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LncRNA GABPB1-AS1调控miR-150-5p表达对高糖诱导人肾小球系膜细胞纤维化的影响 被引量:1
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作者 王琼 朱燕亭 +2 位作者 董倩兰 孙燕 丁通 《热带医学杂志》 CAS 2023年第10期1351-1357,共7页
目的探究长链非编码RNA(LncRNA)GABPB1-AS1调控miR-150-5p表达对高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMC)纤维化的影响。方法采用qRT-PCR法检测高糖诱导的HMC细胞中LncRNA GABPB1-AS1、miR-150-5p表达情况,将对数期HMC细胞分为对照组(5.5 mmol/L... 目的探究长链非编码RNA(LncRNA)GABPB1-AS1调控miR-150-5p表达对高糖诱导人肾小球系膜细胞(HMC)纤维化的影响。方法采用qRT-PCR法检测高糖诱导的HMC细胞中LncRNA GABPB1-AS1、miR-150-5p表达情况,将对数期HMC细胞分为对照组(5.5 mmol/L葡萄糖)、高糖组(30 mmol/L葡萄糖)、高糖+pcDNA3.1-NC组、高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1组、高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1+mimic NC组、高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1+miR-150-5p mimic组,培养48 h后,CCK-8法检测各组细胞增殖率;qRT-PCR法检测细胞中纤维连接蛋白(FN)、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)、纤维结缔组织生长因子(CTGF)mRNA表达水平;ELISA法检测细胞上清液白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平;Western blot法检测FN、ICAM-1、CTGF蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因验证LncRNA GABPB1-AS1、miR-150-5p靶向关系。结果对照组HMC细胞呈卵圆形;高糖组HMC细胞经培养后呈长梭形,细胞间隙增大、数目增多;高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1组HMC细胞较高糖组,部分恢复卵圆形;高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1+miR-150-5p mimic组HMC细胞形态学改变较高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1组严重。与对照组比较,高糖组GABPB1-AS1水平降低(t=13.403,P<0.05);增殖率、miR-150-5p水平,FN、ICAM-1、CTGF mRNA与蛋白水平,上清液IL-6、TNF-α水平升高,差异均有统计学意义(t=7.960、12.307、12.137、13.707、12.970、17.757、13.964、15.724、15.645、12.065,P均<0.05);与高糖组比较,高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1组GABPB1-AS1水平升高(t=11.103,P<0.05),增殖率、miR-150-5p水平,FN、ICAM-1、CTGF mRNA与蛋白水平,上清液IL-6、TNF-α水平降低,差异均有统计学意义(t=3.371、12.346、7.873、7.542、5.977、4.413、6.950、4.848、10.117、11.470,P均<0.05);与高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1组比较,高糖+pcDNA3.1-GABPB1-AS1+miR-150-5p mimic组GABPB1-AS1水平降低(t=4.529,P<0.05),增殖率、miR-150-5p水平,FN、ICAM-1、CTGF mRNA与蛋白水平,上清液IL-6、TNF-α水平升高,差异均有统计学意义(t=2.487、7.405、6.333、5.233、3.313、3.693、3.777、4.017、7.026、7.276,P均<0.05)。结论LncRNA GABPB1-AS1可能通过下调miR-150-5p表达,抑制高糖诱导的HMC细胞纤维化。 展开更多
关键词 LncRNA gabpb1-AS1 miR-150-5p 人肾小球系膜细胞 纤维化
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长非编码RNA GABPB1-AS1调控氧化应激适应性线粒体生成的机制研究 被引量:2
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作者 徐思 李野 《体育科学》 CSSCI 北大核心 2019年第7期45-53,共9页
