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Hsp90 and reactive oxygen species regulate thermotolerance of rice seedlings via induction of heat shock factor A2 (OsHSFA2) and galactinol synthase 1 (OsGolS1) 被引量:1
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作者 Nong Thi Hue Huong Thi Tran +6 位作者 Thuy Phan Junya Nakamura Tomoe Iwata Keisuke Harano Yushi Ishibashi Takashi Yuasa Mari Iwaya-Inoue 《Agricultural Sciences》 2013年第3期154-164,共11页
Heat stress induces expression of a set of thermotolerance-related genes in plants. We focused on rice (Oryza sativa L.) homologs of the gene family that encodes galactinol synthase (OsGolS), which is closely related ... Heat stress induces expression of a set of thermotolerance-related genes in plants. We focused on rice (Oryza sativa L.) homologs of the gene family that encodes galactinol synthase (OsGolS), which is closely related to the Arabidopsis thaliana galactinol synthase (AtGolS) family whose expression is induced under various stresses. OsGolS1 was highly up-regulated compare to the level of OsGolS2 in re- sponse to heat stress. Interestingly, OsGolS1 was also up-regulated by treatment with the Hsp90 inhibitor, geldanamycin (GDA). Expression profiles of OsGolS1 were correlated to those of OsHsfA2 under the GDA treatments. Treatment with GDA increased expression of OsHsfA2, but marginally increased or did not change OsHsfA1 expression. Notably, gel shift assay indicated that OsHsfA2 binds directly to OsGolS1 promoter region and that OsHsfA1 also binds to the promoter regions of OsHsfA2. Both OsHsfA2 and OsGolS1 were dramatically induced in response to heat stress. Accordingly, galactinol and raffinose contents in rice seedlings increased significantly following the induction of OsGolS1. Pre-treatment of rice seedlings with raffinose or GDA improved their thermotolerance. These results suggest that OsGolS1 plays an important role in response to heat stress, possibly via the transcription cascade of OsHsfA1-OsHsfA2 that leads to galactinol and raffinose accumulation, and that the increased content of these carbohydrates is a key response factor for rice seedlings to enhance thermotolerance. 展开更多
关键词 galactinol SYNTHASE GELDANAMYCIN HEAT Shock Factor HEAT Shock Protein Oryza SATIVA
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植物肌醇半乳糖苷合成酶家族基因功能的研究进展
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作者 刘岩 林天宝 吕志强 《浙江农业学报》 北大核心 2025年第8期1817-1824,共8页
