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茯苓多糖通过下调lncRNA GAS5表达抑制TNF-α诱导的气道平滑肌细胞重构 被引量：1
1
作者 曹卫红 向金波 +6 位作者 彭经纬 李世刚 闫梦真 魏含清 胡小燕 袁野 罗军 《吉林中医药》 2025年第4期449-455,共7页
目的探究茯苓多糖(poria cocos polysaccharides,PCP)对肿瘤坏死因子α(airway smooth muscle cells,TNF-α)刺激下的气道平滑肌细胞(ASMCs)的增殖、迁移和细胞外基质(ECM)沉积的影响及长链非编码RNA生长阻滞特异性转录本5(lnc RNA GAS5... 目的探究茯苓多糖(poria cocos polysaccharides,PCP)对肿瘤坏死因子α(airway smooth muscle cells,TNF-α)刺激下的气道平滑肌细胞(ASMCs)的增殖、迁移和细胞外基质(ECM)沉积的影响及长链非编码RNA生长阻滞特异性转录本5(lnc RNA GAS5)在其中的作用。方法采用TNF-α处理ASMCs来建立哮喘细胞模型。将沉默GAS5的si RNA(si-GAS5)及阴性对照组si-NC转染入ASMCs中,并将其分为:Control组,TNF-α+si-NC组,TNF-α+si-GAS5组和TNF-α+si-NC+PCP组。CCK-8法检测各组ASMCs的增殖活力,Western blot检测细胞中增殖相关蛋白PCNA、Ki67和ECM沉积相关蛋白CollagenⅠ、CollagenⅡ、MMP-9与TIMP-1的表达,Transwell法检测各组细胞的迁移能力。结果与Control组比较,TNF-α+si-NC组AMSCs中GAS5表达、细胞的增殖活力与迁移和细胞中PCNA、Ki67、CollagenⅠ、CollagenⅡ、MMP-9蛋白表达均显著增加(P<0.05),而细胞中TIMP-1蛋白表达明显降低(P<0.05);与TNF-α+si-NC组比较,TNF-α+si-NC+PCP组中GAS5表达、细胞的增殖活力与迁移和细胞中PCNA、Ki67、CollagenⅠ、CollagenⅡ、MMP-9蛋白表达均显著降低(P<0.05),而细胞中TIMP-1蛋白表达明显升高(P<0.05);与TNF-α+si-GAS5组比较,TNF-α+si-NC+PCP组的上述检测指标均无明显改变(P>0.05)。结论PCP可通过抑制细胞增殖、迁移和ECM沉积来改善TNF-α诱导的ASMCs功能改变,这可能与茯苓多糖降低了ASMCs中GAS5/mi R-10a表达的作用有关。 展开更多
关键词 茯苓多糖 lncRNA gas5 气道平滑肌细胞 细胞增殖
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lncRNA GAS5靶向miR-21通过PI3K/Akt/mTOR信号通路抑制肺癌细胞的上皮-间质转化和自噬
2
作者 张茜 刘杰 马红霞 《国际检验医学杂志》 2025年第5期568-574,共7页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)GAS5靶向微小RNA-21(miR-21)通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制肺癌细胞的上皮-间质转化和自噬。方法实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测lncRNA GAS5在5... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)GAS5靶向微小RNA-21(miR-21)通过磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路抑制肺癌细胞的上皮-间质转化和自噬。方法实时定量聚合酶链反应(qPCR)检测lncRNA GAS5在5例非小细胞肺癌(NSCLC)组及癌旁组中的表达。用双荧光素酶报告基因实验检测lncRNA GAS5对miR-21的靶向作用。另将A549细胞分为5组,包括pcDNA-null组、pcDNA-GAS5组、pcDNA-GAS5+mimic-NC组、pcDNA-GAS5+mimic组、pcDNA-GAS5+mimic+BEZ235组。用qPCR检测lncRNA GAS5和miR-21表达。用蛋白质印迹法检测PI3K、磷酸化Akt(p-Akt)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、贝克兰蛋白1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)-Ⅱ、LC3-Ⅰ、上皮钙黏蛋白(E-cadherin)、神经钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、扭转蛋白1(Twist1)、核增殖相关抗原(Ki67)和增殖细胞核抗原(PCNA)表达。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物法检测细胞增殖活力。结果NSCLC组lncRNA GAS5表达明显高于癌旁组,差异有统计学意义(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验确定A549细胞中lncRNA GAS5对miR-21有直接靶向作用。与pcDNA-null组比较,pcDNA-GAS5组细胞增殖活力减少,lncRNA GAS5、PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin1、LC3-Ⅱ、N-cadherin、Vimentin、Twist1、Ki67、PCNA表达下调,miR-21、LC3-Ⅰ、E-cadherin表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA-GAS5+mimic-NC组比较,pcDNA-GAS5+mimic组细胞增殖活力上调,PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin1、LC3-Ⅱ、N-cadherin、Vimentin、Twist1、Ki67、PCNA表达上调,miR-21、LC3-Ⅰ、E-cadherin表达下调,差异有统计学意义(P<0.05)。与pcDNA-GAS5+mimic组比较,pcDNA-GAS5+mimic+BEZ235组细胞增殖活力下调,PI3K、p-Akt、p-mTOR、Beclin1、LC3-Ⅱ、N-cadherin、Vimentin、Twist1、Ki67、PCNA表达下调,LC3-Ⅰ和E-cadherin表达上调,差异有统计学意义(P<0.05)。结论lncRNA GAS5通过miR-21抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路,从而抑制肺癌细胞的上皮-间质转化和自噬,减少细胞增殖活力。 展开更多
关键词 长链非编码RNA gas5 微小RNA-21 磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路 肺癌
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芪玉三龙方调控LncRNA GAS5及FAS/FADD通路促进肺癌荷瘤小鼠肿瘤凋亡的作用
3
作者 刘桐 张星星 +3 位作者 高雅婷 黄谭谭 童佳兵 李泽庚 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第5期2291-2297,共7页