目的:研究lncRNA GABPB1-AS1调控氧化应激适应性线粒体生成的关键调控因子PGC-1α和GABPB1的活化的作用机理。方法:人脐静脉内皮细胞(HUVEC)以200 μM的H2O2刺激3h构建氧化应激细胞模型,去除H2O2后继续培养,检测GABPB1-AS1在细胞应激后... 目的:研究lncRNA GABPB1-AS1调控氧化应激适应性线粒体生成的关键调控因子PGC-1α和GABPB1的活化的作用机理。方法:人脐静脉内皮细胞(HUVEC)以200 μM的H2O2刺激3h构建氧化应激细胞模型,去除H2O2后继续培养,检测GABPB1-AS1在细胞应激后阶段的表达行为及其对PGC-1α和GABPB1的调控作用。1)qRT-PCR检测GABPB1-AS1和PGC-1α在去除H2O2后2h、4h、8h和16h表达情况,western bloting(WB)检测对应时段PGC-1α蛋白水平。转染GABPB1-AS1的siRNA和表达质粒,WB检测其对PGC-1α蛋白水平的影响。Tagertscan数据库预测miR-101与GABPB1-AS1和PGC-1α的结合关系,RNA pull down检测GABPB1-AS1对miR-101的亲和吸附作用,转染miR-101的mimic和inhibitor,WB检测其对PGC-1α蛋白水平的影响;2)qRT-PCR检测GABPB1-AS1和GABPB1在去除H2O2后2h、4h、8h、16和24h表达情况,WB检测对应时段GABPB1蛋白水平及过表达GABPB1-AS1后GABPB1蛋白水平。NCBI数据库预测并用RNA pull down和RNAprotection assay(RPA)验证GABPB1-AS1与GABPB1序列重叠位点、亲和吸附作用及其生理意义。结果:1)氧化应激诱导高表达的GABPB1-AS1在去除H2O2后逐渐降低至基线水平,对应时段PGC-1α蛋白水平显著增高;敲低和过表达GABPB1-AS1可以分别抑制和上调PGC-1α蛋白水平;miR-101在GABPB1-AS1和PGC-1α的3’UTR上均有结合位点,RNA pull down证明GABPB1-AS1亲和结合miR-101,过表达和敲除miR-101分别抑制和上调PGC-1α蛋白水平;2)氧化应激作用诱导GABPB1-AS1与GABPB1协同表达,而GABPB1蛋白变化则呈“U”曲线,过表达GABPB1-AS1下调GABPB1 mRNA及蛋白水平,GABPB1-AS1与GABPB1 mRNA的前端1~449 nt序列互补,RNA pull down和RPA实验证实二者在1~447 nt互补结合形成重叠二聚体结构,并保持GABPB1 mRNA稳定。结论:氧化应激诱导高表达的LncRNA GABPB1-AS1在应激适应阶段通过GABPB1-AS1/miR-101/PGC-1α轴,上调PGC-1α蛋白水平,促进应激适应性线粒体生成,GABPB1-AS1作为核质互作信号分子参与氧化应激适应应答,调控GABPB1协同促进这一过程。GABPB1-AS1参与的线粒体生成调控机制是人类特有的氧化应激适应机制。 展开更多
关键词 长非编码RNA gabpb1-AS1 氧化应激适应 PGC-1Α gabpb1
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LncRNA GABPB1-AS1调控急性髓系白血病细胞增殖侵袭迁移及凋亡的作用和机制 被引量:1
3
作者 杨菲菲 唐浩 +1 位作者 孙慧 孙寅 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期392-400,共9页
目的:探究长非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)GA结合蛋白转录因子β亚基1的反义RNA(antisense RNA of GA binding protein transcription factorβsubunit 1,GABPB1-AS1)靶向微小RNA-497-5p/热休克蛋白8(microRNA-497-5p/heat sho... 目的:探究长非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)GA结合蛋白转录因子β亚基1的反义RNA(antisense RNA of GA binding protein transcription factorβsubunit 1,GABPB1-AS1)靶向微小RNA-497-5p/热休克蛋白8(microRNA-497-5p/heat shock protein 8,miR-497-5p/HSPA8)轴调控急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞增殖、侵袭迁移及凋亡的作用和机制。方法:HL-60细胞分为正常对照组、si-NC组、si-GABPB1-AS1组、si-GABPB1-AS1+NC inhibitor组、si-GABPB1-AS1+miR-497-5p inhibitor组。qRT-PCR检测LncRNA GABPB1-AS1、miR-497-5p和HSPA8表达;双荧光素酶报告基因实验验证LncRNA GABPB1-AS1、miR-497-5p和HSPA8的靶向关系;MTT检测细胞活力;Edu检测细胞增殖;Transwell小室实验检测侵袭和迁移;流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blot检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、HSPA8、肿瘤转移相关蛋白2(metastasis-associated proteins,MTA2)、酵母Atg6同系物(homolog of yeast Atg6,Beclin-1)和Caspase-3蛋白水平;建立小鼠移植瘤模型验证LncRNA GABPB1-AS1对AML移植瘤生长的影响。