棉子糖家族寡糖(RFOs)是植物重要碳水化合物贮运成分,肌醇半乳糖苷合成酶(GolS)作为RFOs生物合成的关键限速酶,参与影响碳储存、韧皮部运输、渗透调节及逆境信号传导,在生长发育和逆境胁迫响应中也发挥重要作用。本文结合近些年国内外... 棉子糖家族寡糖(RFOs)是植物重要碳水化合物贮运成分,肌醇半乳糖苷合成酶(GolS)作为RFOs生物合成的关键限速酶,参与影响碳储存、韧皮部运输、渗透调节及逆境信号传导,在生长发育和逆境胁迫响应中也发挥重要作用。本文结合近些年国内外关于植物肌醇半乳糖苷合成酶基因家族特性、生物学功能等研究近况,阐述GolS家族基因在影响植物同化物运输、种子发育、生物及非生物胁迫响应中的作用,分析未来可进一步探究GolS基因的表达调控机制,挖掘其在作物品种改良和抗逆育种中的应用潜力,为农业生产提供理论支持和技术参考。 展开更多
关键词 棉子糖家族寡糖(RFOs) GolS基因 胁迫耐受
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甘蓝型油菜BnGolS2基因在拟南芥中的耐盐性分析
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作者 朱羿霖 谢其均 +8 位作者 王诗伟 向建华 焦茹玉 杨倩 徐理佳 刘新红 王同华 刘丽莉 严明理 《植物生理学报》 北大核心 2025年第6期765-776,共12页
肌醇半乳糖苷合成酶(galactinol synthase,GolS)是棉子糖家族寡糖(raffinose family oligosaccharides,RFOs)合成的关键酶,参与植物非生物胁迫响应。本研究以野生型(WT)和异源表达甘蓝型油菜(Brassica napus)GolS2基因(BnGolS2-OE)的拟... 肌醇半乳糖苷合成酶(galactinol synthase,GolS)是棉子糖家族寡糖(raffinose family oligosaccharides,RFOs)合成的关键酶,参与植物非生物胁迫响应。本研究以野生型(WT)和异源表达甘蓝型油菜(Brassica napus)GolS2基因(BnGolS2-OE)的拟南芥(Arabidopsis thaliana)为材料,探讨过表达BnGolS2转基因植株对盐胁迫的响应情况。结果表明:BnGolS2-OE对盐胁迫更敏感;NaCl条件下,其萌发势、萌发率、根长及生物量均显著低于WT。盐胁迫下,BnGolS2-OE的相对电导率显著高于WT,表明细胞膜受损加剧;同时,其超氧阴离子(O_(2)^(-·))和过氧化氢(H_(2)O_(2))含量较WT显著升高,提示氧化胁迫更为严重。进一步研究发现,盐胁迫诱导后,BnGolS2-OE中过氧化氢酶(CAT)、过氧化物酶(POD)和超氧化物歧化酶(SOD)活性虽有所升高,但增幅低于WT;且抗氧化相关基因SOD1和CAT1的表达量与WT更低。由此推测,甘蓝型油菜BnGolS2基因可能通过转录后调控抑制H_(2)O_(2)清除能力,从而负向调节拟南芥耐盐性。 展开更多
关键词 油菜 肌醇半乳糖苷合成酶 耐盐性 活性氧
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甜瓜GolS家族基因鉴定及其响应低温胁迫的表达分析
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作者 贺丹丹 何宏泰 +3 位作者 王文庭 周文美 刘燕敏 刘骕骦 《园艺学报》 北大核心 2025年第1期136-148,共13页
为探索甜瓜肌醇半乳糖苷合成酶(GolS)基因的特性及其响应低温胁迫的表达模式,利用生物信息手段对其家族成员进行全基因组鉴定及染色体位置、进化关系、基因结构、启动子顺式作用元件、组织特异性表达和在低温胁迫下的表达模式等进行分... 为探索甜瓜肌醇半乳糖苷合成酶(GolS)基因的特性及其响应低温胁迫的表达模式,利用生物信息手段对其家族成员进行全基因组鉴定及染色体位置、进化关系、基因结构、启动子顺式作用元件、组织特异性表达和在低温胁迫下的表达模式等进行分析。结果鉴定出12个CmGolS不均匀地分布在9条染色体上,并且在系统发育树中被分为5族。理化性质分析表明甜瓜CmGolS蛋白均为亲水性蛋白。基因结构分析表明CmGolS基因保守性较高,多有2~5个内含子且含有与胁迫和赤霉素、生长素、脱落酸等激素响应相关的顺式作用元件以及保守基序“DxD”和“HxxGxxKPW”。CmGolS具有组织表达特异性,大多在雄花中表达,并且在低温胁迫处理下相对表达量大多呈显著上调趋势,表明CmGolS参与响应低温胁迫。 展开更多
关键词 甜瓜 肌醇半乳糖苷合成酶 生物信息分析 低温胁迫 表达分析
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一个辣椒肌醇半乳糖苷合成酶同源基因全长cDNA的克隆与低温表达分析 被引量:5
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作者 缪旻珉 李娜 +3 位作者 任旭琴 张宗东 程皓 曹碚生 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1671-1675,共5页