目的:基于动物实验和长链非编码RNA(LncRNA)转录组学,探究芪玉三龙方治疗肺癌荷瘤小鼠的潜在作用机制。方法:构建肺癌A549皮下瘤模型,选择模型组及芪玉三龙方组的肿瘤组织进行LncRNA高通量测序,结合生物信息学分析寻找差异基因,进行基... 目的:基于动物实验和长链非编码RNA(LncRNA)转录组学,探究芪玉三龙方治疗肺癌荷瘤小鼠的潜在作用机制。方法:构建肺癌A549皮下瘤模型,选择模型组及芪玉三龙方组的肿瘤组织进行LncRNA高通量测序,结合生物信息学分析寻找差异基因,进行基因本体(GO)生物过程富集分析,构建内源性竞争RNA(ceRNA)网络,最后使用动物肿瘤组织进行验证。结果:动物实验中,芪玉三龙组肿瘤组织可见片状坏死细胞。与模型组比较,芪玉三龙方组能够抑制Ki67蛋白表达。LncRNA测序结果筛选出667个差异mRNAs,234个差异LncRNAs,其中,LncRNA GAS5有显著的差异表达水平。对差异mRNA进行GO生物学过程分析筛选出细胞的凋亡过程。构建的ceRNA网络结果显示,LncRN GAS5能够与miR-23a-3p作用,影响下游的FAS/FADD凋亡信号通路。TUNEL结果显示,使用芪玉三龙方后肿瘤组织的细胞凋亡增加。RT-qPCR结果显示,与模型组比较,芪玉三龙高剂量组显著促进LncRNA GAS5、FAS、FADD mRNA表达(P<0.01)。结论:芪玉三龙方能够抑制肺癌肿瘤组织的生长,促进肿瘤组织的凋亡,其作用机制可能是通过上调LncRNA GAS5表达,调控miR-23a-3p表达水平,继而影响下游FAS/FADD凋亡通路。 展开更多
关键词 芪玉三龙方 肺癌 转录组学 LncRNA gas5 凋亡 机制 FAS/FADD通路 内源性竞争RNA
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柚皮苷调控lncRNA GAS5改善骨关节炎软骨细胞线粒体凋亡 被引量：1
4
作者 林琴 朱瑛凯 +3 位作者 林艳铭 兰书洁 陈长兴 付长龙 《康复学报》 2025年第3期265-274,共10页
目的基于lncRNA GAS5探讨柚皮苷抑制软骨细胞线粒体凋亡改善骨关节炎(OA)的机制研究。方法体内实验,选择2月龄SD雄性大鼠30只,并采用随机数字法将其分为假手术组、模型组和柚皮苷组,每组10只。模型组和柚皮苷组采用改良的Hulth法构建大... 目的基于lncRNA GAS5探讨柚皮苷抑制软骨细胞线粒体凋亡改善骨关节炎(OA)的机制研究。方法体内实验,选择2月龄SD雄性大鼠30只,并采用随机数字法将其分为假手术组、模型组和柚皮苷组,每组10只。模型组和柚皮苷组采用改良的Hulth法构建大鼠OA模型,假手术组大鼠在相同位置仅打开关节腔,随即缝合伤口。术后4周,柚皮苷组采用75 mg/kg柚皮苷溶液进行灌胃,假手术组和模型组给予等量生理盐水,每周灌胃6次,连续灌胃4周。采用甲苯胺蓝和番红O染色分析观察大鼠关节软骨组织病理切片的形态变化;qPCR和Western blot法检测大鼠关节软骨组织中lncRNA GAS5表达水平及Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C蛋白表达量;TUNEL法检测柚皮苷对大鼠软骨组织中软骨细胞凋亡率的影响。体外实验,(1)将细胞随机分为空白组、SNP组、柚皮苷组和SNP+柚皮苷组4组,采用荧光原位杂交(FISH)法检测各组lncRNA GAS5的表达量。(2)将细胞随机分为空白+sh-NC组、SNP+sh-NC组、空白+sh-GAS5组和SNP+sh-GAS5组4组,采用qPCR法检测各组lncRNA GAS5表达水平。(3)将细胞分为空白组、SNP+柚皮苷组、SNP组和SNP+柚皮苷+sh-GAS5组4组,采用Western blot法检测各组Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C的蛋白表达量。结果(1)体内实验结果:甲苯胺蓝和番红O染色结果显示,假手术组膝关节软骨层展现出清晰的层次结构,表面光滑完整,软骨细胞排列整齐有序,潮线清晰可见;模型组膝关节软骨层表面粗糙不平,存在明显缺损,结构变得模糊不清,并可见到空洞;与模型组比较,柚皮苷组软骨表面相对光滑,软骨细胞排列更加整齐,潮线保持完整,软骨染色呈现出更为均匀的状态。qPCR结果显示,与假手术组比较,模型组lncRNA GAS5表达水平升高(P<0.05);与模型组比较,柚皮苷组lncRNA GAS5表达水平下降(P<0.05)。Western blot结果显示,与假手术组比较,模型组Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C的蛋白表达量升高(P<0.05);与模型组比较,柚皮苷组Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C的蛋白表达量降低(P<0.05)。TUNEL法检测结果显示,与假手术组比较,模型组软骨细胞凋亡率增加(P<0.05);与模型组相比,柚皮苷组软骨细胞凋亡率减少(P<0.05)。(2)体外实验结果:FISH结果显示,与空白组比较,SNP组软骨细胞中lncRNA GAS5荧光表达量增加(P<0.05);与SNP组比较,SNP+柚皮苷组lncRNA GAS5荧光表达量减少(P<0.05)。qPCR结果显示,与空白+sh-NC组比较,SNP+sh-NC组的lncRNA GAS5 mRNA表达水平明显升高(P<0.05);与空白+sh-NC组比较,空白+sh-GAS5组的lncRNA GAS5 mRNA水平明显下降(P<0.05),证明sh-GAS5转染成功;与SNP+sh-NC组比较,SNP+sh-GAS5组的lncRNA GAS5 mRNA相对表达量降低(P<0.05)。Western blot结果显示,与空白组比较,SNP组的Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C蛋白表达量升高(P<0.05);与SNP组比较,SNP+柚皮苷组Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C蛋白表达量下降(P<0.05);与SNP+柚皮苷组比较,SNP+柚皮苷组+sh-GAS5组Caspase-3、Bax、MMP-13和Cyt-C蛋白表达量上升(P<0.05)。结论柚皮苷可通过抑制lncRNA GAS5表达,减少软骨细胞线粒体凋亡,延缓软骨退变进程,改善OA。 展开更多
关键词 骨关节炎 线粒体凋亡 柚皮苷 长链非编码RNA生长停滞特异性5(lncRNA gas5) 软骨细胞
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血清外泌体LncRNA GAS5在胃癌患者中的表达水平及其临床意义
5
作者 张向前 韩笑 张坤 《临床检验杂志》 2025年第5期336-340,共5页