结果:与人骨髓单核细胞相比,不同AML细胞系THP-1、NB4、U-937、HL-60中LncRNA GABPB1-AS1高表达[(1.29±0.10)、(1.58±0.12)、(2.02±0.17)、(3.17±0.24)vs.(1.02±0.07)]、miR-497-5p低表达[(0.94±0.07)、(0.75±0.03)、(0.57±0.03)、(0.25±0.01)vs.(1.05±0.09)]。由于HL-60细胞中LncRNA GABPB1-AS1表达最高,故选择该细胞系进行功能验证实验。敲低LncRNA GABPB1-AS1能降低HL-60细胞活力、Edu阳性率、细胞侵袭数、迁移数、HSPA8 mRNA及HSPA8、PCNA和MTA2蛋白表达,增加凋亡率、miR-497-5p及Caspase-3和Beclin-1蛋白表达(P<0.05)。miR-497-5p与LncRNA GABPB1-AS1、HSPA8之间分别存在靶向关系;抑制miR-497-5p表达能逆转LncRNA GABPB1-AS1敲低对HL-60细胞恶性生物学行为的抑制作用;抑制LncRNA GABPB1-AS1表达可抑制移植瘤生长。结论:LncRNA GABPB1-AS1敲低对AML细胞进展抑制作用,可能与上调miR-497-5p表达,下调HSPA8表达有关。 展开更多
关键词 急性髓系白血病 gabpb1-AS1 增殖 侵袭 凋亡
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淫羊藿-仙茅药对通过调节lncRNA Gabpb1-AS1对高糖诱导成骨细胞损伤的保护作用 被引量:1
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作者 屈怡菲 毛竹君 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期3658-3662,共5页
目的:探讨淫羊藿和仙茅药对(EBCOs)在长链非编码RNA(lncRNA)水平上对高浓度葡萄糖诱导的成骨细胞损伤的保护机制。方法:淫羊藿干叶和仙茅干根茎热水提取制备EBCOs;成骨细胞分为对照组(1.65 mmol/L葡萄糖处理24 h)、HG模型组(33.1 mmol/... 目的:探讨淫羊藿和仙茅药对(EBCOs)在长链非编码RNA(lncRNA)水平上对高浓度葡萄糖诱导的成骨细胞损伤的保护机制。方法:淫羊藿干叶和仙茅干根茎热水提取制备EBCOs;成骨细胞分为对照组(1.65 mmol/L葡萄糖处理24 h)、HG模型组(33.1 mmol/L葡萄糖处理24 h)和EBCO组(33.1 mmol/L葡萄糖处理24 h并用10μg/mL含EBCOs血清干预);lncRNA测序检测lncRNA表达水平;细胞转染沉默lncRNA Gabpb1-AS1;qRT-PCR检测lncRNA Gabpb1-AS1和Nrf2 mRNA表达量;Western Blot检测Keap1、Nrf2和BMP2蛋白表达量。结果:HG组较control组lncRNA Gabpb1-AS1表达显著增加(P<0.01),EBCOs干预后可显著降低Gabpb1-AS1表达(P<0.01)。转染沉默lncRNA Gabpb1-AS1后,lncRNA Gabpb1-AS1显著降低(P<0.01),Nrf2和BMP2蛋白表达显著增加(P<0.01),Keap1蛋白表达显著降低(P<0.01)。结论:EBCOs可通过下调lncRNA Gabpb1-AS1来减轻高糖诱导的成骨细胞损伤。 展开更多
关键词 淫羊藿 仙茅 成骨细胞 lncRNA gabpb1-AS1 糖尿病性骨质疏松症 机制
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GABPB1-AS1 acts as a tumor suppressor and inhibits non-small cell lung cancer progression by targeting miRNA-566/F-box protein 47
5
作者 HUALIANG LV CHANGCHUN LAI +1 位作者 WENQU ZHAO YIBO SONG 《Oncology Research》 SCIE 2021年第6期401-409,共9页
It has been certified that GABPB1-AS1 is aberrantly expressed and plays as a vital role in some kinds of cancers.However,its expression pattern and functions in non-small cell lung cancer(NSCLC)are still largely unknow... It has been certified that GABPB1-AS1 is aberrantly expressed and plays as a vital role in some kinds of cancers.However,its expression pattern