采用RT-PCR结合RACE技术,从低温处理的辣椒(Capsicum annuum L.)品种‘苏长红’叶片中克隆得到一个肌醇半乳糖苷合成酶同源基因(GS)的cDNA序列(GenBank登录号:EF566470),全长1444bp,推断其编码336个氨基酸。序列分析表明该基因与其他高... 采用RT-PCR结合RACE技术,从低温处理的辣椒(Capsicum annuum L.)品种‘苏长红’叶片中克隆得到一个肌醇半乳糖苷合成酶同源基因(GS)的cDNA序列(GenBank登录号:EF566470),全长1444bp,推断其编码336个氨基酸。序列分析表明该基因与其他高等植物的GS基因具有较高的同源性。该基因常温下在辣椒各组织中均无表达,经4℃或10℃处理6h后在叶片中开始表达,而茎和根系中均不表达。Southern杂交结果表明辣椒基因组中还存在其他GS同源基因。 展开更多
关键词 辣椒 肌醇半乳糖苷合成酶 低温处理 克隆
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葡萄肌醇半乳糖苷合成酶基因VvGolS2-4的克隆及表达特性分析 被引量:5
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作者 冯睿杰 侯丽霞 +2 位作者 郭扬 马倩 刘新 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期87-95,共9页
为了研究葡萄肌醇半乳糖苷合成酶基因家族的特性,以抗低温品种左优红组培苗为材料,通过同源克隆技术,获得VvGolS2、VvGolS3和VvGolS4全长CDS,对其序列进行了生物信息学分析,同时利用实时定量PCR技术探究了3个基因的组织表达特性和响应... 为了研究葡萄肌醇半乳糖苷合成酶基因家族的特性,以抗低温品种左优红组培苗为材料,通过同源克隆技术,获得VvGolS2、VvGolS3和VvGolS4全长CDS,对其序列进行了生物信息学分析,同时利用实时定量PCR技术探究了3个基因的组织表达特性和响应逆境因子及相关信号分子的特性。结果显示:3个基因c DNA大小分别为954,978,1 011 bp,分别编码317,325,336个氨基酸序列;3个蛋白分子量分别为36.65,36.97,38.12 k Da;等电点分别为5.12,5.33和5.16,且均在C端含有一个疏水的五肽APXAA;实时荧光定量PCR证明,3个GolSs在葡萄不同组织中表达情况不同,VvGolS2和VvGolS4在叶片中表达量最高,而VvGolS3则在花和卷须中表达量最高;不同逆境因子及逆境信号分子均会影响VvGolS2、VvGolS3和VvGolS4基因的表达量,其中VvGolS2和VvGolS4基因的表达受盐诱导最明显,VvGolS3基因的表达受低温诱导最明显;另外,胁迫信号分子乙烯、过氧化氢和脱落酸均可诱导VvGolS2基因表达量上升,而VvGolS3基因的表达受脱落酸和乙烯的诱导,乙烯、过氧化氢和硫化氢则均可诱导VvGolS4基因表达量上升。综上推测,3个Vv GolSs均与葡萄抵御逆境胁迫相关,但各自功能可能有所不同。 展开更多
关键词 葡萄 肌醇半乳糖苷合成酶基因 基因克隆 表达特性分析
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植物中棉子糖系列寡糖代谢及其调控关键酶研究进展 被引量:23
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作者 李芳 汪晓峰 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期852-859,共8页
棉子糖系列寡糖代谢与植物生长发育、逆境胁迫、种子耐贮性及脱水耐性等关系密切.棉子糖系列寡糖的合成从棉子糖的合成开始,由半乳糖苷肌醇上的半乳糖基的转移依次生成棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖等.寡糖代谢是一个复杂的调控体系,其中肌... 棉子糖系列寡糖代谢与植物生长发育、逆境胁迫、种子耐贮性及脱水耐性等关系密切.棉子糖系列寡糖的合成从棉子糖的合成开始,由半乳糖苷肌醇上的半乳糖基的转移依次生成棉子糖、水苏糖、毛蕊花糖等.寡糖代谢是一个复杂的调控体系,其中肌醇-1-磷酸合成酶、肌醇半乳糖苷合成酶、蔗糖合成酶、棉子糖合成酶、水苏糖合成酶和毛蕊花糖合成酶等参与了棉子糖系列寡糖的生物合成过程.本文对植物中棉子糖系列寡糖的代谢及其重要调控酶的特性、功能及分子生物学研究进展进行综述. 展开更多
关键词 肌醇半乳糖苷合成酶 肌醇-1-磷酸合成酶 棉子糖半系列寡糖 棉子糖合成酶 水苏糖合成酶
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木薯中肌醇半乳糖苷合成酶基因在大肠杆菌中的表达 被引量:4
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作者 范洁 王雨晴 +6 位作者 李瑞梅 张帆 段瑞军 符少萍 刘姣 胡新文 郭建春 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期1027-1032,共6页
本研究利用从木薯中克隆到的肌醇半乳糖苷合成酶基因构建到高效表达载体pGEX-6p-1上,构建重组载体MeGolS5-p GEX,并对GST-MeGolS5融合表达的IPTG诱导浓度、诱导不同温度、不同菌液浓度和诱导时间等条件进行优化。研究结果表明:随诱导时... 本研究利用从木薯中克隆到的肌醇半乳糖苷合成酶基因构建到高效表达载体pGEX-6p-1上,构建重组载体MeGolS5-p GEX,并对GST-MeGolS5融合表达的IPTG诱导浓度、诱导不同温度、不同菌液浓度和诱导时间等条件进行优化。研究结果表明:随诱导时间增长GST-MeGolS5融合蛋白表达量提高,在37℃时,OD600为0.4左右,诱导4 h MeGolS5-GST融合蛋白的表达量达到最大,在0.2 mmol/L IPTG浓度下,可以有效诱导MeGolS5-GST融合蛋白的表达;MeGolS5重组菌株可以耐受5%的PEG6000模拟的干旱胁迫。本研究结果可为解析MeGolS5基因的功能以及在木薯抗旱过程中的作用机理提供参考。 展开更多