目的探讨血清外泌体长链非编码RNA(LncRNA)GAS5在胃癌患者中的表达水平,并分析其临床意义。方法选取2019年1月至2020年12月于河南电力医院就诊的70例胃癌患者以及同期70例体检健康者作为研究对象,分别收集2组研究对象血清标本及临床病... 目的探讨血清外泌体长链非编码RNA(LncRNA)GAS5在胃癌患者中的表达水平,并分析其临床意义。方法选取2019年1月至2020年12月于河南电力医院就诊的70例胃癌患者以及同期70例体检健康者作为研究对象,分别收集2组研究对象血清标本及临床病理资料。另收集20例接受手术治疗的胃癌患者癌组织及癌旁组织标本。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组研究对象组织及血清外泌体LncRNA GAS5的表达水平,采用化学发光法检测血清癌胚抗原(CEA)与糖类抗原(CA19-9)的表达水平。采用ROC曲线评价不同检测指标对胃癌的筛查效能,并分析其与胃癌患者临床病理参数及预后的关系。结果胃癌患者血清外泌体LncRNA GAS5的表达水平显著低于健康人对照组(t=10.84,P<0.001),且胃癌组织中LncRNA GAS5的表达水平亦低于癌旁组织(t=14.94,P<0.001)。ROC曲线分析结果表明,血清外泌体LncRNA GAS5用于胃癌筛查的ROC曲线下面积(AUC^(ROC))为0.807,当cut-off值为1.96时,其敏感性为81.43%,特异性为67.14%,均显著优于传统肿瘤标志物CEA、CA19-9的筛查效能(AUC^(ROC)分别为0.664和0.713)。对胃癌患者的临床病理参数分析结果显示,血清外泌体LncRNA GAS5低表达与肿瘤大小、TNM分期及远处转移等密切相关(P<0.05)。血清外泌体LncRNA GAS5低表达组患者的总生存时间显著低于高表达组患者(中位总生存时间:23个月vs 35个月,P=0.03)。结论胃癌患者血清外泌体LncRNA GAS5呈低表达,对胃癌具有较高的筛查效能,有望成为胃癌患者筛查和预后评估的潜在生物学标志物。 展开更多
关键词 胃癌 外泌体 血清 长链非编码RNA gas5 生物学标志物 诊断
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LncRNA GAS5通过miR-1228-3p/PKC/MMP2轴抑制糖尿病肾病系膜细胞的增殖和纤维化
6
作者 何建雄 杨文凡 +1 位作者 余皓 施森 《西部医学》 2025年第5期664-671,679,共9页
目的探讨长链非编码RNA GAS5在糖尿病肾病(CDKD)进展中的生物学作用及其潜在的分子机制。方法收集2023年于本院接受标准肾活检的10例肾脏组织,针对受试者肾脏组织进行Masson染色以及PAS染色;使用高糖(30 mM)诱导人系膜细胞48 h后通过RT-... 目的探讨长链非编码RNA GAS5在糖尿病肾病(CDKD)进展中的生物学作用及其潜在的分子机制。方法收集2023年于本院接受标准肾活检的10例肾脏组织,针对受试者肾脏组织进行Masson染色以及PAS染色;使用高糖(30 mM)诱导人系膜细胞48 h后通过RT-qPCR检测LncRNA GAS5的表达水平;过表达或敲除LncRNA GAS5和miR-1228-3p后通过RT-qPCR、细胞增殖实验、EdU实验和Western Blot实验检测系膜细胞增殖活性和纤维化相关蛋白包括纤维连接蛋白(FN)、IV型胶原(Col-4)和转化生长因子beta1(TGF-β1)的表达及PKC/MMP2信号通路的激活情况。结果Masson染色和PAS染色显示DKD患者肾组织系膜明显增生,基底膜糖原增加,纤维化明显增加。DKD患者和高糖诱导的系膜细胞中LncRNA GAS5表达下调,纤维化相关蛋白上调。LncRNA GAS5协同miR-1228-3p表达上调PKC/MMP-2信号通路抑制系膜细胞的增殖和纤维化标志蛋白的表达。结论LncRNA GAS5通过靶向miR-1228-3p/PKC/MMP2轴来抑制系膜细胞增殖以及纤维化相关蛋白和表达。LncRNA GAS5/miR-1228-3p/PKC/MMP2轴阐明了糖尿病肾病的病理机制,为DKD的治疗提供了潜在的治疗靶点。 展开更多
关键词 LncRNA gas5 糖尿病肾病 miR-1228-3p PKC/MMP2 增殖和纤维化
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长链非编码RNA GAS5和基质金属蛋白酶9在非小细胞肺癌病人血清中的表达及临床价值
7
作者 梁志伟 辛鑫 余会敏 《临床外科杂志》 2025年第5期498-502,共5页
目的 探究长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)和基质金属蛋白酶9(MMP9)在非小细胞肺癌(NSCLC)病人血清中的表达及临床价值。方法 选取2018年12月~2019年12月收治的NSCLC病人115例为NSCLC组,根据预后将其分为生存组94例,死亡组21例;同期在... 目的 探究长链非编码RNA GAS5(lncRNA GAS5)和基质金属蛋白酶9(MMP9)在非小细胞肺癌(NSCLC)病人血清中的表达及临床价值。方法 选取2018年12月~2019年12月收治的NSCLC病人115例为NSCLC组,根据预后将其分为生存组94例,死亡组21例;同期在本院体检健康的志愿者115例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)测定血清lncRNA GAS5水平;采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清MMP9水平;采用Pearson分析NSCLC病人血清lncRNA GAS5水平与MMP9水平相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC)评价血清lncRNA GAS5、MMP9水平在诊断NSCLC中的价值;采用多因素Cox回归分析NSCLC病人预后的影响因素。结果 与对照组相比较,NSCLC组血清lncRNA GAS5水平降低,MMP9水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);Pearson显示,NSCLC病人血清lncRNA GAS5水平与MMP9水平呈负相关(r=-0.523,P<0.05);血清lncRNA GAS5、MMP9水平均与肿瘤直径、TNM分期、淋巴结是否转移相关(P<0.05);血清lncRNA GAS5、MMP9水平诊断NSCLC的曲线下面积(AUC)分别为0.842、0.916,两者联合诊断的AUC为0.952,均优于两者单独诊断(Z=3.904、1.982,P<0.05);死亡组血清lncRNA GAS5水平较生存组显著降低,血清MMP9水平较生存组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05);多因素Cox回归分析显示,高水平lncRNA GAS5为NSCLC预后不良的独立保护因素,高水平MMP9和淋巴结转移均为NSCLC预后不良的独立危险因素(P<0.05)。结论 NSCLC病人血清lncRNA GAS5水平显著降低,MMP9水平显著升高,两者在临床诊断NSCLC中具有一定潜在价值,且是NSCLC预后不良的影响因素。 展开更多
关键词 长链非编码RNA gas5 基质金属蛋白酶9 非小细胞肺癌 临床价值
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雷公藤甲素通过lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴抑制细胞焦亡改善佐剂型关节炎大鼠炎症 被引量：2
8
作者 王啊敏 曹云祥 +2 位作者 刘健 朱南飞 王慧 《免疫学杂志》 CAS CSCD 2024年第5期418-424,共7页
