNA GAS6-AS1表达、PDK4 mRNA表达、克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数及PCNA、MMP-9和PDK4的蛋白表达均低于si-NC组,而miR-708-5p表达、细胞凋亡率及Bax蛋白表达高于si-NC组(P<0.05);与si-GAS6-AS1组、si-GAS6-AS1+anti-NC组比较,si-GAS6-AS1+anti-miR-708-5p组PDK4 mRNA表达、克隆细胞数、迁移细胞数、侵袭细胞数及PCNA、MMP-9和PDK4的蛋白表达水平升高,而miR-708-5p表达、凋亡率及Bax蛋白表达降低(P<0.05)。LncRNA GAS6-AS1靶向负调控miR-708-5p表达,miR-708-5p靶向负调控PDK4表达。结论抑制LncRNA GAS6-AS1可能通过靶向miR-708-5p来下调PDK4表达,进而抑制TU686细胞增殖、侵袭,促进其凋亡。 展开更多
关键词 喉癌 LncRNA gas6-as1 miR-708-5p PDK4 增殖 侵袭
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LncRNA GAS6-AS1调节miR-330-5p/PTBP1轴对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响 被引量：2
2
作者 王灿灿 李翡 +1 位作者 王景龙 潘珂 《国际医药卫生导报》 2025年第4期633-640,共8页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)调节miR-330-5p/多聚嘧啶串结合蛋白1(PTBP1)轴对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法本实验于2023年2月至12月实施。收集2021年7月至2023年6月期间在陕西中医... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)调节miR-330-5p/多聚嘧啶串结合蛋白1(PTBP1)轴对宫颈癌细胞恶性生物学行为的影响。方法本实验于2023年2月至12月实施。收集2021年7月至2023年6月期间在陕西中医药大学附属医院接受手术治疗的26例宫颈癌患者癌组织和癌旁组织,将宫颈癌MS751细胞分为control组、sh-NC组、sh-GAS6-AS1组、sh-GAS6-AS1+inhibitor NC组、sh-GAS6-AS1+miR-330-5p inhibitor组、sh-GAS6-AS1+oe-NC组、sh-GAS6-AS1+oe-PTBP1组;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测细胞和组织中的GAS6-AS1、miR-330-5p和PTBP1 mRNA表达水平;细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测细胞增殖;Transwell实验检测细胞迁移和侵袭;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot检测细胞中肿瘤增殖抗原(Ki67)、Bcl-2关联X蛋白(Bax)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、PTBP1蛋白表达量。验证miR-330-5p与GAS6-AS1和PTBP1的靶向关系。采用t检验、单因素方差分析和SNK-q检验进行统计分析。结果宫颈癌组织GAS6-AS1、miR-330-5p和PTBP1 mRNA表达水平与癌旁组织比较(1.84±0.17比1.03±0.09、0.34±0.03比0.98±0.07、2.13±0.22比1.06±0.10),差异均有统计学意义(均P<0.05)。癌组织中PTBP1阳性表达率为(68.46±7.82)%,高于癌旁组织的(21.83±2.79)%(P<0.05)。宫颈癌细胞中GAS6-AS1和PTBP1 mRNA表达高于正常人宫颈上皮细胞H8,miR-330-5p表达低于正常人宫颈上皮细胞H8(均P<0.05);sh-GAS6-AS1组MS751细胞中GAS6-AS1和PTBP1 mRNA表达、A_(450)(24 h、48 h)值、细胞迁移和侵袭数量、Ki67、Bcl-2、MMP-2、PTBP1蛋白表达均低于sh-NC组,miR-330-5p表达、凋亡率和Bax蛋白表达均高于sh-NC组(均P<0.05);在下调GAS6-AS1的同时敲低miR-330-5p表达或上调ANXA2表达,均可减弱下调GAS6-AS1对MS751细胞行为的抑制作用(均P<0.05)。结论干扰GAS6-AS1表达可调控miR-330-5p/PTBP1轴,进而抑制宫颈癌细胞增殖、迁移和侵袭,并促进凋亡。 展开更多
