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转染自杀基因G1 CEACDNa致SW480细胞死亡的机制
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作者 王小军 马庆久 +5 位作者 赖大年 黎成金 鲁建国 李金茂 邓琰 高德明 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2003年第11期831-835,共5页
目的 研究转染了逆转录病毒载体G1CEACDNa致SW 480肠癌细胞的死亡机制。方法 脂质体法转染G 1CEACDNa至SW 480细胞。行RT PCR间接验证CD基因的表达情况。细胞计数测量生长曲线 ;用含 1mmol/L 5 -氟胞嘧啶 ( 5 FC)的 164 0培养基培养... 目的 研究转染了逆转录病毒载体G1CEACDNa致SW 480肠癌细胞的死亡机制。方法 脂质体法转染G 1CEACDNa至SW 480细胞。行RT PCR间接验证CD基因的表达情况。细胞计数测量生长曲线 ;用含 1mmol/L 5 -氟胞嘧啶 ( 5 FC)的 164 0培养基培养细胞 ,MTT法测生长抑制率和旁观者效应 ;透射电镜观察细胞的超微结构 ;流式细胞仪annexinV和PI双重染色行细胞凋亡检查。结果 RT PCR产物电泳显示在 1.5kb处可见相应的显影条带。MTT比色实验示 1mmol/L 5 FC作用下CD+SW 480细胞在 48h开始生长抑制 ,72 ,96,12 0h抑制率分别约为 3 0 .0 % ,5 0 .0 % ,80 .0 %。电镜下可见凋亡的早、中、晚期细胞及凋亡小体 ,同时可见部分细胞呈坏死改变。流式细胞仪显示 48h开始有少量细胞出现凋亡 ,72 ,96h细胞群凋亡和坏死的比率分别为 2 0 .2 % ,3 0 .7%和 19.6% ,2 1.1%。结论 转染G 1CEACDNa的SW 480细胞给予 5 FC处理后 ,其细胞死亡机制为坏死和凋亡并存 ,细胞凋亡过程的诱导可能是该治疗过程中的旁观者效应。 展开更多
关键词 细胞凋亡 SW480细胞 自杀基因 g1ceacdna 转染
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