目的探讨雷公藤甲素(TP)通过lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴抑制细胞焦亡改善AA大鼠炎症的机制。方法将大鼠分为4组,每组6只:正常组(NC),模型组(MC),雷公藤甲素组(TP)和甲氨蝶呤组(MTX)。建立AA大鼠模型,观察大鼠一般状态、右足跖肿胀... 目的探讨雷公藤甲素(TP)通过lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴抑制细胞焦亡改善AA大鼠炎症的机制。方法将大鼠分为4组,每组6只:正常组(NC),模型组(MC),雷公藤甲素组(TP)和甲氨蝶呤组(MTX)。建立AA大鼠模型,观察大鼠一般状态、右足跖肿胀度和关节炎指数;HE染色检测各组大鼠关节滑膜组织病理形态;ELISA法检测IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α炎症因子水平;荧光定量PCR检测Caspase-1、IL-1β、NLRP3、GSDMD、GAS5、TLR4、NF-κB、miR-21 mRNA表达水平;Western blot检测Caspase-1、NLRP3、GSDMD、NF-κB、Caspase-4、TLR4蛋白的表达情况。结果与NC组比较,MC组大鼠肿胀度、关节炎指数显著升高(P<0.05),炎性细胞浸润增加;与MC组比较,TP组和MTX组IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α炎症因子水平下降(P<0.05),Caspase-1、IL-1β、NLRP3、GSDMD、TLR4、NF-κB、miR-21 mRNA表达水平减少,GAS5 mRNA表达增加(P<0.05),Caspase-1、NLRP3、GSDMD、NF-κB、Caspase-4、TLR4蛋白水平下降(P<0.05);与MTX组比较,TP组IL-1β、IL-6、IL-18、TNF-α炎症因子水平下降(P<0.05),Caspase-1、IL-1β、NLRP3、GSDMD、TLR4、NF-κB、miR-21 mRNA表达水平减少(P<0.05)。结论雷公藤甲素可能通过lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴,抑制细胞焦亡,抑制促炎因子产生,改善AA大鼠炎症。 展开更多
关键词 雷公藤甲素 lncRNA gas5/miR-21/TLR4信号轴 细胞焦亡 免疫炎症 佐剂型关节炎
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黄芪糖蛋白干扰lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴抑制细胞焦亡改善佐剂性关节炎大鼠心肌损伤 被引量：2
9
作者 付皖兰 曹云祥 +1 位作者 束开艳 朱南飞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第10期872-879,共8页
目的基于长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5/微小RNA 21/Toll样受体4(lncRNA GAS5/miR-21/TLR4)信号轴探究黄芪糖蛋白(HQGP)对佐剂性关节炎(AA)大鼠心肌损伤的作用及机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、... 目的基于长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5/微小RNA 21/Toll样受体4(lncRNA GAS5/miR-21/TLR4)信号轴探究黄芪糖蛋白(HQGP)对佐剂性关节炎(AA)大鼠心肌损伤的作用及机制。方法将SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、甲氨蝶呤(MTX)组、HQGP组,每组6只。复制AA模型,第19天开始给药,连续4周。检测各组AA大鼠足趾肿胀度、关节炎指数(AI),HE染色观察大鼠心肌组织病理变化,透射电镜观察心肌组织超微结构的变化及焦亡小体情况,ELISA检测血清白细胞介素6(IL-6)、IL-18、IL-1β和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒检测心肌组织LDH释放量,实时荧光定量PCR检测心肌组织核因子κB p65(NF-κB p65)、胱天蛋白酶1(caspase-1)、含pyrin结构域核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)的mRNA以及lncRNA GAS5/miR-21/TLR4信号轴分子的表达,Western blot法检测心肌组织TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3和GSDMD蛋白水平。结果与正常对照组相比,模型组大鼠足趾肿胀度、AI显著升高;大鼠心肌纤维溶解、断裂,肌节结构模糊,心肌纤维排列紊乱,组织间有炎性细胞浸润,线粒体嵴明显断裂稀疏,焦亡小体数量增加;血清促炎细胞因子IL-6、IL-18、IL-1β和TNF-α表达显著升高;心肌组织中GAS5表达显著降低,miR-21表达显著升高,LDH释放量、TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3、GSDMD的mRNA和蛋白表达水平显著升高。与模型组比较,HQGP组大鼠足趾肿胀度、AI和心肌组织病理状态明显改善;血清IL-6、IL-18、IL-1β和TNF-α表达显著降低;心肌组织中GAS5表达显著升高,miR-21表达显著降低,LDH释放量、TLR4、NF-κB p65、caspase-1、NLRP3的mRNA和蛋白表达水平显著降低,GSDMD的mRNA表达降低且蛋白水平显著降低。结论HQGP通过上调lncRNA GAS5抑制miR-21/TLR4信号传导,抑制细胞焦亡,减少促炎细胞因子表达,改善AA大鼠心肌损伤。 展开更多
关键词 佐剂性关节炎 心肌损伤 长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(lncRNA gas5) MIR-21 Toll样受体4(TLR4) 细胞焦亡 黄芪糖蛋白
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LncRNA GAS5通过miR-182-5p/FOXF2轴对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、凋亡、迁移及侵袭的影响 被引量：1
10
作者 张宗敏 那思家 郭治辰 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第8期1160-1169,共10页
目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(LncRNA GAS5)调节微小RNA-182-5p(miR-182-5p)/叉头盒蛋白F2(FOXF2)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法收集45例确诊为OSCC的癌组织以及癌旁组织,体外培养人口... 目的探讨长链非编码RNA生长停滞特异性转录本5(LncRNA GAS5)调节微小RNA-182-5p(miR-182-5p)/叉头盒蛋白F2(FOXF2)对口腔鳞状细胞癌(OSCC)细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响。方法收集45例确诊为OSCC的癌组织以及癌旁组织,体外培养人口腔上皮细胞系HOEC及人OSCC细胞系CAL-27、HSC-3、SCC-25,qRT-PCR检测组织、细胞中LncRNA GAS5、miR-182-5p、FOXF2的表达;择细胞株CAL-27分为ctrl组、pcDNA组、pcDNA-GAS5组、pcDNA-GAS5+miR-NC组及pcDNA-GAS5+miR-182-5p mimics组,采用CCK-8试剂盒检测细胞增殖活性,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Western Blot检测癌细胞中FOXF2、bax、Bcl-2、cleaved caspase-3及E-cadherin蛋白表达,双萤光素酶报告实验验证miR-182-5p与LncRNA GAS5、FOXF2的关系。