关键词 宫颈癌 长链非编码RNA生长停滞特异基因转录的反义RNA miR-330-5p/多聚嘧啶串结合蛋白1轴 生物学行为
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lncRNA GAS6-AS1靶向调控IL-11对子宫内膜基质细胞向成纤维细胞分化的影响 被引量：2
3
作者 巫剑红 代荫梅 +3 位作者 田玉翠 蒋子雯 王静璇 张宇迪 《山东医药》 CAS 2023年第13期10-14,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)靶向调控白细胞介素11(IL-11)对子宫内膜基质细胞(ESCs)向成纤维细胞分化的影响。方法体外传代培养ESCs,取传3~6代、对数生长期、生长状态良好的ESCs,随机分为TGF... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)生长停滞特异基因转录的反义RNA(GAS6-AS1)靶向调控白细胞介素11(IL-11)对子宫内膜基质细胞(ESCs)向成纤维细胞分化的影响。方法体外传代培养ESCs,取传3~6代、对数生长期、生长状态良好的ESCs,随机分为TGF-β_(1)未干预组和TGF-β_(1)干预组。TGF-β_(1)未干预组不予TGF-β_(1)干预,TGF-β_(1)干预组用无血清培养基饥饿培养后予TGF-β_(1)干预,收集细胞,采用RT-qPCR法检测lncRNA GAS6-AS1、IL-11及纤维化标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白α1(COL1A1)mRNA表达。另取传3~6代、对数生长期、生长状态良好的ESCs,分别转染三条si-GAS6-AS1序列以及si-Control序列,采用RT-qPCR法验证转染效率。将转染si-GAS6-AS1的ESCs用无血清培养基饥饿培养后予TGF-β_(1)干预,收集细胞,采用Western blotting法检测IL-11、α-SMA、COL1A1蛋白表达,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率。结果与TGF-β_(1)未干预组比较,TGF-β_(1)干预组lncRNA GAS6-AS1、IL-11、α-SMA、COL1A1 mRNA相对表达量均显著升高(P均<0.01)。转染si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2、si-GAS6-AS1-3及si-Control序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量分别为0.22±0.04、0.27±0.06、0.81±0.07、1.00±0.00。与转染si-Control序列的ESCs比较,转染si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量显著降低(P均<0.01),而转染si-GAS6-AS1-3序列的ESCs GAS6-AS1 mRNA相对表达量降低不明显(P>0.05)。因此,选择si-GAS6-AS1-1、si-GAS6-AS1-2序列进行后续实验。与si-Control+TGF-β_(1)组比较,si-GAS6-AS1-1+TGF-β_(1)组和si-GAS6-AS1-2+TGF-β_(1)组IL-11、α-SMA、COL1A1蛋白相对表达量及细胞增殖活性均显著降低,细胞凋亡率均显著升高(P均<0.01)。结论lncRNA GAS6-AS1通过靶向调控IL-11表达抑制ESCs向成纤维细胞分化。 展开更多
关键词 宫腔粘连 长链非编码RNA生长停滞特异基因转录的反义RNA 白细胞介素11 子宫内膜基质细胞 成纤维细胞
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LncRNA GAS6-AS1靶向miR-324-3p激活Wnt/β-catenin通路调控脑胶质瘤细胞增殖及放疗敏感性的研究 被引量：2