关键词 木薯 肌醇半乳糖苷合成酶 原核表达
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烟草肌醇半乳糖苷合成酶基因NtGolS1的克隆及序列分析 被引量:3
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作者 林世锋 王仁刚 +3 位作者 任学良 王东茂 张拓 黄亚娟 《东北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期113-118,共6页
为从烟草中克隆到与植物抗逆相关的肌醇半乳糖苷合成酶基因GolS,以辣椒GolS基因为探针,通过电子克隆法从烟草栽培品种K326中分离出一条编码GolS基因的cDNA序列,暂被命名为NtGolS1。NtGolS1包含一个完整的开放读码框,编码343个氨基酸,具... 为从烟草中克隆到与植物抗逆相关的肌醇半乳糖苷合成酶基因GolS,以辣椒GolS基因为探针,通过电子克隆法从烟草栽培品种K326中分离出一条编码GolS基因的cDNA序列,暂被命名为NtGolS1。NtGolS1包含一个完整的开放读码框,编码343个氨基酸,具备糖基转移酶保守结构域;序列比对结果表明,NtGolS1蛋白与其他植物的GolS蛋白具有很高的相似性;系统进化树分析表明,NtGolS1与耐旱植物维柯萨的Gols亲缘关系最近。这些结果为进一步研究NtGolS1的性质和功能,并为植物抗逆基因工程研究提供理论基础。 展开更多
关键词 烟草 肌醇半乳糖苷合成酶(GolS) 克隆 序列分析
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泡核桃肌醇半乳糖苷合成酶基因克隆及表达分析 被引量:4
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作者 王毅 肖良俊 +1 位作者 马婷 宁德鲁 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期2029-2033,共5页
肌醇半乳糖苷合成酶是植物中棉子糖系列寡糖合成中的关键酶,在植物抗性生理中扮演重要作用。本研究利用RT-PCR技术从泡核桃中成功克隆获得一个受冷害诱导的肌醇半乳糖苷合成酶基因(Js GS1),其含有1 026 bp的开放阅读框,编码341个氨基... 肌醇半乳糖苷合成酶是植物中棉子糖系列寡糖合成中的关键酶,在植物抗性生理中扮演重要作用。本研究利用RT-PCR技术从泡核桃中成功克隆获得一个受冷害诱导的肌醇半乳糖苷合成酶基因(Js GS1),其含有1 026 bp的开放阅读框,编码341个氨基酸,登录号为:KX657831。该基因推断的蛋白与核桃(Juglans regia)GS蛋白的相似性为89%;系统进化树分析显示其与核桃、麻疯树(Jatropha curcas)、蓖麻(Ricinus communis)形成一个分支。半定量PCR显示:低温4℃处理3 h后有微弱表达,6 h后大量表达。这说明Js GS1是典型的受冷害诱导的GS基因。本研究为揭示泡核桃抗寒机理以及肌醇半乳糖苷合成酶在冷害胁迫下的作用提供帮助,并为利用基因工程手段培育抗寒新品种提供理论依据。 展开更多
关键词 泡核桃 肌醇半乳糖苷合成酶 冷害 基因表达 基因克隆
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小桐子肌醇半乳糖苷合成酶3的基因克隆及其生物信息学分析和功能初步验证 被引量:3
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作者 王海波 邹竹荣 龚明 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期91-100,共10页
旨在研究可溶性糖在小桐子抗冷性形成中的作用机制及其相关抗冷基因工程的应用。克隆了小桐子肌醇半乳糖苷合成酶家族成员3基因(Jc GS3)的全长c DNA,序列长1 053 bp,包含完整的开放阅读框1 008 bp,编码由335个氨基酸组成的酶蛋白(理论... 旨在研究可溶性糖在小桐子抗冷性形成中的作用机制及其相关抗冷基因工程的应用。克隆了小桐子肌醇半乳糖苷合成酶家族成员3基因(Jc GS3)的全长c DNA,序列长1 053 bp,包含完整的开放阅读框1 008 bp,编码由335个氨基酸组成的酶蛋白(理论分子量为38 k D、等电点为5.44,含有典型的Dx D基序)。对其相应基因组序列中启动子区域进行分析,鉴定到了TATA框、CAAT框、CRT/DRE低温响应元件以及ABA应答元件等。进一步将其在酵母中表达,发现该基因的表达能够显著提高其重组酵母菌的低温抵抗能力。 展开更多
关键词 小桐子 肌醇半乳糖苷合成酶3 CDNA克隆 生物信息学分析 酵母表达
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油菜(Brassica napus L.)种子脱水耐性获得过程中肌醇半乳糖苷合成酶活性与可溶性糖含量的变化 被引量:6
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作者 李煦 汪晓峰 《植物生理学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第12期1173-1180,共8页