结果与癌旁组织相比,OSCC组织中LncRNA GAS5、FOXF2 mRNA表达降低,miR-182-5p表达升高(P<0.05);CAL-27、HSC-3、SCC-25细胞与HOEC相比,LncRNA GAS5、miR-182-5p、FOXF2表达趋势与OSCC组织内一致,且在CAL-27表达最明显,选择其作为后续实验的细胞株;与ctrl组、pcDNA组比较,pcDNA-GAS5组CAL-27细胞中GAS5、FOXF2 mRNA、细胞凋亡率及BAX、E-cadherin蛋白表达升高(P<0.05),miR-182-5p表达、细胞增殖、迁移和侵袭数及Bcl-2蛋白表达降低(P<0.05);上调miR-182-5p可减弱过表达LncRNA GAS5对CAL-27细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用,也可抑制癌细胞凋亡;LncRNA GAS5靶向负调控miR-182-5p表达,miR-182-5p靶向负调控FOXF2表达。结论上调GAS5可能通过抑制miR-182-5p来增加FOXF2表达,进而抑制CAL-27细胞增殖、迁移及侵袭,促进CAL-27细胞的凋亡。 展开更多
关键词 长链非编码RNA gas5 miR-182-5p 叉头盒蛋白F2 口腔鳞癌 细胞增殖 凋亡 迁移和侵袭
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GAS5作为miR-223-3p的ceRNA介导U87细胞的焦亡抑制脑胶质细胞的增殖,槲皮素可以增强GAS5的作用 被引量：2
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作者 孙艳强 李虹良 +2 位作者 陈康雪 李杰 孙中磊 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2024年第3期230-240,共11页
本研究旨在探讨生长抑制特异性基因5(GAS5)作为miR-223-3p对脑胶质瘤生长的抑制作用及其可能机制。通过starbase工具预测GAS5与miR-223-3p结合情况,双荧光素酶报告实验和RNA免疫沉淀测定GAS5和miR-223-3p之间的结合关系。体外培养脑胶... 本研究旨在探讨生长抑制特异性基因5(GAS5)作为miR-223-3p对脑胶质瘤生长的抑制作用及其可能机制。通过starbase工具预测GAS5与miR-223-3p结合情况,双荧光素酶报告实验和RNA免疫沉淀测定GAS5和miR-223-3p之间的结合关系。体外培养脑胶质细胞U87,分为对照组(control)、槲皮素组(quercetin)、GAS5抑制组(si-GAS5)和槲皮素+si-GAS5组(quercetin+si-GAS5)组,对比分析槲皮素对GAS5/miR-223-3p及焦亡蛋白(NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMD和GSDME)的影响,以及U87细胞增殖能力的影响。结果显示,Starbase工具预测GAS5与miR-223-3p结合,双荧光素酶报告实验和RNA免疫沉淀测定揭示了GAS5和miR-223-3p之间的直接结合。槲皮素促进GAS5的表达,抑制miR-223-3p和焦亡相关蛋白(NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMD和GSDME)的表达,抑制U87细胞的增殖和侵袭(P <0.05);下调GAS5, miR-223-3p和焦亡相关蛋白(NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMD和GSDME)的表达增多,促进RC-4B/C细胞的增殖和侵袭(P<0.05);槲皮素可以逆转GAS5下调引起的miR-223-3p和焦亡相关蛋白(NLRP3、ASC、caspase-1、GSDMD和GSDME)的表达增加,抑制U87细胞的增殖和侵袭(P <0.05)。槲皮素抑制脑胶质瘤细胞U87的增殖,可能是通过促进GAS5表达竞争性抑制miR-223-3p,抑制焦亡信号途径实现的。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 U87 gas5 miR-223-3p 焦亡
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lncRNA GAS5调控miR-452-5p/Mcl-1通路对急性肺损伤大鼠肺组织细胞焦亡的影响
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作者 柯有力 罗东 +1 位作者 刘旭 别磊 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期621-628,共8页
目的探讨长链非编码RNA生长抑制特异因子5(lncRNA GAS5)调控miR-452-5p/髓样细胞白血病序列-1(Mcl-1)通路对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织细胞焦亡的影响。方法取SD大鼠随机分成6组(每组10只):对照组、模型组、pUC57-lncRNA GAS5组、miR-45... 目的探讨长链非编码RNA生长抑制特异因子5(lncRNA GAS5)调控miR-452-5p/髓样细胞白血病序列-1(Mcl-1)通路对急性肺损伤(ALI)大鼠肺组织细胞焦亡的影响。方法取SD大鼠随机分成6组(每组10只):对照组、模型组、pUC57-lncRNA GAS5组、miR-452-5p抑制剂组、pUC57-NC+miR-452-5p-NC组、pUC57-lncRNA GAS5+miR-452-5p激活剂组。模型组和各干预组大鼠以腹腔注射脂多糖的方法构建ALI模型,对照组大鼠腹腔注射等量生理盐水,造模同时进行分组干预。然后检测大鼠肺功能,比较各组用力肺活量(FVC)、0.3秒用力呼气容积(FEV0.3)/FVC、潮气量(VT);HE染色观察大鼠肺组织病理损伤,并以Holfbauer评分评估其损伤程度;酶联免疫吸附法(ELISA)测定大鼠肺泡灌洗液(BALF)和血清炎症因子白细胞介素(IL)-18、IL-1β水平;免疫印迹法检测大鼠肺组织焦亡相关指标[消皮素D(GSDMD)、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)、天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶(Caspase)-1、Caspase-11]及Mcl-1蛋白表达;实时荧光定量PCR检测大鼠肺组织lncRNA GAS5、miR-452-5p及Mcl-1表达;双荧光素酶报告基因实验验证大鼠肺泡上皮细胞L2中lncRNA GAS5对miR-452-5p的靶向调节。结果与对照组比较,模型组大鼠FVC、FEV0.3/FVC、lncRNA GAS5表达、Mcl-1蛋白及mRNA表达降低(均P<0.05),VT、Holfbauer评分、IL-18及IL-1β水平、GSDMD、NLRP3、Caspase-1及Caspase-11蛋白表达、miR-452-5p表达升高(均P<0.05)。与模型组比较,pUC57-lncRNA GAS5组、miR-452-5p抑制剂组大鼠FVC、FEV0.3/FVC、Mcl-1蛋白及mRNA表达均升高(均P<0.05),VT、Holfbauer评分、IL-18及IL-1β水平、GSDMD、NLRP3、Caspase-1及Caspase-11蛋白表达、miR-452-5p表达均降低(均P<0.05);pUC57-NC+miR-452-5p-NC组大鼠各指标无显著差异(均P>0.05)。与pUC57-lncRNA GAS5组比较,pUC57-lncRNA GAS5+miR-452-5p激活剂组大鼠FVC、FEV0.3/FVC、Mcl-1蛋白及mRNA表达降低(均P<0.05),VT、Holfbauer评分、IL-18及IL-1β水平、GSDMD、NLRP3、Caspase-1及Caspase-11蛋白表达、miR-452-5p表达升高(均P<0.05)。结论lncRNA GAS5可通过靶向下调miR-452-5p而促进Mcl-1表达,进而抑制ALI大鼠炎症反应及肺组织细胞焦亡,最终减轻大鼠肺损伤并改善其肺功能。 展开更多