and functions in non-small cell lung cancer(NSCLC)are still largely unknown.This study aims to assess GABPB1-AS1 expression and biological roles in NSCLC.The expression of GABPB1-AS1 was detected in NSCLC specimens and adjacent normal specimens.CCK8 and Transwell assays were performed to evaluate the effects of GABPB1-AS1 on NSCLC cell proliferation,migration and invasion.Bioinformatics tools and luciferase reporter assays were applied to predict and verify GABPB1-AS1’s direct targets.The results revealed that GABPB1-AS1 is sharply reduced in NSCLC specimens and cell lines.CCK8 assays indicated that overexpression of GABPB1-AS1 dramatically reduced NSCLC cell growth,and Transwell assays proved that NSCLC cell migration and invasion were distinctly inhibited by GABPB1-AS1.Exploration of the mechanism uncovered that miRNA-566(miR-566)/F-box protein 47(FBXO47)is directly targeted by GABPB1-AS1 in NSCLC.The study demonstrated that GABPB1-AS1 inhibited NSCLC cell proliferation,migration and invasion by targeting miR-566/FBXO47. 展开更多
关键词 gabpb1-AS1 NSCLC PROGRESSION miRNA-566 FBXO47
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LncRNA GABPB1-AS1通过靶向hsa-miR-30b-3p促进人结直肠癌细胞增殖侵袭迁移
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作者 童笑笑 宋美华 +1 位作者 方政 陈峥世 《中华消化病与影像杂志(电子版)》 2025年第5期436-443,共8页
目的探究LncRNA GABPB1-AS1通过靶向hsa-miR-30b-3p促进人结直肠癌细胞增殖侵袭迁移的分子机制。方法体外培养人正常结直肠黏膜细胞系FHC和人结直肠癌细胞系HT-29、SW480、LOVO及WiDr。使用si-NC、si-LncRNA GABPB1-AS1、miR-30b-3p inh... 目的探究LncRNA GABPB1-AS1通过靶向hsa-miR-30b-3p促进人结直肠癌细胞增殖侵袭迁移的分子机制。方法体外培养人正常结直肠黏膜细胞系FHC和人结直肠癌细胞系HT-29、SW480、LOVO及WiDr。使用si-NC、si-LncRNA GABPB1-AS1、miR-30b-3p inhibitor对照、miR-30b-3p inhibitor转染HT-29细胞。通过Starbase数据库预测GABPB1-AS1和hsa-miR-30b-3p在结直肠癌组织和癌旁组织中的差异表达和潜在靶向结合位点,GSCA数据库预测GABPB1-AS1表达对结直肠患者生存预后的影响。采用RT-qPCR检测GABPB1-AS1和miR-30b-3p表达水平。采用双荧光素酶实验验证GABPB1-AS1和hsa-miR-30b-3p的靶向关系。采用CCK-8检测细胞活力。采用流式细胞术检测细胞凋亡。采用Transwell实验检测细胞侵袭能力。采用划痕试验检测细胞迁移能力。结果生物信息学分析表明,相比癌旁组织,GABPB1-AS1在结直肠癌组织中表达上调,miR-30b-3p表达下调;高表达GABPB1-AS1患者的总生存期和无进展生存期明显缩短。RT-qPCR和双荧光素酶实验结果表明,GABPB1-AS1在结直肠癌组织中表达上调,miR-30b-3p表达下调;GABPB1-AS1靶向负调控miR-30b-3p的表达。敲低GABPB1-AS1的表达能够显著抑制HT-29细胞的活力、侵袭和迁移的能力,促进HT-29细胞的凋亡;在此基础上,抑制miR-30b-3p的表达可部分逆转敲低GABPB1-AS1对HT-29细胞活力、凋亡水平、侵袭和迁移能力的影响。结论LncRNA GABPB1-AS1通过靶向负调控hsa-miR-30b-3p的表达促进人结直肠癌细胞增殖、侵袭和迁移。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 HT-29 LncRNA gabpb1-AS1 hsa-miR-30b-3p
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