在这个研究中测量不同发育时期的油菜种子中可溶性糖含量与肌醇半乳糖苷合成酶(galactinol synthase,GOLS)活性,将二者的变化趋势与种子脱水耐性获得的过程相比较并对结果进行相关性分析。结果显示油菜种子脱水耐性获得过程中,葡萄糖和... 在这个研究中测量不同发育时期的油菜种子中可溶性糖含量与肌醇半乳糖苷合成酶(galactinol synthase,GOLS)活性,将二者的变化趋势与种子脱水耐性获得的过程相比较并对结果进行相关性分析。结果显示油菜种子脱水耐性获得过程中,葡萄糖和果糖含量均随着发育期的延长而下降,蔗糖则保持较高水平;肌醇含量下降而肌醇半乳糖苷含量上升;棉子糖系列寡糖(raffinose familyolig osaccharides,RFO)含量随着种子发育而上升,特别是水苏糖,在成熟种子中可以达到相当高的浓度。油菜种子发育中期,细胞内GOLS活性开始上升,至贮藏物积累完成时达到最大。GOLS活性变化与种子肌醇半乳糖苷积累速度、RFO含量及种子的脱水耐性呈一定的正相关关系。我们认为GOLS促使RFO积累,从而对种子脱水耐性的获得产生重要影响。 展开更多
关键词 脱水耐性 棉子糖系列寡糖 肌醇半乳糖苷合成酶 甘蓝型油菜
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Comparison of transcriptome and metabolome analysis revealed differences in cold resistant metabolic pathways in different apple cultivars under low temperature stress 被引量:7
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作者 Gongxun Xu Lijie Li +3 位作者 Jia Zhou Deguo Lyu Deying Zhao Sijun Qin 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CAS CSCD 2023年第2期183-198,共16页
Freezing injury in winter is an important abiotic stress that seriously affects plant growth and development.Deciduous fruit trees resist freezing injury by inducing dormancy.However,different cultivars of the same sp... Freezing injury in winter is an important abiotic stress that seriously affects plant growth and development.Deciduous fruit trees resist freezing injury by inducing dormancy.However,different cultivars of the same species have different cold resistance strategies.Little is known about the molecular mechanism of apple trees in response to freezing injury during winter dormancy.Therefore,in this study,1-year-old branches of the cold-resistant cultivar‘Hanfu’(HF)and the cold-sensitive cultivar‘Changfuji No.2’(CF)were used to explore their cold resistance through physiological,biochemical,transcriptomics,and metabolomics analyses.Combining physiological and biochemical data,we found that HF had a stronger osmotic regulation ability and antioxidant enzyme activity than CF,as well as stronger cold resistance.The functional enrichment analysis showed that both cultivars were significantly enriched in pathways related to signal transduction,hormone regulation,and sugar metabolism under freezing stress.In addition,the differentially expressed genes(DEGs)encoding galactinol synthase,raffinose synthase,and stachyose synthetase in raffinose family oligosaccharides(RFOs)metabolic pathways were upregulated