4
作者 徐华 张海萍 +4 位作者 王虹伊 赵钦 郭巧宁 马蕾 陆军 《河北医药》 CAS 2022年第19期2885-2890,共6页
目的研究LncRNA GAS6-AS1对脑胶质瘤T98G细胞增殖及其放疗敏感性的影响。方法RT-qPCR技术分析脑胶质瘤组织、癌旁组织和X射线照射的T98G细胞中LncRNA GAS6-AS1、miR-324-3p基因表达。分别下调T98G细胞中GAS6-AS1或miR-324-3p的表达后,利... 目的研究LncRNA GAS6-AS1对脑胶质瘤T98G细胞增殖及其放疗敏感性的影响。方法RT-qPCR技术分析脑胶质瘤组织、癌旁组织和X射线照射的T98G细胞中LncRNA GAS6-AS1、miR-324-3p基因表达。分别下调T98G细胞中GAS6-AS1或miR-324-3p的表达后,利用X射线照射细胞,分析GAS6-AS1表达下调对T98G细胞增殖、侵袭和凋亡的影响。miRcode和双荧光素酶报告基因实验检测LncRNA GAS6-AS1和miR-324-3p之间的相互关系。同时上调LncRNA GAS6-AS1与miR-324-3p在T98G细胞中的表达,进一步分析T98G细胞增殖、侵袭和放疗敏感性。Western blot检测miR-324-3p对Wnt/β-catenin通路的影响。分析miR-153-3p通过Wnt/β-catenin通路对T98G细胞增殖、侵袭和放疗敏感性的影响。结果与癌旁正常组织比较,脑胶质瘤组织中LncRNA GAS6-AS1 mRNA表达显著升高,差异有统计学意义(P<0.01)。2、4、6 Gy X射线照射T98G细胞后中GAS6-AS1 mRNA表达低于0 Gy剂量X射线照射(P<0.05)。下调LncRNA GAS6-AS1表达后,GAS6-AS1 mRNA表达明显降低(P<0.01)。下调GAS6-AS1表达后,T98G细胞活力降低(P<0.01),细胞侵袭数目减少。6 Gy X射线照射细胞后活力明显降低(P<0.05),细胞凋亡率显著升高;下调GAS6-AS1表达后并用6 Gy X射线照射细胞,活力明显降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高。GAS6-AS1 wt+miR-324-3p mimics组荧光素酶活性显著低于mimics NC+GAS6-AS1 wt组(P<0.01)。与癌旁正常组织比较,脑胶质瘤组织中miR-324-3p mRNA表达显著降低(P<0.01)。2、4、6 Gy X射线照射T98G细胞后中miR-324-3p mRNA表达高于0 Gy剂量X射线照射(P<0.05)。上调GAS6-AS1和miR-324-3p表达后,GAS6-AS1、miR-324-3p mRNA表达明显升高(P<0.01)。与pcDNA-3.1(+)+mimics NC组比较,pcDNA-GAS6-AS1+mimics NC组T98G细胞活力和侵袭数目显著升高(P<0.05),pcDNA-3.1(+)+miR-324-3p mimics组细胞活力和侵袭数目显著降低(P<0.05);与pcDNA-3.1(+)+miR-324-3p mimics组比较,pcDNA-GAS6-AS1+miR-324-3p mimics组细胞活力和侵袭数目显著升高(P<0.05)。与pcDNA-3.1(+)+mimics NC+6 Gy组比较,pcDNA-GAS6-AS1+mimics NC+6 Gy组细胞活力明显上升,细胞凋亡率明显降低(P<0.05);pcDNA-3.1(+)+miR-324-3p mimics+6 Gy组细胞活力明显降低,细胞凋亡率明显上升(P<0.05);与pcDNA-3.1(+)+miR-324-3p mimics+6 Gy组比较,pcDNA-GAS6-AS1+miR-324-3p mimics+6 Gy组细胞活力明显上升,细胞凋亡率明显降低(P<0.05)。与mimics NC组比较,miR-324-3p mimics组细胞内β-catenin和CyclinD1蛋白表达显著降低,β-catenin/GAPDH、CyclinD1/GAPDH比值显著降低(P<0.01)。与inhibitor NC组比较,miR-324-3p inhibitor组细胞内β-catenin和CyclinD1蛋白表达显著升高,β-catenin/GAPDH、CyclinD1/GAPDH比值显著升高(P<0.01)。