关键词 lncRNA gas5 miR-452-5p/Mcl-1通路 急性肺损伤 肺组织细胞焦亡
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LncRNA GAS5-AS1靶向miR-106a-5p调控结直肠癌细胞增殖、迁移和侵袭
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作者 余周 胡满溢 戴剑 《世界华人消化杂志》 CAS 2024年第7期525-533,共9页
背景长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)生长停滞特异性转录本5反义RNA(growth arrest specific transcript 5 antisense RNA,GAS5-AS1)被发现在多种癌症中扮演肿瘤抑制因子的作用.但是其在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)进... 背景长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)生长停滞特异性转录本5反义RNA(growth arrest specific transcript 5 antisense RNA,GAS5-AS1)被发现在多种癌症中扮演肿瘤抑制因子的作用.但是其在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)进展中的作用和机制尚不清楚.目的探讨LncRNA GAS5-AS1靶向miR-106a-5p在CRC进展中的作用.方法实时荧光定量聚合酶链反应分析LncRNA GAS5-AS1和miR-106a-5p在43对CRC组织和癌旁组织样本中的表达.分别转染pcDNA、pcDNA-LncRNA GAS5-AS1、anti-miR-NC、anti-miR-106a-5p、si-NC、si-LncRNA GAS5-AS1、pcDNA-LncRNA GAS5-AS1+miR-NC、pcDNA-LncRNA GAS5-AS1+miR-106a-5p mimics至HCT8细胞.细胞计数试剂盒-8法检测细胞活力;Transwell小室法检测迁移和侵袭细胞数.通过双荧光素酶报告实验确定LncRNA GAS5-AS1和miR-106a-5p的靶向关系.结果与癌旁组织比较,CRC组织中LncRNA GAS5-AS1表达降低(P<0.05),miR-106a-5p表达升高(P<0.05).与转染pcDNA比较,转染pcDNA-LncRNA GAS5-AS1后HCT8细胞活力、迁移、侵袭、miR-106a-5p表达显著降低(P<0.05).与转染anti-miR-NC比较,转染anti-miR-106a-5p后HCT8细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著降低(P<0.05).与转染si-NC比较,转染si-LncRNA GAS5-AS1后miR-106a-5p表达水平显著升高(P<0.05).与转染miR-NC比较,转染miR-106a-5p能显著降低LncRNA GAS5-AS1-WT载体的荧光素酶活性,表明miR-106a-5p是LncRNA GAS5-AS1的直接靶点.与转染pcDNA-LncRNA GAS5-AS1+miR-NC比较,转染pcDNA-LncRNA GAS5-AS1+miR-106a-5p mimics后HCT8细胞活力、迁移和侵袭细胞数显著升高(P<0.05).结论LncRNA GAS5-AS1通过靶向miR-106a-5p来抑制CRC细胞增殖、迁移和侵袭. 展开更多
关键词 结直肠癌 LncRNA gas5-AS1 miR-106a-5p 细胞增殖 迁移 侵袭
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LncRNA GAS5通过miR-21调控脊髓损伤后神经细胞凋亡的机制研究
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作者 刘涛 支中正 +4 位作者 王英杰 李富平 周付超 康健 何志敏 《骨科》 CAS 2024年第2期145-154,共10页
目的 明确长链非编码RNA生长阻滞特异性转录因子5(LncRNA GAS5)与微小RNA-21(miR-21)的关系,阐明LncRNA GAS5调控miR-21参与脊髓损伤后神经细胞凋亡的机制。方法 建立脊髓损伤大鼠和氧糖剥夺复氧(OGD/R)处理的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(... 目的 明确长链非编码RNA生长阻滞特异性转录因子5(LncRNA GAS5)与微小RNA-21(miR-21)的关系,阐明LncRNA GAS5调控miR-21参与脊髓损伤后神经细胞凋亡的机制。方法 建立脊髓损伤大鼠和氧糖剥夺复氧(OGD/R)处理的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞(PC-12)模型;沉默和过表达GAS5,构建下调shGAS5表达的慢病毒,通过生物信息学分析预测LncRNA GAS5与miR-21存在结合位点等。通过双荧光素酶报告基因实验等探究GAS5与miR-21的结合位点;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测miR-21、GAS5、同源性磷酸酶-张力蛋白(phosphatase and tensin homolog,PTEN)基因、半胱天冬氨酸蛋白酶3(Caspase 3)、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2相关X基因(Bax)、Bcl-2和蛋白激酶B(AKT)的RNA表达水平;Western blot检测Cleaved caspase 3、Bax、Bcl-2、AKT和磷酸化AKT(p-AKT)的蛋白表达水平;TUNEL技术检测神经细胞凋亡程度。结果 大鼠脊髓损伤后脊髓中miR-21、Bcl-2及pAKT表达水平降低(P<0.05),GAS5、PTEN、Bax及Cleaved caspase-3表达均升高(P<0.05)。PC-12体外培养与OGD/R损伤后出现与大鼠脊髓损伤模型类似结果,且于OGD/R处理后2 h最显著。GAS5可通过碱基互补配对方式结合miR-21,进而调控下游PTEN信号通路。下调GAS5或过表达miR-21可抑制PC-12细胞凋亡(P<0.05)。结论 GAS5通过结合miR-21,上调PTEN并抑制AKT磷酸化,进而促进脊髓损伤诱导的神经细胞凋亡。 展开更多
关键词 脊髓损伤 长链非编码RNA 生长阻滞特异性转录因子5 微小RNA-21 同源性磷酸酶-张力蛋白 凋亡
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心康冲剂含药血清调控GAS5-miR21对心肌成纤维细胞增殖的影响 被引量：3
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作者 刘蓉芳 郭冰 +2 位作者 余意 李园 王敏 《中国中医药信息杂志》 CAS CSCD 2024年第9期102-109,共8页