in HF,and raffinose and stachyose were accumulated,while their contents in CF were lower.HF accumulated 4-aminobutyric acid,spermidine,and ascorbic acid to scavenge reactive oxygen species(ROS).While the contents of oxidized glutathione,vitamin C,glutathione,and spermidine in CF decreased under freezing stress,consequently,the ability to scavenge ROS was low.Furthermore,the transcription factors apetala 2/ethylene responsive factor(AP2/ERF)and WRKY were strongly induced under freezing stress.In summary,the difference in key metabolic components of HF and CF under freezing stress is the major factor affecting their difference in cold resistance.The obtained results deepen our understanding of the cold resistance mechanism in apple trees in response to freezing injury during dormancy. 展开更多
关键词 APPLE Freezing stress Cold resistance galactinol synthase TRANSCRIPTOME METABOLOME
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遮光对黄瓜幼苗同化物代谢相关糖和酶的影响
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作者 张治平 王爱花 +1 位作者 陆慢 缪旻珉 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期371-379,共9页
试验中发现,黄瓜幼苗遮光叶片蔗糖含量略高于未遮光对照叶片,而棉籽糖、肌醇半乳糖苷和水苏糖含量显著低于对照叶片。叶片中肌醇半乳糖苷合成酶活性和基因转录水平变化趋势一致,遮光叶片显著低于对照叶片;棉籽糖合成酶活性差异不显著,... 试验中发现,黄瓜幼苗遮光叶片蔗糖含量略高于未遮光对照叶片,而棉籽糖、肌醇半乳糖苷和水苏糖含量显著低于对照叶片。叶片中肌醇半乳糖苷合成酶活性和基因转录水平变化趋势一致,遮光叶片显著低于对照叶片;棉籽糖合成酶活性差异不显著,但是遮光叶片棉籽糖合成酶基因转录水平显著低于对照叶片;遮光叶片水苏糖合成酶活性显著低于对照,且相关基因转录水平变化与酶活性变化一致;此外蔗糖非发酵相关蛋白激酶1基因(SnRK1)表达水平在遮荫处理6 h时显著高于对照。表明在遮光胁迫下,黄瓜幼苗通过调控肌醇半乳糖苷合成酶、水苏糖合成酶和蔗糖非发酵相关蛋白激酶1相关基因表达和酶活性,维持叶片蔗糖含量,提供生长所需能量,保证叶片存活。 展开更多
关键词 黄瓜 肌醇半乳糖苷合成酶 棉籽糖合成酶 水苏糖合成酶 蔗糖非发酵相关蛋白激酶1
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芝麻肌醇半乳糖苷合成酶基因SiGolS6的克隆及功能分析 被引量:9
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作者 刘爱丽 魏梦园 +3 位作者 黎冬华 周瑢 张秀荣 游均 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第17期3432-3442,共11页
【目的】SiGolS6是芝麻肌醇半乳糖苷合成酶家族成员,在植物抗旱过程中可能发挥重要作用。研究SiGolS6在植物干旱胁迫抗性中的功能,以期为芝麻抗旱遗传改良提供理论基础和基因资源。【方法】利用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-... 【目的】SiGolS6是芝麻肌醇半乳糖苷合成酶家族成员,在植物抗旱过程中可能发挥重要作用。研究SiGolS6在植物干旱胁迫抗性中的功能,以期为芝麻抗旱遗传改良提供理论基础和基因资源。【方法】利用反转录PCR(reverse transcription PCR,RT-PCR)方法从芝麻中克隆获得肌醇半乳糖苷合成酶基因SiGolS6。使用InterProScan、ClustalX2和MEGA5.2等生物信息学软件对序列进行分析。通过对转SiGolS6拟南芥材料的表型分析和生理指标测定,研究SiGolS6在植物抗旱性中的功能及作用机理。【结果】克隆获得SiGolS6的全长CDS序列为921 bp,编码306个氨基酸,其蛋白质分子量为35.07 kD,等电点为4.75。序列分析显示SiGolS6蛋白含有糖基转移酶保守结构域(IPR002495),属于糖基转移酶超家族。与其他物种GolS蛋白构建的系统进化树中,SiGolS6与马铃薯中的同源基因相似度较高。利用潮霉素筛选和PCR鉴定,获得6个独立的转基因拟南芥株系;qRT-PCR分析筛选出表达量较高的3个转基因株系(OE-2、OE-3和OE-4)用于后续试验分析,检测发现这三个转基因株系的棉子糖含量显著高于野生型植株。干旱胁迫下,转基因株系萎蔫程度较野生型轻,干旱胁迫28 d和复水恢复生长5 d后,转基因株系的鲜重均显著高于野生型,而正常供水条件下无明显差异;干旱胁迫28 d后复水生长5 d,50%的转基因植株基本恢复,而野生型植株存活率不到10%。干旱胁迫21 d,转基因植株的相对电导率,活性氧积累和相对MDA含量均显著低于野生型,而相对SOD、POD活性则显著高于野生型。【结论】在拟南芥中超量表达芝麻SiGolS6,能够提高植物在干旱胁迫中的耐受性。 展开更多