与inhibitor NC组比较,miR-324-3p inhibitor转染T98G细胞48 h后增殖活力显著上调(P<0.05),细胞侵袭数目明显增加(P<0.01);与miR-324-3p inhibitor组比较,miR-324-3p inhibitor+XAV939组细胞增殖活力显著降低(P<0.05),细胞侵袭数目明显减少(P<0.01)。用6 Gy X射线照射T98G细胞后,与inhibitor NC组比较,miR-324-3p inhibitor组细胞增殖活力显著上调(P<0.05),细胞凋亡率明显降低(P<0.01),与miR-153-3p inhibitor组相比,miR-153-3p inhibitor+XAV939组细胞增殖活力显著降低(P<0.05),细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。结论LncRNA GAS6-AS1靶向miR-324-3p激活Wnt/β-catenin通路促进了T98G细胞增殖,降低了放疗敏感性。 展开更多
关键词 LncRNA gas6-as1 miR-324-3p 脑胶质瘤 增殖 放疗敏感性
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lncRNA GAS6-AS1在子宫内膜癌中的表达与临床病理特征和预后因素分析 被引量：1
5
作者 王杉杉 张圆圆 《右江医学》 2023年第12期1091-1095,共5页
目的分析子宫内膜癌组织中长链非编码RNA生长阻滞特异性基因6反义RNA1(lncRNA GAS6-AS1)表达水平,并探讨其与临床病理特征及预后的关系。方法回顾性分析2015年6月至2018年1月于河南大学第一附属医院行子宫切除的80例子宫内膜癌患者。收... 目的分析子宫内膜癌组织中长链非编码RNA生长阻滞特异性基因6反义RNA1(lncRNA GAS6-AS1)表达水平,并探讨其与临床病理特征及预后的关系。方法回顾性分析2015年6月至2018年1月于河南大学第一附属医院行子宫切除的80例子宫内膜癌患者。收集患者子宫内膜癌组织以及癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测组织中lncRNA GAS6-AS1表达水平。Kaplan-Meier法分析组织lncRNA GAS6-AS1表达与子宫内膜癌患者预后的关系,多因素Cox回归分析影响子宫内膜癌预后的因素。结果与癌旁组织相比,子宫内膜癌组织中lncRNA GAS6-AS1表达水平较高(P<0.001)。lncRNA GAS6-AS1表达水平与浸润深度、盆腔淋巴结转移具有相关性(P<0.05)。lncRNA GAS6-AS1低表达组5年累积总生存率高于lncRNA GAS6-AS1高表达组(P<0.05)。浸润深度≥1/2肌层、组织lncRNA GAS6-AS1高表达是子宫内膜癌患者预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论子宫内膜癌组织中lncRNA GAS6-AS1呈高表达,与子宫内膜癌预后不良有关,可能成为评估预后的分子标志物。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 长链非编码RNA生长阻滞特异性基因6反义RNA1 临床病理特征 实时定量PCR
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LncRNA GAS6-AS1、miR-370-3p在稽留流产患者蜕膜组织中的表达及意义
6
作者 李引弟 白东昱 +2 位作者 刘亚利 吴杰婷 王娟 《中国医师杂志》 2025年第10期1548-1551,共4页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)GAS6-AS1、微小RNA(miR)-370-3p在稽留流产患者蜕膜组织中的表达及意义。方法收集延安大学附属医院2023年5月—2024年5月收治的104例稽留流产患者为研究组,另选取非医学原因的人工流产孕妇78例为对照组。... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)GAS6-AS1、微小RNA(miR)-370-3p在稽留流产患者蜕膜组织中的表达及意义。方法收集延安大学附属医院2023年5月—2024年5月收治的104例稽留流产患者为研究组,另选取非医学原因的人工流产孕妇78例为对照组。