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题名金针菇褐化病毒(FvBV)脱毒方法
被引量：4
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作者
张俊玲
章炉军
刘建辉
李亮
尚晓冬
谭琦
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机构
南京农业大学生命科学学院
上海市农业科学院食用菌研究所国家食用菌工程技术研究中心
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出处
《微生物学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第10期1952-1961,共10页
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基金
国家科技支撑项目(No.2013BAD16B02)
上海种业专项[沪农科种字(2012)第6号]
农业科技成果转化资金项目(No.2014GB2C000086)
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文摘
【目的】评价5种不同脱毒方法对金针菇(Flammulina velutipes)菌株的脱毒效果,筛选出脱毒率高和脱毒后金针菇菌株菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等性状改善明显的脱毒方法。【方法】以栽培金针菇菌株F-4889为研究材料,从菌丝体中提取大小约2.0 kb的病毒dsRNA,经RT-PCR鉴定该病毒为金针菇褐化病毒(FvBV)。采用菌丝尖端分离、原基组织分离、原生质体单核化、有性生殖和核迁移5种脱毒方法对金针菇菌株进行脱毒处理,利用dsRNA技术和RT-PCR检测脱毒效果。【结果】菌丝尖端分离脱毒后得到1株脱毒菌株;原基组织分离法未能脱毒;原生质体单核化脱毒法得到3株脱毒单核菌株和2株原单杂交脱毒菌株;有性生殖脱毒法获得脱毒孢子单核菌株23株和单孢杂交脱毒菌株8株;核迁移脱毒后得到5株核迁移脱毒菌株。脱毒率依次为25.0%、0、7.5%、57.5%和100%。脱毒菌株的菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等均优于出发菌株、菌丝尖端和原基组织分离菌株。【结论】这5种方法中原生质体单核化、有性生殖和核迁移脱毒法脱毒效果较佳,均能有效脱除Fv BV,脱毒率高,脱毒后菌株菌丝生长速度、生物量、漆酶活力等均明显提高。
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关键词
dsRNA技术
反转录PCR
fvbv
脱毒
原生质体单核化
有性生殖
核迁移
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Keywords
dsRNA technique, RT-PCR, fvbv, Virus elimination, Protoplast monokaryotization, Sexual reproduction, Nuclei migration
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分类号
S436.461
[农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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题名主栽金针菇品种中病毒的快速检测和鉴定
被引量：3
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作者
张俊玲
章炉军
谭琦
尚晓冬
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机构
上海市农业科学院食用菌研究所/国家食用菌工程技术研究中心
南京农业大学生命科学学院
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出处
《中国农学通报》
2015年第6期234-240,共7页
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基金
国家科技支撑项目"食用菌新品种培育及制种关键技术研究"(2013BAD16B02)
上海种业专项"香菇重要基因资源的收集
+1 种基金
评价及应用"[沪农科种字(2012)第6号]
农业科技成果转化资金项目"优质高效金针菇新品种‘金针菇G1’的推广应用"(2014GB2C000086)
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文摘
为了探索一种成本低、速度快、易操作、特异性强的dsRNA提取方法来检测金针菇中的病毒,并对目前主栽金针菇品种进行病毒的快速检测和鉴定。以各地主栽的金针菇品种为主要研究材料,采用试剂盒法和Redzol法2种方法检测dsRNA,将这2种方法进行比较,并通过反转录PCR和测序确定病毒种类。结果表明,试剂盒法和Redzol法均在主栽金针菇品种F-4889和F-4891菌丝体中检测到FvBV的病毒组分。与试剂盒法相比,Redzol法检测时间短,样品需求量小,易操作,成本较低,不需要繁琐的前期准备工作,适于实验室和大中型食用菌生产企业使用。Redzol法能从金针菇菌丝体中准确提取dsRNA病毒组分,并在主栽品种F-4889和F-4891菌丝体中成功检测到FvBV的病毒组分,为栽培生产、优化市场种质资源、育种选材等提供了理论依据。
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关键词
金针菇
Redzol
DSRNA
反转录PCR
fvbv
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Keywords
Flammulina velutipes
Redzol
dsRNA
reverse transcription PCR
fvbv
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分类号
Q939.5
[生物学—微生物学]
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