关键词 芝麻 肌醇半乳糖苷合成酶 转基因拟南芥 耐旱性 功能分析
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巴西橡胶树GolS和RS家族基因理化特性与表达特征分析 被引量:2
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作者 卢基来 王志勇 +4 位作者 龙翔宇 方永军 周明旭 阳江华 秦云霞 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2020年第20期6665-6670,共6页
肌醇半乳糖苷合成酶(galactinol synthase, GolS)和棉子糖合成酶(raffinose synthase, RS)是棉子糖系列寡糖(raffinose family oligosaccharides, RFOs)代谢的重要酶,广泛参与植物的生长发育以及逆境胁迫抗性等。本研究基于橡胶树基因... 肌醇半乳糖苷合成酶(galactinol synthase, GolS)和棉子糖合成酶(raffinose synthase, RS)是棉子糖系列寡糖(raffinose family oligosaccharides, RFOs)代谢的重要酶,广泛参与植物的生长发育以及逆境胁迫抗性等。本研究基于橡胶树基因组数据库平台,分离鉴定Gol S和RS家族成员,重点分析其表达模式,以了解其在橡胶树叶片发育及割胶过程中的作用。结果表明:HbGolS1和HbRS1分别是乳管中两家族的关键成员,HbGolS1在叶片和胶乳中高表达,随叶片发育其丰度逐渐升高,在成熟叶片中达到峰值。此外,该基因受割胶显著诱导上调表达,乙烯利明显抑制其表达;与之不同,HbRS1在胶乳中特异表达,不受割胶和乙烯利处理的影响。本研究结果阐明了HbGolS和HbRS随叶片发育及割胶的表达特性,为进一步解析橡胶树中RFOs代谢及其功能依据。 展开更多
关键词 逆境胁迫 半乳糖醇合成酶 棉子糖合成酶
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植物肌醇半乳糖苷合酶的生理功能和调控机制 被引量:10
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作者 从青 程龙军 杨宁 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1193-1200,共8页
植物肌醇半乳糖苷合酶(galactinol synthase,GolS)是高等植物棉子糖类寡糖合成途径中的关键酶,为棉子糖系列寡糖提供活化的半乳糖基,调控植物体内棉子糖(raffinose,RFO)系列寡糖的生物合成与积累。编码该酶的基因属于糖基转移酶(glycosy... 植物肌醇半乳糖苷合酶(galactinol synthase,GolS)是高等植物棉子糖类寡糖合成途径中的关键酶,为棉子糖系列寡糖提供活化的半乳糖基,调控植物体内棉子糖(raffinose,RFO)系列寡糖的生物合成与积累。编码该酶的基因属于糖基转移酶(glycosyltransferases,GTs)GT8基因家族的亚家族。GolS参与合成的最终产物棉子糖家族低聚糖(raffinose family oligosaccharides,RFOs)是植物中重要的碳水化合物存在形式,在细胞内可溶性强,可作为脱水保护剂;还能发挥稳定膜结构的作用。同时,GolS催化合成的直接产物肌醇半乳糖苷(galactinol)和RFOs都能作为羟基自由基捕获分子参与活性氧的清除。因此,GolS参与的代谢途径在植物碳同化物的贮存与运输、生物和非生物逆境响应、种子的脱水效应等生命过程中均发挥了重要作用。GolS基因结构差异与表达模式不同,导致不同GolS基因参与的生物学功能具有很大的差异。研究植物中不同GolS基因的结构特征,组织特异性表达特性及它们响应不同生长发育阶段、环境变化的表达特性,对了解GolS参与的生物学功能具有重要意义。同时,在分子生物学水平上,深入了解调控植物GolS基因的分子调控机制,为通过遗传工程或分子辅助育种等手段,利用GolS改良农林作物的经济性状提供理论支持。本文针对近年来植物中GolS基因的生理功能和调控机制的研究进行了综述。 展开更多
关键词 肌醇半乳糖苷 棉子糖 肌醇半乳糖苷合酶
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酸枣肌醇半乳糖苷合成酶ZjGolS2基因的克隆及表达分析 被引量:1
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作者 靳娟 刘晶 +2 位作者 杨磊 樊丁宇 郝庆 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第13期4327-4333,共7页