收集受试者蜕膜组织,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)法检测LncRNA GAS6-AS1和miR-370-3p表达,蛋白免疫印迹(Western blot)检测组织中血管内皮生长因子(VECF)表达水平,免疫组化法检测组织中微血管密度(MVD)。采用Pearson相关性分析评估LncRNA GAS6-AS1、miR-370-3p表达与VECF、MVD的相关性,并采用受试者工作特征(ROC)曲线分析LncRNA CAS6-AS1、miR-370-3p表达对稽留流产的诊断价值。结果研究组患者LncRNA GAS6-AS1表达、VECF以及MVD低于对照组,miR-370-3p表达水平高于对照组(均P<0.05)。Pearson相关性分析发现,VECF、MVD与LncRNA GAS6-AS1表达呈正相关,与miR-370-3p表达呈负相关(均P<0.05)。ROC曲线分析结果显示,LncRNA GAS6-AS1、miR-370-3p表达诊断稽留流产的AUC分别为0.872、0.851,两者联合诊断的AUC为0.931,其灵敏度和特异度分别为85.6%、87.2%。结论稽留流产患者蜕膜组织中LncRNA GAS6-AS1低表达,miR-370-3p高表达,二者与血管生长之间存在相关性,且联合诊断稽留流产有一定的价值。 展开更多
关键词 流产 稽留 蜕膜 gas6-as1 miR-370-3p
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过表达lncRNA ATG16L2-211通过促进lncRNA GAS6-AS1表达抑制肺腺癌细胞的生长和迁移
7
作者 王敏 李刚 +3 位作者 程小彬 李晶 汪六林 龙琦 《国际呼吸杂志》 2022年第1期50-55,共6页
目的分析长链非编码RNA(lncRNA)ATG16L2-211在肺腺癌组织和细胞株中的表达, 研究其对肺腺癌细胞生长和迁移的影响及其分子机制。方法本研究为实验室研究。GEPIA在线数据库分析ATG16L2-211在肺腺癌组织中的表达情况。采用实时定量聚合酶... 目的分析长链非编码RNA(lncRNA)ATG16L2-211在肺腺癌组织和细胞株中的表达, 研究其对肺腺癌细胞生长和迁移的影响及其分子机制。方法本研究为实验室研究。GEPIA在线数据库分析ATG16L2-211在肺腺癌组织中的表达情况。采用实时定量聚合酶链式反应检测ATG16L2-211在肺腺癌细胞株(H1650、A549、H1975、H1299)中的表达情况。将ATG16L2-211序列和阴性对照序列转入H1650细胞, 分别标记为ATG16L2-211组和阴性对照组。CCK-8法检测H1650细胞活力, 细胞划痕实验检测H1650细胞迁移。GEPIA在线数据库分析ATG16L2-211相关性较高的基因。实时定量聚合酶链式反应和Western blot检测ATG16L2-211相关基因的表达。结果 ATG16L2-211在肺腺癌组织中表达低于正常组织(t=48.12, P<0.001)。ATG16L2-211在肺腺癌细胞株中表达均低于正常肺泡上皮细胞(P值均<0.05), H1650细胞中ATG16L2-211表达最低(F=13.79, P<0.001)。与阴性对照组比较, 从2 d开始至5 d ATG16L2-211组H1650细胞增殖活力均降低(P值均<0.05)。阴性对照组和ATG16L2-211组划痕愈合率为(72.15±6.23)%和(21.54±4.08)%, ATG16L2-211组H1650细胞迁移能力降低(t=6.79, P=0.001)。肺腺癌组织中ATG16L2-211和GAS6-AS1表达呈显著正相关(r=0.60, P<0.001)。与阴性对照组比较, ATG16L2-211组H1650细胞中GAS6-AS1表达增加(t=3.37, P=0.015), 葡萄糖转运蛋白1基因表达降低(t=4.33, P=0.005), 转化生长因子β1信号通路蛋白表达降低。结论 ATG16L2-211在肺腺癌组织及细胞株中低表达, 上调ATG16L2-211能通过促进GAS6-AS1表达发挥抑制肺腺癌细胞生长和迁移的作用。 展开更多
关键词 肺肿瘤 腺癌 细胞增殖 细胞转移 ATG16L2-211 gas6-as1
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