目的 观察心康冲剂含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖的影响,基于GAS5-miR-21探讨其抑制CFs增殖的作用机制。方法 取SD乳鼠心肌,差速贴壁法分离CFs,采用血管紧张素Ⅱ诱导CFs增殖,在转染微小RNA-21(miR-21)过表达慢... 目的 观察心康冲剂含药血清对血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞(CFs)增殖的影响,基于GAS5-miR-21探讨其抑制CFs增殖的作用机制。方法 取SD乳鼠心肌,差速贴壁法分离CFs,采用血管紧张素Ⅱ诱导CFs增殖,在转染微小RNA-21(miR-21)过表达慢病毒、生长阻滞特异性转录本5(GAS5)沉默慢病毒后,分别用心康冲剂含药血清干预24 h。CCK-8法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞周期,免疫荧光染色检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达,RT-qPCR检测GAS5、miR-2l、磷酸酶及张力蛋白同源物(PTEN)mRNA表达,Western blot检测PTEN、Akt、周期蛋白D1(Cyclin D1)和周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)蛋白表达。结果 与空白组比较,模型组CFs细胞活力增强,G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,α-SMA阳性表达升高,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达降低,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,心康冲剂组CFs细胞活力减弱,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,α-SMA阳性表达降低,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达升高,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达降低;mi R-21过表达组和GAS5沉默组CFs细胞活力增强,G0/G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,α-SMA阳性表达升高,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达降低,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与miR-21过表达组、GAS5沉默组比较,miR-21过表达+心康冲剂组、GAS5沉默+心康冲剂组CFs细胞活力减弱,G0/G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少,α-SMA阳性表达降低,GAS5、PTEN mRNA及PTEN蛋白表达升高,miR-21 mRNA及Akt、Cyclin D1、CDK4蛋白表达降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 心康冲剂含药血清可抑制沉默GAS5所致miR-21、Akt表达升高,对抗过表达miR-21所致GAS5和PTEN表达降低,抑制CFs增殖周期,促进GAS5发挥“分子海绵”作用,改善血管紧张素Ⅱ诱导的CFs过度增殖。 展开更多
关键词 心肌纤维化 细胞周期 心康冲剂 生长阻滞特异性转录本5 微小RNA-21 心肌成纤维细胞
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过表达LncRNA GAS5对SD大鼠心肌成纤维细胞活化增殖的影响 被引量：8
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作者 张家贵 陶辉 +4 位作者 施鹏 陈泽文 曹炜 占红英 石开虎 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2017年第3期328-332,共5页
目的应用长链非编码RNA GAS5(LncRNA GAS5)过表达质粒(pEGFP-C1-GAS5)转染SD大鼠心肌成纤维细胞,观察其对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法提取SD大鼠心肌成纤维细胞,转化生长因子β1(TGF-β1)刺激其增殖,分为pEGFP-C1-GAS5组、阴性... 目的应用长链非编码RNA GAS5(LncRNA GAS5)过表达质粒(pEGFP-C1-GAS5)转染SD大鼠心肌成纤维细胞,观察其对心肌成纤维细胞活化增殖的影响。方法提取SD大鼠心肌成纤维细胞,转化生长因子β1(TGF-β1)刺激其增殖,分为pEGFP-C1-GAS5组、阴性对照组和空白对照组,应用LncRNA GAS5基因的过表达质粒(pEGFP-C1-GAS5)通过脂质体瞬时转染细胞,48 h后收获细胞。采用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测GAS5、Ⅰ型胶原前胶原(Col1A1)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的mRNA表达,Western blot分析Col1A1和α-SMA蛋白表达变化,MTT法检测细胞增殖活力。结果 TGF-β1刺激心肌成纤维细胞后,qRT-PCR结果显示LncRNA GAS5的表达量较正常组下降(P<0.05);与阴性对照组和空白对照组比较,转染了pEG-FP-C1-GAS5的实验组,qRT-PCR结果显示实验组的GAS5表达均明显升高(P<0.05),同时α-SMA和Col1A1 mRNA表达显著降低(P<0.05);Western blot结果显示转染pEG-FP-C1-GAS5的实验组α-SMA和Col1A1蛋白表达量均明显降低(P<0.05);MTT法检测结果表明在实验组心肌成纤维细胞的增殖活力低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。结论过表达LncRNA GAS5可显著降低心肌成纤维细胞的增殖活力,提示GAS5有抑制心肌成纤维细胞的活化增殖的作用,为以后进一步研究提供依据。 展开更多
关键词 LncRNA gas5 心肌成纤维细胞 Α-平滑肌肌动蛋白 Ⅰ型胶原前胶原
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LncRNA-GAS5抑制miR-21介导的非完全匹配靶mRNA降解 被引量：14
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作者 郑伟 董洁 +10 位作者 李少华 丁红梅 李慧 黄皑雪 夏伟 白琛俊 郭晓华 李达 耿介 李洁 邵宁生 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第7期580-590,共11页