肌醇半乳糖苷合成酶是催化棉子糖系列寡糖合成的关键酶,在植物抗逆生理过程中具有重要作用。本研究根据酸枣高温胁迫转录组数据,成功从酸枣幼苗叶片中克隆到1个肌醇半乳糖苷合成酶基因ZjGolS2,包含一个1017 bp的开放阅读框,编码338个氨... 肌醇半乳糖苷合成酶是催化棉子糖系列寡糖合成的关键酶,在植物抗逆生理过程中具有重要作用。本研究根据酸枣高温胁迫转录组数据,成功从酸枣幼苗叶片中克隆到1个肌醇半乳糖苷合成酶基因ZjGolS2,包含一个1017 bp的开放阅读框,编码338个氨基酸,蛋白分子量为38.82 kD,GenBank登录号为XM_016044622.2。系统进化树分析表明,酸枣ZjGolS2编码氨基酸与葡萄VvGolS3(Vitis vinifera,ARS22082.1)、海岛棉GbGolS(Gossypium barbadense,KAB1995026.1)亲缘关系最近。该基因在根、茎和叶片中均有表达,其中在叶片中的表达量最高;在45℃处理3和6 h后较对照表达量差异不显著,12和24 h后ZjGolS2基因表达量分别提高了1.82和2.08倍,这说明ZjGolS2受高温逆境诱导。同时本研究成功构建了表达载体pCambia-1300-ZjGolS2。本研究结果为进一步研究ZjGolS2基因的功能提供理论基础,并为提高果树耐高温能力和分子育种提供参考依据。 展开更多
关键词 酸枣 肌醇半乳糖苷合成酶 基因克隆 表达分析
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大豆肌醇半乳糖苷合成酶基因GmGolS克隆及非生物胁迫表达分析 被引量:7
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作者 邱爽 张军 +3 位作者 何佳琦 周雨明 李铭杨 翟莹 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2021年第5期945-949,共5页
【目的】本文探索了大豆肌醇半乳糖苷合成酶(GolS)基因与非生物胁迫的关系。【方法】通过RT-PCR从大豆叶片cDNA中扩增编码GolS的基因GmGolS。生物信息学分析预测该基因及编码蛋白的理化性质。构建系统进化树分析GolS蛋白的亲缘进化关系... 【目的】本文探索了大豆肌醇半乳糖苷合成酶(GolS)基因与非生物胁迫的关系。【方法】通过RT-PCR从大豆叶片cDNA中扩增编码GolS的基因GmGolS。生物信息学分析预测该基因及编码蛋白的理化性质。构建系统进化树分析GolS蛋白的亲缘进化关系。采用实时荧光定量PCR技术检测该基因在非生物胁迫下的表达模式。【结果】GmGolS基因ORF全长987 bp,编码328个氨基酸,分子量38.03 kDa,等电点5.79。GmGolS蛋白定位于细胞的叶绿体和/或细胞质中,并且与沙冬青AmGolS蛋白的亲缘关系最近。干旱、高盐和低温胁迫均可不同程度的诱导GmGolS基因的表达,且GmGolS对干旱胁迫的响应最为明显。【结论】以上结果表明GmGolS基因在大豆中可响应多种非生物胁迫,为GmGolS在大豆抗逆基因工程育种中的进一步应用提供理论依据。 展开更多
关键词 大豆 肌醇半乳糖苷合成酶 非生物胁迫 实时荧光定量PCR
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大豆GmGolS1的克隆及转基因烟草耐高温性鉴定 被引量:6
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作者 李铭杨 邱爽 +3 位作者 何佳琦 于海伟 张军 翟莹 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期575-582,共8页
棉子糖系列寡糖(RFOs,raffinose family oligosaccharides)是植物体内一种重要的渗透调节物质,肌醇半乳糖苷合成酶(GolS,galactinol synthase)是RFOs合成过程中的关键酶。本研究从大豆中克隆了GmGolS1基因。序列分析结果显示,GmGolS1基... 棉子糖系列寡糖(RFOs,raffinose family oligosaccharides)是植物体内一种重要的渗透调节物质,肌醇半乳糖苷合成酶(GolS,galactinol synthase)是RFOs合成过程中的关键酶。本研究从大豆中克隆了GmGolS1基因。序列分析结果显示,GmGolS1基因位于大豆3号染色体,基因序列内部有3个内含子,开放阅读框(ORF,open reading frame)全长1020 bp,编码的多肽含有339个氨基酸,分子量38.82 kDa,等电点5.47。GmGolS1氨基酸序列具有植物GolS蛋白的共同特征:一个保守的丝氨酸磷酸化位点、一个锰离子结合相关的DXD元件和一个羧基末端疏水性五肽。蛋白系统进化分析结果显示,GmGolS1与沙东青AmGolS和蒺藜苜蓿MtGolS的亲缘关系较近。实时荧光定量PCR结果显示GmGolS1在大豆幼苗中可以不同程度的应答高温、低温、干旱及高盐胁迫,且高温胁迫下GmGolS1的表达量升高最明显。构建GmGolS1植物表达载体并转化烟草,获得4个转基因烟草株系。GolS酶活性检测结果显示,转基因烟草中GmGolS1转录后的产物发挥了GolS的催化活性。高温胁迫下GmGolS1转基因烟草的植株表型及电解质渗透率、可溶性糖含量和丙二醛含量的检测结果表明,GmGolS1提高了转基因烟草的耐高温性。 展开更多
关键词 大豆 肌醇半乳糖苷合成酶 非生物胁迫 耐高温性
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