LncRNA-GAS5作为miR-21的"分子海绵",通过"吸收"miR-21从而调控miR-21对靶基因的抑制.此外,miR-21直接调控非完全匹配靶基因PTEN和TPM1的表达.我们首先在HEK293T和HeLa细胞中确认,miR-21通过碱基互补配对调控非完... LncRNA-GAS5作为miR-21的"分子海绵",通过"吸收"miR-21从而调控miR-21对靶基因的抑制.此外,miR-21直接调控非完全匹配靶基因PTEN和TPM1的表达.我们首先在HEK293T和HeLa细胞中确认,miR-21通过碱基互补配对调控非完全匹配靶基因PTEN和TPM1的蛋白表达,但不影响PTEN和TPM1mRNA的水平.此外,过表达miR-21后,qRT-PCR检测PTEN和TPM1mRNA的半衰期,发现它们的半衰期显著缩短,miR-21加速PTEN和TPM1mRNA的降解.通过转染lncRNA-GAS5的过表达质粒,发现lncRNA-GAS5竞争性地与miR-21结合能够延长PTEN和TPM1mRNA的半衰期,而miR-21与lncRNA-GAS5碱基互补配对结合后,又对lncRNA-GAS5存在调节作用,减弱lncRNA-GAS5的稳定性并加速lncRNA-GAS5的降解.LncRNA-GAS5作为miR-21的"分子海绵"能够抑制miR-21对非完全匹配靶mRNAPTEN和TPM1的降解,同时,miR-21与lncRNA-GAS5结合后又存在对lncRNA-GAS5的反馈调节,这些相互作用机制的发现有助于了解lncRNA、miRNA、mRNA之间这个复杂又精细的调控环路. 展开更多
关键词 LncRNA-gas5 MIR-21 PTEN TPM1 RNA稳定性
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长链非编码RNA GAS5在绝经后骨质疏松症肾阴虚证的表达及对骨免疫细胞因子的调控作用 被引量：5
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作者 陈娟 李生强 +3 位作者 叶云金 谢丽华 陈赛楠 葛继荣 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1691-1695,共5页
目的研究长链非编码RNA GAS5(long non-coding RNA GAS5,lncRNA GAS5)在绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)肾阴虚证的表达及其对骨免疫相关细胞因子的调控作用。方法随机选择绝经后妇女,经骨密度检测和中医辨证分型,... 目的研究长链非编码RNA GAS5(long non-coding RNA GAS5,lncRNA GAS5)在绝经后骨质疏松症(postmenopausal osteoporosis,PMOP)肾阴虚证的表达及其对骨免疫相关细胞因子的调控作用。方法随机选择绝经后妇女,经骨密度检测和中医辨证分型,分为肾阴虚证组(38例)、肾阳虚证组(32例)和健康对照组(35名)。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测外周血单核细胞中lncRNA GAS5的表达。通过慢病毒介导的RNA干扰技术,抑制THP-1人单核细胞中lncRNA GAS5基因的表达,并应用细胞因子抗体芯片技术检测骨免疫相关细胞因子的表达变化。结果与对照组比较,lncRNA GAS5在PMOP肾阴虚证组和肾阳虚证组的表达水平均明显降低(P<0.01);与肾阳虚证组比较,肾阴虚证组lncRNA GAS5的降低趋势更明显(P<0.05);RNA干扰抑制lncRNA GAS5表达后,与对照组比较,干扰组lncRNA GAS5的表达下调67.58%,而白细胞介素(IL-6、IL-7、IL-17)、转化生长因子β(TGF-β1)、集落刺激因子(G-CSF、M-CSF)等23种骨代谢相关细胞因子的表达水平显著上调,重组人巨噬细胞炎症蛋白-1β(MIP-1b)、白细胞介素1 b(IL-1 b)、胞间黏附分子-1(ICAM-1)等3种因子的表达下调。结论lncRNA GAS5在PMOP肾阴虚证中低表达;体外抑制lncRNA GAS5的表达可影响骨免疫相关细胞因子水平。 展开更多
关键词 中医中药 绝经后骨质疏松症 肾阴虚证 长链非编码RNA gas5 细胞因子 骨免疫
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长非编码RNA GAS5在卵巢癌患者中的低表达及其临床意义（英文） 被引量：3
19
作者 李婕 李银广 +3 位作者 陈爱月 李珠玉 侯文汇 游泽山 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期746-751,共6页
【目的】探讨长链非编码RNA GAS5在卵巢癌中的表达水平及其临床意义。【方法】收集卵巢癌患者的瘤体组织标本,通过实时荧光定量PCR检测GAS5在卵巢癌组织中的表达水平。采用相关性分析,分析其表达水平与临床病理特征之间的关系、及其与... 【目的】探讨长链非编码RNA GAS5在卵巢癌中的表达水平及其临床意义。【方法】收集卵巢癌患者的瘤体组织标本,通过实时荧光定量PCR检测GAS5在卵巢癌组织中的表达水平。采用相关性分析,分析其表达水平与临床病理特征之间的关系、及其与疾病预后之间的关系。【结果】在卵巢癌瘤体组织中GAS5表达显著下降(P=0.0004);GAS5的表达与瘤体体积呈负相关(d<5 cm vs.d>5 cm,P<0.000 1);GAS5的表达与肿瘤期别呈负相关(Ⅰ~Ⅱgrades vs.Ⅲ~Ⅳgrades,P=0.0086)。采用Kaplan-Meier分析表明,GAS5表达水平越低患者预后和生存越差。【结论】GAS5在卵巢癌中的表达情况与临床病理特征以及预后相关,可作为潜在的卵巢癌检测标记物。 展开更多
关键词 长非编码RNA gas5 卵巢癌 临床意义
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长链非编码RNAGAS5对人乳腺癌细胞株增殖和侵袭能力的影响 被引量：6
20
作者 吴海华 李钰 +6 位作者 张凌宇 王海凤 陈丽 黄文明 陈素莲 陈昌杰 杨清玲 《蚌埠医学院学报》 CAS 2016年第7期849-853,共5页
目的:探讨长链非编码RNA GAS5对人乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移生物学活性的影响。方法:qRT-PCR方法检测3株乳腺癌细胞株SKBR-3、MDA-MB-231及MCF-7中LncRNA GAS5的表达;LncRNA GAS5干扰片段和过表达载体分别转染LncRNA GAS5高表达以及... 目的:探讨长链非编码RNA GAS5对人乳腺癌细胞增殖、侵袭及迁移生物学活性的影响。方法:qRT-PCR方法检测3株乳腺癌细胞株SKBR-3、MDA-MB-231及MCF-7中LncRNA GAS5的表达;LncRNA GAS5干扰片段和过表达载体分别转染LncRNA GAS5高表达以及低表达的乳腺癌细胞株,qRT-PCR方法检测转染后LncRNA GAS5的表达;磺酰罗丹明B染色法检测细胞的增殖能力;Transwell和划痕实验检测细胞的侵袭及迁移能力。结果:LncRNA GAS5在乳腺癌SKBR-3细胞中表达量最低,MCF-7细胞中表达量最高(P<0.01);SKBR-3以及MCF-7细胞分别转染LncRNA GAS5过表达载体和干扰片段后,SKBR-3细胞LncRNA GAS5表达量增高,MCF-7表达量降低(P<0.01);下调LncRNA GAS5的表达,细胞的增殖能力升高,侵袭及迁移能力增强(P<0.01);过表达LncRNA GAS5之后,细胞的增殖能力、侵袭和迁移能力减弱(P<0.01)。结论:LncRNA GAS5是涉及到乳腺癌发展的一个新型的分子,有可能成为乳腺癌治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 长链非编码RNA gas5 增殖 迁移 侵袭
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